专利名称：提高马铃薯离体无性繁殖率的方法
技术领域：
本发明涉及一种提高马铃薯离体无性繁殖效率的方法。
马铃薯离体无性繁殖的方法有好几种。我们已研究出一种综合的方法，可用来大批量生产马铃薯的繁殖基体，还适于生产不同种类的繁殖基体(生根切块、微型块茎和小块茎，见匈牙利专利文件申请号1160/84)。
在应用上述发明的过程中，我们发现，在液体培养基中芽的生长和繁衍情况比在固态培养基上更好。
在液体培养基中繁殖芽，更适宜于获取生根的植株。我们进而设计了一些实验，让液体培养基中繁殖出来的生根植株进一步繁殖。通过这些实验，我们研究出比原方法效率更高的离体繁殖法。
这种方法的基本点如下液体培养基中生产的生根植株用于放在温室中进一步培养或用来生产离体微型块茎，其繁殖方法是先将它们分成芽和生根芽块，然后将这两个部分都放入新鲜的营养培养基。使液体培养基中生长的芽继续繁殖，可以提高繁殖率，但本方法基本的也是新的步骤是利用生根芽块继续繁殖，这个步骤能使繁殖率提高五倍，还能节约大量时间。
根据本发明所派生的一种方法，将芽和生根芽块放入液体培养基，结果，从芽长出的培养体同原来的生根培养体相同，可用于生产微型块茎，或转入温室种植，也可用上面讲的方法去繁殖，而从生根芽块长出来的培养体则更适于用作离体微型块茎培养体的基体。
根据本发明派生出来的另一种方法，只将芽放入液体培养基内进一步生长成生根的培养体，生根的芽块则被置于固体培养基上，经过一段短时间培养，就产生出一些适于进一步繁殖的新芽。
在固体琼脂培养基上培育的生根芽块，不仅适合于离体繁殖，而且也适于温室裁培，因为它们与液体培养基中生长的培养体相同。
按本发明的另一方案，将生根芽块和芽都放到固体培养基上，在生根芽块上发育出大量新芽，而放在固体培养基上的芽却不断地长出根系。这两种培养体都可以按上述办法来使用，即可在离体条件下进一步繁殖，可在它们的基础之上诱变生成离体微型块茎，亦可转入温室种植。
最后的这种方法是本发明的最佳方案，因为它比液体培养基所需繁殖基体更少。芽块上全部幼芽均能发育成芽，芽又可切短再用。
琼脂培养基上生长出的生根培养体，可以与培养基一起植入土壤。
对使用固态琼脂培养基的可能性加以考察，表明可以使用比一般固体培养基更薄的基层，每层厚度约为1厘米。
在这种培养基中生长的培养体的根系，无论在离体繁殖还是在入土栽植方面，都有优势。
省时的原因是以下两个因素1、在液体培养基中安放芽，比用固体培养基所需时间少;
2、可用一个动作把生根芽块放入新鲜的液体或固体培养基中，因为根连在一起。
以下是
具体实施例方式我们使用的营养培养基成份为马铃薯营养培养基固体维持与繁殖培养基
NH4NO31600mgKNO31900mgCaCl2·2H2O 440mgMgSO4·7H2O 370mgNa2-EDTA+FeSO4·7H2O 25mgH3BO46.2mgMnSO4·4H2O 22.3mgZnSO4·4H2O 8.6mgKI0.83mgNa2MoO4·2H2O 0.25mgCuSO4·5H2O 0.025mgCoCl2·6H2O 0.025mg内消旋肌醇(Mesoinosit)100mg盐酸硫胺素(ThiamineHCl)0.5mg盐酸吡哆醛(PyridoxineHCl)1.0mg烟酸(Nicotinicacid)5.0mg泛酸(Panthoteneacid)2.5mg萘乙酸(Naphtylaceticacid)0.001mg蔗糖(Saccharose)30g琼脂(Agar)6.5gpH5.7液体生根培养基无琼脂，其余成分同上。
例1将固体培养基上生长的马铃薯培养体的芽切下，在含20毫升液体培养基的400毫升瓶内放入大约10个芽切块，放在温度为22℃、照明度为3000勒克斯16小时的条件下培养两星期。在这种条件下，有20～25个新芽及与之相连的根发育出来。在无菌条件下，用镊子从瓶中取出生根的培养体，切下芽并将其放入2～3只含新鲜营养培养基的瓶内，余下的生根芽块又被放入新的液体培养基。用这种方式制成的培养体生长两周即发生诱变，用以生产微型块茎，经过2～3个月，它们平均能产出50个微型块茎。
按上述方法从切下的芽发育而成的培养体，可用于繁殖，也可移植到温室内，它们也能诱变成微型块茎。在相同时间内，应用上述方法要比使用固体培养基上生成的培养体多生产50%的培养体。
例2将固体培养基(成份如上所述)上生长的培养体的芽切下，在含有20毫升液体培养基的400毫升瓶内放入大约10个芽切块，放在温度为22℃、照明度为3000勒克斯16小时的条件下培养两星期。在这种条件下，有20～25个新芽及与之相连的根发育出来。用经过消毒的镊子取出生根的培养体，切下芽并放入含有新鲜液体培养基的2～3只瓶内。液体培养基中生长出来的培养体被用于进一步繁殖、微型块茎诱变或移至温室内栽植。在两个星期内，放在固体培养基上的生根芽块发育成了新芽，这适合作为3～4个新培养体的基体。
在同样时间内，用上述方法比仅仅用固体繁殖培养基所生产的培养体多5倍，这就节省了许多时间。
权利要求
1.一种提高马铃薯离体无性繁殖率的方法，其特征在于液体培养基中生长起来的生根培养体由于被分为芽与生根芽块而能够充分繁殖。
2.权利要求1所述的方法，其特征在于芽与生根芽块这两部分都是在液体培养基中进一椒敝车摹
3.权利要求1所述的方法，其特征在于芽在液体培养基里进一步繁殖而生根芽块是在固体培养基上进一步繁殖。
4.权利要求1所述的方法，其特征在于芽和生根芽块均放在固体琼脂培养基上繁殖。
5.权利要求1至4任何一项中的方法，其特征在于该方法可多次重复。
6.权利要求1至3中任何一项中以及权利要求5所述的方法，其特征在于液体培养基里长出的芽所发育成的培养体，可用于微型块茎诱变和/或进一步繁殖以及/或者栽植入温室。
7.权利要求1或2所述的方法，其特征在于液体培养基里长出的生根芽块所发育成的培养体可用于微型块茎诱变。
8.权利要求1或3或4所述的方法，其特征在于固体培养基上长出的生根芽块所发育成的培养体可用来繁殖新的培养体。
全文摘要
本发明涉及一种提高马铃薯离体无性繁殖率的方法，其方式是液体培养基中生长起来的生根培养体由于被分成芽和生根芽块而能够充分繁殖。
文档编号A01H4/00GK1032448SQ8810147
公开日1989年4月19日 申请日期1988年2月16日 优先权日1987年2月16日
发明者吉约尔吉·莫尔那尔, 弗伦克·弗格伦 申请人:诺沃特拉德公司