一种兰属杂交兰的创制方法
【技术领域】
[0001]本发明属于植物育种领域，具体涉及一种兰属杂交兰的创制方法。
【背景技术】
[0002]大花蕙兰(CymbidiumHybrid)为兰科兰属植物中部分大花型附生种的杂交种，大花蕙兰的杂交育种已有一百多年的历史了，它们的亲本主要是大花型的热带附生兰类，常常要经过多次反复的杂交，才能形成有价值的品种，是世界上销量最高的洋兰之一。尽管大花蕙兰花色鲜艳、花期长，观赏性极高，深受世界兰花爱好者的欢迎，但由于大花蕙兰多无香味，因此其观赏性状仍可以改进。而兰科兰属植物种类丰富，约有68-70余种。除热带附生种外，还具有大量的温带地生种，如传统国兰中的春兰、蕙兰、建兰、墨兰、莲瓣兰、寒兰等，目前已有部分温带地生兰与大花蕙兰等材料杂交，培育出观赏性介于大花蕙兰和国兰中间类型的杂交兰，具有花色鲜艳，具香味等特征。
[0003]但目前所培育的杂交兰品种多为大花蕙兰与建兰和墨兰等杂交后选育的品种，而蕙兰为温带地生兰中的重要类型，具有优良的观赏性，香味浓郁，而由于与大花蕙兰等品种花期时间不一致，目前尚无蕙兰杂交兰品种培育出。
【发明内容】
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[0004]本发明的目的是提供一种兰属杂交兰的创制方法，采用适当技术控制大花蕙兰开花与蕙兰进行杂交，培育新型杂交兰品种，可以丰富兰属杂交兰的品种类型，提高杂交兰的观赏性。
[0005]本发明的技术方案如下:
[0006]—种新型兰属杂交兰的创建方法，包括亲本大花蕙兰、杂交兰及蕙兰材料的温室培养及开花调控的步骤:
[0007]a)母本材料的培养:以大花蕙兰和杂交兰品种为母本，生长4-5年的成熟植株种植于温室中，冬春季节控制营养生长，控制N、P、K营养水平，降低氮素，提高磷钾肥浓度，前期适当控制温度，3-4月份提高温度，控制其在春季开花；
[0008]b)父本材料的培养:选择多年生的蕙兰为母本，通过N、P、K营养及光照和温度控制，促进蕙兰于3-4月份开花；
[0009]c)杂交授粉:从父本蕙兰开花株上用镊子分离花粉块，母本大花蕙兰或杂交兰开花株上的单花开放后去掉花粉块，授以父本蕙兰的花粉块，每朵花授以蕙兰花粉块4-6个，以确保授粉；
[0010]d)子房和种子发育:授粉后的大花蕙兰一周后花瓣萎蔫，两周后能观察到子房明显膨大，剪去干枯花瓣和萼片，防止细菌和真菌的滋生;生长210-270天后，果荚变黄开裂前可以采收果荚。
[0011]所述亲本大花蕙兰、杂交兰及蕙兰材料的温室培养及开花调控的步骤之后还包括杂交后代种子无菌播种的步骤:
[0012]e)无菌萌发培养基:以1/2MS或MS为基本培养基添加6-BA 0.5-2.0mg.L—1和NAA0.5-2.0mg.L—1 ；
[0013]f)无菌播种和萌发:采收成熟果荚，自来水冲洗后，在超净工作台进行表面灭菌处理，先用75%的乙醇处理I分钟，再用I %的次氯酸钠处理30-40分钟，无菌水冲洗3-4次，在无菌滤纸上切开果荚，取出种子，播种于萌发培养基；
[0014]g)杂交后代植株再生:以MS为基本培养基添加NAA 0.5-1.0mg.L—1和1.0-2.0mg.L一1适宜原球茎发育和植株再生；
[0015]h)生根植株移栽:生根植株打开瓶口驯化3-5d，洗净培养基后以800-1000倍的百菌清处理l_3h，采用水苔为基质移栽于2.5寸营养钵，移栽后控制温室温度在25°C，空气相对湿度80 %，20天以后长出新根成活，生长6个月后植株进一步移栽至较大营养钵进一步生长。
[0016]所述步骤e)、步骤g)和步骤h)中的培养基中均分别添加3%的鹿糖和100-150ml.L一1椰子汁，活性炭1-2%，pH值调至5.4-5.6，培养条件为光照100lx，16h光周期，25°C培养。
[0017]本发明的有益效果是:
[0018]由于大花蕙兰与兰属其他种材料杂交后代形成的种子发育不完全，无胚乳，常规情况下极难萌发，需要采用无菌播种技术才能萌发，加之种间远缘杂交后代生活力弱，因而后代萌发和繁殖困难，而无菌播种技术可以通过培养基中的营养成分和植物生长调节剂促进杂交后代种子发育和成熟萌发。萌发植株进一步生长和成苗后可以在后代群体中筛选出优良株系，进行大量繁殖和推广应用。
[0019]本发明方法是以兰属地生兰中的蕙兰为父本，通过与母本大花蕙兰或杂交兰杂交，杂交后代种子无菌播种，萌发成苗后在后代群体中筛选出具有蕙兰和大花蕙兰特征的新型兰属杂交兰，蕙兰杂交兰可以将蕙兰的香味浓、抗逆性强等性状转移到花色鲜艳，生长速度快的大花蕙兰和其他杂交兰中。
[0020]本发明方法可以用于培育具有蕙兰特征的优良杂交兰后代材料，与现有大花蕙兰和其他墨兰杂交兰及建兰杂交兰等在形态特征和生长特征及抗逆性等方面不同，具备蕙兰的优良性状，可以丰富兰属杂交兰的品种类型。
【具体实施方式】
[0021]下面对本发明作进一步描述:
[0022]实施例1:
[0023]1.以杂交兰‘韩国桃花’为母本，蕙兰为父本进行杂交，杂交后代无菌播种；
[0024]a.母本材料的培养:选择杂交兰品种‘韩国桃花’为母本，生长4-5年的成熟植株种植于温室中，冬春季节控制营养生长，采用低氮，高磷、钾的花多多2号营养液每周浇灌I次，前期适当控制温度，后期提高温度，促使其3-4月份开花；
[0025]b.父本材料的培养:选择多年生的蕙兰为母本，通过N、P、K营养及光照和温度控制，促进蕙兰于3-4月份开花；
[0026]c.杂交授粉:从父本蕙兰开花株上用镊子分离花粉快，母本杂交兰开花株上的单花开放后去掉花粉块，授以父本蕙兰的花粉块，每朵花授以蕙兰花粉块4-6个，以确保授粉；
[0027]d.子房和种子发育:授粉后的杂交兰I周后花瓣萎蔫，2周后能观察到子房明显膨大，剪去干枯花瓣和萼片，防止细菌和真菌的滋生;生长240天后，果荚成熟，变黄开裂前采收果夹。
[0028]2杂交后代种子无菌播种:
[0029]a.无菌萌发培养基:以MS为基本培养基，添加6-BA 0.5mg.L—1和NAA2.0mg.L一S
[0030]b.无菌播种和萌发:采收成熟果荚，自来水冲洗后，在超净工作台进行表面灭菌处理，先用75%的乙醇处理I分钟，再用I %的次氯酸钠处理30分钟，无菌水冲洗4次，在无菌滤纸上切开果荚，取出种子，播种于萌发培养基;播种60天后杂交后代种子陆续萌发；
[0031 ] c.杂交后代植株再生:将萌发至5.0mm左右的原球茎及根状茎接种于MS培养基添加NAA 0.5mg.L—1和6_BA 1.0mg.L—1培养基，促进原球茎发育和植株再生，30-60天后原球茎陆续萌发成苗，并具有不定根；
[0032]d.生根植株移栽:生根植株打开瓶口驯化3-5d，洗净培养基后以1000倍的百菌清处理2h，以水苔为基质定植于2.5寸营养钵，移栽后控制温室温度在25°C，空气相对湿度80%，20天以后长出新根成活，生长6个月后植株进一步移栽到3寸营养钵进一步生长，所获得植株均表现为附生兰和温带地生兰的特征，可以进一步筛选优良株系作为新材料加以推广。
[0033]以上条件所用培养基除注明外，均添加3%的蔗糖和100-150ml.L—1椰子汁，活性炭I %，pH值调至5.6，培养条件为光照1000Ix，16h光周期，25°C培养。
[0034]上面所述的实施例仅仅是对本发明的优选实施方式进行描述，并非对本发明的构思和范围进行限定，在不脱离本发明设计构思前提下，本领域中普通工程技术人员对本发明的技术方案做出的各种变型和改进，均应落入本发明的保护范围，本发明请求保护的技术内容已经全部记载在权利要求书中。
【主权项】
1.一种兰属杂交兰的创建方法，其特征是包括亲本大花蕙兰、杂交兰及蕙兰材料的温室培养及开花调控的步骤: a)母本材料的培养:以大花蕙兰和杂交兰品种为母本，生长4-5年的成熟植株种植于温室中，冬春季节控制营养生长，控制N、P、K营养水平，降低氮素，提高磷钾肥浓度，前期适当控制温度，3-4月份提高温度，促进其在春季开花； b)父本材料的培养:选择多年生的蕙兰为母本，通过N、P、K营养及光照和温度控制，促进蕙兰于3-4月份开花； c)杂交授粉:从父本蕙兰开花株上用镊子分离花粉块，母本大花蕙兰或杂交兰开花株上的单花开放后去掉花粉块，授以父本蕙兰的花粉块，每朵花授以蕙兰花粉块4-6个，以确保授粉； d)子房和种子发育:授粉后的大花蕙兰或杂交兰一周后花瓣萎蔫，两周后能观察到子房明显膨大，剪去干枯花瓣和萼片，防止细菌和真菌的滋生;生长210-270天后，果荚变黄开裂前可以采收果荚。2.根据权利要求书I所述兰属杂交兰的创制方法，其特征在于所述亲本大花蕙兰、杂交兰及蕙兰材料的温室培养及开花调控的步骤之后还包括杂交后代种子无菌播种的步骤: e)无菌萌发培养基:以1/2MS或MS为基本培养基添加6-BA0.5-2.0mg.L—1和NAA0.5-.2.0mg.L—S f)无菌播种和萌发:采收成熟果荚，自来水冲洗后，在超净工作台进行表面灭菌处理，先用75%的乙醇处理I分钟，再用I %的次氯酸钠处理30-40分钟，无菌水冲洗3-4次，在无菌滤纸上切开果荚，取出种子，播种于萌发培养基； g)杂交后代植株再生:以MS为基本培养基添加NAA0.5-1.0mg.L—1和1.0-2.0mg.L—1适宜原球茎发育和植株再生； h)生根植株移栽:生根植株打开瓶口驯化3-5d，洗净培养基后以800-1000倍的百菌清处理l-3h，采用水苔为基质移栽于2.5寸营养钵，移栽后控制温室温度在25°C，空气相对湿度80%，20-30天以后长出新根成活，生长6个月后植株进一步移栽至较大营养钵进一步生长。3.根据权利要求书2所述兰属杂交兰的创制方法，其特征在于所述步骤e)、步骤g)和步骤h)中的培养基中均分别添加3%的蔗糖和100-150ml.L—1椰子汁，活性炭1_2%，pH值调至.5.4-5.6,培养条件为光照10001X，16h光周期，25 °C培养。
【专利摘要】一种兰属杂交兰的创建方法，其特征是包括亲本大花蕙兰、杂交兰及蕙兰材料的温室培养及开花调控的步骤：a)母本材料的培养；b)父本材料的培养；c)杂交授粉；d)子房和种子发育；e)无菌播种等。本发明方法可以用于培育具有蕙兰特征的优良杂交兰后代材料，与现有大花蕙兰和其他墨兰杂交兰及建兰杂交兰等在形态特征和生长特征及抗逆性等方面不同，具备蕙兰的优良性状，可以丰富兰属杂交兰的品种类型。
【IPC分类】A01H1/02
【公开号】CN105580729
【申请号】CN201610053360
【发明人】王广东, 陈瑶瑶, 张景华
【申请人】南京农业大学
【公开日】2016年5月18日
【申请日】2016年1月26日