专利名称：一种提取那西肽粗品的方法
技术领域：
本发明属于化学制药领域，涉及一种兽药词料添加剂的原料药的制备方法，具体涉及一 种制备含硫多肽类抗生素那西肽粗品的方法。
技术背景那西肽是1961年法国科学家在Streptomyces actuosus 40037发酵液中发现的，后由罗纳 普朗克公司试生产并在比利时、法国、美国等多个国家和地区进行动物喂养试验，发现其是 一种效果极好的促生长剂。但由于其产量低，成本太高而未能大规模推广，后来日本三菱公 司对那西肽产生菌进行了大量的选育研究，并进行了动物喂养试验、安全性试验、急慢性毒 性试验等，最后开发成新产品，并于1987年底被日本批准为法定的饲料添加剂，其商品名为 Primofax， 1988年2月上市，当年的销售额为10亿日元。由于那西肽属于大分子物质，在体 内不吸收，因此没有残留，目前已被欧共体、北美、日本等国广泛使用。那西肽于1998年批准为国家三类新兽药，2001年被农业部列为可在饲料中长时间添加 使用的词料药物添加剂。那西肽作为饲料添加剂具有以下特点l.有明显的促进畜禽生长及 改善饲料利用率的效果。2.用量低(2.5mg/kg~20mg/kg)，使用范围广(畜禽和水产)。3.动物 专用抗生素。4.只有抑菌作用而无杀菌作用。5.对革兰氏阳性菌有效。6.不产生由R—质粒所 引起的耐药性，与其他抗生素无交叉耐药性。7.不被消化道吸收，无残留问题。8.使用安全， 对动物和人无任何毒副作用。9.对环境影响小，属环保型饲料添加剂。目前国内外对那西肽原料的制备有下面几种方法 一是将环醚类溶剂作为提取剂与那西 肽菌丝体混合，调节pH值，弃去固体类物质，剩余的有机溶剂相中加入有机盐类，沉淀那西 肽。二是将那西肽菌丝体与有机溶剂(丙酮或乙醇等)混合，调节pH值，固液分离，液体部 分加入含有酸的水溶液沉淀那西肽。三是采用溶媒法将那西肽菌丝体发酵液中的那西肽直接 提取出来，采用加入等体积酒精，然后匀浆、离心、收集上清、浓縮、用正丁醇萃取、浓縮 蒸干、加入二氧六环溶解，再加入水沉淀那西肽、沉淀的那西肽再用水洗，烘干，如专利公 开号为CN1899599A《一种制备那西肽预混剂的方法》。第一种方法采用环醚类溶剂提取菌丝 体中的那西肽，环醚类溶剂价格相对较高，如果大规模生产的话成本会大大增加，提取过程 还需要调节pH值，并在沉淀那西肽时加入了有机盐类，这相当于在提纯的那西肽中又加入 了其它的杂质，而且不容易将其除去。第二种方法在整个过程中也要进行体系pH值的调节， 增加了一定的工作量，而且用酸性水溶液沉淀那西肽后，所使用的有机试剂就没有办法重新利用，废弃的试剂溶液会带来环保方面的问题。第三种方法由于是直接利用发酵液提取那西 肽，因此限制了该方法的使用范围，并且整个提取过程步骤繁琐，生产周期长，不适合进行 工业生产。
发明内容
本发明的目的是提供一种从那西肽菌丝体中提取那西肽粗品的方法。本发明具有生产工 艺简单、操作方便、生产效率高、经济而且环保等优点，还可以根据需要将提取的那西肽制 备成不同含量规格的那西肽预混剂，或进一步进行精制成那西肽精品。
本发明的那西肽粗品制备工艺是用有机溶剂将菌丝体中的那西肽提取出来，然后将有机 溶剂去除，剩下的固体即为那西肽粗品。
本发明的那西肽粗品的制备方法为以下步骤-
(1) 以那西肽菌丝体为原料，用2 6重量体积倍的有机溶剂进行浸泡，温度控制在30 50°C，同时匀速搅拌，搅拌的速度为30 150转/分钟，搅拌时间为0.5 4小时；
(2) 将搅拌后物料中的有机溶剂浸泡液和固体残渣分离，将浸泡液于蒸发仪上蒸馏，温 度为40 65'C，回收有机溶剂，获浓縮提取物；
(3) 将除去有机溶剂的浓縮提取物置于干燥箱中，温度为25 85'C条件下干燥8~30小 时，将干燥提取物粉碎获那西肽粗品。
步骤(1)所述有机溶剂为无水乙醇或甲醇其一。
步骤(l)所述有机溶剂还可以为体积比为1:1 1:5的氯仿一乙醇混合液或体积比为1:1 l:5的氯仿一甲醇混合液其一。
以步骤(2)所述固体残渣为原料，按权利要求1的步骤进一步提取残留那西肽。 按本发明方法提取的那西肽粗品可以应用于制备各种含量规格的那西肽预混剂或那西肽
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本发明所述的那西肽粗品的制备方法进一步叙述如下
称取一定量的那西肽菌丝体，按2 6体积倍的量选择加入以下有机溶剂之一种无水乙 醇、甲醇、氯仿和乙醇混合液(体积比例为1:1 1:5)、氯仿和甲醇混合液(体积比例为1:1 1:5)，用搅拌桨进行匀速搅拌，搅拌的速度为30 150转/分钟，搅拌时间为0.5 4小时，整 个体系的温度控制在30 50'C;然后把有机溶剂浸泡液和固体残渣分离，将浸泡液置于温度 为40 65'C的蒸发仪上进行蒸馏，去除有机溶剂，同时对有机溶剂进行回收利用；将除去有 机溶剂的浓縮提取物置于干燥箱中干燥8~30小时，温度为25 85'C,干燥提取物经粉碎后， 得到那西肽粗品。以上所述分离的固体残渣经质量检测后，如果里面仍然含有那西肽，可以将固体残渣进行回收利用，重复以上操作。
本发明所述的那西肽粗品可制成各种含量规格的那西肽预混剂或进一步精制成那西肽精
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本发明的优点在于本发明制备那西肽粗品的工艺，是用有机溶剂直接提取菌丝体中的 那西肽，工艺简单、操作方便、生产效率高，而且那西肽菌丝体和有机溶剂可以重复利用， 这样即经济又环保，制备出的那西肽粗品还可以根据需要制成各种含量规格的预混剂，也可 以将其进一步提纯制成那西肽精品。因此本发明是一种较为理想的那西肽的制备方法。
具体实施例方式
实施例1:
称量那西肽菌丝体1000g，加入2000ml乙醇，用速度为30转/分钟的搅拌桨进行匀速搅 拌，搅拌时间2小时，整个体系的温度控制在4(TC;将体系中的浸泡液置于旋转蒸发仪中， 在55。C水浴中将乙醇去除，并利用溶剂回收装置回收乙醇。浓縮提取物转移至干燥箱中干燥 14小时(5(TC)，取出，粉碎，得到含量为30 70X左右的那西肽50 100g。本发明制备的 那西肽粗品可制成各种含量规格的预混剂或进一步提纯制成含量为90%以上的精品那西肽。
实施例2:
称量那西肽菌丝体1000g，加入4000ml氯仿和乙醇混合液(氯仿乙醇=1: 3)，用速 度为100转/分钟的搅拌桨进行匀速搅拌，搅拌时间3小时，整个体系的温度控制在35'C;将 与固体残渣分离的有机溶剂浸泡液进行蒸馏，温度为50'C，将氯仿和乙醇混合液蒸干，同时 回收有机溶剂，除去有机溶剂的浓缩提取物转移至干燥箱中干燥10小时(55°C)，取出，粉 碎，得到含量为30 70X左右的那西肽50 100g。本发明的那西肽粗品可制成各种含量规格 的预混剂或进一步提纯制成含量为90%以上的那西肽精品。
实施例3:
称量那西肽菌丝体1000g，加入6000ml氯仿和甲醇混合液(甲醇氯仿=1: 1)，用速 度为150转/分钟的搅拌桨进行匀速搅拌，搅拌时间4小时，整个体系的温度控制在45'C;将 与固体残渣分离的有机溶剂浸泡液进行蒸馏，温度为6(TC，将氯仿和甲醇混合液蒸干，同时 回收有机溶剂，除去有机溶剂的浓縮提取物转移至干燥箱中干燥18小时(45°C),取出，粉 碎，得到含量为30 70X左右的那西肽50 100g。本发明的那西肽粗品可制成各种含量规格 的预混剂或进一步提纯制成含量为90%以上的那西肽精品。
实施例4:
上述3例中的固体残渣经质量检测后如仍然含有那西肽，则收集残渣1000g，加入6000ml氯仿和甲醇混合液(氯仿甲醇=1: 5)，用速度为100转/分钟的搅拌桨进行匀速搅拌，搅 拌时间2小时，整个体系的温度控制在45'C;将与固体残渣分离的有机溶剂浸泡液进行蒸馏，
温度为60。C，将氯仿和甲醇混合液蒸干，同时回收有机溶剂，除去有机溶剂的浓縮提取物转 移至干燥箱中干燥12小时(5(TC )，取出，粉碎，得到含量为30 70%左右的那西肽50 100g。 本发明的那西肽粗品可制成各种含量规格的预混剂或进一步提纯制成含量为卯％以上的那西
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权利要求
1、一种提取那西肽粗品的方法，其特征在于以下步骤(1)以那西肽菌丝体为原料，用2～6重量体积倍的有机溶剂进行浸泡，温度控制在30～50℃，同时匀速搅拌，搅拌的速度为30～150转/分钟，搅拌时间为0.5～4小时；(2)将搅拌后物料中的有机溶剂浸泡液和固体残渣分离，将浸泡液于蒸发仪上蒸馏，温度为40～65℃，回收有机溶剂，获浓缩提取物；(3)将除去有机溶剂的浓缩提取物置于干燥箱中，温度为25～85℃条件下干燥8～30小时，将干燥提取物粉碎获那西肽粗品。
2、 如权利要求1所述一种提取那西肽粗品的方法，其特征在于步骤(1)所述有机溶 剂为无水乙醇或甲醇其一。
3、 如权利要求1所述一种提取那西肽粗品的方法，其特征在于步骤(1)所述有机溶 剂为体积比为1:1 1:5的氯仿一乙醇混合液或体积比为1:1 1:5的氯仿一甲醇混合液其一。
4、 如权利要求1所述一种提取那西肽粗品的方法，其特征在于以步骤(2)所述固体 残渣为原料，按权利要求1的步骤进一步提取残留那西肽。
5、 如权利要求1所述一种提取那西肽粗品的方法，其特征在于按该方法提取的那西肽 粗品应用于制备各种含量规格的那西肽预混剂或那西肽精品。
全文摘要
一种提取那西肽粗品的方法，以那西肽菌丝体为原料，用2～6重量体积倍的有机溶剂进行浸泡，温度控制在30～50℃，同时以30～150转/分钟匀速搅拌0.5～4小时；搅拌物固液分离，浸泡液于蒸发仪上蒸馏，回收有机溶剂，浓缩提取物置于干燥箱中，温度为25～85℃条件下干燥8～30小时，粉碎后获那西肽粗品。本发明的有机溶剂采用无水乙醇或甲醇其一，或采用体积比为1∶1～1∶5的氯仿-乙醇混合液或体积比为1∶1～1∶5的氯仿-甲醇混合液其一。本发明方法提取的那西肽粗品可以应用于制备各种含量规格的那西肽预混剂或那西肽精品。
文档编号C12P21/02GK101302247SQ20081006261
公开日2008年11月12日 申请日期2008年6月24日 优先权日2008年6月24日
发明者底佳芳, 丽 王, 陈贵才 申请人:浙江汇能动物药品有限公司