利用贝类及其副产品制备营养型调味品的方法

专利名称：利用贝类及其副产品制备营养型调味品的方法
技术领域：
本发明涉 及调味品技术领域，具体地是一种利用贝类及其副产品制备营养型调味品的方法，可广泛用于食品、粮油、饮料、酒等领域。
背景技术：
在海洋中生活着20多万种生物(约占整个地球生物总量的87% )，其中已发现 2000多种具有独特功效的生物活性物质，是为人们提供药品、保健品、食品和生物材料的巨大宝库。随着人们对海洋资源开发利用的认识加深，在资源丰富的贝类产品(牡蛎、贻贝、 扇贝)及其副产品的开发利用上也有部分人作了研究，但由于技术措施不太得当，贝类加工多为粗浅原料加工(贝肉干)，缺乏贝类精深加工，贝类营养及活性成分提取及应用技术落后，粗加工副产物直接排放，浪费资源，污染环境。另外还存在产品脱腥、去杂不彻底，产品结构和产品形式不太合理，仍旧没有根本解决增值等问题。中国专利《扇贝加工食品及其制造方法》(专利号02151478. X)，提供了一种调和了圆润的盐味和香味的味美可口、且解冻时几乎不产生滴水的扇贝加工食品及其制造方法。利用海洋深层水，将扇贝在0. 05MPa以下的减压下进行处理，将上述处理的扇贝在20 70°C的海洋深层水中浸渍1 25分钟，使海洋深层水浸透到扇贝内部。该法需用海洋深层水(220m深度)，以及减压装置(如真空泵等)、脱盐浓缩装置(反渗透脱盐浓缩机)，故存在原料采集较困难、设备投资高昂等问题，但是仍然没有解决贝类营养及活性成分高效提取等问题。中国专利《功能型海鲜调味品的制备方法》(专利号200710015838. 8)，提供了一种功能型海鲜调味品的制备方法，包括如下工艺步骤a.海带加工，将干海带加入水进行浸泡、清洗、切碎，经过三次浸提，过滤得滤液；将三次所得的滤液混合后进行减压浓缩，得海带多糖和苷肽营养液；b.扇贝加工，将扇贝去壳、清洗、打浆，加入发酵罐，同时加入水进行浸提，然后加入复合酶发酵，再加入酸性蛋白酶发酵，然后进行灭酶；c.产品，将步骤a、 b所得的产物混合后加入风味酶发酵，再加入功能型酵母液发酵，然后加入香辛料，进行压滤，再进行真空脱气，然后进行调配，高压均质，进行灭活，再进行脂化除沉，进行超高温瞬间灭菌，最后灌装得成品。本发明工艺繁杂，工序较多，设备较复杂昂贵，且海带的加入破坏了海鲜调味品的天然风味。

发明内容
本发明的目的是克服上述已有技术的不足，提供一种利用贝类及其副产品制备营养型调味品的方法，主要解决了目前开发利用的贝类营养及活性成分的提取工艺及应用技术落后，粗加工副产物直接排放，浪费资源，污染环境，产品脱腥、去杂不彻底，产品结构和产品形式不太合理，没有根本解决增值等问题。为了达到上述目的，本发明是这样实现的一种营养型调味品的制备方法，其包括如下工艺步骤
—、将贝肉进行双 酶水解及酵母发酵来制备贝肉营养调味品具体步骤如下步骤a:将选自牡蛎、贻贝、扇贝的贝类产品作为原料，清洗去壳后，进行贝类勻浆 (可用JM-FB型胶体磨，转速1450 2900r/min,乳化细度2 50 μ m)；步骤b 将勻浆后的贝肉进行酶解，酶解温度35 75°C，时间2 10h，加酶量 0.05% 1.5% (以贝肉鲜料计)，复合酶种类为复合蛋白酶+复合风味蛋白酶，其中复合蛋白酶(Protamex)l. 11 X 105U/g、复合风味蛋白酶(Flavorzyme) 3. 0 X 104U/g，二者均购自丹麦NovoNordisk公司；随后90 100°C灭酶，自行冷却；步骤c 将上述的步骤b的产品进行酵母菌发酵，具体为无菌操作加入 10%葡萄糖，0. 5% 8%无水乙醇，再分别接种0. 5% 6%产酯酵母1274和1202菌株(二者均购自济南久益生物工程有限公司)，20 45°C恒温发酵，每隔Id取滤液测定总酯量，当总酯含量达0. 3g/100ml，则发酵结束；步骤d 美拉德反应将步骤c的发酵液IOOOmL,拌勻，装上冷凝管，在沸腾状态下回流0. 5 3小时。步骤e 脱色及除去重金属趁热(50 90°C )在步骤d的反应液中加入0. 3%的复合脱色吸附剂搅拌吸咐0. 5 3小时；所述复合脱色吸附剂是采用如下方法制得的⑴酸活化凹凸棒土 用0. 05 0. 3mol/L的HCl浸泡凹凸棒土，离心分离，将固形物 80 120°C干燥至恒重，250 450°C焙烧0. 5 5h，过100 300目筛，即得酸活化凹凸棒土 ；(2)将酸活化凹凸棒土与活性炭粉末按照1 1 4的重量比混合均勻；(3)改性处理将脱乙酰度> 80 %的壳聚糖，用0. 5 % 5 %的醋酸溶液缓慢溶解，得1 % 15 %的壳聚糖溶胶；向步骤b制得的混合物中加入 10%壳聚糖溶胶，20 75°C拌勻成糊， 使酸活化凹凸棒土与活性炭粉末混合物完全润湿，进行改性反应；(4)将步骤c的混合物在 80 120°C下干燥至恒重，随后进行研磨过100 300目筛，即得复合脱色吸咐剂，该复合脱色吸附剂另行申请专利；步骤f 将步骤e的处理液进行过滤、调味并进行装瓶和杀菌。过滤可用常规硅藻土过滤机过滤，过滤后滤液浊度< 2. ONTU ；调味可根据需要加白糖、醋、植物香辛料(大料、桂皮、胡椒、花椒、丁香等)；装瓶用350 650ml玻璃瓶盛装；杀菌用巴氏杀菌(85 IOO0C, 10 30min)。最终所制得的产品技术指标为粗脂肪5士2g/100ml，总糖1 2g/100ml,粗蛋白1 2g/100ml,总酸1. 0 2. 4g/100ml,氨基酸态氮(FAN)彡0. 4g/100ml,总酯 0. 3 1. 0g/100ml,菌落总数彡8000cfu/g,大肠菌群彡30MPN/100ml,未能检出致病菌， ρΗ6· 0 士 1。应用示例①本申请的上述贝肉营养调味品用于酒类产品的应用将贝肉营养调味品加入露酒、保健酒中，可使酒的营养及活性功能提高(如贝类多糖、活性肽、牛磺酸及锌元素)，副作用及腥苦味更低，并使酒香协调、诱人，酒体优雅、丰满，口感醇厚、绵柔，有海鲜特有的鲜美风味。②贝肉营养调味品用于营养补剂及海鲜调味品由于酶解作用，产品具有生物活性肽、多糖及氨基酸，加上酵母菌体含有丰富的维生素、氨基酸和无机盐类等成分，所以制得的产品具有很高的营养价值及生理功效，可作营养补剂。本品氨基酸含量高，营养丰富、 风味良好，是制作海鲜调味品的良好基料。应用生物酶解方法所获得的产物，避免了酸水解存在的氨基酸破坏及氯丙醇毒性问题，使调味品中氨基酸组成配比更趋合理，尤其是贝类能生成IMP (肌苷酸)，除自身呈鲜味之外，与谷氨酸共存时显示鲜味增效作用，因此，IMP的存在可使贻贝水解液更具良好的海鲜风味特征。产酯酵母，亦称生香酵母，具有较强的氧化特性和产酯能力，能将糖类及其衍生物转化成乙醇、乙酸和CO2，有机酸与醇类产生酯化作用形成乙酸乙酯，使发酵液具有酯香气及醇香气，酯香味浓郁、持久。后期发酵中可使蛋白质水解为氨基酸，酵母RNA降解后生成的嘌呤核苷酸，与谷氨酸钠盐起协同作用，具有强烈的增鲜效果。同时，产酯酵母还能利用原料中的糖产生大量的酯类物质，使发酵液具有独特的香味。且加入产酯酵母后，发酵液除了氨基酸态氮(FAN)值高以外，产 酯酵母可去除腥昧、异味，更重要的是能赋予食品和调味品以发酵特有的某种风味。二、利用贻贝水煮液浓缩汁制备贻贝营养调味汁酶种类枯草杆菌中性蛋白酶(酶活力105U/g，购自无锡杰能科学生物有限公司)+木瓜蛋白酶(酶活力6 X 105U/g，购自广州远天酶制剂厂)。酵母菌种类酿酒酵母2399、产酯酵母2300(均购自山东梁山良友生物工程有限公司)。步骤a:贻贝水煮液浓缩将贻贝进行水煮，待贻贝开壳后，取贝肉另外包装以做它用，随后对水煮液进行浓缩(浓缩倍数10 30倍)，得贻贝水煮液浓缩汁。步骤b 酶解取步骤a的贻贝水煮液浓缩汁1000ml，大豆蛋白粉0. 5 8g，枯草杆菌中性蛋白酶0. 5 10g，木瓜蛋白酶0. 5 IOg ；酶解将上述物质搅拌均勻，利用自然 PH值，于20 75°C酶解1 5小时，得酶解液；步骤C:稀释、配料向步骤b的酶解液中加入饮用水以1 1 5稀释，得稀释液， 再加入葡萄糖0. 5 % 5 %，酵母膏0. 1 % 5 %，拌勻，得混合液；步骤d 灭菌将上述混合液于75 135°C，热处理10 60分钟灭菌(兼灭酶)， 得灭菌液；步骤e 酵母菌种子扩培(具体工艺参见附图1，即斜面菌种一小三角瓶培养一大三角瓶培养一卡氏罐培养一酵母菌种子)。酿酒酵母2399或K氏酿酒酵母、产酯酵母 2300 (均购自山东梁山良友生物工程有限公司)；发酵将步骤d的灭菌液冷却，接入酵母种子 10%在20 45°C发酵12 72小时得发酵液。步骤f 发酵将上述灭菌液冷却，接入酵母种子 10%在20 45°C发酵 12 72小时得发酵液；步骤g 美拉德反应、配料将步骤f的发酵液lOOOmL，添加葡萄糖1 8g，NaCl 2 18g，Vbi 0. 5 6g，Ve 0. 1 5g，拌勻，装上冷凝管，在沸腾状态下回流0. 5 3小时， 得美拉德反应液；步骤h 脱色及去重金属趁热(50 90°C )在美拉德反应液加入0. 3%的复合脱色吸附剂(制备方法如前所述)搅拌吸咐0. 5 3小时；步骤i 过滤常规硅藻土过滤(NTU < 2. 0)；步骤j 灭菌、灌装常规巴氏灭菌(85 100°C，10 30min)、无菌灌装，即得成
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应用示例贻贝营养 调味汁可直接用于常规食品调味，或加入以下辅料(w/v)食盐 10%，味精0. 2%，香料0.05% 3% (大料、桂皮、胡椒、花椒、丁香等)；若用于酒类风味改良剂，也可将其放入食用酒精或清香型白酒中保存，并使最终成品酒精度> 15% )。产品技术指标总糖3 7g/100ml，全氮彡1. 0g/100ml，总酸1. 5 2. 4g/100ml, 氨基酸态氮(FAN)彡0. 3g/100ml，菌落总数彡8000cfu/g,大肠菌群彡30MPN/IOOml，未能检出致病菌。本发明所述的营养型调味品的制备方法与已有技术相比具有突出的实质性特点和显著进步1、提高了贝类水产品及下脚料的增值利用，如运用贻贝水煮液下脚料，可增值利用，不仅能变废为宝，提高经济效益，更重要的是保护环境，保护了海洋生态环境。2、以牡蛎等贝类肉为原料，应用酶解法，避免了酸解存在的氨基酸破坏及氯丙醇毒性问题，也避免了酸、碱法工艺对产品营养成分的破坏；肌苷酸使水解液具海鲜风味，产酯酵母将糖类转化成乙醇、乙酸及乙酸乙酯，使发酵液具有酯香气及醇香气，营养价值高， 口感好，并可去除腥昧、异味。3、接种1274菌株产总酯量高于1202菌株，发酵液的酯香味浓郁、持久，风味良好， 选择1274+1202菌株，总酯含量随着发酵时间延长，逐渐增高，选用多菌株发酵，能促进微生物种间的协同作用，使发酵液中微生物群体稳定，发酵产物可互相补充，最终提高发酵产品的风味和香味，酯香味浓厚；发酵产品不产生异味，发酵液除了 FAN值高以外，产酯酵母能去除腥味、苦味和异味，屏蔽咸味，更重要的是能赋予食品和调味品以发酵特有的某种风味；无致病性，直接混合纯培养于基质中，通过相互间的协调共同发酵。4、贻贝蒸煮液的肽、氨基酸，以及外加葡萄糖、Vc, Vbi等在浓缩加热作用下发生美拉德反应，产生肉香、烤香和焦香；所含三甲胺带来腥味，可通过酶解、发酵、生化反应及物理吸咐等作用使腥味减弱。5、复合改性脱色吸咐剂可去除镉、铬、铅、铜等重金属，并具脱腥作用。6、有效的将贝类产品中所含有的氨基酸、牛磺酸、微量元素、以及肽类和多糖等营养成分充分的转化到了产品中，提高了产品的功能性与营养性；将富含天然海洋生物营养元素的调味品与生活必需品进行完美的结合，改善人们的生活质量。除非另有说明，本申请中的“ ％ ”为重量百分比。


附图1 将贝肉进行双酶水解及酵母发酵来制备贝肉营养调味品的工艺流程图附图2 利用贻贝水煮液浓缩汁制备贻贝营养调味汁的工艺流程图附图3 酵母菌扩大培养工艺流程图为更好地理解与实施，下面结合实施例说明本发明营养型调味品的制备方法。实施例1 贝肉双酶水解及酵母发酵制贝肉营养调味品酶种类复合蛋白酶(酶活力1. 5AU/g) +复合风味蛋白酶(酶活力1000AU/g)(丹麦 NovoNordisk 公司)产酯酵母菌种类产酯酵母1274+1202菌株(济南久益生物工程有限公司)。
衡量指标氨基酸态氮(FAN)的含量、总酯含量、感官评定。步骤a 将牡蛎作为原料，清洗去壳后，进行贝类勻浆(采用JM-FB型胶体磨，转速 2900r/min,乳化细度 50 μ m)。步骤b 将勻浆后的贝肉进行酶解，酶解温度50°C，时间6h，加酶量0. 4 % (以贝肉鲜料计)，复合酶种类为复合蛋白酶+复合风味蛋白酶，其中复合蛋白酶 (Protamex) 1. IlX 105U/g、复合风味蛋白酶(Flavorzyme) 3. OX 104U/g，二者均购自丹麦 NovoNordisk公司；随后100°C灭酶，自行冷却。步骤c 将上述的步骤b的产品进行酵母菌发酵。发酵工艺无菌操作加入5%葡萄糖，2%无水乙醇，再分别接种2%产酯酵母1274和1202菌株(二者均购自济南久益生物工程有限公司)，28°C恒温发酵，每隔Id取滤液测定总酯量。步骤d 美拉德反应，将上述发酵液IOOOmL,拌勻，装上冷凝管，在沸腾状态下回流 1小时，得美拉德反应液。步骤e 脱色及去重金属。趁热(75°C )在美拉德反应液加入的复合脱色吸附齐U，搅拌吸咐2小时；步骤f 将步骤e的处理液进行过滤、调味一装瓶一杀菌。过滤采用常规硅藻土过滤机过滤，过滤后滤液浊度1. 5NTU ；调味可根据需要加白糖2%、醋1%、植物香辛料(大料、桂皮、胡椒、花椒、丁香)各0. 05% ；装瓶用500ml玻璃瓶盛装；杀菌用巴氏杀菌(95°C， 25min)。本实施例中的复合脱色吸附剂是采用如下方法制得的(1)酸活化凹凸棒土 用
0.lmol/L的HCl浸泡凹凸棒土，离心分离，将固形物90°C干燥至恒重，350°C焙烧2h，过200 目筛，即得酸活化凹凸棒土 ；(2)将酸活化凹凸棒土与活性炭粉末按照1 2的重量比混合均勻；(3)改性处理将脱乙酰度> 80%的壳聚糖，用2%的醋酸溶液缓慢溶解，得10%的壳聚糖溶胶；向步骤b制得的混合物中加入8%壳聚糖溶胶，40°C拌勻成糊，使酸活化凹凸棒土与活性炭粉末混合物完全润湿，进行改性反应；(4)将步骤c的混合物在100°C下干燥至恒重，随后进行研磨过200目筛，即得复合脱色吸咐剂。产品技术指标为粗脂肪5. 6g/100ml，总糖1. 5g/100ml，粗蛋白1. 8g/100ml，总酸
1.8g/100ml，氨基酸态氮(FAN)O. 4g/100ml，总酯 0. 6g/100ml，菌落总数 5000cfu/g，大肠菌群20MPN/100ml，未检出致病菌，pH6. 3。将本实施例产品加入椰岛鹿龟酒中，可使酒香药香协调、诱人，酒体优雅、醇厚、回味悠长。实施例2，利用贻贝水煮液浓缩汁制贻贝营养调味汁工艺酶种类枯草杆菌中性蛋白酶(酶活力105U/g，购自无锡杰能科学生物有限公司)+木瓜蛋白酶(酶活力6 X 105U/g，购自广州远天酶制剂厂)。酵母菌种类酿酒酵母2399、产酯酵母2300 ( 二者均购自山东梁山良友生物工程有限公司)。步骤a 酶解配料。贻贝浓缩液1000ml，大豆蛋白粉2g，枯草杆菌中性蛋白酶5g， 木瓜蛋白酶5g。

步骤b:酶解。将上述物质搅拌均勻，利用自然pH值( !1 = 7)，于501酶解3小时。
步骤c:稀释、配料。将上述酶解液用饮用水1 1稀释，得稀释液，再加入葡萄糖 2%，酵母膏1%，拌勻，得混合液。步骤d 灭菌。将上述混合液于121°C，热处理30分钟灭菌(兼灭酶)，得灭菌液。 步骤e 酵母菌种子扩培(见附图3，常规酵母菌培养基)。酿酒酵母2399。步骤f 发酵。将上述灭菌液冷却，接入酵母种子5%在28 30°C发酵48小时得发酵液。步骤g :美拉德反应、配料。将上述发酵液10001^，添加葡萄糖58，妝(11(^，￥81 2g， Vc lg，拌勻，装上冷凝管，在沸腾状态下回流1小时，得美拉德反应液。步骤h:脱色及去重金属。即趁热(65°C)在美拉德反应液加入0.5%的复合脱色吸附剂(根据实施例1同样的方法制得)，搅拌吸咐1小时。步骤i 过滤。常规硅藻土过滤(滤液NTU1. 0)。步骤j 灭菌、灌装。常规巴氏灭菌(90°C，30min)、无菌灌装，即得成品。该成品可直接用于常规食品调味，或加入以下辅料(w/v)食盐5%，味精0. 8%， 香料0.1% (大料、桂皮、胡椒、花椒、丁香等)；若用于酒类风味改良剂，也可将其放入食用酒精或清香型白酒中保存，并使最终成品酒精度> 30% )。产品技术指标为总糖3. 8g/100ml，全氮1. 5g/100ml，总酸1. 9g/100ml，氨基酸态氮(FAN)O. 3g/100ml，菌落总数2000cfu/g，大肠菌群20MPN/100ml，致病菌未检出。将本实施例产品加入椰岛海王酒中，可使酒香药香协调，酒体优雅、丰满，具有椰岛海王酒所需要的海洋生物风味。
权利要求
1.一种贝类营养调味品的制备方法，其包括如下工艺步骤步骤a:将选自牡蛎、贻贝或扇贝的贝类产品作为原料，清洗去壳后，进行贝类勻浆； 步骤b 将勻浆后的贝肉进行酶解，酶解温度35 75°C，时间2 10h，加酶量0. 05% 1.5% (以贝肉鲜料计)，复合酶种类为复合蛋白酶+复合风味蛋白酶，其中复合蛋白酶 (Protamex) 1. 11 X 105U/g、复合风味蛋白酶(Flavorzyme) 3. OX 104U/g ；随后 90 100°C灭酶，自行冷却；步骤c 将上述的步骤b的产品进行酵母菌发酵，具体为无菌操作加入 10%葡萄糖，0. 5% 8%无水乙醇，再分别接种0. 5% 6%产酯酵母1274和1202菌株，20 45°C 恒温发酵，每隔Id取滤液测定总酯量，当总酯含量达0. 3g/100ml，则发酵结束；步骤d 美拉德反应将步骤c的发酵液IOOOmL,拌勻，装上冷凝管，在沸腾状态下回流 0. 5 3小时；步骤e 脱色及除去重金属趁热(50 90°C )在步骤d的反应液中加入0. 3% 的复合脱色吸附剂搅拌吸咐0. 5 3小时；所述复合脱色吸附剂是采用如下方法制得的(1)酸活化凹凸棒土用0. 05 0. 3mol/L的HCl浸泡凹凸棒土，离心分离，将固形物80 120°C干燥至恒重，250 450°C焙烧0. 5 5h，过100 300目筛，即得酸活化凹凸棒土 ；(2)将酸活化凹凸棒土与活性炭粉末按照1 1 4的重量比混合均勻；(3)改性处理将脱乙酰度> 80%的壳聚糖，用0. 5% 5%的醋酸溶液缓慢溶解，得 15%的壳聚糖溶胶；向步骤b制得的混合物中加入 10%壳聚糖溶胶，20 75°C拌勻成糊，使酸活化凹凸棒土与活性炭粉末混合物完全润湿，进行改性反应；(4)将步骤c的混合物在80 120°C 下干燥至恒重，随后进行研磨过100 300目筛，即得复合脱色吸咐剂；步骤f 将步骤e的处理液进行过滤、调味并进行装瓶和杀菌。
2.权利要求1所制得的贝肉营养调味品用于酒类产品的用途。
3.权利要求1所制得的贝肉营养调味品用于营养补剂或海鲜调味品的用途。
4.一种贻贝营养调味汁的制备方法，其包括如下工艺步骤步骤a 贻贝水煮液浓缩将贻贝进行水煮，待贻贝开壳后，取贝肉另外包装以做它用， 随后对水煮液进行浓缩(浓缩倍数10 30倍)，得贻贝水煮液浓缩汁；步骤b 酶解取步骤a的贻贝水煮液浓缩汁1000ml，大豆蛋白粉0. 5 8g，枯草杆菌中性蛋白酶0. 5 10g，木瓜蛋白酶0. 5 IOg ；将这些物质搅拌均勻，利用自然pH值，于 20 75°C酶解1 5小时，得酶解液；步骤c:稀释、配料向步骤b的酶解液中加入饮用水以1 1 5稀释，得稀释液，再加入葡萄糖0. 5 % 5 %，酵母膏0. 1 % 5 %，拌勻，得混合液；步骤d 灭菌将上述混合液于75 135°C，热处理10 60分钟灭菌，得灭菌液； 步骤e 酵母菌种子扩培，采用常规酵母菌培养基进行扩培；所述酵母采用酿酒酵母 2399或K氏酿酒酵母、产酯酵母2300 ；步骤f 发酵将步骤d的灭菌液冷却，接入酵母菌种子 10%在20 45°C发酵 12 72小时得发酵液；步骤g 美拉德反应、配料将步骤f的发酵液lOOOmL，添加葡萄糖1 8g，NaCl 2 18g，VB10. 5 6g，Vc 0. 1 5g，拌勻，装上冷凝管，在沸腾状态下回流0. 5 3小时，得美拉德反应液；步骤h:脱色及去重金属趁热(50 90°C )在美拉德反应液加入0. 3%的复合脱色吸附剂搅拌吸咐0. 5 3小时，所述复合脱色吸附剂如权利要求1所述方法制得； 步骤i 过滤常规硅藻土过滤(NTU < 2. 0)；步骤j 灭菌、灌装常规巴氏灭菌(85 100°C，10 30min)、无菌灌装，即得成品。
5.权利要求4所制得的贻贝营养调味汁用于食品调味的用途。
全文摘要
本发明提供一种利用贝类及其副产品制备营养型调味品的方法，可广泛用于食品、粮油、饮料、酒等领域。该方法主要解决了目前开发利用的贝类营养及活性成分的提取工艺及应用技术落后、粗加工副产物直接排放、浪费资源、污染环境、产品脱腥、去杂不彻底，产品结构和产品形式不太合理，没有根本解决增值等问题。
文档编号A23L1/23GK102379410SQ20111033362
公开日2012年3月21日 申请日期2011年10月28日 优先权日2011年10月28日
发明者兰余, 刘小兵, 刘盛兰, 雷燕, 马小花 申请人:海南椰岛(集团)股份有限公司