一种马属动物xy精子分离液的制作方法
【专利摘要】本发明公开了一种马属动物XY精子分离液，其中，分离液包括A液和脱脂奶，A液包括葡萄糖、棉子糖、D-乳糖单水合物、柠檬酸三钠、柠檬酸钾和HEPES。分离液的配制方法为：称取A液的各种组分放入无菌烧杯中，加双蒸水溶解后，定容、过滤、分装、灭菌、密封，即得A液，向A液加入等量的脱脂奶混合均匀即可得到分离液，其适用于马属动物XY精子分离。本发明的有益效果是：配制简单，使用方便，马属动物XY精子分离效果好，省时省力，适于规模化生产和应用。
【专利说明】—种马属动物XY精子分离液
【技术领域】
[0001]本发明涉及动物精液保存的【技术领域】，特别涉及一种马属动物XY精子分离液。
【背景技术】
[0002]通过性别控制，不但可减少人类性连锁遗传疾病的发生，既帮助具有性连锁隐性遗传病的患者选择后代性别，避免遗传疾病的发生；也可挽救濒临灭绝的珍稀物种；更重要的是可使肉用家畜多产公畜，乳用家畜多产母畜，满足畜牧生产需要，大大提高畜牧生产的经济利益。同时，优质种公畜精液的分离不但能够提高家畜繁殖效率，也能够减少家畜遗传疾病的传播，这在家畜遗传育种中尤为重要。XY精子分离是性别控制最根本的技术手段，由精子分离而衍生出了人工授精、体外受精和精子卵浆内注射3种可行的性别控制途径。为实现高水平性别控制，高效、快速的XY精子分离成为研究的焦点。本发明所述XY精子分离液能够高效、快速分离XY精子，成功率高、受胎效果好，对马属动物繁育而言有重要的经济效益。
【发明内容】
[0003]为了解决传统的精液分离液对XY精子分离不准确、受胎率低等问题，本发明提供了一种马属动物XY精子分离液。
[0004]为了实现上述发明 目的，本发明提供了一种马属动物XY精子分离液，所述分离液包括A液和脱脂奶，所述A液包括葡萄糖、棉子糖、D-乳糖单水合物、柠檬酸三钠、柠檬酸钾和 HEPES。
[0005]其中，所述A液和所述脱脂奶的混合体积比例优选为1:1。
[0006]每500ml的所述A液中，各组分的含量为:葡萄糖22~26g、棉子糖1.5^1.7g、D_乳糖单水合物1.5~1.7g、柠檬酸三钠Na3C6H5O7.2Η20 0.2~0.25g、柠檬酸钾0.35~0.45g、HEPES
4.6~4.8g0
[0007]所述葡萄糖为无水葡萄糖，其分子式为C6H12O6 ;所述棉子糖的分子式为C18H32O6.5H20 ;所述D-乳糖单水合物的分子式为C12H22O11.H2O ;所述柠檬酸钾的分子式为K3C6H5O7.H2O ;所述 HEPES 的分子式为 C8H18N2O4S15
[0008]本发明实施例提供的技术方案带来的有益效果是:使用本发明马属动物XY精子分离液进行精液的分离，效果明显优于传统的分离释液，马属动物精液的分离效果好，保证精子的活率和精子顶体完整率，增强受精能力，充分提高了精液的利用率和优良公畜配种的效率；本发明的分离液配制简单，使用方便，可置于0-5°C保存，随用随取，省时省力，适于规模化生产和应用。
【具体实施方式】
[0009]下面结合实施例对本发明做进一步描述。
[0010]实施例1称取葡萄糖24g、棉子糖1.6g、D-乳糖单水合物1.6g、柠檬酸三钠Na3C6H5O7.2H20
0.24g、柠檬酸钾0.4g和HEPES 4.7g，放入无菌烧杯中，加双蒸水溶解后，定容、过滤、分装、灭菌、密封，即得A液；将经过严格灭菌、密封的A液标记配制时间，置于(T5°C保存，随用随取；取适量的A液加入等量体积的脱脂奶混合均匀后，得到本实施例1的分离液。
[0011]对比试验I
将传统的稀释液葡萄糖-卵黄稀释液(对照组I)和牛奶稀释液(对照组2)，与实施例1的稀释液(实施例组I)分别稀释分离马的精液。其中，将实施例1的稀释液置于37°C恒温水浴锅中I小时后，按体积比1:5对马的新鲜精液(活率> 0.8)进行稀释，然后将稀释后的精液进行分离。在0-48小时内观察对照组1、对照组2和实施例组I的精子活力，每隔12个小时测定精子的活率，结果如表1所示。
[0012]表1:不同分离液对马精子活率的影响
【权利要求】
1.一种马属动物XY精子分离液，其特征在于，所述分离液包括A液和脱脂奶，所述A液包括葡萄糖、棉子糖、D-乳糖单水合物、柠檬酸三钠、柠檬酸钾和HEPES。
2.根据权利要求1所述的马属动物XY精子分离液，其特征在于，所述A液和所述脱脂奶的混合体积比例为1:1。
3.根据权利要求1所述的马属动物XY精子分离液，其特征在于，每500ml的所述A液中，各组分的含量为:葡萄糖22~26g、棉子糖1.5^1.7g、D-乳糖单水合物1.5^1.7g、柠檬酸三钠 Na3C6H5O7.2H20 0.2~0.25g、柠檬酸钾 0.35~0.45g、HEPES 4.6~4.8g。
4.根据权利要求1-3任意一项所述的马属动物XY精子分离液，其特征在于，所述葡萄糖为无水葡萄糖，其分子式为C6H12O6 ;所述棉子糖的分子式为C18H32O6.5Η20 ;所述0_乳糖单水合物的分子式为C12H22O11.H2O ;所述柠檬酸钾的分子式为K3C6H5O7.H2O ;所述HEPES的分子式为 C8H18N2O4S0
【文档编号】C12N5/076GK103756959SQ201310586762
【公开日】2014年4月30日 申请日期:2013年11月21日 优先权日:2013年11月21日
【发明者】邹敬清, 索佳佳, 邢金凤 申请人:青岛德瑞骏发生物科技有限公司, 伊犁德瑞骏发生物科技有限公司, 青岛德瑞鳌蓝马术有限公司