谷子SiREM6基因在提高植物抗盐性的应用的制作方法
【专利摘要】本发明提供了一种谷子SiREM6基因在提高植物抗盐性的应用，将含有谷子SiREM6基因开放阅读框序列的表达载体经农杆菌介导转化到植物中，可获得了抗盐性提高的转基因植物，有利于农业生产。
【专利说明】谷子S i REM6基因在提高植物抗盐性的应用
【技术领域】
[0001]本发明涉及基因工程领域，具体地说，涉及谷子SiREM6基因在提高植物抗盐性的应用。
【背景技术】
[0002]谷子(Setaria italica L.),属于禾本科,狗尾草属，广泛栽培于欧亚大陆的温带和热带。谷子的适应能力极强，它既耐旱、耐贫瘠的土壤，又耐酸、耐碱，尤以耐旱能力最强，所以谷子除了分布在我国北方干旱地区外，在我国南方某些干旱、贫瘠的山区，也有种植。为了提高植物的抗逆境能力，通过对冀谷11号基因组的分析，从谷子中挖掘了一些有应用潜力的和抗逆相关的基因。其中，谷子的Remorin蛋白家族基因可能参与了植物对于非生物胁迫的响应。第一个被发现的Remorin蛋白是定位于马铃薯叶片质膜上的一个约为34kDa大小的蛋白质,该蛋白在体外可以被寡半乳糖醒酸(Oligogalacturonide, 0GA)磷酸化。
【发明内容】
[0003]本发明提供谷子SiREM6基因在提高植物抗盐性的应用。 [0004]前述应用，具体是将含有谷子SiREM6基因开放阅读框序列的表达载体经农杆菌介导转化到植物中。
[0005]本发明还提供了含有谷子SiREM6基因开放阅读框序列的载体，所述谷子SiREM6基因开放阅读框序列如SEQ ID N0.1所示。
[0006]本发明还提供了含有所述载体的工程菌。
[0007]本发明从谷子cDNA中筛选得到一个Remorin蛋白家族基因，称之为SiREM6基因。该基因的开放阅读框的序列长度为639bp，其核苷酸序列如图2A所示。通过核苷酸序列推测，SiREM6编码一个含212个氨基酸的蛋白，富含赖氨酸(18.99% , w/w)和谷氨酸(22.39% ,w/w)。根据DNAMAN6.0.3.48软件分析，该蛋白大小为23kDa，等电点为5.4。通过InterProScan预测出该蛋白含有一个典型而保守的Remorin蛋白的C端和Remorin蛋白的N端结构域。进一步分析该蛋白的氨基酸序列表明，该蛋白的N端含有9个脯氨酸，C端包含一个coiled-coil结构域(图2)。根据谷子中的11个Remorin蛋白及其它植物Remorin蛋白的氨基酸序列(分析中涉及到的所有Remorin蛋白的Gene/EST编号请见表I)，用MEGA5.2.2软件进行了 Remorin蛋白的进化分析，结果如图3所示，SiREM6蛋白和水稻OsREMl.5及玉米ZmREMl.2的亲缘关系较近,属于第1_3组Remorin蛋白。进一步，根据Raffaele 等(Raffaele et al., 2007, Plant Phys1l.Vol.145, pp.593-600)人对 Remorin蛋白的分类方法，比较N端的氨基酸序列发现，SiREM6蛋白属于第I组Remorin蛋白，而第I组Remorin蛋白可能参与了植物对于非生物胁迫的响应。SiREM6定位于谷子原生质体的细胞质中，在体外能自聚成类似于纤维状的结构。qRT-PCR研究表明SiREM6在谷子的根、茎、叶和花序中均有表达，而且在不同程度上受到ΑΒΑ、盐和冷胁迫诱导表达，但几乎不受PEG诱导表达。
[0008]表1系统进化分析中所有Remorin蛋白
[0009]
【权利要求】
1.谷子SiREM6基因在提高植物抗盐性的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，将含有谷子SiREM6基因开放阅读框序列的表达载体经农杆菌介导转化到植物中。
3.含有谷子SiREM6基因开放阅读框序列的载体，其特征在于，所述谷子SiREM6基因开放阅读框序列如SEQ ID N0.1所示。
4.含有权利要求3 所述载体的工程菌。
【文档编号】C12N1/21GK104031937SQ201410176183
【公开日】2014年9月10日 申请日期:2014年4月28日 优先权日:2014年4月28日
【发明者】于静娟, 岳静, 李丛 申请人:中国农业大学