本发明属于饲料组合物
技术领域：
，具体涉及一种燕麦糠与柑橘渣纤维发酵饲料及制备方法。
背景技术：
：饲料纤维主要是指一般不易被消化的食物营养素，主要来自于植物的细胞壁，包含纤维素、纤维素、树胶、果胶及木质素等。纤维是一种复杂的混合物，根据水溶性的不同可以分为水溶性纤维(SDF)和水不溶性纤维(IDF)；近年来，膳食纤维进一步分为可发酵型纤维和不可发酵型纤维。水不溶性膳食纤维主要由植物细胞壁组成，如纤维素、木质素和半纤维素，芝麻粕、小麦麸、米糠粕等等,在原料中大量存在。水溶性膳食纤维由半纤维素多糖组成，如存在于燕麦、大麦、豆类中的果胶和凝胶等。其一般为亲水，非结晶型纤维，与碳水化合物和脂质的代谢有关，易被肠道液润湿，因此很容易被肠道中的微生物所利用。可发酵型纤维是指能被畜禽肠道中的微生物分解成不同水平程度的那部分纤维，主要包括果聚糖、果胶、聚葡萄糖及抗性淀粉等。可发酵型膳食纤维能促进畜禽代谢，如其可以作为益生元，促进肠道益生菌的生长；产生短链脂肪酸(SCFA)，促进水和钠的吸收，促进黏膜细胞增殖；提供能量；降低细胞腔内的pH。不可发酵型膳食纤维主要包括纤维素、木质素以及一些发酵缓慢的半纤维素。不可发酵型膳食纤维对畜禽的主要作用在于其可以促进微生物的增殖，从而使微生物净化，降解有毒物质而达到解毒的目的，而且有些微生物还可以抑制或减缓癌细胞的增殖；另外，不可发酵型膳食纤维还能润肠通便，促进肠道蠕动，减少食物在胃肠道的停滞时间，降低肠内压。纤维的功能：作为一种特殊的营养素，它含有独特的生物活性物质混合物，包括抗性淀粉、维生素、矿物质、植物化学物质和抗氧化成分。饲料发酵以后小肽的含量明显增加。小肽的主要作用是吸收快、不易饱和、与氨基酸有独立的吸收机制，有助于减轻游离氨基酸相互竞争共同吸收位点产生的拮抗作用，还能促进游离氨基酸的转运，从而促进氨基酸吸收提高蛋白利用率。小肽对消化道具有保护作用，令幼龄动物小肠早熟，刺激消化酶的分泌。小肽具有免疫活性，能使动物消化道内有益菌群增殖，提高机体抗病力。燕麦糠粗蛋白只有4％，粗纤维含量达到29％，水分7.2％、灰分2.79、粗纤维29.68％，是一种非常好的粗纤维原料。但是酸性洗涤纤维含量高，黄曲霉毒素和呕吐毒素超标严重。燕麦糠还含有丰富的纤维和其它营养成分如铁、钾和维生素B1等。经过微生物发酵后，粗蛋白含量增加50-60％，铁、钾和维生素B1等含量增加10-15％，有效降解霉菌毒素，同时含有多种微生物代谢产物，能够促进动物生长，增强疾病抵抗力。柑橘渣是以柑橘果实生产果汁罐头剩余的果浆、果核、果皮干燥后粉碎得到的产物，颜色呈淡黄色或褐色，有淡柑橘味，品尝稍有苦味，90％可通过10目标准筛，100％可通过8目标准筛。柑橘渣中一般成分含量为：干物质90.00％.，其中粗蛋白9.8％，粗脂肪3.7％，30.6％的粗纤维，无氮浸出物60.3％，粗灰分6.6％，钙1.84％，磷0.12％。柑橘渣中含有并且有苦味的物质，影响了动物的有效利用。柑橘皮渣中百菌清和敌敌畏残留等16种农药，残留含量的影响,通过发酵可以有效降解，并提高粗蛋白等营养含量，显著降低粗纤维含量。柑橘渣对反刍动物的消化能为13.79MJ/kg，对猪的消化能为13.78MJ/kg，对鸡的代谢能为6.27MJ/kg。柑橘渣精氨酸含量0.27％，赖氨酸0.22％，蛋氨酸0.10％，胱氨酸0.12％，色氨酸0.07％，铁为378.0mg/kg，铜6.0mg/kg，锰为7.0mg/kg，锌为15mg/kg。柑橘渣的营养价值经过发酵后会有很大改观，与未发酵的干粉相比，粗蛋白质提高50％，氨基酸提高55％，粗脂肪提高24％，维生素提高10％一60％，粗纤维下降17％，说明发酵能弥补干粉蛋白质、氨基酸的不足，并增加维生素含量，使其营养达到较高水平，发酵柑橘渣16种氨基酸含量都有所增加总氨基酸含量分别从7.59％增加到10.84％；必需氨基酸含量增加49.72％；非必需氨基酸增加41.18％其中赖氨酸增加80％；蛋氨酸增加41.67％；苏氨酸增加82.76％。用以饲喂奶牛，可代替40％-45％的玉米粉，且奶牛毛皮光亮，抗病力增强。苜蓿是一种非常优良的植物性蛋白质饲料，粗蛋白含量高、消化率高、富含维生素和各种矿物质，苜蓿干物质粗蛋白质含量在18％以上，饲喂奶牛可显著提高奶牛的产奶量和牛奶品质，还可减少因为过多吃精料引起的奶长奶牛利用年限，提高经济效益。研究表明，经过微生物发酵后，苜蓿草粗纤维含量为11.90％,比未发酵时降低了38.34％，粗蛋白质和真蛋白质含量为29.62％、22.97％，分别比未发酵时提高了42.41％和28.97％，酸溶性小肽的含量升12.59％，必需氨基酸和总氨基酸含量均有所增加，经过微生物发酵能够使苜蓿粉的粗蛋白质含量相对增加，降低纤维素含量，提高酸溶性肽含量，从而改善苜蓿粉的饲用品质。苜蓿草粉是猪鸡饲料非常好的纤维素营养来源，其中含有粗蛋白20％以上，粗纤维21％以上，猪的有机物消化率只有47％，并且含有一定的大肠杆菌等有害菌和黄曲霉毒素等有害物质，通过发酵以后，提高有益菌的数量，降低有害菌的数量，有效改善猪鸡肠道健康状态。中国发明申请用秸秆发酵降低粗纤维生产饲料的方法，申请号：201410657067.2发明公开了一种利用秸秆发酵降低粗纤维生产饲料的方法，涉及农业
技术领域：
；原料准备、搅拌、装袋、材料收集、加尿素、调制菌液、装袋、二次发酵、包装等；本发明可以解决目前秸秆无法用作家畜饲料、秸秆有效利用率低的问题。复合菌发酵高纤维农副产品生产动物益生菌饲料的方法，申请号：201110237021.1公开了一种复合菌发酵高纤维农副产品生产动物益生菌饲料的方法,是将高纤维农副产品除杂、粉碎处理,与辅料(0～6.0％硫酸铵、和/或0～3.0％磷酸二氢钾、和/或0～1.0％氯化钙和/或0～1.0％硫酸镁)按比例混合均匀后润水蒸料；蒸料完成后冷却至20～40℃,同时接种粗壮脉纹胞菌和植物乳杆菌，20～40℃下固态发酵2～5d；将发酵完成的饲料置于40℃～70℃干燥后粉碎,即得富含类胡萝卜素的益生菌饲料产品。本方法具有生产效率高,成本低,效益好的优点,解决环境污染问题的同时,又缓解了能量和蛋白饲料来源严重短缺的压力。技术实现要素：本发明针对的燕麦糠、柑橘渣和苜蓿草等原料粗纤维含量高、有霉菌毒素污染等情况，采取发酵技术，增加小肽等营养含量，降低粗纤维含量，增加有益的未知因子，并提高有益菌数量，提高猪禽的利用效果。经过发酵的混合纤维可以大量使用到猪饲料中，降低成本的同时，为猪提供安全饲料保障。为了实现上述目标，本发明采用的方案是：一种用于猪饲养用混合发酵纤维饲料,由以下重量份数的原料制备：柑橘渣、燕麦糠、苜蓿草的酵母菌混合发酵产物A1份，柑橘渣、燕麦糠、苜蓿草、蔬菜的乳酸菌混合发酵产物B1-3份，柑橘渣、燕麦糠、苜蓿草的芽孢杆菌混合发酵产物C2-3份。所述A由以下方法制备得到：将柑橘渣、燕麦糠、苜蓿草按照质量比1:2.5-3:1-3组成的原料混合物添加到可加热的混合机中，加入原料混合物质量40-60％的水、3-5％的葡萄糖，混合均匀后加热到70-80℃20-30分钟后，将物料冷却至25-30℃，加入原料混合物质量0.2-0.5％的混合酵母菌种子液，在25-30℃培养40-50小时，搅拌转速为20-30r/min，培养到20-25小时添加原料混合物质量0.005-0.1％的L-半胱氨酸、0.05-0.1％的甘草粉碎粒，发酵结束后用流化床干燥，得到水分含量小于14wt％的柑橘渣、燕麦糠、苜蓿草的酵母菌混合发酵产物A。所述B由以下方法制备得到：将柑橘渣、燕麦糠、苜蓿草、蔬菜按照质量比1:2-3:1：1组成的原料混合物添加到容器中，加入原料混合物质量30-70％的水、2-3％的葡萄糖、0.5-2％的混合乳酸菌种子液，在25-37℃培养50-75小时，发酵结束后用流化床干燥，得到水分含量小于14wt％的柑橘渣、燕麦糠、苜蓿草、蔬菜的乳酸菌混合发酵产物B；所述蔬菜为白菜、西红柿、莲花菜、菜花中至少一种；所述蔬菜需清洗切分为小块后使用。所述C由以下方法制备得到：将柑橘渣、燕麦糠、苜蓿草按照质量比1:1-2.5:1-4组成的原料混合物添加到可加热的混合机中，加入原料混合物质量50-60％的水、2-3％的葡萄糖，混合均匀后加热到50-60℃30分钟后，将物料冷却至25-30℃，加入原料混合物质量0.1-0.3％的混合芽孢杆菌种子液，在25-30℃培养50-80小时，搅拌转速为30-50r/min。发酵结束后用流化床干燥，得到水分含量小于14wt％的柑橘渣、燕麦糠、苜蓿草的芽孢杆菌混合发酵产物C。所述混合酵母菌种子液由以下方法制备得到：将产朊假丝酵母菌、酿酒酵母菌分别接种于PDY液体培养基中，在25-32℃，150-200rpm下培养30-40小时，分别得到产朊假丝酵母菌种子液、酿酒酵母菌种子液，再将产朊假丝酵母菌种子液、酿酒酵母菌种子液按照体积比1:1～1:5混合接种到混合酵母菌种子液培养基中，在25-32℃，150-200rpm下培养20-30小时，得到混合酵母菌种子液；所述混合酵母菌种子液培养基由以下方法制备得到：蛋白胨15.0g、葡萄糖18.0g、酵母提取物3.0g、氯化钠5.0g、蒸馏水1000ml、pH值6.8-7.2，121℃灭菌20min；所述酿酒酵母为CGMCCNo.12789。所述混合乳酸菌种子液由以下方法制备得到：将植物乳杆菌、乳酸片球菌分别接种于MRS液体培养基中，在32-37℃条件下培养20-30小时，分别得到植物乳杆菌种子液、乳酸片球菌种子液，再将植物乳杆菌种子液、乳酸片球菌种子液按照体积比1:2～1:4混合接种到混合乳酸菌种子液培养基中，在30-37℃下培养20-30小时，得到混合乳酸菌种子液；所述混合乳酸菌种子液培养基由以下方法制备得到：蛋白胨12g、葡萄糖25g、牛肉膏8g、酵母抽提物6g、磷酸氢二钠5g、柠檬酸二胺0.25g、乙酸钠6g、吐温802ml、硫酸镁0.8g、硫酸锰0.5g、硫酸亚铁0.2g、蒸馏水1000ml，pH值6.0-6.5,120℃灭菌20min。所述混和芽孢杆菌种子液由以下方法制备得到：将枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌分别接种于TSB液体培养基中，在30-37℃、150-250rpm下培养12-30小时，分别得到枯草芽孢杆菌种子液、地衣芽孢杆菌种子液，再将枯草芽孢杆菌种子液、地衣芽孢杆菌种子液按照体积比1:1～1:3混合接种到混和芽孢杆菌种子液培养基中，在30-37℃、150-250rpm下培养12-30小时，得到混和芽孢杆菌种子液；所述混合芽孢杆菌种子液培养基由以下方法制备得到：大豆蛋白胨10g、葡萄糖15g、胰蛋白胨5g、磷酸氢钠4g、氯化钾2g、蒸馏水1000ml，pH值6.8-7.0，120℃灭菌20min。本发明的另一目的是提供一种上述用于猪饲养用混合发酵纤维饲料的制备方法。为了实现上述目标，本发明采用的方案是：一种上述用于猪饲养用混合发酵纤维饲料的制备方法，包括以下步骤：将柑橘渣、燕麦糠、苜蓿草的酵母菌混合发酵产物A，柑橘渣、燕麦糠、苜蓿草、蔬菜的乳酸菌混合发酵产物B，柑橘渣、燕麦糠、苜蓿草的芽孢杆菌混合发酵产物C按照质量比1:1-3:2-3混合均匀得到上述用于猪饲养用混合发酵纤维饲料。有益效果通过柑橘渣、燕麦糠、苜蓿草及蔬菜的混和发酵，作为一种发酵纤维饲料应用于猪鸡饲料可以显著提高猪、鸡的肠绒毛发育和隐窝深度，改善消化机能和肠道健康状态；发酵后的混合纤维饲料粗蛋白含量提高40％以上，酸溶性小肽的含量提高12％以上，增加未知营养因子等含量，降低粗纤维30％以上，显著提高饲料的有机物消化率，提高免疫功能和抗病力，为提供安全猪鸡产品提供强有力的保障。发明产品中富含酵母菌，作为益生菌组成成分发挥作用，同时酵母发酵产生的多量谷胱甘肽产物也分泌到产品中。增加了产品营养物质含量，GSH含量达到30mg/kg,提高了产品的营养功能和效果。具体实施方式下面通过具体的实施方案叙述本发明。除非特别说明，本发明中所用的技术手段均为本领域技术人员所公知的方法。另外，实施方案应理解为说明性的，而非限制本发明的范围，本发明的实质和范围仅由权利要求书所限定。对于本领域技术人员而言，在不背离本发明实质和范围的前提下，对这些实施方案中的物料成分和用量进行的各种改变或改动也属于本发明的保护范围。下面的实施例可以使本领域技术人员更全面地理解本发明，但不以任何方式限制本发明。CGMCCNo.12789具体为酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)tlj2016，该菌株已于保藏于2016年7月15日中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCCNo.12789，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮编100101。所述酿酒酵母tlj2016的最适生长pH为6.0-6.5,最适生长温度为28-35℃；所述酿酒酵母tlj2016是从一株宁夏果园中分离得到的酿酒酵母出发菌株经以下步骤得到：原始出发菌种→试管活化→硫酸二乙酯(DES)诱变→高渗平板筛选→亚硝基胍(NTG)诱变筛选→高渗平板初筛→摇瓶筛选→发酵复筛(产GSH能力)→传代稳定性试验。1、本发明所提供的酿酒酵母对葡萄糖的耐受能力达到300g/L，利于其在高浓度葡萄糖条件下生产GSH；2、本发明所提供的酿酒酵母在5L发酵罐中发酵生产GSH终浓度达到3308mg/L；3、本发明所提供的酿酒酵母耐受L-半胱氨酸的能力远高于出发菌株，在5mmol/LL-半胱氨酸作用下仍能缓慢生长，在40mmol/LL-半胱氨酸作用下仍能保持GSH大量合成；4、本发明所提供的酿酒酵母耐盐能力达到18％，有利于扩展其应用领域。(一)高糖条件下tlj2016发酵产GSH能力实验(1)摇瓶培养取tlj2016斜面菌种一环，接入装有30mL摇瓶培养基的250mL摇瓶中150rpm,30℃培养30h得种子液；摇瓶培养基(g/L)：(NH4)2SO46、葡萄糖35、K2HPO4·3H2O3、KH2PO40.5、酵母粉11、MnSO40.1、KCL0.1、FeSO40.1、MgSO4·7H2O0.1，pH6.0；(2)5L发酵罐培养将种子液按10％接种量，接入装有3L发酵培养基的发酵罐中，30℃,通气量6L/min,罐压0.03MPa，500rpm,恒pH6.0条件下进行发酵培养，发酵至30h时，一次性添加终浓度为25mmol/L的L-半胱氨酸，总发酵时间为50h；发酵培养基(g/L)：(NH4)2SO410、葡萄糖100、K2HPO4·3H2O8、KH2PO40.5、酵母粉11、MnSO40.1、KCL0.1、FeSO40.1、MgSO4·7H2O0.1,pH6.0；发酵结束后，测定发酵液中GSH的含量为3308mg/L。(二)L-半胱氨酸耐受力实验将出发菌株以及tlj2016斜面菌种各一环，分别接入装有30mL摇瓶培养基的250mL摇瓶中150rpm,30℃培养进行培养，在培养至12h时，向摇瓶中加入不同终浓度的L-半胱氨酸，再培养10h，测定细胞干重，结果表1、2；摇瓶培养基(g/L)：(NH4)2SO46、葡萄糖20、K2HPO4·3H2O3、KH2PO40.5、酵母粉11、MnSO40.1、KCL0.1、FeSO40.1、MgSO4·7H2O0.1，pH6.0；表1：出发菌株L-半胱氨酸耐受力L-半胱氨酸浓度mmol/L0510152040出发菌株干重g/L22.615.710.24.32.20.8GSH浓度(mg/L)35.646.743.240.737.925.3表2：tlj2016L-半胱氨酸耐受力L-半胱氨酸浓度mmol/L0510152040Tlj2016干重g/L25.728.523.621.220.618.7GSH浓度(mg/L)73.298.3113.5121.7127.5135.8从表2的结果可以看出，对于出发菌株，培养基中添加L-半胱氨酸，细胞停止生长，并且开始自溶，导致GSH增长率随着L-半胱氨酸浓度的升高而降低；而低浓度L-半胱氨酸下，tlj2016仍能够缓慢生长，随着L-半胱氨酸浓度的提高，tlj2016菌株的细胞干重缓慢下降，而GSH浓度持续增长，这一结果将有利于GSH生产过程中通过添加前体氨基酸-L-半胱氨酸提促进GSH的生产。(三)耐盐能力实验取tlj2016菌液1mL接种菌种于含有不同NaCl浓度的(含量梯度为0％、2％、5％、10％、15％、18％)的10mLYPD液体培养基(pH＝6.5)，置于30℃下分别培养24h，每个处理3个重复。各取1ml样品菌液于9ml生理盐水中混匀，制备稀释度溶液，取0.1ml稀释液于YPD固体平板中涂布，于30℃生化培养箱中倒置培养36小时(每个稀释度做3个平行)记录计算平板上的菌数个数。结果见表3，可知该菌的耐盐浓度为18％，说明tlj2016不仅可以在常规环境中生存，在高盐条件下依然具有活力，可应用于酱油、腌制品等高盐食品加工过程中耗糖产谷胱甘肽。表3：耐盐能力检测(×107cfu/ml)实施例1：一种用于猪饲养用混合发酵纤维饲料，由以下方法制备得到：将柑橘渣、燕麦糠、苜蓿草的酵母菌混合发酵产物A，柑橘渣、燕麦糠、苜蓿草、蔬菜的乳酸菌混合发酵产物B，柑橘渣、燕麦糠、苜蓿草的芽孢杆菌混合发酵产物C按照质量比1:2:2混合均匀即得到用于猪饲养用混合发酵纤维饲料。该饲料中GSH含量达到33mg/kg。A的制备：将柑橘渣、燕麦糠、苜蓿草按照质量比1:2.8:2组成的原料混合物添加到可加热的混合机中，加入原料混合物质量50％的水、4％的葡萄糖，混合均匀后加热到75℃25分钟后，将物料冷却至28℃，加入原料混合物质量0.4％的混合酵母菌种子液，在28℃培养45小时，搅拌转速为25r/min，培养到22小时添加原料混合物质量0.008％的L-半胱氨酸、0.08％的甘草粉碎粒，发酵结束后用流化床干燥，得到水分含量为14wt％的柑橘渣、燕麦糠、苜蓿草的酵母菌混合发酵产物A。B的制备：将柑橘渣、燕麦糠、苜蓿草、蔬菜按照质量比1:2.5:1:1组成的原料混合物添加到容器中，加入原料混合物质量60％的水、3％的葡萄糖、0.7％的混合乳酸菌种子液，在28℃培养65小时，发酵结束后用流化床干燥，得到水分含量为14wt％的柑橘渣、燕麦糠、苜蓿草、蔬菜的乳酸菌混合发酵产物B；所述蔬菜为白菜，所述蔬菜需清洗切分为小块后使用。C的制备：将柑橘渣、燕麦糠、苜蓿草按照质量比1:2:3组成的原料混合物添加到可加热的混合机中，加入原料混合物质量55％的水、2％葡萄糖，混合均匀后加热到55℃30分钟后，将物料冷却至26℃，加入原料混合物质量0.2％的混合芽孢杆菌种子液，在26℃培养70小时，搅拌转速为40r/min。发酵结束后用流化床干燥，得到水分含量为14wt％的柑橘渣、燕麦糠、苜蓿草的芽孢杆菌混合发酵产物C。混合酵母菌种子液的制备：将产朊假丝酵母菌、酿酒酵母菌分别接种于PDY液体培养基中，在26℃，180rpm下培养35小时，分别得到产朊假丝酵母菌种子液、酿酒酵母菌种子液，再将产朊假丝酵母菌种子液、酿酒酵母菌种子液按照体积比1:3混合接种到混合酵母菌种子液培养基中，在26℃，180rpm下培养26小时，得到混合酵母菌种子液；所述混合酵母菌种子液培养基的制备：蛋白胨15.0g、葡萄糖18.0g、酵母提取物3.0g、氯化钠5.0g、蒸馏水1000ml、pH值7，121℃灭菌20min；所述酿酒酵母菌为CGMCCNo.12789，所述产朊假丝酵母菌为CGMCC21641。混合乳酸菌种子液的制备：将植物乳杆菌、乳酸片球菌分别接种于MRS液体培养基中，在35℃下培养26小时，分别得到植物乳杆菌种子液、乳酸片球菌种子液，再将植物乳杆菌种子液、乳酸片球菌种子液按照体积比1:3混合接种到混合乳酸菌种子液培养基中，在33℃下培养25小时，得到混合乳酸菌种子液；所述混合乳酸菌种子液培养基的制备：蛋白胨12g、葡萄糖25g、牛肉膏8g、酵母抽提物6g、磷酸氢二钠5g、柠檬酸二胺0.25g、乙酸钠6g、吐温802ml、硫酸镁0.8g、硫酸锰0.5g、硫酸亚铁0.2g、蒸馏水1000ml，pH值6.2,120℃灭菌20min；所述植物乳杆菌为CGMCC13919,所述乳酸片球菌为CGMCC12696。混和芽孢杆菌种子液的制备：将枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌分别接种于TSB液体培养基中，在33℃、200rpm下培养25小时，分别得到枯草芽孢杆菌种子液、地衣芽孢杆菌种子液，再将枯草芽孢杆菌种子液、地衣芽孢杆菌种子液按照体积比1:2混合接种到混和芽孢杆菌种子液培养基中，在33℃、200rpm下培养20小时，得到混和芽孢杆菌种子液；所述混合芽孢杆菌种子液培养基的制备：大豆蛋白胨10g、葡萄糖15g、胰蛋白胨5g、磷酸氢钠4g、氯化钾2g、蒸馏水1000ml，pH值6.8，120℃灭菌20min；所述枯草芽孢杆菌为CGMCC11700,地衣芽孢杆菌为CGMCC17461。实施例2一种用于猪饲养用混合发酵纤维饲料，由以下方法制备得到：将柑橘渣、燕麦糠、苜蓿草的酵母菌混合发酵产物A，柑橘渣、燕麦糠、苜蓿草、蔬菜的乳酸菌混合发酵产物B，柑橘渣、燕麦糠、苜蓿草的芽孢杆菌混合发酵产物C按照质量比1:1:3混合均匀即得到用于得到用于猪饲养用混合发酵纤维饲料。该饲料中GSH含量达到32mg/kg。A的制备：将柑橘渣、燕麦糠、苜蓿草按照质量比1:2.5:1组成的原料混合物添加到可加热的混合机中，加入原料混合物质量60％的水、3％的葡萄糖，混合均匀后加热到70℃20分钟后，将物料冷却至25℃，加入原料混合物质量0.2％的混合酵母菌种子液，在25℃培养40小时，搅拌转速为20r/min，培养到25小时添加原料混合物质量0.005％的L-半胱氨酸、0.05％的甘草粉碎粒，发酵结束后用流化床干燥，得到水分含量为13wt％的柑橘渣、燕麦糠、苜蓿草的酵母菌混合发酵产物A。B的制备：将柑橘渣、燕麦糠、苜蓿草、蔬菜按照质量比1:2:1:1组成的原料混合物添加到容器中，加入原料混合物质量30％的水、3％的葡萄糖、0.5％的混合乳酸菌种子液，在25℃培养50小时，发酵结束后用流化床干燥，得到水分含量为13wt％的柑橘渣、燕麦糠、苜蓿草、蔬菜的乳酸菌混合发酵产物B；所述蔬菜为白菜、西红柿按照质量比1:1组成，所述蔬菜需清洗切分为小块后使用。C的制备：将柑橘渣、燕麦糠、苜蓿草按照质量比1:2.5:1组成的原料混合物添加到可加热的混合机中，加入原料混合物质量50％的水、2％的葡萄糖，混合均匀后加热到50℃30分钟后，将物料冷却至25℃后，加入原料混合物质量0.1％的混合芽孢杆菌种子液，在25℃培养80小时，搅拌转速为30r/min。发酵结束后用流化床干燥，得到水分含量为13wt％的柑橘渣、燕麦糠、苜蓿草的芽孢杆菌混合发酵产物C。混合酵母菌种子液的制备：将产朊假丝酵母菌、酿酒酵母菌分别接种于PDY液体培养基中，在25℃，150rpm下培养40小时，分别得到产朊假丝酵母菌种子液、酿酒酵母菌种子液，再将产朊假丝酵母菌种子液、酿酒酵母菌种子液按照体积比1:1混合接种到混合酵母菌种子液培养基中，在25℃，150rpm下培养30小时，得到混合酵母菌种子液；所述混合酵母菌种子液培养基的制备：蛋白胨15.0g、葡萄糖18.0g、酵母提取物3.0g、氯化钠5.0g、蒸馏水1000ml、pH值6.8，121℃灭菌20min；所述酿酒酵母菌为CGMCCNo.12789，所述产朊假丝酵母菌为CGMCC21641。混合乳酸菌种子液的制备：将植物乳杆菌、乳酸片球菌分别接种于MRS液体培养基中，在32℃下培养30小时，分别得到植物乳杆菌种子液、乳酸片球菌种子液，再将植物乳杆菌种子液、乳酸片球菌种子液按照体积比1:2混合接种到混合乳酸菌种子液培养基中，在30℃下培养30小时，得到混合乳酸菌种子液；所述混合乳酸菌种子液培养基的制备：蛋白胨12g、葡萄糖25g、牛肉膏8g、酵母抽提物6g、磷酸氢二钠5g、柠檬酸二胺0.25g、乙酸钠6g、吐温802ml、硫酸镁0.8g、硫酸锰0.5g、硫酸亚铁0.2g、蒸馏水1000ml，pH值6.0,120℃灭菌20min；所述植物乳杆菌为CGMCC13919,所述乳酸片球菌为CGMCC12696。混和芽孢杆菌种子液的制备：将枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌分别接种于TSB液体培养基中，在30℃、150rpm下培养30小时，分别得到枯草芽孢杆菌种子液、地衣芽孢杆菌种子液，再将枯草芽孢杆菌种子液、地衣芽孢杆菌种子液按照体积比1:1混合接种到混和芽孢杆菌种子液培养基中，在30℃、150rpm下培养30小时，得到混和芽孢杆菌种子液；所述混合芽孢杆菌种子液培养基的制备：大豆蛋白胨10g、葡萄糖15g、胰蛋白胨5g、磷酸氢钠4g、氯化钾2g、蒸馏水1000ml，pH值7，120℃灭菌20min；所述枯草芽孢杆菌为CGMCC11700,地衣芽孢杆菌为CGMCC17461。实施例3一种用于猪饲养用混合发酵纤维饲料，由以下方法制备得到：将柑橘渣、燕麦糠、苜蓿草的酵母菌混合发酵产物A，柑橘渣、燕麦糠、苜蓿草、蔬菜的乳酸菌混合发酵产物B，柑橘渣、燕麦糠、苜蓿草的芽孢杆菌混合发酵产物C按照质量比1:3:2混合均匀即得到用于得到用于猪饲养用混合发酵纤维饲料。该饲料中GSH含量达到32mg/kg。A的制备：将柑橘渣、燕麦糠、苜蓿草按照质量比1:3:2组成的原料混合物添加到可加热的混合机中，加入原料混合物质量40％的水、5％的葡萄糖，混合均匀后加热到80℃30分钟后，将物料冷却至30℃，加入原料混合物质量0.5％的混合酵母菌种子液，在30℃培养50小时，搅拌转速为30r/min，培养到20小时添加原料混合物质量0.1％的L-半胱氨酸、0.1％的甘草粉碎粒，发酵结束后用流化床干燥，得到水分含量为12wt％的柑橘渣、燕麦糠、苜蓿草的酵母菌混合发酵产物A。B的制备：将柑橘渣、燕麦糠、苜蓿草、蔬菜按照质量比1:3:1:1组成的原料混合物添加到容器中，加入原料混合物质量70％的水、2％的葡萄糖、2％的混合乳酸菌种子液，在37℃培养75小时，发酵结束后用流化床干燥，得到水分含量为12wt％的柑橘渣、燕麦糠、苜蓿草、蔬菜的乳酸菌混合发酵产物B；所述蔬菜为莲花菜、菜花按照质量比2:1组成，所述蔬菜需清洗切分为小块后使用。C的制备：将柑橘渣、燕麦糠、苜蓿草按照质量比1:1:4组成的原料混合物添加到可加热的混合机中，加入原料混合物质量60％的水、3％的葡萄糖，混合均匀后加热到60℃30分钟后，将物料冷却至30℃后，加入原料混合物质量0.3％的混合芽孢杆菌种子液，在30℃培养50小时，搅拌转速为500r/min。发酵结束后用流化床干燥，得到水分含量为12wt％的柑橘渣、燕麦糠、苜蓿草的芽孢杆菌混合发酵产物C。混合酵母菌种子液的制备：将产朊假丝酵母菌、酿酒酵母菌分别接种于PDY液体培养基中，在32℃，200rpm下培养30小时，分别得到产朊假丝酵母菌种子液、酿酒酵母菌种子液，再将产朊假丝酵母菌种子液、酿酒酵母菌种子液按照体积比1:5混合接种到混合酵母菌种子液培养基中，在32℃，200rpm下培养20小时，得到混合酵母菌种子液；所述混合酵母菌种子液培养基的制备：蛋白胨15.0g、葡萄糖18.0g、酵母提取物3.0g、氯化钠5.0g、蒸馏水1000ml、pH值7.2，121℃灭菌20min；所述酿酒酵母菌为CGMCCNo.12789，所述产朊假丝酵母菌为CGMCC21641。混合乳酸菌种子液的制备：将植物乳杆菌、乳酸片球菌分别接种于MRS液体培养基中，在37℃下培养20小时，分别得到植物乳杆菌种子液、乳酸片球菌种子液，再将植物乳杆菌种子液、乳酸片球菌种子液按照体积比1:4混合接种到混合乳酸菌种子液培养基中，在37℃下培养20小时，得到混合乳酸菌种子液；所述混合乳酸菌种子液培养基的制备：蛋白胨12g、葡萄糖25g、牛肉膏8g、酵母抽提物6g、磷酸氢二钠5g、柠檬酸二胺0.25g、乙酸钠6g、吐温802ml、硫酸镁0.8g、硫酸锰0.5g、硫酸亚铁0.2g、蒸馏水1000ml，pH值6.5,120℃灭菌20min；所述植物乳杆菌为CGMCC13919,所述乳酸片球菌为CGMCC12696。混和芽孢杆菌种子液的制备：将枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌分别接种于TSB液体培养基中，在37℃、250rpm下培养12小时，分别得到枯草芽孢杆菌种子液、地衣芽孢杆菌种子液，再将枯草芽孢杆菌种子液、地衣芽孢杆菌种子液按照体积比1:3混合接种到混和芽孢杆菌种子液培养基中，在37℃、250rpm下培养12小时，得到混和芽孢杆菌种子液；所述混合芽孢杆菌种子液培养基的制备：大豆蛋白胨10g、葡萄糖15g、胰蛋白胨5g、磷酸氢钠4g、氯化钾2g、蒸馏水1000ml，pH值7，120℃灭菌20min；所述枯草芽孢杆菌为CGMCC11700,地衣芽孢杆菌为CGMCC17461。实施例4将本实施例1制得的饲料、普通的饲料，做使用效果试验。经过大量的梯度试验结果得知，混合发酵纤维饲料在仔猪料应用8％效果最好，因此本发明组说明的试验结果是添加量8％。综合11个试验的结果如下：选择72头体重相近的断奶仔猪，分成2组，包括对照组和本发明组，每组6个重复，每个重复6头猪，试验期为35天。表4：本发明对仔猪生产性能和肠道组织形态的影响由表4可见，本发明组平均日增重提高17.9％，料肉比降低13.6％，十二指肠绒毛高度、回肠绒毛高度分别提高13.8％和10.2％，发酵纤维饲料改善仔猪肠道健康效果显著。表5：本发明对仔猪肠道菌群平衡和胸腺重量的影响由表5可见，仔猪食糜中和粪便中有益菌数量明显提高，免疫器官重量明显提高。本发明在仔猪方面使用效果明显，处于行业领先水平。断奶仔猪断奶综合征的问题，也是全世界的养猪行业所面临的共性难题。随着国内绿色添加剂生物技术特别是微生态制剂技术的发展，为解决仔猪阶段断奶仔猪断奶后的肠道健康问题提供了技术支持。本发明组取得理想效果的新型无公害饲料在猪料上的应用等可以有效替代抗生素使用，抑制肠内有害微生物菌群，调节肠道菌群平衡，增强非特异性免疫功能等，提高饲料利用率，保障猪群健康。本发明组发酵纤维饲料能显著降低肠道中的大肠杆菌数，使肠道微生物重新形成有利于动物体的微生态平衡及维持正常生理功能；有益菌乳酸菌等可以竞争性排斥有害菌，防止病原菌定位转移，促进消化道修复；发酵饲料产生的有益菌乳酸菌等可产生乳酸、挥发性脂肪酸及蛋白多肽类拮抗物质，从而抑制大肠杆菌等有害微生物的生长繁殖以及对致病性微生物产生拮抗作用；能提高断奶后仔猪绒毛高度及绒毛高度与隐窝深度的比值；同时分泌多种消化酶，提高饲料的利用率；能够促进肠道相关淋巴组织发育，有助于维持这些淋巴组织处于高度的反应“准备状态”，提高抗体水平，提高脾脏T、B淋巴细胞的比例，T、B淋巴细胞的数量增多，降低脾粘连细胞，提高了动物体的体液和细胞免疫水平。本发明组改善了仔猪生长性能和肠道形态，并对肠道菌群和免疫器官指数有正面改善。当前第1页1 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