本发明属于医药学领域，尤其涉及一种林蛙油肽微粒的制备方法。
背景技术：
林蛙油又称为哈蟆油、雪蛤油，为中国林蛙雌蛙的输卵管，经采制干燥而得。林蛙油是我国东北地区名贵的中药材和滋补品，具有补肾益精，润肺养阴的功效，对于治疗神疲乏力、心悸失眠、痨嗽咳血有很好效果。此外，大量研究显示，林蛙油中含有丰富的营养物质，食用后可增加人体优良蛋白质、氨基酸和矿物质的摄入量；同时林蛙油中还含有丰富的多糖、脂肪、雌二醇及其他生物活性物质，可以增强人体免疫力，延缓人体衰老，增强人体对恶劣环境的抵抗能力，具有良好的保健功效。
近年来，随着人们对林蛙副产品开发利用的重视，利用林蛙油进行新产品的开发，引起了国内外学者和林蛙加工企业的极大兴趣。
动物模型试验证明:林蛙油蛋白水解产生的生物活性多肽易消化吸收，可为那些由饮食不能满足蛋白质营养需要的人员提供氮素营养，如胰腺炎、短肠综合症和crohn氏病患者及婴幼儿、老年人和运动员等。作为肠道营养液同时可起到降血压、降胆固醇等生理功能，同时提高机体抗击疾病的能力。
微胶囊化技术是一种利用天然或合成的高分子材料，将气体、液体或固体包裹起来，形成一种封闭微小粒子的包埋技术。采用微胶囊技术制得的产品有良好的功能性和贮存稳定性，使用方便且可以解决林蛙油传统的风干及热处理加工工艺中所不能解决的产品异味严重、性状不稳定、货架期短等众多问题。它作为一种食品加工新方法，在欧美等发达国家应用已十分普遍，利用微胶囊技术生产的产品已成为国际现代食品工业中一类十分重要的食品原料或配料。
综上所述，现有技术存在的问题是：
目前市场林蛙油产品类型单一，制作复杂，不适合工业化生产；不能将林蛙油中天然风味成分的加工、保存及再现；而且现有技术在林蛙油产品制备中，不能有效避免了原料受到污染，造成安全性差、货架期短等问题。
技术实现要素：
针对现有技术存在的问题，本发明提供了一种林蛙油肽微粒的制备方法，
本发明是这样实现的，一种林蛙油肽微粒的制备方法，包括以下步骤：
冷冻干燥林蛙油的制备：进行原料选择、纯净水发制、去除筋膜、磨浆、超高压杀菌、打入均质机进行均质处理，制得冷冻干燥林蛙油，创新性的采用了先冷冻干燥，再酶解的方法，不仅大大提高了酶解效率，而且呈现异味的杂质大大减少，为后续产品提供良好的品质保障；
进行酶解：将冷冻干燥林蛙油干品放入酶解罐中，调ph，按林蛙油干重的体积比例添加木瓜蛋白酶，酶解后，调整水浴温度，灭酶处理，冷却至室温，离心后即得林蛙油肽粗提物，酶解过程中，通过试验设计，科学的选择了单一酶酶解，适当比例的复合酶酶解的方法，提高了酶解效率，降低了工业化生产成本；
进行膜过滤、浓缩、配料：将获得的林蛙油肽粗提物经过多级膜过滤系统处理；进一步获得所需分子量大小的林蛙油肽水解物；采用双效浓缩器将林蛙油肽水解物进行浓缩处理，得林蛙油肽浓缩液；向林蛙油肽浓缩液中加入预处理的大豆肽、人参提取物、灵芝提取物中的一种或几种进行均匀混合后备用；
保护剂的制作、混合：称取乳清蛋白粉、β-环状糊精、麦芽糊精、单硬脂酸甘油酯；均加入到蒸馏水中进行均匀混合；调ph；将溶液在微波或高压条件下加热，保温，冷却至室温后备用；将林蛙油浓缩液与保护剂均匀混合后，采用高剪切均质机乳化处理；
喷雾干燥、分装、入库：调节喷雾干燥机进口温度，出口温度，进料流量，进行喷雾干燥；将喷雾干燥后产品装入包装袋内进行真空包装，入库后即得林蛙油肽微粒。
进一步，冷冻干燥林蛙油的制备，具体包括：选质量符合标准的干品林蛙油作为冷冻干燥林蛙油原料；将挑选出的林蛙油与长白山纯净水按1:50~1:110比例加水泡发，发至水分完全吸尽，蛙油充分膨胀、松软；手工去除筋膜及其它杂质；将辅料提取液加入林蛙油中，同时按1:12~1:15质量比例向搅拌均匀的林蛙油中加入长白山纯净水，研磨2分钟~4分钟，并与按质量比0.5%~3%的复合调味料进行均匀混合，加入酸味调节剂0.05%~0.8%进行口味调配；使用的调味料包括糖，酸味调节剂包括食品级柠檬酸和乳酸；
在121℃，0.1mpa条件下，将磨浆后林蛙油进行高压灭菌15分钟~30分钟，打入均质机进行均质处理，备用。
进一步，所述进行酶解，具体包括：将林蛙油干品放入酶解罐中，调ph至5.0-6.5，按林蛙油干重的体积比0.1%~1%(w/w)添加木瓜蛋白酶，50℃~60℃条件下，酶解2h~4h后，调整水浴温度至95℃~100℃，灭酶处理5min~15min，冷却至室温后，5000rpm离心20min后即得林蛙油肽粗提物。
进一步，所述保护剂的制作、混合，具体包括：称取乳清蛋白粉100g~200g、β-环状糊精50g~100g、麦芽糊精50g~100g，单硬脂酸甘油酯5g~10g；均加入到1l蒸馏水中进行均匀混合；调整保护剂ph至7.0~9.5，将溶液在加热至80℃，保温30分钟~60分钟，冷却至室温后备用；
按照1:3~5的质量比例将林蛙油浓缩液与保护剂均匀混合后，采用高剪切均质机乳化处理3分钟~5分钟。
进一步，所述喷雾干燥、分装、入库，具体包括：调节喷雾干燥机进口温度120℃~150℃，出口温度65℃~85℃，进料流量250ml/h~350ml/h，进行喷雾干燥；将喷雾干燥后产品装入包装袋内进行真空包装，入库后即得林蛙油肽微粒。
本发明另一目的在于提供一种利用上述的林蛙油肽微粒的制备方法制备的用于治疗短肠综合症的林蛙油肽微粒。
本发明另一目的在于提供一种利用上述的林蛙油肽微粒的制备方法制备的用于治疗crohn氏病的林蛙油肽微粒。
本发明另一目的在于提供一种利用上述的林蛙油肽微粒的制备方法制备的用于降血压的林蛙油肽微粒。
本发明另一目的在于提供一种利用上述的林蛙油肽微粒的制备方法制备的用于降胆固醇的林蛙油肽微粒。
本发明另一目的在于提供一种利用上述的林蛙油肽微粒的制备方法制备的用于增强人体免疫力林蛙油肽微粒。
本发明的优点及积极效果为：
按照本发明制备的林蛙油，既可以保证林蛙油的营养价值，解决传统产品食用方法、样式单一问题，此外，还可作为动物源食品的替代品应用于一些特殊市场，使得用林蛙油制备的优质蛋白类食品应用于地质勘探、航空航天等领域成为可能，具有传统林蛙油产品无法比拟的的应用前景。
本发明应用酶解及微胶囊化技术制备出的林蛙油肽微粒，不仅可以提高林蛙油肽的营养价值，解决林蛙油中天然风味成分的加工、保存及再现等问题，产品无异味，货架期延长50%以上，且符合天然绿色、健康、美食的要求，而且还可以作为配料用于方便食品、休闲食品，特别是能很好地满足老年人、小孩及女士的对健康食品的需求。此外，还为林蛙油肽在食品、医药、畜牧、化妆品等各行业应用及林蛙油肽相关保健产品开发提供理论依据，同时促进林蛙深加工技术发展和相关生物保健产品开发提供技术支撑。
本发明制备的林蛙油肽微粒不仅产品质量好、纯度高，喷雾干燥过程是在封闭的环境中进行，不与外界接触，避免了原料受到污染、安全性高，且改善了产品口感，降低了林蛙油肽的不良风味，更方便运输、贮存和生产加工。此外，工艺简单，成本低，适合工业化生产。
附图说明
图1是本发明实施例提供的林蛙油肽微粒的制备方法流程图。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
下面结合附图对本发明的应用原理作详细描述。
如图1所示，本发明实施例提供的林蛙油肽微粒的制备方法，包括：
s101:冷冻干燥林蛙油的制备：选质量符合标准的干品林蛙油作为冷冻干燥林蛙油原料；将挑选出的林蛙油与长白山纯净水按1:50~1:110比例加水泡发，发至水分完全吸尽，蛙油充分膨胀、松软；手工去除筋膜及其它杂质；将辅料提取液加入林蛙油中，同时按1:12~1:15质量比例向搅拌均匀的林蛙油中加入长白山纯净水，研磨2分钟~4分钟，并与按质量比0.5%~3%的复合调味料进行均匀混合，加入酸味调节剂0.05%~0.8%进行口味调配；使用的调味料包括糖，酸味调节剂包括食品级柠檬酸和乳酸；121℃，0.1mpa条件下，将磨浆后林蛙油进行高压灭菌15~30分钟，冷却至室温；打入均质机进行均质处理，制得冷冻干燥林蛙油，备用。
s102:进行酶解：将林蛙油干品放入酶解罐中，调ph至5.0-6.5，按林蛙油干重的0.1%~1%(w/w)添加木瓜蛋白酶，50℃~60℃条件下，酶解2~4h后，调整水浴温度至95~100℃，灭酶处理5~15min，冷却至室温后，5000rpm离心20min后即得林蛙油肽粗提物；
s103:进行膜过滤、浓缩、配料：将获得的林蛙油肽粗提物经过多级膜过滤系统处理；进一步获得所需分子量大小的林蛙油肽水解物；采用双效浓缩器将林蛙油肽水解物进行浓缩处理，得林蛙油肽浓缩液；向林蛙油肽浓缩液中加入预处理的大豆肽、人参提取物、灵芝提取物中的一种或几种进行均匀混合后备用；
s104:保护剂的制作、混合：称取乳清蛋白粉100~200g、β-环状糊精50~100g、麦芽糊精50~100g，单硬脂酸甘油酯5~10g、加入到1l蒸馏水中进行均匀混合；
调ph：调整保护剂ph至7.0~9.5，将溶液在微波或高压条件下加热至80℃以上，保温30~60min，冷却至室温后备用；按照1:3~5的比例将林蛙油浓缩液与保护剂均匀混合后，采用高剪切均质机乳化处理3~5min；
s105:喷雾干燥、分装、入库：调节喷雾干燥机进口温度120℃~150℃，出口温度65℃~85℃，进料流量250ml/h~350ml/h，进行喷雾干燥；将喷雾干燥后产品装入包装袋内进行真空包装，入库后即得林蛙油肽微粒。
下面结合具体实施例对本发明的应用原理作进一步描述。
实施例1绿茶味冷冻干燥林蛙油的制备：
原料选择：挑选质量符合标准的黄色或淡黄色块状半透明的干品林蛙油作为林蛙油原料；
预处理：将干品林蛙油挑选除杂；
发制：将去除杂质的林蛙油与长白山山泉水按照1:80比例进行泡发，发制时间12h，使得林蛙油充分膨胀、松软；
去筋膜：采用人工方式去除发制好的林蛙油中筋膜、黑蛙卵，并清洗除杂；
煮制脱腥：按1:12（w/v）比例向预混林蛙油中加入长白山山泉水，85℃条件下煮制15min；
调配：将煮制脱腥后的林蛙油与抹茶粉、绿茶香精并与按质量比0.5%~3%的复合调味料进行均匀混合，加入酸味调节剂0.05%~0.8%进行口味调配；使用的调味料包括糖，酸味调节剂包括食品级柠檬酸和乳酸；
加入食品添加剂；121℃，0.1mpa条件下，将磨浆后林蛙油进行高压灭菌15~30分钟，冷却至室温；打入均质机进行均质处理，制得冷冻干燥即食林蛙油，备用；
酶解：将林蛙油干品放入酶解罐中，调ph至5.0，按林蛙油干重的0.5%(w/w)添加木瓜蛋白酶，60℃酶解2h后，调整水浴温度至95℃，灭酶处理10min，冷却至室温后，5000rpm离心20min后即得林蛙油肽粗提物；
膜过滤：将获得的林蛙油肽粗提物经过多级膜过滤系统处理；进一步获得所需分子量大小的林蛙油肽水解物；
浓缩：采用双效浓缩器将林蛙油肽水解物进行浓缩处理，得林蛙油肽浓缩液；
配料：向林蛙油肽浓缩液中加入预处理的大豆肽、进行均匀混合后备用;
保护剂的制作：称取乳清蛋白粉100g、β-环状糊精50g、麦芽糊精
50g，单硬脂酸甘油酯5g、加入到1l蒸馏水中进行均匀混合；
调ph：调整保护剂ph至7.0，将溶液在微波或高压条件下加热至80℃以上，保温30~60min；
混合：按照1:5的比例将林蛙油浓缩液与保护剂均匀混合后，采用高剪切均质机乳化处理5min；
喷雾干燥：调节喷雾干燥机进口温度150℃，出口温度80℃，进料流量300ml/h，进行喷雾干燥；
分装、入库：将喷雾干燥后产品装入包装袋内进行真空包装，入库后即得林蛙油肽微粒。
实施例2山楂味冷冻干燥即食林蛙油的制备
原料选择：选质量符合标准的黄色或淡黄色块状半透明的干品林蛙油作为冷冻干燥林蛙油原料；
预处理：将干品林蛙油挑选除杂；
发制：将去除杂质的干品林蛙油与长白山山泉水按照1:100比例进行泡发，发制时间10h，使得蛙油充分膨胀、松软；
去筋膜：将发制好的林蛙油去除筋膜、黑蛙卵并清洗除杂；
添加辅料：按1:7（w/w）比例将预处理的林蛙油与辅料混合均匀，使用的辅料包括、活性炭吸附、甘草、八角、等中的一种或几种；
煮制脱腥：按1:13（w/v）比例向预混林蛙油中加入长白山山泉水，90℃煮制12min；
调配：将脱腥后的林蛙油与山楂粉并与按质量比0.5%~3%的复合调味料进行均匀混合，加入酸味调节剂0.05%~0.8%进行口味调配；使用的调味料包括糖，酸味调节剂包括食品级柠檬酸和乳酸；
121℃，0.1mpa条件下，将磨浆后林蛙油进行高压灭菌15~30分钟，冷却至室温；打入均质机进行均质处理，制得冷冻干燥即食林蛙油，备用；
酶解：将林蛙油干品放入酶解罐中，调ph至5.5，按林蛙油干重的0.3%(w/w)添加木瓜蛋白酶，60℃酶解3h后，调整水浴温度至100℃，灭酶处理10min，冷却至室温后，5000rpm离心20min后即得林蛙油肽粗提物；
膜过滤：将获得的林蛙油肽粗提物经过多级膜过滤系统处理；进一步获得所需分子量大小的林蛙油肽水解物；
浓缩：采用双效浓缩器将林蛙油肽水解物进行浓缩处理，得林蛙油肽浓缩液；
配料：向林蛙油肽浓缩液中加入适量预处理的人参提取物、进行均匀混合后备用；
保护剂的制作：称取乳清蛋白粉150g、β-环状糊精60g、麦芽糊精70g，单硬脂酸甘油酯6g、加入到1l蒸馏水中进行均匀混合；
调ph：调整保护剂ph至8.0，将溶液在微波或高压条件下加热至80℃以上，保温30~60min，冷却至室温后备用；
混合：按照1:3的比例将林蛙油浓缩液与保护剂均匀混合后，采用高剪切均质机乳化处理3min；
喷雾干燥：调节喷雾干燥机进口温度140℃，出口温度85℃，进料流量280ml/h，进行喷雾干燥；
分装、入库：将喷雾干燥后产品装入包装袋内进行真空包装，入库后即得林蛙油肽微粒。
实施例3榛仁味冷冻干燥即食林蛙油的制备
原料选择：选质量符合标准的黄色或淡黄色块状半透明的干品林蛙油作为冷冻干燥林蛙油原料；
预处理：将干品林蛙油挑选除杂；
发制：按料液比为1:110（w/v）向去除杂质的干品林蛙油中添加长白山山泉水进行泡发，发制时间12h，使蛙油充分膨胀、松软；
去筋膜：将发制好的林蛙油去除筋膜、黑蛙卵并清洗除杂；
添加辅料：按1:80w/w）比例向预处理林蛙油中加入辅料并混合均匀，使用的辅料包括姜、桂皮、丁香、白醋、白酒、柠檬酸等中的一种或几种；
煮制腥脱：按料液比1:12（w/v）为向预混林蛙油中加入长白山山泉水混合均匀，100℃煮制10min；
调配：将煮制脱腥后的林蛙油与榛仁粉并与按质量比0.5%~3%的复合调味料进行均匀混合，加入酸味调节剂0.05%~0.8%进行口味调配；使用的调味料包括糖，酸味调节剂包括食品级柠檬酸和乳酸调味料；
121℃，0.1mpa条件下，将磨浆后林蛙油进行高压灭菌15~30分钟，冷却至室温；打入均质机进行均质处理，制得冷冻干燥即食林蛙油，备用；
酶解：将林蛙油干品放入酶解罐中，调ph至5.5，按林蛙油干重的0.4%(w/w)添加木瓜蛋白酶，55℃酶解4h后，调整水浴温度至100℃，灭酶处理10min，冷却至室温后，5000rpm离心20min后即得林蛙油肽粗提物；
膜过滤：将获得的林蛙油肽粗提物经过多级膜过滤系统处理；进一步获得所需分子量大小的林蛙油肽水解物；
浓缩：采用双效浓缩器将林蛙油肽水解物进行浓缩处理，得林蛙油肽浓缩液；
配料：向林蛙油肽浓缩液中加入适量预处理的人参提取物、进行均匀混合后备用；
保护剂的制作：称取乳清蛋白粉170g、β-环状糊精60g、麦芽糊精85g，单硬脂酸甘油酯6g、加入到1l蒸馏水中进行均匀混合；
调ph：调整保护剂ph至8.0，将溶液在微波或高压条件下加热至80℃以上，保温30~60min，冷却至室温后备用；
混合：按照1:6的比例将林蛙油浓缩液与保护剂均匀混合后，采用高剪切均质机乳化处理2min；
喷雾干燥：调节喷雾干燥机进口温度170℃，出口温度80℃，进料流量330ml/h，进行喷雾干燥；
分装、入库：将喷雾干燥后产品装入包装袋内进行真空包装，入库后即得林蛙油肽微粒。
按照本发明制备的林蛙油，既可以保证林蛙油的营养价值，解决产品单一问题，同时符合天然绿色、健康、美食的要求，又可以作为配料用于方便食品、休闲食品，特别是能很好地满足老年人、小孩及爱吃零食又害怕发胖的女士的需要。此外，还可作为动物源食品的替代品应用于一些特殊市场，例如地质勘探、部队野营训练以及航空航天专用食品等，具有广阔的应用前景。
本发明应用酶解及微胶囊化技术制备出的林蛙油肽微粒，不仅可以提高林蛙油肽的营养价值，解决林蛙油中天然风味成分的加工、保存及再现等问题，且符合天然绿色、健康、美食的要求，而且还可以作为配料用于方便食品、休闲食品，特别是能很好地满足老年人、小孩及女士的对健康食品的需求。此外，还为林蛙油肽在食品、医药、畜牧、化妆品等各行业应用及林蛙油肽相关保健产品开发提供理论依据，同时促进林蛙深加工技术发展和相关生物保健产品开发提供技术支撑。
本发明制备的林蛙油肽微粒不仅产品质量好、纯度高，喷雾干燥过程是在封闭的环境中进行，不与外界接触，避免了原料受到污染、安全性高，且改善了产品口感，降低了林蛙油肽的不良风味，更方便运输、贮存和生产加工。此外，工艺简单，成本低，适合工业化生产。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。