本发明涉及酵素粉制备领域，尤其涉及一种黑果枸杞酵素的制备方法。
背景技术：
黑果枸杞果实含有的人体必需脂肪酸、生物碱、酚类、蛋白质、维生素，并含有18种人体必需氨基酸，其微量元素也很丰富，此外还含有较多的还原多糖和色素类物质，尤其是含有丰富的天然类花色苷；且具有降血糖、抗疲劳、提高机体免疫力、抗氧化防衰老、抗癌抗肿瘤作用。
酵素是日本和中国台湾地区的说法，通常称作“酶”，其是催化特定化学反应的蛋白质、rna或其复合体，也有专家认为酵素是由多种氨基酸、维生素及矿物质构成的活性物质，被称为“活性的物质”和“掌握所有生命活动的物质”。众所周知，营养素必须在酵素的作用下分解到15μm左右的小分子，才能穿过肠壁上皮细胞，被毛细血管吸收，在口腔有淀粉酵素，胃里有胃蛋白酶，肝脏则分泌脂肪酵素，而脾脏则分泌各种综合酵素，这些酵素通过对营养素的分解促进其吸收，从而达到全面调理的综合作用。由此可知，酵素的作用至关重要。
传统酵素生产采用微生物自然发酵，发酵过程不可控，极易受到有害微生物污染，所得产品不但质量不稳定，还容易存在质量安全隐患，并且发酵周期较长，至少数月至一年。发酵周期过长，效率低，成本高。
目前，酵素的生产原料均为新鲜果实，成本高，加工副产品对环境污染大。黑果枸杞残果或果渣是黑果枸杞果汁加工产业的副产品，通常作为垃圾扔掉，污染环境，增加企业排污成本。
技术实现要素：
本发明所要解决的技术问题是提供一种成本低廉、周期短的黑果枸杞酵素的制备方法。
为解决上述问题，本发明所述的一种黑果枸杞酵素的制备方法，包括以下步骤：
⑴将黑果枸杞残果或果渣经超微粉碎至粒径小于40µm，得到黑果枸杞粉；
⑵所述黑果枸杞粉中按1：1的重量比加入纯水，搅拌混匀后，按每l混合液加入1g稳定剂，并于70℃加热25~30分钟，经自然冷却至室温，得到黑果枸杞原液；
⑶在所述黑果枸杞原液中先加入预先活化的果胶酶或纤维素酶或果胶酶-纤维素复合酶，搅拌均匀后，于50~60℃酶解3~4小时，然后加入蛋白酶-淀粉酶-纤维素复合酶，搅拌均匀后，于40~50℃酶解2~4小时，得到酶解液；
⑷所述酶解液中按其重量依次接种1.5~2%酵母菌、4~5%乳酸菌和0.5~1%醋酸菌，搅拌均匀后密闭，于30℃发酵培养1~3天，经过滤去除残渣后得到上清液，该上清液中按10g/l加入蔗糖，得到黑果枸杞酵素液；所述黑果枸杞酵素液经冷冻干燥、粉碎至500~1000目后即得黑果枸杞酵素粉。
所述步骤⑵中的稳定剂是指柠檬酸钠、柠檬酸钾、异抗坏血酸钠、异抗坏血酸钾、壳聚糖中的任意一种。
所述步骤⑶中果胶酶或纤维素酶或果胶酶-纤维素复合酶的添加量按每吨所述黑果枸杞原液中加入12~15g。
所述果胶酶-纤维素复合酶是指将果胶酶与纤维素酶按1：0.5~1的重量比混合而成。
所述步骤⑶中果胶酶是指聚半乳糖醛酸酶、果胶裂解酶和果胶酯酶中的任意一种或组合。
所述步骤⑶中蛋白酶-淀粉酶-纤维素复合酶的添加量均按每吨所述黑果枸杞原液中加入14~15g；所述蛋白酶-淀粉酶-纤维素复合酶是指将蛋白酶、淀粉酶、纤维素酶按1：1：1的重量比混合而成。
所述步骤⑷中酵母菌是指酒精酵母或生香酵母。
所述步骤⑷中乳酸菌为嗜热链球菌、植物乳杆菌、双歧杆菌的任意组合。
所述步骤⑷中冷冻干燥的条件是指温度为-40℃~-80℃，真空度为10~40pa。
本发明与现有技术相比具有以下优点：
1、本发明克服传统酵素只能以新鲜水果为原料制备，成本高，周期性强的缺点，而致力于变废为宝，以黑果枸杞残果或果渣作为原料来制备黑果枸杞酵素粉，所得产品不但成本低廉而且营养更丰富（生物活性酶含量更高）。
2、本发明采用酵母、乳酸菌和醋酸菌组合而成的纯种混合发酵技术，实现发酵过程的全程精准控制，所得产品品质稳定，质量安全可控，且大大缩短酵素制备周期（从传统工艺的数月至一年缩短至数周）。
3、采用本发明方法所得酵素产品不仅具有丰富的蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶、纤维素酶、超氧化物歧化酶、代谢产物和大量的益生菌细胞，而且具备黑果枸杞自身的保健功效，不仅填补现有技术的空白，而且具有更大的营养价值和保健功效，长期食用可达到排毒养颜、软化血管、改善微循环、提高机体抗氧化能力、延缓衰老等的医疗价值和保健作用。
4、本发明原理科学，设备简单，适于大规模生产。
5、将实施例1~3的黑果枸杞酵素分别按照gb/t23527-2009蛋白酶制剂中蛋白酶测定方法；gb/t24401-2009a-淀粉酶制剂中淀粉酶测定方法；gb/t23535-2009脂肪酶制剂中脂肪酶的测定方法和gb/t5009.171-2003保健食品中超氧化物歧化酶(sod)活性的测定方法分别测量蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶以及sod活性，取步骤⑴所得的黑果枸杞原液作为对比例。结果如表1所示：
表1
结果显示，本发明的黑果枸杞酵素包含丰富的生物酶活性成分，较黑果枸杞果汁具有显著提高，取得了显著的技术效果，是一种非常优异的保健产品。
具体实施方式
实施例1一种黑果枸杞酵素的制备方法，包括以下步骤：
⑴将黑果枸杞残果或果渣经超微粉碎至粒径小于40µm，得到黑果枸杞粉。
⑵黑果枸杞粉中按1：1的重量比（kg/kg）加入纯水，搅拌混匀后，按每l混合液加入1g稳定剂，并于70℃加热25分钟，经自然冷却至室温，得到黑果枸杞原液。
其中：稳定剂是指柠檬酸钠、柠檬酸钾、异抗坏血酸钠、异抗坏血酸钾、壳聚糖中的任意一种。
⑶在黑果枸杞原液中先加入预先活化的果胶酶或纤维素酶或果胶酶-纤维素复合酶（37℃温水溶解酶，并保温20min将酶活化），搅拌均匀后，于50℃酶解3小时，然后加入蛋白酶-淀粉酶-纤维素复合酶，搅拌均匀后，于40℃酶解2小时，得到酶解液。
其中：果胶酶或纤维素酶或果胶酶-纤维素复合酶的添加量按每吨黑果枸杞原液中加入12g。果胶酶-纤维素复合酶是指将果胶酶与纤维素酶按1：0.5的重量比（kg/kg）混合而成。果胶酶是指聚半乳糖醛酸酶、果胶裂解酶和果胶酯酶中的任意一种或组合。
蛋白酶-淀粉酶-纤维素复合酶的添加量均按每吨黑果枸杞原液中加入14g；蛋白酶-淀粉酶-纤维素复合酶是指将蛋白酶、淀粉酶、纤维素酶按1：1：1的重量比（kg/kg）混合而成。
⑷酶解液中按其重量依次接种1.5%酵母菌、4%乳酸菌和0.5%醋酸菌，搅拌均匀后密闭，于30℃发酵培养1天，经过滤去除残渣后得到上清液，该上清液中按10g/l加入蔗糖，得到黑果枸杞酵素液；黑果枸杞酵素液在温度为-40℃、真空度为10pa的条件下经冷冻干燥、粉碎至500目后即得黑果枸杞酵素粉。
其中：酵母菌是指酒精酵母或生香酵母。乳酸菌为嗜热链球菌、植物乳杆菌、双歧杆菌的任意组合。
实施例2一种黑果枸杞酵素的制备方法，包括以下步骤：
⑴将黑果枸杞残果或果渣经超微粉碎至粒径小于40µm，得到黑果枸杞粉。
⑵黑果枸杞粉中按1：1的重量比（kg/kg）加入纯水，搅拌混匀后，按每l混合液加入1g稳定剂，并于70℃加热30分钟，经自然冷却至室温，得到黑果枸杞原液。
其中：稳定剂同实施例1。
⑶在黑果枸杞原液中先加入预先活化的果胶酶或纤维素酶或果胶酶-纤维素复合酶（37℃温水溶解酶，并保温20min将酶活化），搅拌均匀后，于60℃酶解4小时，然后加入蛋白酶-淀粉酶-纤维素复合酶，搅拌均匀后，于50℃酶解4小时，得到酶解液。
其中：果胶酶或纤维素酶或果胶酶-纤维素复合酶的添加量按每吨黑果枸杞原液中加入15g。果胶酶-纤维素复合酶是指将果胶酶与纤维素酶按1：1的重量比（kg/kg）混合而成。果胶酶同实施例1。
蛋白酶-淀粉酶-纤维素复合酶的添加量均按每吨黑果枸杞原液中加入15g；蛋白酶-淀粉酶-纤维素复合酶同实施例1。
⑷酶解液中按其重量依次接种2%酵母菌、5%乳酸菌和1%醋酸菌，搅拌均匀后密闭，于30℃发酵培养2天，经过滤去除残渣后得到上清液，该上清液中按10g/l加入蔗糖，得到黑果枸杞酵素液；黑果枸杞酵素液在温度为-80℃、真空度为40pa的条件下经冷冻干燥、粉碎至1000目后即得黑果枸杞酵素粉。
其中：酵母菌、乳酸菌同实施例1。
实施例3一种黑果枸杞酵素的制备方法，包括以下步骤：
⑴将黑果枸杞残果或果渣经超微粉碎至粒径小于40µm，得到黑果枸杞粉。
⑵黑果枸杞粉中按1：1的重量比（kg/kg）加入纯水，搅拌混匀后，按每l混合液加入1g稳定剂，并于70℃加热30分钟，经自然冷却至室温，得到黑果枸杞原液。
其中：稳定剂同实施例1。
⑶在黑果枸杞原液中先加入预先活化的果胶酶或纤维素酶或果胶酶-纤维素复合酶（37℃温水溶解酶，并保温20min将酶活化），搅拌均匀后，于60℃酶解3小时，然后加入蛋白酶-淀粉酶-纤维素复合酶，搅拌均匀后，于50℃酶解3小时，得到酶解液。
其中：果胶酶或纤维素酶或果胶酶-纤维素复合酶的添加量按每吨黑果枸杞原液中加入15g。果胶酶-纤维素复合酶是指将果胶酶与纤维素酶按1：0.6的重量比（kg/kg）混合而成。果胶酶同实施例1。
蛋白酶-淀粉酶-纤维素复合酶的添加量均按每吨黑果枸杞原液中加入14.4g；蛋白酶-淀粉酶-纤维素复合酶同实施例1。
⑷酶解液中按其重量依次接种1.5%酵母菌、4%乳酸菌和0.5%醋酸菌，搅拌均匀后密闭，于30℃发酵培养3天，经过滤去除残渣后得到上清液，该上清液中按10g/l加入蔗糖，得到黑果枸杞酵素液；黑果枸杞酵素液在温度为-50℃、真空度为20pa的条件下经冷冻干燥、粉碎至600目后即得黑果枸杞酵素粉。
其中：酵母菌、乳酸菌同实施例1。
实施例4一种黑果枸杞酵素的制备方法，包括以下步骤：
⑴将黑果枸杞残果或果渣经超微粉碎至粒径小于40µm，得到黑果枸杞粉。
⑵黑果枸杞粉中按1：1的重量比（kg/kg）加入纯水，搅拌混匀后，按每l混合液加入1g稳定剂，并于70℃加热28分钟，经自然冷却至室温，得到黑果枸杞原液。
其中：稳定剂同实施例1。
⑶在黑果枸杞原液中先加入预先活化的果胶酶或纤维素酶或果胶酶-纤维素复合酶（37℃温水溶解酶，并保温20min将酶活化），搅拌均匀后，于58℃酶解3.5小时，然后加入蛋白酶-淀粉酶-纤维素复合酶，搅拌均匀后，于45℃酶解3小时，得到酶解液。
其中：果胶酶或纤维素酶或果胶酶-纤维素复合酶的添加量按每吨黑果枸杞原液中加入13g。果胶酶-纤维素复合酶是指将果胶酶与纤维素酶按1：0.8的重量比（kg/kg）混合而成。果胶酶同实施例1。
蛋白酶-淀粉酶-纤维素复合酶的添加量均按每吨黑果枸杞原液中加入14.8g；蛋白酶-淀粉酶-纤维素复合酶同实施例1。
⑷酶解液中按其重量依次接种1.8%酵母菌、4.5%乳酸菌和0.8%醋酸菌，搅拌均匀后密闭，于30℃发酵培养2天，经过滤去除残渣后得到上清液，该上清液中按10g/l加入蔗糖，得到黑果枸杞酵素液；黑果枸杞酵素液在温度为-70℃、真空度为30pa的条件下经冷冻干燥、粉碎至800目后即得黑果枸杞酵素粉。
其中：酵母菌、乳酸菌同实施例1。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。