专利名称：利巴韦林脂质体制剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及医药技术领域，确切地说它是一种利巴韦林脂质体制剂。
背景技术：
本发明为抗病毒药物利巴韦林(三氮唑核苷、病毒唑)的脂质体新剂型，包括注射给药、口服、气雾、喷雾、眼用和外用等所有利巴韦林脂质体剂型。该课题为国家八五重点科技攻关课题85-922-03-12《脂质体制剂的研究》的成果转化。
脂质体是药剂学第四代给药系统——靶向给药系统的新剂型。一般认为普通的针剂、片剂为第一代给药系统；缓释制剂为第二代给药系统；控释制剂为第三代给药系统；靶向制剂是第四代给药系统。脂质体是目前靶向给药系统最成熟、最有代表性的新剂型。由于病毒是在细胞内复制和繁殖的，现有抗病毒药物制剂都不能有效地将抗病毒药物带入感染病毒的细胞中，在细胞内达到杀死病毒的浓度，如果增大给药剂量对人体的毒性也增大。现有抗病毒药物制剂的生物利用度很低。脂质体剂型在抗病毒药物、抗寄生虫药物、抗癌药物、生物工程药物等许多方面都显示了它比普通剂型提高药效、降低毒性等许多优点。这主要是由于脂质体是人工细胞，可以通过脂质体与细胞的相互作用，将包封的药物直接带入细胞和患病部位，延长药物体内半衰期，显著地提高药的治疗指数和大幅度降低药物的毒性、增加药物稳定性等，具有普通剂型不可比拟的优越性。这种给药系统是药剂学目前最新、最有前途的给药系统。脂质体新剂型的研究是药剂学领域的前沿课题，过去国内外对脂质体的研究主要集中将脂质体作为抗癌药物和抗菌药物的载体，国外研制了阿霉素脂质体和阿米卡星脂质体，并获得FDA批准成为新药已大量应用于临床。但是国内外目前还未见将脂质体作为抗病毒药物利巴韦林的载体，采用可以工业化大生产的制备工艺，研制成利巴韦林质体的各种新剂型的文献报道。
病毒性疾病是严重危害人类生命和健康的一大类常见病、多发病和传染病，病毒性疾病对人类的危害正在日趋严重。尤其是近年发病率都在逐年增高。因此，抗病毒药物及制剂的研究越来越引起人们的重视。流行性感冒是全球发病率最高的疾病。每年各国因流感造成的经济损失高达几百亿美元，造成数百人的死亡。流感还能引起病毒性肺炎等多种疾病。迄今为止还没有治疗流感病毒的特效药。病毒性肝炎、流行性乙性脑炎和出血热等病毒性疾病也给人们带来了极大的灾难。三氮唑核苷脂质体正是降服这些危害极大的病毒性疾病的新药。
虽然几十年研究过的抗病毒药剂很多，但目前临床上效果好又安全，而且药物生物利用度高的抗病毒制剂却为数不多，其主要原因是由病毒利用宿主细胞复制。目前临床上应用的抗病毒制剂，常常不能有效地将抗病毒药物带入感染病毒的细胞中，在细胞内达到杀死病毒的浓度，如果增大给药剂量对人体的毒性也增大。将抗病毒药物制成脂质体剂型，脂质体是一种人工细胞，它可以与人体细胞发生吸附、融合、脂交换和被细胞内吞等相互作用，将脂质体剂型中的抗病毒药物带入细胞内杀死病毒，脂质体剂型使抗病毒药物具有细胞靶向性，从而显著地提高疗效，降低毒性，提高药物的生物利用度，达到高效、低毒、安全的治疗效果。
发明内容
本发明是抗病毒药三氮唑核苷的高效、低毒、安全、稳定、质量可控、服用方便的脂质体新剂型——利巴韦林脂质体制剂，是由国家八五重点科技攻关课题《脂质体制剂的研究》所研制开发的高科技成果。它属于目前药剂学最先进的第四代给药系统——靶向给药系统的新剂型。它是将脂质体做为抗病毒药物利巴韦林的载体，制成各种剂型用做治疗病毒性疾病。所述的剂型为脂质体口服液、口服乳剂、气雾剂、喷雾剂、前体脂质体固体制剂。前体脂质体固体制剂为胶囊剂、片剂和颗粒剂。利巴韦林脂质体固体制剂的制备方法其特征是将利巴韦林溶解在磷酸盐缓冲溶液中，匀速加入磷脂和胆固醇及维生素E的均匀混合物，58℃～62℃保温半小时，形成乳白色脂质体微囊泡的均匀乳状液。利巴韦林脂质体固体制剂的制备方法，其特征是将脂质膜材均匀混合后包裹药物制成前体脂质体固体颗粒再制成各种固体制剂，加入水后可形成脂质体。
本项目的药效学试验是在中国医学科学院医药生物技术研究所完成，是在抗病毒药效学和药理学方面国内外著名的陈鸿姗教授主持下进行的。实验证明三氮唑核苷脂质体比普通三氮唑核苷口服液和注射液提高药效显著使用三氮唑核苷脂质体给药可使流感病毒感染致肺炎小鼠死亡率比使用市售剂型降低50％；三批实验平均半数有效量(ED50)降低47.42％；以治疗指数为指标效果提高3.99倍。说明脂质体剂型比普通剂型提高药效显著。
脂质体另一个突出的特点是降低药物的毒性。国内外报道的各种药物脂质体剂型，都比原剂型明显地降低了毒性。我们研究室20年中研制了十几种药物的脂质体剂型，其毒性都明显低于原有市售剂型。三氮唑核苷脂质体也同样大幅度降低了药物毒性。下面是其急性毒性实验结果
三氮唑核苷脂质体对小鼠口服给药LD50为5548mg/kg；市售三氮唑核苷口服液LD50为2031mg/kg；三氮唑核苷脂质体对小鼠静脉注射的LD50为1417mg/kg；三氮唑核苷市售注射剂的LD50为1074mg/kg；说明脂质体剂型显著地降低了三氮唑核苷的毒性。脂质体使三氮唑核苷口服给药的半数致死量提高了2.73倍。
脂质体进入体内被网状内皮系统巨噬细胞天噬还激活了机体自身的名疫功能，提高自身的抗病毒、抗感染能力和抗癌能力。脂质体本身是一种免疫激活剂，又从激活人体自身免疫功能方面，加速疾病的自愈。脂质体是目前最有前途的、最先进的第四代给药系统——靶向给药系统的最成熟的新剂型。脂质体剂型在国内外都有可靠的临床基础。我们经过大量查阅文献和实验筛选，确定将脂质体作为抗病毒药物的靶向给药新剂型。该课题具有明显的创新性和先进性。这种新剂型与现有市售剂型相比具有提高疗效显著，降低毒性明显的优点。并且该新剂型又具有服用方便、质量可控、成本较低、产品稳定和制剂工艺符合工业化大生产要求等特点。
更重要的是脂质体口服制剂中的主要辅料是大豆磷脂，经国内外大量研究证明，并且现在已经得到世界公认口服大豆磷脂具有许多保健功能。日本松木康夫博士在他的《大豆“卵磷脂”健康法——现代人的健康革命》的论著中指出“卵磷脂是生命之源”、“卵磷脂是生命的基础物质”。他指出口服大豆磷脂可使头脑聪明，对提高注意力有优异的效果，具有速效健脑作用；还可以有效地降低胆固醇，预防动脉硬化并可清扫血管使其柔软，并对动脉硬化形成的高血压、脑中风、心脏病有预防和治疗作用。口服大豆磷脂还可以溶解胆结石；治疗和预防糖尿病；治疗和预防早老性疾呆；并且还具有美容、健体、补充人们所缺少的不饮和脂肪酸和胆碱等多方面保健功能。
综上所述，三氮唑核苷脂质体是治疗和预防病毒性疾病的高效、低毒、服用方便，好剂型。这个剂型又提高了人体的免疫功能，还具有多方面的保健功能。它是一个集治病、防病、健身于一体的新剂型。
三氮唑核苷为疗效确切的广谱抗病毒合成药，在《新药临床前研究指导原则汇编》中作为规定的抗流感病毒、抗呼吸合胞病毒、抗出血热病毒和抗乙型脑炎病毒的阳性对照药物。该品种的临床应用比较广泛。将三氮唑核苷制成脂质体剂型也同样具有广泛的适应症。脂质体剂型比三氮唑核苷现有市售剂型显著提高药效，降低毒性，提高药物的生物利用度。另外，使用脂质体制剂不增加患者的用药费用，并显著地缩短了疗程。
总之，三氮唑核苷脂质体是高效、低毒、安全、服用方便、质量可控的新剂型。它成本不高、适应症广。其适应症又为常见病、多发病、传染病。其中，有些适应症目前还没有特效药，其死亡率很高。三氮唑核苷脂质体将成为治愈和预防这些病毒性传染病的新药。
具体实施例方式(一)制备称取磷酸二氢钠和磷酸氢二钠配制磷酸盐缓冲溶液，按100mg/ml称取利巴韦林原料药溶解在磷酸盐缓冲溶液中，匀速加入磷脂和胆固醇及维生素E的均匀混合物，58℃～62℃保温半小时，形成乳白色脂质体微囊泡的均匀乳状液。
(二)稳定性实验该脂质体制剂稳定性非常好，92年样品放置至今，仍为均匀乳白色乳状液，不分层无沉演。按新药上报技术要求进行稳定考察试验符合要求，制剂稳定性测定实验结果如下考察项目外观、色泽、分(降)解产物、pH值、粒度、含量、包封率等。
实验条件1、光照(4100Lx)10天，以上考察项目均无变化，该制剂对光稳定。
2、高温40℃、60℃、80℃10天，该制剂在40℃±0.5℃条件下各项指标均无变化，在80℃±0.5℃高温条件下制剂的含量和包封率略有下降。
3、低温置冰箱中(0-5℃)保存，以上各项指标均不变，证明该制剂在低温下保存稳定。
4、加速试验温度40℃，相对湿度75％，三批样品均为上市包装，进行六个月的加速试验，各项指标均不变。
5、室温留样考察三批样品(930405，930406，930408)按规定进行室温留样考察，测定36个月的数据，各项指标均符合要求。
6、化学动力学预测有效期实验样品经40℃±0.5℃，60℃±0.5℃，70℃±0.5℃和80℃±0.5℃四个温度的加速试验，以化学动力学方法处理测定数据，计算求出三氮唑核苷脂质体25℃贮存时有效期为3.4年。
(三)药效学实验该课题抗病毒药效学试验是在中国医学科学院医药生物技术所病毒室和沈阳药科大学药理系共同完成的并由该所陈鸿姗教授主持下完成的。药效学多次实验结果如下小鼠体内抗病毒实验表明，以流感病毒甲型(H1N1)FM1鼠肺透应株感染致肺炎小鼠使用三氮唑核苷脂质体治疗比使用现有三氮唑核苷市售剂型治疗使小鼠死亡率降低50％，生存日数显著延长，以保护百分率为指标三批实验平均半数有效量(ED50)三氮唑核苷注射剂为120.04mg/kg，三氮唑核苷脂质体为61.79mg/kg，三氮数有效量(ED50)三氮唑核苷注射剂为120.04mg/kg，三氮唑核苷脂质体为61.79mg/kg，三氮唑核苷脂质体比普通注射剂治疗ED50降低47.42％。治疗指数三氮唑核苷注射剂为12.05，三氮唑核苷脂质体为24.71，后者为前者的2.05倍。
药效学多次实验结果一致证明三氮唑核苷脂质体明显优于三氮肥唑核苷普通注射剂，ED50明显降低，治疗指数显著提高，并使病毒感染的小鼠使用脂质体剂型治疗比使用普通注射剂治疗死亡率显著降低，生存日数明显延长。
(四)药理毒理实验由沈阳药科大学药理研究室王敏伟教授等完成。
1、急性毒性实验结果小鼠静脉注射LD50三氮唑核苷脂质体注射剂为1417mg/kg，三氮唑核苷市售注射剂为1074mg/kg；小鼠腹腔注射LD50三氮唑核苷脂质体为1526.6mg/kg；市售三氮唑核苷为1505mg/kg；小鼠经口给药LD50三氮唑核苷脂质体为5548mg/kg。
2、三氮唑核苷脂质体注射液过敏实验对豚鼠过每实验为阴性结果。
3、三氮唑核苷脂质体注射剂溶血试验对兔血的溶血实验也为阴性结果。
权利要求
1.利巴韦林脂质体制剂，其特征在于将利巴韦林溶解在磷酸盐缓冲溶液中，匀速加入磷脂和胆固醇及维生素E的均匀混合物，58℃～62℃保温半小时，形成乳白色脂质体微囊泡的均匀乳状液。
2.利巴韦林前体脂质体制剂，其特征在于将脂质膜材均匀混合后包裹药物制成前体脂质体固体颗粒再制成固体制剂，加入水后可形成脂质体。
3.根据权利要求1或2所述的利巴韦林脂质体制剂，其特征在于所述的脂质体制剂为脂质体口服液、口服乳剂、胶囊剂、片剂和颗粒剂、利巴韦林脂质体气雾剂、喷雾剂、眼用和外用脂质体给药剂型。
全文摘要
本发明为抗病毒药利巴韦林的脂质体制剂,因为脂质体是一种人工细胞,可以将抗病毒药物带入感染病毒的细胞中,因而该新剂型比目前利巴韦林市售剂型显著提高药效,降低毒性。将利巴韦林溶解在磷酸盐缓冲溶液中,匀速加入磷脂和胆固醇及维生素E的均匀混合物,58℃～62℃保温半小时,形成乳白色脂质体微囊泡的均匀乳状液。将脂质体做为抗病毒药物利巴韦林的载体,可制成各种剂型。
文档编号A61K31/7056GK1346633SQ0112824
公开日2002年5月1日 申请日期2001年10月8日 优先权日2001年10月8日
发明者邓英杰 申请人:沈阳药科大学