治疗痤疮的中药组合物的制作方法

专利名称：治疗痤疮的中药组合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种治疗痤疮的中药组合物。具体的，本发明涉及含有清热药物、活血祛瘀药物、利水渗湿药物、理气药物的药物提取物，不含解表和补血药物的治疗痤疮的中药组合物。另外，本发明还涉及含有黄芩甙和丹参酮的治疗痤疮的中药提取物。
背景技术：
痤疮(acne)是皮肤科的常见多发病，又名粉刺、寻常痤疮(acnevulgaris)等。据国外报道，其青春期发病率为90％以上，国内90年代中期报道该病已成为皮肤科最为关注的常见病多发病之一，约占皮肤科日常门诊量的13％左右并以每年1％的速率增加。
痤疮的发病机理复杂，主要为雄激素分泌增多、皮脂腺功能亢进、皮脂分泌过多、毛囊皮脂导管角化异常、毛囊皮脂单位微生物作用及炎症反应等。虽然痤疮通常没有生命危险，但是发病时的瘙痒、疼痛等造成痛苦，而且生成的黑头、粉刺、丘疹等均影响美观，不同程度上对人们的生活质量造成影响。
目前西医多采用药物疗法和物理疗法。药物疗法主要为口服和外用药物治疗，口服药物主要有抗生素、异维A酸、雌激素、肾上腺皮质激素等药物；外用主要有抗生素、维甲酸、过氧化苯甲酰、雌激素、肾上腺皮质激素、锌盐等；物理疗法主要有紫外线、X射线、冷冻、激光等。这些疗法可取得一定疗效但存在复发率高、刺激性大等不足之处。
治疗痤疮的中成药现有如金花消痤丸(由栀子、薄荷、大黄、金银花、黄连、黄柏、黄芩、桔梗、甘草组成)；皮肤病血毒丸(由茜草、当归、白芍、熟地黄、荆芥穗、蛇蜕、地肤子、苍耳子、白芷、防风、浮萍、蝉蜕、牛蒡子、桔梗、苦杏仁、赤茯苓、大黄、黄柏、白茅根、赤芍、地黄、牡丹皮、紫草、连翘、金银花、土茯苓、白鲜皮、忍冬藤、土贝母、天葵子、益母草、皂角刺、桃仁、川芎、紫荆皮、鸡血藤、红花、甘草等39味药物组成)；清热暗疮片(由金银花、大黄浸膏、穿心莲浸膏、牛黄、蒲公英浸膏、山豆根浸膏、珍珠层粉、桅子浸膏、甘草组成)；当归苦参丸(由当归、苦参组成)等。
现有的这些药物多以清热解毒药物为主，另外还多含有解表、补血药物等。鉴于痤疮机理复杂、致病因素多，单纯清热解毒难以取得较好疗效。采用解表药物的原因是根据医学典籍(《诸病源候论·面疮候》，《医宗金鉴·肺风粉刺》等)，认为痤疮主要是由于肺热引起。不过近年的研究表明，病因并不囿于肺热，因此以此为基础的治疗难免顾此失彼。而且我们认为痤疮并非由于血虚引起，因此补血恐难以起到治疗作用。
现有药物，有些虽然还有其他辅助成分配合，但是药味繁多，药物之间的相互作用难以掌握。另外，目前的中成药多数是单纯将药物简单处理后制造，药量大，病人服用时依存性较差。
近年来的病理学等的研究表明，痤疮的生成与内分泌、皮脂和毛囊内微生物等多种因素有关。比较公认的解释是，由于雄激素水平增高，刺激皮脂腺增生肥大，皮脂分泌增多，促进皮质毛囊内存在的丙酸杆菌(痤疮杆菌)及其他常驻菌(如金黄色葡萄球菌等)大量繁殖，分解脂肪产生游离脂肪酸导致毛囊周围的炎性反应等，导致痤疮的生成及其他相关症状。经过研究，清热药物对痤疮丙酸杆菌、金黄色葡萄球菌等有抑菌效果。
另外，通过对痤疮患者的血液流变学研究，发现其血液粘度普遍偏高，暗示血液粘度增高可能与痤疮发病有关。这一结果为采用活血化瘀药物治疗痤疮提供了一定依据(王葆芳等，天津中医学院学报，1995，(2)41)。

发明内容
本发明人等通过实践发现，通过采用以清热药物、活血祛瘀药物为主，辅以利水渗湿药物、理气药物等中药的提取物组成的组合物，可以消除痤疮导致的毛囊肿等炎症反应、抑制痤疮细菌，对治疗痤疮有效。
另外，我们还发现，含有黄芩甙和丹参酮的药物组合物，对治疗痤疮有效。
由此，本发明涉及1.治疗痤疮的药物组合物，其中含有主要由清热药物和活血祛瘀药物组成，以及利水渗湿药物和理气药物的中药组合物的提取物，同时中药组合物中不含解表药物和/或补血药物。
2.根据上述1的药物组合物，其中清热药物选自清热燥湿药物和清热解毒药物，清热燥湿药物多于清热解毒药物。
3.根据1或2的药物组合物，其中清热药物选自黄芩、黄连、黄柏、龙胆、苦参、苦豆草、马尾连、苦木、功劳木等清热燥湿药物和/或金银花、忍冬藤、连翘、蒲公英、大青叶、板兰根、青黛、穿心莲、牛黄、重楼、拳参、半边莲、垂盆草、土茯苓、鱼腥草、射干、山豆根、北斗根、马勃、锦灯笼、马齿苋、白头翁、秦皮、鸦胆子、大血藤、败酱、白花蛇舌草、白蔹、白鲜皮、漏芦、山慈菇、野菊花、委陵菜、土贝母、天葵子、菊苣、四季青、千里光等清热解毒药物；活血祛瘀药物选自川芎、乳香、没药、延胡索、郁金、姜黄、莪术、三棱、丹参、虎杖、益母草、茺蔚子、鸡血藤、桃仁、红花、藏红花、五灵脂、牛膝、穿山甲、皂角刺、王不留行、土鳖虫、水蛭、泽兰、月季花、凌霄花、刘寄奴、苏木、干漆、卷柏、水红花子、丝瓜络、紫荆皮、夏天无等；利水渗湿药物选自茯苓、猪苓、泽泻、薏苡仁、车前子、车前草、滑石、木通、通草、金钱草、海金沙、石韦、茵陈、青叶胆、冬瓜皮、冬瓜子、大腹皮、赤小豆、瞿麦、灯心草、地肤子、福寿草、葫芦、西瓜翠衣、玉米续、鼠李、荠菜等；理气药物选自陈皮、枳实、佛手、香橼、枸橘、木香、天仙藤、香附、乌药、川楝子、刀豆等。
5.根据上述任一项的药物组合物，其中中药选自黄芩、黄连、苦参、连翘、丹参、虎杖、茵陈和陈皮。
6.根据上述任一项的组合物，其特征在于，是由黄芩、黄连、苦参、连翘、丹参、虎杖、茵陈和陈皮以15∶10∶10∶12∶12∶10∶15∶10的比例获得的提取物组成的。
7.根据上述任一项的组合物，其特征在于，该药物组合物制成散剂、片剂、块剂或颗粒剂、茶剂或胶囊剂。
8.根据上述7的组合物，其特征在于，该组合物制成胶囊。
9.治疗痤疮的药物组合物，含有黄芩甙和丹参酮。
10.黄芩甙和丹参酮在治疗痤疮的药物中的应用。
具体实施例方式
以下叙述中，除非特别指出，％是指重量百分含量。
本发明中的“主要含有”是指含量在原料药材的总量中，为超过50％的量，优选在60％以上，更优选在70％以上的量。但是应当注意的是，本发明中“主要”不表示组成中不可以含有其它药物，因此，考虑到其它成分的存在，最好不超过90％，更优选不超过80％。
我们通过实践发现，通过采用以清热药物、活血祛瘀药物为主，辅以利水渗湿药物、理气药物等中药的提取物组成的组合物，可以消除痤疮导致的毛囊肿等炎症反应、抑制痤疮细菌，对治疗痤疮有效。
与以往的认识不同，本发明的中药组合物中不含解表药物和/或补血药物。
我们还发现，如果将清热药物以以往清热解毒药物为主改为以清热燥湿药物为主，治疗痤疮的效果更好。
具体讲，清热药物可以选自常用的清热药物如黄芩、黄连、黄柏、龙胆、苦参、苦豆草、马尾连、苦木、功劳木等清热燥湿药物，以及金银花、忍冬藤、连翘、蒲公英、大青叶、板兰根、青黛、穿心莲、牛黄、重楼、拳参、半边莲、垂盆草、土茯苓、鱼腥草、射干、山豆根、北斗根、马勃、锦灯笼、马齿苋、白头翁、秦皮、鸦胆子、大血藤、败酱、白花蛇舌草、白蔹、白鲜皮、漏芦、山慈菇、野菊花、委陵菜、土贝母、天葵子、菊苣、四季青、千里光等清热解毒药物。
根据我们的研究，虽然不囿于某种特定的理论，但是发现清热燥湿药物在痤疮的治疗中起最主要的作用，同时清热解毒药物也是不可缺少的。从使用的量上来讲，清热燥湿药物应当多于清热解毒药物，这与以往的常规做法是相反的。以往在治疗痤疮的药物中，通常清热解毒药物要多于清热燥湿药物，甚至有时不使用清热燥湿药物。
清热燥湿药物中，优选黄芩、黄连、黄柏、龙胆、苦参等中的一种或多种。
黄芩，是唇形科植物黄芩Scutellaria baicalensis Geoogi的干燥根，具有清热燥湿、泻火解毒的功效。其有效成分主要为黄酮类和双氢黄酮类化合物，如黄芩甙、黄芩素、汉黄芩甙、汉黄芩素、白杨黄素、千层纸黄素等。其中黄芩素和汉黄芩素分别是黄芩甙和汉黄芩甙的甙元，黄芩甙、黄芩素、汉黄芩甙、汉黄芩素等黄酮类化合物统称黄芩素类化合物。
黄连，是毛茛科植物黄连Coptis chinensis Franch、三角叶黄连C.deltoidea C.Y.Cheng et Hsiao、云连C.teeda Wall.以及其他同属的通常也作为黄连使用的植物的干燥根茎。具有清热燥湿、泻火解毒的功效。其中主要的药理活性成分为异喹啉类生物碱，如小檗碱、黄连碱、甲基黄连碱、巴马亭、药根碱等。药理学研究表明，这类生物碱不仅具有抗菌、抗病毒活性，而且还有抗炎作用。
黄柏，是芸香科植物黄皮树Phellodendron chinense Rupr.或者黄檗P.amurense Schneid.的干燥树皮。具有清热燥湿、泻火解毒的功效。其中主要的药理活性成分为异喹啉类生物碱，除小檗碱、巴马亭等以外，还有黄柏碱等。
龙胆，是龙胆科植物条叶龙胆Gentiana amanshurica Kitag.、龙胆G.scabra Bge、三花龙胆G.triflora Pall.或坚龙胆G.regescensFranch.等的干燥根及根茎。具有清热燥湿、清泻肝火的功效。其中主要的药理成分为龙胆苦甙、獐牙菜苦甙等萜类成分。
苦参，是豆科植物苦参Sophora flavescens Ait.的干燥根。具有清热燥湿的功效，其中主要药理活性成分为苦参碱、氧化苦参碱等生物碱。这类生物碱具有良好的抗过敏作用。
我们发现，从活性和适应性角度来看，清热燥湿药物更优选黄芩、黄连、苦参。
清热解毒药物优选大黄、金银花、连翘、土茯苓、蒲公英等。
大黄是蓼科植物掌叶大黄Rheum palmatum L.、唐古特大黄R.tanguticum Maxim.ex Balf.或药用大黄R.officinale Baill.的干燥根及根茎。其功效为清热解毒、泻下、活血祛瘀等。其中主要有效成分为蒽醌类化合物及其甙类。
金银花是忍冬科植物忍东Lonicera japonica Thunb.、红腺忍东L.hypoglauca Miq.、山银花L.confusa DC或毛花柱忍冬L.dasystyla Rehd.的干燥花蕾或带初开的花。其效用有清热解毒、疏散风寒的作用。其中含有多种萜类挥发油成分，具有良好的抗菌等作用。
连翘是木樨科植物连翘Forsythia suspendsa(Thunb.)Vahl的干燥果实。其药效为清热解毒，消痈散节。其中含有桦木酸、连翘甙、松脂素、连翘醇甙等。这些化合物具有良好的抗菌等作用。
土茯苓是百合科植物光叶菝葜Smilax glabra Roxb.的干燥根茎，其功效为解毒、除湿，其中含有菝葜皂甙类化合物，因此还有抗炎的作用。
蒲公英是菊科植物蒲公英Taraxacum mongolicum Hand.-Mazz.、碱地蒲公英T.sinicum Kitag.或同属其它植物的干燥全草。其药效为清热解毒、利湿等。主要成分含有萜类、挥发油等，不仅具有抗菌作用，也可以激发机体免疫功能。
清热解毒药物最优选连翘。
清热药物，包括清热燥湿药物和清热解毒药物，优选占组合物原料药物的40重量％以上，更优选在50重量％以上，但是清热药物并非越多越好，考虑药物的相互作用，清热药物的量最好不超过总量的70重量％，最好在60重量％以下。
在清热燥湿和清热解毒药物间，如上所述，清热燥湿药物应当多于清热解毒药物，优选含量比在2∶1以上，不高于4∶1。清热燥湿药物和清热解毒的药物的比例最优选在3∶1左右。
如上所述，痤疮患者很多具有血液粘滞的体质，为此，我们在组合物中加入活血祛瘀药物，通过促进血液循环，降低血压粘度，以期改善痤疮症状，获得了成功。
活血祛瘀药物可选自川芎、乳香、没药、延胡索、郁金、姜黄、莪术、三棱、丹参、虎杖、益母草、茺蔚子、鸡血藤、桃仁、红花、藏红花、五灵脂、牛膝、穿山甲、皂角刺、王不留行、土鳖虫、水蛭、泽兰、月季花、凌霄花、刘寄奴、苏木、干漆、卷柏、水红花子、丝瓜络、紫荆皮、夏天无等。优选川芎、丹参、虎杖、益母草、皂角刺、桃仁、红花、紫荆皮、鸡血藤。
川芎是伞形科植物川芎Ligusticum chuanxiong Hort.的干燥根茎，其药效为活血行气、祛风止痛等。其中含有挥发油、内酯、生物碱和酚类等。
丹参是唇形科植物丹参Salviam miltiorrhiza Bge.的干燥根及根茎。其药效为活血祛瘀、凉血消痈等。其中主要含有呋喃并菲醌类成分，如丹参酮类、隐丹参酮等。可以改善微循环、增强免疫，同时具有一定抗菌作用。
虎杖是蓼科植物虎杖Polygonum cuspidatum Sieb.et Zucc.的根茎和根。其中含有蒽醌类如大黄素及其甙类和和一些二苯乙烯类化合物如虎杖甙等。
益母草是唇形科植物益母草Leonurus heterophyllus Sweet的干燥地上部分。其药效为活血祛瘀、利水消肿等。其中含有益母草碱、水苏碱等生物碱。
皂角刺是豆科植物皂荚Gleditsia sinensis Lam.的干燥棘刺。可以脱毒排脓，活血消痈。
桃仁是蔷薇科植物桃Prunus persica (Linn)Batsch.或山桃P.davidiana(Carr.)Franch的干燥成熟种子。其药效为活血祛瘀等。其中含有苦杏仁甙等。
红花是菊科植物红花Carthamus tinctorius L.的干燥花。可以活血、消肿、止痛。其中含有黄酮类化合物红花甙类等，以及红花多糖等。可以抗血小板、抗凝血，促进淋巴细胞转化等。
紫荆皮是木兰科植物长梗南五味子Kadsura longipedunculataFinet et Gagnep的干燥根皮。其药效是活血通经、解毒消肿等。
鸡血藤是豆科植物密花豆Spatholobus suberectus Dunn的干燥藤茎。其药效为行血补血等。
活血祛瘀药物更优选丹参、虎杖、紫荆皮等。最优选丹参和虎杖。
根据本发明人等的研究，本发明的组合物中，活血祛瘀药物的用量，以组成组合物的药材的总量计，应当在10％以上，考虑到组合物中的其它成份，其含量最好不超过40％，优选20～30％左右。同时，活血祛瘀药物的含量应当少于清热药物，最好在清热药物的1/4以上，1/2以下。活血祛瘀药物的含量少于清热药物的1/4，其活血、促进血液循环的作用有可能发挥得不充分，清热药物的效果也难以发挥。如果超过了1/2，清热药物的含量，因此药效也有可能不能充分发挥。
本发明人等发现，在本发明的组合物中，虽然不依赖任何现有的解释，除了清热药物和活血祛瘀药物以外，佐以利水渗湿药物和/或理气药物，可以进一步发挥对痤疮的治疗作用。
利水渗湿药物选自茯苓、猪苓、泽泻、薏苡仁、车前子、车前草、滑石、木通、通草、金钱草、海金沙、石韦、茵陈、青叶胆、冬瓜皮、冬瓜子、大腹皮、赤小豆、瞿麦、灯心草、地肤子、福寿草、葫芦、西瓜翠衣、玉米续、鼠李、荠菜等。优选茯苓、猪玲、茵陈、冬瓜皮、西瓜翠衣等。
茯苓是多孔菌科真菌茯苓Poria cocos(Schw.)Wolf的干燥菌核。可以利水渗湿，健脾益胃等。含有茯苓酸等三萜羧酸以及茯苓聚糖等多糖类。
猪苓是多孔菌科真菌猪苓Polyporus umbellatus(Pers.)Fr.的干燥菌核。可以利水渗湿等。含有猪苓聚糖等多糖类等。
茵陈是菊科植物茵陈蒿Artemisia capillaries Thunb.的干燥幼苗，另外，也可以使用通常也作茵陈用的同属其它植物等。可以清热利湿。含有挥发油如茵陈二炔酮等、黄酮类成分茵陈色原酮等。其水提取物可以抑制多种细菌，挥发油可以强烈抑制某些致病真菌。
冬瓜皮是葫芦科植物冬瓜Benincasa hispida(Thunb.)Cogn.的干燥外果皮。作用是利水消肿等。
西瓜翠衣是葫芦科植物西瓜Citrullus vulgaris Schrad.的果皮。作用是清署解热，止渴等。
理气药物选自陈皮、枳实、佛手、香橼、枸橘、木香、天仙藤、香附、乌药、川楝子、刀豆等。优选陈皮。
陈皮是芸香科植物橘Citrus reticulata Blanco的干燥成熟果皮。可以理气调中、燥湿化痰等。含有挥发油和黄酮甙类等。
利水渗湿药物和/或理气药物的含量，以组成组合物的药材的总量计，应当在10％以上，考虑到组合物中的其它成份，其含量最好不超过40％，优选20～30％左右。在同时含有利水渗湿药物和理气药物的情况下，利水渗湿药物的含量与理气药物可以大致相同，或者略多于后者，但是优选不超过2倍，最好在1.5倍左右。
本发明的一个优选组成包括含有选自黄芩、黄连、苦参的清热燥湿药物，选自连翘的清热解毒药物，选自丹参、虎杖的活血化淤药物，以及选自茵陈的利水渗湿药物和选自陈皮的理气药物。
特别的，当黄芩、黄连、苦参、连翘、丹参、虎杖、茵陈和陈皮以15∶10∶10∶12∶12∶10∶15∶10的比例组成组合物时，其药效可以得到更好的发挥。
本发明组合物的用量，按照原药材计，每日用量在10g(2钱)～100g(2两)之间，一般用量在15g(3钱)～75g(1两半)左右，优选20g(4钱)～50g(1两)，最好在25g(半两)左右(根据情况可以±5g左右)。
由于痤疮的治疗需要较长时间，选择剂型时，需选择体积小，携带服用方便的剂型。常规煎制制剂不方便携带和服用，因此难以满足上述要求。故从长期服药角度，优选固体制剂。
作为固体制剂，有散剂、胶囊剂、片剂、茶剂、块剂或颗粒剂等。本发明如果采用固体制剂的话，按照上述叙述，应先制成浸膏。再制备颗粒剂时，可以加入一定量的辅料促进造粒和浸膏溶解，作为颗粒剂的辅料可以根据本领域的常识选择。制备压制片剂时，具体的工艺例如将浸膏混合入一定量的辅料等，同时加入制软材、造粒，打片。从制剂角度来说，胶囊剂可以将浸膏直接或仅通过简单处理封入明胶胶囊中，工艺简单。同时由于胶囊溶解后直接可以释放药物成分，药物溶出好，起效块，疗效发挥稳定，而且服用方便、体积小，因此胶囊剂是最优选的。同时，作为内服制剂，通过调节机体的阴阳平衡，实现对外在发病的治疗，也符合中医理论关于以内养外的思路。
当然，在保证服用方便，容易服用的前提下，口服液、酒剂等其它口服或者非经肠道给药制剂、以及外用制剂如搽剂或者软膏剂、硬膏剂、泥敷剂等也可以采用。本领域技术人员可以根据所具体采用的组成和提取工艺进行决定，这种变化都属于本发明的范围。
以下介绍本发明的制剂工艺。
因为提取浸膏的工艺属于本领域熟知的常识，本发明中不拟对此作过多的限制。应予说明，组合物中含有的药材的有效成分有水溶性的、也有脂溶性的，有的同时含有水溶性成分和脂溶性成分。对于含有脂溶性或同时含有水溶性和脂溶性成分的药材，应采取首先用醇提取或者其它有机溶剂如醚、石油醚等提取的方式提取出脂溶性成分。对于含有水溶性成分的药材，在不引起药物相互作用的情况下，可以混合用水提取。对于同时含有水溶性和脂溶性成分的药材，在提取出脂溶性成分以后，也可以一起用水提取。对于含有挥发油有效成分的药材，应当避免在提取过程中挥发油的损失。例如可以先提取出挥发油之后，再将其包合到环糊精等载体中备用。对于有效成分热不稳定的药材，可以根据中药领域常规做法，将其粉碎或者用低温方法提取出有效成分后，混合到浸膏中。
以上提取可以采用本领域熟知的方法，例如提取脂溶性成分的时候可以采取溶剂浸渍、渗漉、回流提取等方法。溶剂例如低级脂肪醇如甲醇、乙醇，低沸点挥发性溶剂如乙醚、石油醚，植物油等。也可以利用诸如超临界流体萃取等方法提取。如果脂溶性溶剂还可溶于水，也可以采用溶剂/水混合物如醇/水化合物等。提取水溶性成分的时候，可以采取水浸、煎煮、超声波或者微波提取等方法，也可以将上述方法加以结合使用。
应予说明，对于中药来讲，虽然可以将浸膏进一步纯化以进一步减量，但是根据我们的实践，采用纯度比较低的普通水提物和醇提浸膏等，在保证疗效的同时可以有效降低生产成本，从经济上是有利的。
在此还应该说明的是，我们认为从本发明的中药组合物的提取物来说，从黄芩中提取的以黄芩素类化合物为代表的黄酮成分(以下统称为黄芩素化合物)和从丹参中提取的以丹参酮I、II、隐丹参酮类为代表的呋喃并菲醌类成分(以下统称为丹参酮化合物)在治疗痤疮中起的作用最大，因此本发明也包括含有黄芩素化合物和丹参酮化合物的组合物和上述两类化合物(包括其中所含的单体化合物)在治疗痤疮中的应用。
以下举出实例具体说明提取和制备方法。
为了简便起见，通过以下组成的组合物进行说明，但是本发明组合物不受以下组成的限制。在本发明的介绍基础上，根据本领域的常识，可以进行其它组合，这些组合及其变化都属于本发明的范围。
清热燥湿药物选用黄芩、黄连、苦参、清热解毒药物选用连翘、活血祛瘀药物选用丹参、虎杖、利水渗湿药物选用茵陈、理气药物选用陈皮。
按照制备1000粒胶囊计，各成分用量如下黄芩300g黄连200g苦参200g连翘240g丹参240g虎杖200g茵陈300g陈皮200g以上药味，黄芩加水煎煮3次，每次2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩到相对密度1.05-1.10间，调节pH值1.5-2.0，70℃保温30分钟，静置24小时，抽滤，沉淀用乙醇洗涤至pH值5.0-6.5，再用少量水洗涤后，减压干燥，粉碎成细粉；黄连、苦参二味加60％乙醇回流提取3次，每次1.5小时，滤过，滤液回收乙醇，并浓缩成干浸膏，粉碎成细粉；丹参、虎杖二味加90％乙醇提取2次，每次1.5小时，滤过，药渣备用，合并乙醇提取液，减压回收乙醇，并浓缩成干浸膏，粉碎成细粉；陈皮、连翘、茵陈分别用水蒸气蒸馏提取挥发油，并用β-环糊精包合；蒸馏后的水溶液另器收集；药渣与上述药渣合并，加水煎煮2次，每次1.5小时，滤过，滤液与上述水溶液合并，浓缩至相对密度为1.10清膏，加乙醇使含醇量达60％，搅匀，静置(2-8℃)24小时，滤过，滤液回收乙醇，并浓缩成干浸膏，粉碎成细粉；上述细粉合并，加入挥发油β-环糊精包合物和糊精、微粉硅胶适量，混匀，制成颗粒，干燥，装入胶囊，制成1000粒，即得，每粒中含量为450毫克。
所得胶囊中含有以黄芩甙、连翘甙、橙皮甙等为代表的黄酮甙类，以盐酸小檗碱、苦参碱等为代表的生物碱类，以丹参酮、大黄素等为代表的蒽醌类，以丹参素、原儿茶醛等为代表的酚酸类等化合物，另含有挥发油等其它物质。以上成分都可以采用中华人民共和国药典2000年版1部的方法进行测定。
按照药典记载的薄层色谱法对黄连、苦参、连翘、虎杖、丹参、陈皮进行鉴别，鉴定了黄连药材及盐酸小檗碱、苦参的苦参碱、丹参的丹参酮IIA、大黄的大黄素及大黄素甲醚、连翘的连翘甙、陈皮的橙皮甙的存在。同时对其水分、砷盐、重金属、卫生学等进行了检查和测定，均符合药典标准。
按照药典记载的高效液相色谱法对黄芩甙进行测定，含量在15毫克/粒以上。
按照实施例1同样方法，使用放大10倍量制备胶囊。
即，选用黄芩3000g，得粗提取物(干燥品，下同)421克；黄连和苦参4000g，得粗提取物817克；丹参和虎杖4400g，得粗提取物725克；陈皮、连翘和茵陈7400g，得挥发油9.0毫升，使用β-环糊精包合，得包合物52克，另外得到粗提取物1624克。
以上提取物(含包合物)共3639克，加入糊精和微粉硅胶各430.5克制成颗粒。总重为4482克，按照450毫克/粒的量装胶囊，得到9954粒胶囊。
各项检查同上。
按照实施例1同样方法，使用放大25倍量制备胶囊。
即，选用黄芩7500g，得粗提取物1121克；黄连和苦参10000g，得粗提取物1936克；丹参和虎杖11000g，得粗提取物1806克；陈皮、连翘和茵陈18500g，得挥发油21.5毫升，使用β-环糊精包合，得包合物136克，另外得到粗提取物3965克。以上提取物(含包合物)共8964克，加入糊精和微粉硅胶各1143克制成颗粒。总重为11236克。从中取出2250克，按照450毫克/粒的量装胶囊，得到4966粒胶囊。其余颗粒(以下称实施例3提取物)用于进行以下实验例试验。
各项检查同上。
以下通过本发明提取物的抗炎抑菌、抗过敏、活血化瘀作用，证明其治疗痤疮的功能。
试验材料1.受试药物实施例3所得颗粒，按照需要浓度以0.5％羧甲基纤维素钠溶液配制成实验所需浓度的混悬液备用。
2.其它药物二甲苯(化学纯)上海试剂一厂生产，批号971201；角叉菜胶安徽医科大学临床药理研究所提供；4-氨基吡啶(4-Aminopyridin)Merck产品；羧甲基纤维素钠(CMC-Na)上海华医公司试剂部；煤焦油由合肥市煤气公司提供(100％)，显黑色，糊状；色拉油青岛嘉里植物油有限公司生产，微黄，澄明，其它药品均为市售合格药品。
3.菌种肺炎链球菌(3409)、金黄色葡萄球菌(ATCC25923)、粉刺丙酸杆菌(65102)，由中国药品生物制品检定所提供，均为标准菌株。
4.培养基粉刺丙酸杆菌采用含10％新鲜小牛血清的肉汤；肺炎链球菌采用5％新鲜脱纤维羊血的肉汤；金黄色葡萄球菌直接采用肉汤；均自制。
5.试验动物昆明种小鼠，Wistar大鼠，由安徽省医学科学研究所提供；家兔由蚌埠医学院实验动物科提供。
6.实验条件室温18～28℃、湿度60～75％7.试验方法与结果(1)本发明组合物对二甲苯所致的小鼠耳肿胀的抑制作用取雄性小鼠55只，体积21.0±3.0g，随机分为5组，每组11只，分别口服给予等容量0.5％CMC、相当于1.0g生药/kg、3.0g生药/kg、9.0g生药/kg的实施例3提取物，连续给药3天，最后一次给药后40min致炎，用二甲苯涂擦左耳正、反面，0.1ml/鼠，右耳作对照，致炎后30min处死动物，用Φ9mm打孔器于双耳对称部位取耳片，于精密天平分别称重，左右耳片重量差值为肿胀度，比较药物组与对照组的差异，计算抑肿率。

结果见表1。
表1本发明组合物提取物对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响

与CMC组比较**P＜0.01
从上表看，本发明组合物的提取物可明显抑制二甲苯所致小鼠耳部炎症，并呈现较好的量效关系。
(2)本发明组合物对角叉菜胶致大鼠足跖肿胀的影响取雄性大鼠50只，体重200±20.0g，随机分为5组，每组10只，分别口服给予等容量0.5％CMC、相当于0.7g生药/kg(小剂量组)、2.0g生药/kg(中剂量组)、6.0g生药/kg(大剂量组)的实施例3提取物，连续给药3天，最后一次给药后40min致炎，在大鼠右后足跖部皮下注入1％角叉菜胶0.1ml/足，分别在致炎后1h，2h，3h，4h，5h用足爪容积导电测定仪(山东医科大学出品)测量踝关节下后肢容积，并与致炎前足爪容积比较，计算致炎前后足爪容积之差值为肿胀度，结果见表2。
表2本发明提取物对角叉菜胶致大鼠足跖肿胀的影响

与CMC组比较*P＜0.05，**P＜0.01从表2可见，本发明组合物能够明显抑制角叉菜胶致大鼠足跖肿胀的炎症反应。
(3)对小鼠4-氨基吡啶致痒反应的抑制作用取昆明种小鼠50只，体重18～24g，雌雄兼用，随机分为5组，每组10只，分别口服0.5％CMC、相当于1.0g生药/kg(小剂量组)、3.0g生药/kg(中剂量组)、9.0g生药/kg(大剂量组)的实施例3提取物，连续给药3天，最后一次给药后40min于小鼠颈背部皮下注入4-氨基吡啶1mg/kg(用生理盐水配成0.5％溶液，实验前用生理盐水稀释成0.01％溶液)，将小鼠放入鼠笼内，记录给4-氨基吡啶后10分钟内小鼠的舐体次数(舐体反应注入4-氨基吡啶后10s左右小鼠出现反复扭头舔其背部的行为，以小鼠连续舔体至出现短暂停顿作舔体1次计算)。结果见表3。

表3本发明组合物对4-氨基吡啶致小鼠舔体反应的影响

与CMC组比较*P＜0.05**P＜0.01从表3可见，本发明组合物对小鼠4-氨基吡啶致痒反应有明显的抑制作用，其止痒作用具有良好的量效关系。
(4)对体外粉刺丙酸杆菌的抑制作用采用微量培养法实验，用蒸馏水将实施例3提取物配制成相当于0.48、0.24、0.12、0.06、0.03、0.015g生药/ml的溶液，分别调整PH＝7.2，煮沸30分钟，消毒，4℃冰箱保存备用。取96孔细胞培养板，分别加入不同浓度溶液，100μl/孔，再加入按100倍稀释的疱肉基培养3天的粉刺丙酸杆菌液100μl/孔，各设3个复孔，同时设药液对照及菌液对照，置真空干燥器中，真空负压达0.1mpa，37℃培养7天，观察有无菌落生长，菌落不生长的最高药物稀释度为该药的最低抑菌浓度(MIC)。结果见表4。本发明组合物对粉刺丙酸杆菌液最低抑菌浓度为0.12毫克生药/毫升。
(5)本发明组合物对肺炎链球菌、金黄葡萄球菌的抑制作用采用液体试管法，取灭菌小试管若干支，用相应的培养基稀释被试药，浓度分别为实施例3提取物相当于0.024，0.012，0.006，0.003，0.0015，0.00075g生药/ml；使浓度与成人日服用剂量倍比关系相等，每管装2ml，加入0.1ml新鲜菌液，使每管最终含菌浓度为5×105CFU/ml，置37℃培养箱内培养18h后观察有无菌落生长。菌落不生长的最高药物稀释度为该药的最低抑菌浓度(MIC)，结果见表4。
表4本发明组合物抑菌试验结果

注“-”表示无菌生长，“＝”表示有菌生长，“N”表示未测定从表4可见，解毒平痤胶囊对肺炎链球菌、金黄色葡萄球菌有较好的抑菌作用，对粉刺丙酸杆菌有一定的抑制作用。
(6)本发明组合物对啤酒酵母所致大鼠发热的解热作用实验用大鼠50只，体重200±20.0g，雌雄兼用，随机分为5组，每组10只，分别口服0.5％CMC、相当于0.7g生药/kg(小剂量组)、2.0g生药/kg(中剂量组)、6.0g生药/kg(大剂量组)的实施例3提取物， 1次/天，连续给药3天，第3天测其正常基础肛温后给药，药后30min，各鼠皮下注射7％啤酒酵母混悬液0.5ml/100g，然后每小时测肛温1次，连续5小时，比较各组大鼠不同时间的体温变化，以不同时间所测肛温与基础肛温之差值，为体温变化的指标。结果见表5。
表5本发明组合物对啤酒酵母致热大鼠体温的影响

与CMC组比较*P＜0.05，**P＜0.01从表5可见，各组动物的基础肛温无差异，注射啤酒酵母悬液可使体温升高，本发明组合物中剂量即表现出较好的解热作用。与大剂量组无明显差异。
(7)对兔耳痤疮模型的血液流变学及血清睾酮的影响取雄性健康白兔40只，体重2.5～3.0kg，每日于各兔右耳内侧面耳管开口处涂煤焦油1次，涂擦面积约2×2cm2，左耳相应位置涂色拉油，连续2周，肉眼观察兔耳的变化，然后将实验兔随机分为5组，每组8只，分别口服0.5％CMC，相当于0.36g生药/kg(小剂量组)、1.1g生药/kg(中剂量组)、3.3g生药/kg(大剂量组)的实施例3提取物，1次/天，连续给药14天，第15天对兔耳做肉眼观察，采血进行血液流变学检查，血清睾酮含量测定。切下耳片组织学检查。
血液流变学检查结果见表6。
表6本发明组合物对实验性痤疮家兔的血液流变学的影响

与CMC组比较*P＜0.05，**P＜0.01从表6可见，本发明组合物对实验性痤疮家兔血液流变学指标血浆粘度质、血沉值、纤维蛋白质有明显的下降，与CMC组相比有极显著的差异，说明本发明组合物有良好的活血化瘀作用。
(8)对兔耳痤疮模型的病理变化的影响(8-1)肉眼观察正常兔耳菲薄、柔软，其上可见清晰的毛细血管，兔耳管开口处可见毛囊口排列整齐；涂煤焦油2周兔耳厚度增加、变硬，毛囊口隆起，有黑头粉刺状，涂色拉油兔耳无明显变化，给药两周后，涂煤焦油兔耳观察可见，人CMC组仍可见明显的毛囊角栓，但毛囊口隆起略减轻，变平，给解毒平痤胶囊及清热暗疮片组可见局部毛囊角栓明显减少，部分有栓脱落后遗留点状凹陷的毛囊，毛囊口隆起变平，明显减少。
(8-2)组织学检查(8-2-1)组织学检查方法取耳片涂药处皮肤活检，以10％福尔马林固定，包埋，切片HE染色，于光镜下观察组织学改变。
(8-2-2)组织学判定标准(0)无粉刺，视野中未见炎性细胞；(1)为毛囊漏斗部可见少量致密角化物质，炎性细胞不明显；(2)为毛囊漏斗部可见中等量角化物质，并向皮脂腺延伸，有大量炎性细胞；(3)为扩张的毛囊内有广泛的角化物质，炎性细胞充满视野。
(8-2-3)组织学观察结果色拉油耳未见有角化物质及炎性细胞；而涂煤焦油的CMC兔耳角化物质充满毛囊、灶性鳞状上皮向下推进性增生，伴角质栓形成，间质有淋巴细胞浸润；用药组颗粒层、棘层细胞略增生或不明显增生，炎性细胞不明显，且与阳性对照组表现相似。结果详见表7。
表7本发明组合物对实验性家兔痤疮模型的组织学影响

与模型对照组比较*P＜0.05**P＜0.01从表7可见，本发明组合物对煤焦油致兔耳实验性痤疮模型有治疗作用，能减少其毛囊肿，能使炎性细胞不明显。
权利要求
1.治疗痤疮的药物组合物，其中含有主要由清热药物和活血祛瘀药物组成，以及利水渗湿药物和理气药物的中药组合物的提取物，同时中药组合物中不含解表药物和/或补血药物。
2.根据权利要求1的药物组合物，其中清热药物选自清热燥湿药物和清热解毒药物，清热燥湿药物多于清热解毒药物。
3.根据权利要求1或2的药物组合物，其中清热药物选自清热燥湿药物黄芩、黄连、黄柏、龙胆、苦参、苦豆草、马尾连、苦木、功劳木和/或清热解毒药物金银花、忍冬藤、连翘、蒲公英、大青叶、板兰根、青黛、穿心莲、牛黄、重楼、拳参、半边莲、垂盆草、土茯苓、鱼腥草、射干、山豆根、北斗根、马勃、锦灯笼、马齿苋、白头翁、秦皮、鸦胆子、大血藤、败酱、白花蛇舌草、白蔹、白鲜皮、山慈菇、野菊花、委陵菜、土贝母、天葵子、菊苣、四季青、千里光；活血祛瘀药物选自川芎、乳香、没药、延胡索、郁金、姜黄、莪术、三棱、丹参、虎杖、益母草、茺蔚子、鸡血藤、桃仁、红花、藏红花、五灵脂、牛膝、穿山甲、皂角刺、王不留行、土鳖虫、水蛭、泽兰、月季花、凌霄花、刘寄奴、苏木、干漆、卷柏、水红花子、丝瓜络、紫荆皮、夏天无；利水渗湿药物选自茯苓、猪苓、泽泻、薏苡仁、车前子、车前草、滑石、木通、通草、金钱草、海金沙、石韦、茵陈、青叶胆、冬瓜皮、冬瓜子、大腹皮、赤小豆、瞿麦、灯心草、地肤子、福寿草、葫芦、西瓜翠衣、玉米续、鼠李、荠菜；理气药物选自陈皮、橙皮、橘红、化橘红、橘核、橘叶、橘络、青皮、枳实、枳壳、佛手、香橼、枸橘、木香、川木香、土木香、青木香、天仙藤、香附、乌药、沉香、降香、川楝子、荔枝核、薤白、檀香、刀豆、柿蒂、紫苏梗、甘松、娑罗子、玫瑰花、梅花、九香虫、木腰子、九里香、素馨花、龙涎香。
4.根据权利要求1～3任一项的药物组合物，其中中药选自黄芩、黄连、苦参、连翘、丹参、虎杖、茵陈和陈皮。
5.根据上述任一项的组合物，其特征在于，是由黄芩、黄连、苦参、连翘、丹参、虎杖、茵陈和陈皮以15∶10∶10∶12∶12∶10∶15∶10的比例获得的提取物组成的。
6.根据上述任一项的组合物，其特征在于，该药物组合物制成散剂、片剂、块剂或颗粒剂、茶剂或胶囊剂。
7.根据上述6的组合物，其特征在于，该组合物制成胶囊。
8.治疗痤疮的药物组合物，含有黄芩甙和丹参酮。
9.黄芩甙和丹参酮在治疗痤疮的药物中的应用。
全文摘要
治疗痤疮的药物组合物，其中含有主要由清热药物和活血祛淤药物组成，以及利水渗湿药物和理气药物的中药组合物的提取物，同时中药组合物中不含解表药物和/或补血药物。
文档编号A61P17/10GK1621082SQ20031011799
公开日2005年6月1日 申请日期2003年11月26日 优先权日2003年11月26日
发明者瞿幸 申请人:岐黄药业科技投资有限责任公司