专利名称：具有抗肿瘤和化学敏感活性的双杂环化合物的制作方法
本申请是申请日为2001年7月26日、申请号为01818293.3的中国专利申请的分案申请。
本发明涉及具有抗肿瘤和化学敏感活性的通式(I)的双杂环化合物， 其中A，可以与A’相同或不同，是具有5-7个原子的单或双环系，在一个或两个环上含有一个或多个选自N、S、O的原子；A和A’可以以对称或不对称方式与C-X键合；X，可以与X’相同或不同，表示a)H、OH，X和X’一起为＝O，＝CH-(CH2)nCH3，n是1-3的整数；b)饱和或不饱和的直链或支链C1-C18烷基链，可能被下列基团取代1)C3-C7环烷基；2)NR1R2，其中R1和R2可以是相同或不同的，可以是H、直链或支链C1-C5烷基；3)叠氮化物；4)卤素；5)一个或多个OR3基团，其中R3代表H、直链或支链C1-C5酰基，或甲磺酰基、甲苯磺酰基、三氟甲磺酰基(triflyl)或与邻位的OH一起，R3代表异亚丙基；6)苯基，依次被卤素、硝基、羟基、烷氧基或NR1R2氨基取代，其中R1和R2具有上述含义；7)具有1-5个碳原子的直链或支链烷基的自由的或被酯化的羧基；8)吗啉或甲氧基吗啉；c)C3-C7环烷基；d)苯基或萘基，可能被卤素、硝基、羟基、烷氧基或NR1R2氨基取代，其中R1和R2有上述的含义；
e)C5-C7杂环，可能被卤素、硝基、羟基、烷氧基或氨基NR1R2取代，其中R1和R2具有上述含义；f)含一个或多个选自N、O的杂原子的饱和杂环，可能被OH、CN、O-C1-C4烷基取代；前提是，当A＝A1＝吲哚，X＝H时，X’不是杂环或苯基或烷基；其中R，可以与R’相同或不同，表示H、羟基，所述羟基不被酯化或被C1-C4酰基酯化、亚甲二氧基、硝基、氨基、可能是单或烷基化的C1-C4、单或二C1-C4烷酰基、羧基、烷氧基羰基、卤素、C1-C4烷基。
如果A和A’，可以是相同或不同的，含有氮原子，可能是苄基化的或烷基化的C1-C6。
如果A和A’，可以是相同或不同的，含有硫原子，两个环之一可以被氧化。
抗肿瘤药物在人类治疗中的使用引起大量的的毒副作用，因此导致药物的施用量减少和在某些情况下终止治疗。药物施用量的减少或治疗的终止引起原发性肿瘤生长的增加和/或肿瘤转移的发生。显然，在这些情况下死于癌症的患者人数不可避免地增加。
肿瘤治疗中另一个非常重要并被强烈认知的方面是对于用于治疗肿瘤细胞的药物的抗药性的开始。对药物产生抗药性的细胞通常能够抵抗许多其它抗肿瘤药物，即使这些药物在化学上不相关或作用于不同的作用机理。这类抗药性称为抗多药物性(multidrug resistance)(MDR)(Annu.Rev.Med.1991，42277-286；Drugs of the Future 1997，22653-660)。
大量肿瘤，例如肾上腺皮质、结肠、肾和空肠肿瘤和肝癌从使用抗肿瘤药物治疗开始即显示出抗药性(Barrows，L.R Antineoplasticand Immunoactive Drugs，1995；75；1236-1262)。
在另外一些情况下，肿瘤细胞按照与细菌抵抗抗生素相似的方式获得抗药性。这类抗药性基于治疗过程中发生的肿瘤细胞内的基因改变；这些改变使得子细胞在存在抗肿瘤试剂的环境下增殖。
尽管如此，不管抗药性的起因如何，都导致抗肿瘤治疗的无效。
大量研究认为，人类肿瘤中抗药性的常规形式源自糖蛋白P的存在(Ann.Med.Interna 1997，Mar；14(3)145-53；Acta Scient Venez.2000，51(1)45-52)。
这种糖蛋白作为能量依赖的膜式泵将抗肿瘤药物从细胞内部排出，由此降低了细胞内药物的浓度。
化学敏感剂是在肿瘤细胞内或体内引起改变并有利于所用抗肿瘤试剂的治疗效果增加的化合物。
已知能够调节糖蛋白P功能的化学敏感剂包括钙通道阻断剂(异搏定)、钙调蛋白抑制剂(三氟拉嗪)、吲哚生物碱(利血平)、lysosomotropic试剂(氯喹)、类固醇类(黄体酮)、三苯乙醇类似物(三苯氧胺)、洗涤剂(cremophor EL)和环肽抗生素(环孢菌素)(Cancer，Principles &Practice of Oncology，1993；第四版，J.B.Lippincott Co.，Philadephia，Pa.，2661-2664)。
具有双杂环结构的化合物是已知的。例如，WO95/08540描述了具有抗病毒活性的双-(脒基苯并咪唑基)alcans。
WO99/00381描述了具有抗转移活性的双吲哚衍生物。
US5,780,461描述了具有抗肿瘤活性的双吲哚衍生物。
在上述引用的WO95/08540，WO99/00381和US5,780,461中描述的双吲哚是不同于本发明的化合物。
在医疗领域中，仍然强烈需要用于治疗肿瘤，可以单独使用或与其它已知的抗肿瘤药物联合使用的治疗手段。
在这一领域，同样强烈需要具有抗肿瘤和/或化学敏感活性的化合物，即所述化合物对于抗药的肿瘤具有活性，和/或能够使那些由于上述抗药性条件的开始而无效的抗肿瘤药物对于肿瘤具有活性。
现已发现，式(I)化合物是可以作为抗肿瘤化合物和化学敏感剂的有用试剂。
对于本发明此处描述的化合物的化学敏感机理，即，它们引起抗药性转化的能力，尚不清楚。可以认为涉及肿瘤细胞的相互作用机制，而与肿瘤细胞已经开始抵抗的抗肿瘤药物无关。
得到的实验结果(如下报道)显示，式(I)化合物，无论是单独使用或与其它已知抑菌药物结合使用，是对治疗肿瘤有用的试剂。
因此，通式(I)的化合物是此处描述的本发明主题。
此处描述的本发明的另一目的是通式(I)的化合物及其在医疗领域的用途。
此处描述的本发明的另一目的是含通式(1)化合物作为活性成分和至少一种药物可接受的赋形剂和/或稀释剂的药物组合物。
此处描述的本发明的另一目的是通式(I)的化合物及其制备方法。
此处描述的本发明的另一个目的是含通式(I)的化合物作为活性成分的药物组合物用于肿瘤病变治疗，其中肿瘤选自肉瘤、癌、类癌瘤、骨肿瘤、神经内分泌的肿瘤、淋巴系统白血病、急性早幼粒细胞白血病、脊髓白血病、单核细胞白血病、巨核细胞白血病和霍奇金氏病。
此处描述的本发明的另一目的是含通式(I)的化合物作为活性成分的的药物组合物用于肿瘤病变治疗，其中肿瘤已经显示对于在先用于其治疗的抗生素的抗药性，其中所述式(I)化合物对所述抗药性肿瘤产生化学敏感效果。
此处描述的本发明的另一目的是含通式(I)的化合物作为活性成分，以及结合一种或多种已知的抗肿瘤试剂的药物组合物，其中抗肿瘤化合物选自烷基化试剂、拓扑异构酶抑制剂、抗微管蛋白试剂、嵌入化合物、抗代谢产物、天然产物，例如长春花生物碱、表鬼臼脂素、抗生素、酶、泰克瑟恩(taxan)和细胞分化化合物。
在细胞分化抗肿瘤试剂中，优选全反式视黄酸。
此处描述的本发明的另一个目的是通式(I)的化合物用于制备肿瘤病变治疗的药物的用途。
此处描述的本发明的另一个目的是通式(I)的化合物用于制备肿瘤病变治疗的药物的用途，其中肿瘤已经显示出对于用于其治疗的在先抗肿瘤药物的抗药性，其中所述式(I)化合物对上述抗药性肿瘤产生化学敏感效果。
此处描述的本发明的另一个目的是通式(I)的化合物结合一种或多种已知的抗肿瘤试剂用于制备肿瘤病变治疗的药物的用途。
此处描述的本发明的另一个目的是通式(I)的化合物结合全反式视黄酸用于制备治疗急性早幼粒细胞白血病的药物的用途。
图1显示的是ST1346在ATRA存在和不存在下和NBT诱导活性的关系；图2显示的是ST1346在ATRA存在和不存在下和NBT诱导活性的关系；图3显示的是ST1707在ATRA存在和不存在下和NBT诱导活性的关系；图4显示的是ST1422在ATRA存在和不存在下和O.D.的关系；图5显示的是ST1422在ATRA存在和不存在下和NBT诱导活性的关系；图6显示的是ST1974在ATRA存在和不存在下和NBT诱导活性的关系；图7显示的是ST1974在ATRA存在和不存在下和NBT诱导活性的关系；图8显示的是ST1961在ATRA存在和不存在下和NBT诱导活性的关系。
下面实施例进一步说明本发明。
实施例1使用下面的合成路线1制备实施例1的化合物，其中步骤A和B按照Casiraghi G.等，Tetrahedron，1992，48(27)，5619；Casiraghi G.等，J.Org.Chem.，1994，59(7)，1801；Cornia M.等，J.Org.Chem.，1991，56(7)，5466；Cornia M.等，TetrahedronAsymmetry，1997，8(17)，2905中描述的方法进行。
方案1
步骤A烷基镁盐的制备在搅拌及环境温度下，向含2摩尔烷基-MgBr的无水醚溶液(在无水溶剂(例如乙醚或四氢呋喃)中，由2摩尔烷基-Br和2摩尔Mg制备)中加入2摩尔吲哚，或吲哚衍生物或一种它的类似物。
在真空下除去溶剂，残余物直接用于下一个步骤。
步骤B双吲哚衍生物的制备将上一步骤得到的残余物溶于惰性溶剂，例如CH2Cl2或CHCl3或CHCl2CHCl2中。然后加入2或更多摩尔的路易斯酸(例如SnCl4、TiCl4、CeCl3、TiCl(OPr)3)和1摩尔乙醛。反应于-80℃到+80℃的温度范围内在搅拌下进行12-72小时。在该时期结束时，用弱碱性的中性H2O与NaHCO3、Na2CO3终止反应。
收集有机相，用少量H2O洗涤，经无水MgSO4干燥，过滤并浓缩至干。分离终产物并用常用的层析体系纯化。
实施例1/12，3-5，6-二-O-异亚丙基-1，1-二-7-氮杂吲哚-3-基-1-脱氧-D-甘露醇(ST1353)的制备向单独由7-氮杂吲哚和乙基溴化镁在无水乙醚中制备的7-氮杂吲哚基溴化镁890mg(4mmol)的无水CH2Cl2溶液中(50ml)中，加入SnCl4在无水CH2Cl2中的1M溶液4ml和260.3mg(1mmol)2，3-5，6-二-O-异亚丙基-二-α-D-甘露呋喃糖。
反应混合物在氮气氛围下加热回流24小时，然后通过加入50ml饱和NaHCO3水溶液终止。得到的混合物用乙醚(3×100ml)萃取并用少量H2O洗涤沉淀的萃取液，经无水MgSO4干燥，过滤并浓缩至干。
粗残余物在SiO2柱上用己烷∶乙酸乙酯从9∶1到6∶4的梯度作为洗脱液进行层析。分离纯产物，收率为8％。
C26H30N4O5(478)；熔点＝在210℃时分解；Rf＝0.17(CH2Cl2/CH3COCH3＝1∶1)；1H(CD3OD)δ＝8.15-8.08(2H，dd，CH芳族)；8.10-8.05(1H，d，CH芳族)；7.95-7.9(1H，d，CH芳族)；7.60(1H，s，CH芳族)；7.08(1H，s，CH芳族)；7.06-6.95(2H，m，CH芳族)；5.05-5.35(2H，2m，CH脂族)；4.42(1H，d，CH偕)；3.98-3.9(1H，m，CH脂族)；3.84-3.76(1H，m，CH脂族)；3.45-3.38(1H，m，CH脂族)；1.45；1.35；1.16；0.78(12H，4s，CH3)；MS(IS)M-＝477；UA计算值C65.26，H6.32，N11.70；实测值C65.47，H6.35，N12.01。
实施例1/24，4-二(7-氮杂吲哚-3-基)-1-丁醇(ST1866)的制备按照与实施例1/1描述的相同方式，由7-氮杂吲哚和2-甲氧基四氢呋喃制备该化合物。
C18H18N4O(306.37)；熔点＝在221℃时分解；Rf＝0.18(己烷/AcOEt)；1H(CD3OD)δ＝8.10(2H，t，CH)；7.80(7.8d，2H，d，CH)；7.30(2H，s，CH2)；6.90(2H，m，CH)；4.40(4.4t，1H，t，CH)；3.60(t，2H，t，CH2)；2.30(2H，m，CH2)；1.60(2H，m，CH2)；MS(IS)M-＝305；元素分析计算值C70.57，H5.92，N18.29；实测值C70.67，H5.6.00，N18.10。
实施例2按照以下方案2的合成制备实施例2的化合物。
方案2 双吲哚衍生物的制备在乙醇和水的溶液(例如，不同比例的水和乙醇或甲醇或异丙醇)中，溶解2摩尔的吲哚和1-8摩尔的丁醛。然后加入无机酸(例如HCl)、有机酸(例如CH3COOH)、路易斯酸(特别有效的是镧系元素的三氟磺酸盐，Ln(OTf)3，是可以回收和再用的)形式的催化剂。
溶液在20-80℃范围的温度下搅拌12-72小时。在此时间段结束时，用有机溶剂萃取醇。有机相用少量H2O或碱性H2O洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩至干。
分离终产物并通过常用的层析方法纯化。
实施例2/11，1-二吲哚-3-基-丁烷(ST1385)的制备282mg(2.4mmol)吲哚溶于10ml的CH3OH和5ml的H2O中；加入72mg(1mmol)丁醛和240mg三氟磺酸镝-(CF3SO3)3Dy-(0.393mmol)。
得到的溶液在室温下搅拌24小时。在此期间结束时，在真空下除去甲醇并将残余物用乙酸乙酯(3×50ml)萃取。将有机萃取液汇集，用少量水洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩至干。分离终产物并在SiO2柱上色谱纯化，用己烷∶乙醚作为洗脱液，梯度从9∶1到7∶3。
得到产物284mg，收率为84％。
C20H20N2(288)；熔点150-151℃；Rf＝0.3(乙醚/己烷1∶1)；1H(CD3CN)δ＝9.10(2H，宽-s，NH)；7.60-7.50(4H，d，H4′-H7′)；7.30(2H，宽-s，NH)；7.00-7.20(4H，t，CH芳族)；4.60(1H，t，CH)；2.30(2H，m，CH2)；1.50(2H，m，CH2)；1.10(3H，t，CH3)；MS(IS)M-＝287；元素分析计算值(0.77％，H2O)，C82.65，H7.02，N9.63；实测值C82.36，H7.17，N9.35。
实施例2/21，1-二(5-硝基吲哚-3-基)丁烷(ST1429)的制备使用实施例2/1中描述的方法从5-硝基吲哚和丁醛制备ST1429。
但是，反应在回流下加热48小时。
终产物在SiO2柱上色谱纯化，用己烷∶乙醚作为洗脱液，梯度从6∶4到2∶8。收率为84％。
C20H18N4O4(378)；Rf＝0.4(Et2O/己烷＝8∶2)；1H(CDCl3)δ＝10.63(2H，宽，NH)；8.0(2H，s，CH芳族)；7.58(2H，d，CH芳族)；7.18-6.86(4H，m，CH芳族)；4.17(1H，t，CH)；1.94-1.72(2H，q，CH)；1.02-0.8(2H，m，CH2)；0.55(3H，t，CH3)；
MS(IS)M-＝377；元素分析计算值C63.48，H4.79，N14.80；实测值C63.90，H4.75，N14.34。
实施例2/31，1-二(5-氟吲哚-3-基)丁烷(ST1438)的制备使用实施例2/2中描述的方法从5-氟吲哚和丁醛制备。但是反应在回流下加热24小时。分离终产物并在SiO2柱上色谱纯化，用己烷∶乙醚作为洗脱液，梯度从7∶3到4∶6。收率为45％。
C20H18F2N2(324)；熔点在＞200℃时分解；Rf＝0.36(己烷/AcOEt＝7∶3)；1H(CDCl3)δ＝8.95(2H，宽，NH)；7.35-7.02(6H，m，CH芳族)；6.92-6.8(2H，m，CH芳族)；4.33(1H，t，CH偕)；2.18(2H，q，CH2)；1.44-1.32(2H，m，CH2)；0.96(3H，t，CH3)；MS(IS)M-＝323；元素分析计算值C74.05，H5.59，N8.63，F11.71；实测值C73.78，H6.01，N8.29，F11.98。
实施例2/41，1-二(5-羟基吲哚-3-基)丁烷(ST1393)的制备使用实施例2/2中描述的方法从5-羟基吲哚和丁醛制备。分离终产物并在SiO2柱上色谱纯化，用己烷∶乙醚作为洗脱液，梯度7∶3。收率为65％。
C20H20N2O2(320)；熔点在＞200℃时分解；Rf＝0.3(乙醚∶己烷2∶8)；1H(DMSO)δ＝8.40(2H，s，NH)；7.10-7.00(2H，d，CH芳族)；6.98-6.90(2H，m，CH芳族)；6.80-6.70(2H，m CH芳族)；6.60-6.40(2H，m，CH芳族)；4.20-4.00(1H，t，CH)；2.10-2.0(2H，m，CH2)；1.40-1.20(2H，m，CH2)；1.00-0.80(3H，t，CH3)；MS(IS)M-＝319；元素分析计算值C74.97，H6.29，N8.74；实测值C74.57，H6.00，N8.41。
实施例2/51，1-二(5，6-亚甲基二氧吲哚-3-基)丁烷(ST1478)的制备使用实施例2/2中描述的方法从5，6-亚甲基二氧吲哚和丁醛制备ST1478。终产物在SiO2柱上色谱纯化，用梯度为7∶3的己烷∶乙酸乙酯作为洗脱液。收率为38％。
C22H20N2O4(376)；熔点在＞200℃时分解；Rf＝0.58(己烷/AcOEt＝6∶4)；1H(CD3CN)δ＝9.10-8.90(2H，宽-s，NH)；7.20(1H，s，CH芳族)；7.00(2H，d，CH芳族)；6.80-6.90(2H，d，CH芳族)；6.30(1H，s，CH)；5.90(4H，s，CH2)；4.30(1H，t，CH)；2.30(2H，m，CH2)；1.50(2H，m，CH3)；1.10(3H，t，H4)；MS(IS)M-＝375；元素分析计算值C66.65，H6.10，N7.06；实测值C65.98，H5.90，N6.96。
实施例2/61，1-二(吲哚-3-基)环己基甲烷(ST1487)的制备使用实施例2/2中描述的方法从吲哚和环己烷羧基乙醛制备ST1487。
但是反应在回流下加热48小时。
终产物在SiO2柱上色谱纯化，用7∶3的己烷/醚作为洗脱液。收率为75％。
C23H24N2(328)；熔点在＞210℃时分解；Rf＝0.20(己烷/Et2O＝6∶4)；1H(CDCl3)δ＝7.84(2H，宽，NH)；7.63(2H，d，CH芳族)；7.25(2H，d，CH芳族)；7.18-6.90(4H，m，CH芳族)；4.25(1H，d，CH)；2.35-2.15(1H，m，CH)；1.90-0.85(10H，mm，CH2)；MS(IS)M-＝327；元素分析计算值C84.10，H7.36，N8.52；实测值C83.81，H7.43，N8.30。
实施例2/71，1-二(7-氮杂吲哚-3-基)丁烷(ST1436)的制备使用实施例2/2中描述的方法从7-氮杂吲哚和丁醛制备ST1436。但是反应在回流下加热48小时。分离终产物并在二氧化硅柱上色谱纯化，使用梯度从9∶1到4∶6的CH2Cl2∶CH3COCH3洗脱。收率为15％。
C18H18N4(291)；熔点在＞200℃时分解；Rf＝0.26(CH2Cl2/CH3COCH3＝6∶4)；1H(DMSO-D6)δ＝11.32(2H，宽，NH)；8.12(2H，d，CH芳族)；7.85(2H，d，CH芳族)；7.40(2H，s，CH芳族)；6.98-6.82(2H，m，CH芳族)；4.35(1H，t，CH)；2.15(2H，q，CH2)；1.35-1，05(2H，m，CH2)；0.88(3H，t，CH3脂族)；MS(IS)M-＝290；元素分析计算值C74.95，H6.24，N19.29；实测值C74.52，H6.38，N18.98。
实施例2/81，3-二羟基-2，2-(二吲哚-3-基)丙烷(ST136)的制备使用实施例2/4描述的方法，用二羟基丙酮取代醛制备化合物。收率60％。
C19H18N2O2(306.3)；熔点在223℃时分解；(α)D＝23.8°(0.4％CHCl3)；Rf＝0.77(乙醚)；1H(CD3OD)δ＝7.30-7.20(4H，m，CH芳族)；7.70-7.60(2H，m，CH芳族)；7.30-7.05(4H，m，CH芳族)；7.04-6.96(2H，d，CH芳族)；6.90-6.80(2H，m，CH)；6.62-6.58(2H，m，CH芳族)；4.40(4H，s，CH2)；MS(IS)M-(-H2O)＝287；元素分析计算值C74.48，H5.92，N9.14，实测值C74.08，H5.65，N8.97。
实施例2/91，1-二吲哚-3-基四癸烷(ST1369)的制备使用实施例2/4中描述的方法，将吲哚与四癸烷乙醛反应制备化合物。收率80％。
C30H40N2(428.6)；熔点在50℃软化；Rf＝0.28(己烷/AcOEt85∶15)；1H(CDCl3)δ＝7.80(2H，s，NH)；7.60-7.44(2H，d，CH芳族)；7.30-7.20(2H，d，CH芳族)；7.10-7.00(2H，m，CH芳族)；7.00-6.90(4H，m，CH芳族)；4.42-3.938(1H，t，CH)；2.20-2.00(2H，m，CH2)；1.40-1.00(22H，m，CH2)；0.90-0.70(3H，t，CH3)；MS(IS)M+(+Na)＝451；元素分析计算值C84.05，H9.40，N6.53；实测值C83.70，H9.77，N6.17。
实施例2/101，1-二吲哚-3-基-1-脱氧-D-葡萄糖(ST1350)的制备使用实施例2/4中描述的方法，将吲哚与葡萄糖反应制备化合物。收率60％。
C22H24N2O5(396.45)；熔点在60℃时分解；(α)Dc＝+66.3°(0.5％CH3OH)；Rf＝0.(CHCl3/CH3OH 7∶3)；1H(CD3OD)δ＝7.70(1H，d，CH芳族)；7.60(1H，d，CH芳族)；7.40(1H，s，CH芳族)；7.30-7.20(2H，m，CH芳族)；7.10(1H，s，CH芳族)；7.10-6.8(4H，m，CH芳族)；5.0(1H，d，CH)；4.70-4.60(1H，dd，CH)；3.92-3.85(1H，m，CH)；3.803.60(3H，m，CH2OH和CH)；3.58-3.40(1H，m，CH)；MS(IS)M-＝395；元素分析计算值(2.2％H2O)C65.18，H6.20，N6.87；实测值C65.10，H6.23，N6.40。
实施例2/11(R，S)-1，1-(吲哚-2-基，吲哚-3-基)丁烷(ST1625)的制备282mg吲哚(2.4mmol)溶于10ml的CH3OH和5ml的1N HCl中，然后加入72mg(1mmol)丁醛。
得到的溶液在80℃加热16小时。在此期间结束时，在真空下除去甲醇，并将残余物用CH2Cl2萃取。将有机萃取液汇集，用水洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩至干。分离终产物和在SiO2柱上色谱纯化，用己烷∶乙醚作为洗脱液，梯度从9∶1到7∶3。收率为62％。
C20H20N2(288)；熔点在＞250℃时分解；Rf＝0.25(乙醚/己烷1∶1)；1H(CDCl3)δ＝8.10(1H，宽-s，NH)；7.80(1H，宽-s，NH)；7.60-7.50(4H，d，CH芳族)；7.30(1H，宽-s，NH)；7.20-7.00(4H，t，CH芳族)；6.50(1H，宽-s，CH)；4.60(1H，t，CH)；2.30(2H，m，CH2)；1.50(2H，m，CH2)；1.10(3H，t，CH3)；MS(IS)M-＝287；元素分析计算值C83.29，H6.99，N9.71；实测值C82.77，H6.90，N9.41。
实施例2/12(R，S)-5-羟基-1，1-(吲哚-2-基，吲哚-3-基)戊烷(ST1345)的制备使用实施例2/11中描述的方法，将吲哚与5-羟基戊醛反应制备化合物。收率40％。
C21H22N2O(31.42)；熔点在200℃时分解；Rf＝0.5(己烷/i-PrOH97.5∶2.5)；1H(CDCl3)δ＝8.00(1H，s，NH)；7.8(1H，s，NH)；7.54-7.48(1H，m，CH芳族)；7.40-7.36(1H，d，CH芳族)；7.30-7.20(1H，d，CH芳族)；7.1-6.86(6H，m，CH芳族)；6.40(1H，s，CH芳族)；4.30(1H，t，CH)；3.5(2H，t，CH2)；2.20-2.00(2H，m，CH2)；1.60-1.40(2H，m，CH2)；1.40-1.20(3H，m，CH2eOH)；MS(IS)M-＝317；元素分析计算值C79.21，H6.96，N8.79；实测值C78.64；H7.15，N8.45。
实施例2/13R，S-5-羟基-1，1-(5，6-亚甲基二氧基吲哚-2-基，5，6-亚甲基二氧基吲哚-3-基)戊烷(ST1423)的制备使用实施例2/11中描述的方法，从吲哚的5，6-亚甲基二氧基衍生物制备化合物。收率20％。
C23H22N2O5(406)；熔点在220℃时分解；Rf＝0.63(己烷/i-PrOH＝97.52.5)；1H(CD3CN)δ＝9.1-8.90(2H，宽-s，NH)；7.20(1H，s，CH芳族)；7.00(2H，d，CH芳族)；6.80-6.90(2H，d，CH芳族)；6.30(1H，s，CH芳族)；5.90(4H，s，CH2)；4.30(1H，t，H1)；3.50(2H，m，H5)；2.20(2H，m，CH2)；1.40-1.60(2H，m，CH2)；MS(IS)M+＝407；元素分析计算值C67.98，H5.42，N6.89；实测值C67.90；H5.50，N6.82。
实施例2/14[二(2-吡咯基)苯基]甲烷(ST1430)的制备使用实施例2/4中描述的方法，将吡咯衍生物与苯甲醛反应制备化合物。收率40％。
C15H14N2(222)；Rf＝0.25(己烷/AcOEt＝8∶2)；熔点在200℃时分解；1H(CDCl3)δ＝7.90(2H，宽-s，NH)；7.30(5H，m，CH芳族)；6.70(2H，m CH芳族)；6.20(2H，s CH芳族)；5.90(2H，s，CH芳族)；5.50(IH，s，CH)；MS(IS)M-＝221；元素分析计算值C67.56，H6.30，N12.61；实测值C67.90；H6.50，N12.45。
实施例2/15二(5-乙氧基羰基吡咯-2-基)苯基甲烷(ST1431)的制备使用实施例2/14中描述的方法，将吡咯衍生物与苯甲醛反应制备化合物。收率30％。
C21H22N2O4(366)；熔点在200℃时分解；Rf＝0.25(己烷/AcOEt＝7∶3)；1H(CDCl3)δ＝9.40(2H，宽-s，NH)；7.30(5H，m，CH芳族)；5.90-6.80(4H，t，CH芳族)；5.50(1H，s，CH)；4.20(4H，q，CH2)；1.30(6H，t，CH3)；MS(IS)M-＝365；元素分析计算值C57.37，H6.01，N7.65；实测值C57.00，H6.50，N7.52。
实施例2/161，1-二(2-吡咯基)丁烷(ST1432)的制备使用实施例2/4中描述的方法，将吡咯衍生物与丁醛反应制备化合物。收率45％。
C12H16N2(188)；熔点在200℃时分解；Rf＝0.32(己烷/AcOEt/NEt3＝80∶19∶1)；1H(CDCl3)δ＝7.40(2H，宽-s，NH)；6.60(2H，s，CH芳族)；6.20(2H，s，CH芳族)；6.10(2H，s，CH芳族)；4.00(1H，t，CH)；2.00(4H，q，CH2)；1.30(3H，m，CH3)；MS(IS)M-＝187；元素分析计算值C76.59，H8.51，N14.89；实测值C76.44，H8.50，N14.38。
实施例2/174，4-二(1H-吲哚基)丁酸(ST1961)的制备282mg吲哚(2.4mmol)溶于10ml的CH3OH和5ml的H2O中，然后加入102mg的半琥珀醛(1mmol)和240mg的三氟磺酸镝-(CF3SO3)3Dy-(0.393mmol)。得到的溶液在35℃搅拌24小时。在此期间结束时，在真空下除去甲醇和用乙酸乙酯(3×50ml)萃取残余物。将有机萃取液汇集，用少量水洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩至干。分离终产物和在SiO2柱上色谱纯化，用己烷∶异丙醇作为洗脱液，梯度从9∶1到8∶2。
得到108mg产物，收率为34％。
C20H18N2O2(318.37)；熔点在＞200℃时分解；Rf＝0.31(己烷/异丙醇8∶2)；1H(DMSO-D6)δ＝9.18(2H，宽-s，NH)；7.55(2H，d，CH芳族)；7.30(2H，t，CH芳族)；7.14-6.82(6H，m，CH芳族)；5.40(1H，宽-s，COOH)；4.45(1H，t，CH)；2.58-2.39(2H，m，CH2)；2.39-2.25(2H，m，CH2)；MS(IS)M-＝317；元素分析计算值C75.45；H5.70，N8.80；实测值C75.12，H5.49，N8.56。
实施例2/184-羟基-1，1-二(5，6-亚甲基二氧基吲哚-3-基)丁烷(ST1730)的制备使用实施例2/4中描述的方法，从5，6-亚甲基二氧基吲哚和2-甲氧基四氢呋喃制备化合物。收率35％。
C22H20N2O5(392.41)；熔点在＞240℃时分解；Rf＝0.44(己烷/iPrOH 75/25)；1H(CD3CN)δ＝9.00(2H，宽，NH)；7.20(2H，s，CH芳族)；6.90(4H，m，CH芳族)；6.00(4H，m，CH2)；4.30(1H，t，CH)；3.60(2H，q，CH2)；2.30(2H，m，CH2)；1.60(2H，m，CH2)；MS(IS)M+＝393；元素分析计算值C67.34，H5.14，N7.14；实测值C67.30，H5.20，N7.100。
实施例2/19(R，S)-4-羟基-1，1-二(5，6-亚甲基二氧基吲哚-2-基，5，6-亚甲基二氧基吲哚-3-基)丁烷(ST1731)的制备使用实施例2/11中描述的方法从吲哚的5，6-亚甲基二氧基吲哚制备化合物。收率15％。
C22H20N2O5(392.41)；熔点在205℃时分解；Rf＝0.41(己烷/iPrOH＝75/25)；1H(CD3CN)δ＝9.10(1H，宽，NH)；8.90(1H，宽，NH)；7.20(1H，s，CH芳族)；7.00(2H，s，CH芳族)；6.90-6.80(2H，m，CH～芳族)；6.40(1H，s，CH芳族)；6.00(4H，m，CH2)；4.30(1H，t，CH)；3.70(2H，m，CH2)；2.20(2H，m，CH2)；1.60(2H，m，CH2)；MS(IS)M-＝391；元素分析计算值C67.34，H5.14，N7.14；实测值C67.14，H5.36，N7.10。
实施例2/201，1-二(吲哚-3-基)-4-羟基丁烷(ST1707)的制备使用实施例2/4中描述的方法，从吲哚和2-甲氧基四氢呋喃制备化合物。
C20H20N2O(304.39)；熔点110-115℃；Rf＝0.26(己烷/AcOEt＝1/1)；1H(CD3CN)δ＝10.70(2H，宽，NH)；7.50(2H，d，CH芳族)；7.20(4H，m，CH芳族)；6.90(2H，m，CH芳族)；6.80(2H，m，CH芳族)；4.30(1H，t，CH)；3.40(2H，m，CH2)；2.20(2H，m，CH2)；1.40(2H，m，CH2)；MS(IS)M-＝303；元素分析计算值C78.92，H6.62，N9.20；实测值C78.88，H6.70，N9.10。
实施例2/214-羟基-1，1-二(5，6-亚甲基二氧基吲哚-3-基)丁烷(ST1750)的制备从实施例2/20的反应混合物中分离化合物。
C22H20N2O5(392.41)；熔点在205℃时分解；Rf＝0.60(己烷/iPrOH＝75/25)；1H(CD3CN)δ＝9.10(2H，宽，NH)；7.00-6.90(4H，m，CH芳族)；6.40(2H，s，CH芳族)；6.00(4H，s，CH2)；4.30(1H，t，CH)；3.60(2H q，CH2)；2.30(2H，m，CH2)；1.60(2H，m，CH2)；MS(IS)M-＝391；元素分析计算值C67.34，H5.14，N7.14；实测值C67.26，H5.35，N7.10。
实施例2/221，1-二(5-羟基吲哚-3-基)-5-羟基戊烷的制备如实施例2/4，从5-羟基吲哚制备化合物。
C21H22N2O3(350.42)；熔点在＞200℃时分解；Rf＝0.58(AcOEt)；1H(CD3OD)δ＝7.20-7.00(2H，d，CH芳族)；7.00-6.90(2H，m，CH芳族)；6.90-680(2H，m，CH芳族)；6.70-6.50(2H，m，CH芳族)；4.30-4.20(1H，t，CH)；3.60-3.40(2H，t，CH2)；2.302.05(2H，m，CH2)；1.70-1.50(2H，m，CH2)；1.50-1.40(2H，m，CH2)；MS(IS)M-＝349；元素分析计算值C71.97，H6.32，7.99；实测值C71.00，H6.46，N7.50。
实施例3使用下面方案3的合成制备实施例3的化合物，其中步骤A按照Dondoni G.等，Tetrahedron Lett.，1992，33(29)，4221；Dondoni G.等，Synth.Commun.，1994，24(18)，2537描述的方法进行。
方案3 步骤A硝酮衍生物的制备步骤B双吲哚衍生物的制备步骤A的硝酮衍生物与化学计量量或过量的吲哚一起溶于无水溶剂(例如CH2Cl2、AcOEt、THF、二烷)中。室温下向由此得到的溶液中加入有机或无机酸(例如HCl、乙酸、三氟乙酸、SnCl4、氯化三甲基硅烷)。反应随着吲哚或吲哚衍生物的消失而进行，加入有机溶剂并与碱性水溶液一起剧烈摇动以除去溶液的酸性。在用脱水剂干燥后，浓缩有机溶液。固体残余物在硅胶柱上层析分离并纯化双吲哚衍生物。
实施例3/1(2S)-2，3-O-异亚丙基-2，3-二羟基-1，1-二吲哚-3-基丙烷(ST1330)的制备2，3-O-异亚丙基甘油醛(1.8g，14mmol)(由D-甘露醇的二异亚丙基衍生物新鲜制备)和N-苄基羟胺(1.23g，10mmol)溶于烧瓶中的10ml的CH2Cl2中。在溶液中悬浮10g的Na2SO4并在室温搅拌16小时。在反应结束时，过滤溶液并浓缩直至得到固体，然后用己烷结晶。得到白色固体状硝酮衍生物(2.1g，收率89％)。
将部分这种固体(1.2g，5.11mmol)放置于烧瓶中，溶于无水CH2Cl2(30ml)和吲哚(1.5g，12.8mmol)中，在室温下向得到的溶液中滴加20ml的CH2Cl2。
在室温搅拌16小时后，处理反应混合物用CH2Cl2(70ml)将其溶解并与饱和NaHCO3溶液一起剧烈摇动。在漏斗中分离后，有机相浓缩至干。得到的固体在硅胶柱上层析(乙醚∶己烷1∶1)，得到(2S)-2，3-O-异亚丙基-2，3-二羟基-1，1-二吲哚基-3-基丙烷(1.59g，收率90％)。
C22H22N2O2(346.4)；熔点在100-110℃时分解；(α)D＝18.3°(0.5％CHCl3)；Rf＝0.5(乙醚/己烷＝1∶1)；1H(CDCl3)δ＝8.00(2H，s，NH)；7.60-7.44(2H，dd，CH芳族)；7.26-7.24(2H，dd，CH芳族)；7.20-6.86(6H，m，CH芳族)；5.00-4.84(1H，m CH)；4.64(1H，d，CH)；4.00-3.80(2H，dd，CH)；1.40(6H，s，CH3)；MS(IS)M-＝345；元素分析计算值(4％H2O，2.3％AcOEt)C74.34，H6.50，N7.70；实测值C74.66，H6.84，N7.26。
实施例4使用下面方案4的合成制备实施例4的化合物。
方案4
A＝NoS二苯并咪唑和二苯并噻唑的制备在装有良好搅拌器的烧瓶中加入脱水剂(例如，多磷酸或其酯、亚硫酰氯、磷酸酐)(1.5-最多20mol)、丙二酸酯衍生物(1-2mol)和1，2-苯二胺或其衍生物(1-4mol)，得到二苯并咪唑，或加入2-硫苯胺或其衍生物，得到二苯并噻唑。在完成所有的加入后，在无水环境中和脱氧氛围下，将混合物非常缓慢地加热到160-200℃并在此温度保持20-30小时。在此期间结束时，在冷却的混合物中加入碱性水溶液和与水不混溶的有机溶剂(例如二氯甲烷、乙酸乙酯、乙醚、四氢呋喃)。溶解完成后，从水相中分离有机相并浓缩，得到半固体粗反应产物。
通过在硅胶柱上的直接相层析的方法分离和纯化所有终产物。
实施例4/1苯基二苯并噻唑-2-基甲烷(ST1433)的制备在无水和氩气氛围下，将6g的PPA(多磷酸)，2.54ml的2-氨基苯硫酚(工业90％)(23mmol)和2.60ml(11mmol)的苯基丙二酸二乙酯加入烧瓶中。混合物缓慢加热到140-145℃，然后保持在该温度约16小时或直至胺消失。
然后通过加入乙酸乙酯(300ml)和饱和碳酸氢钠溶液(200ml)进行反应。从水相中分离有机相并真空浓缩，直至所有溶剂完全除去。得到的固体在硅胶色谱柱上纯化(流动相己烷∶二烷，梯度最高8∶2)，得到500mg终产物(收率12％)。
C21H14N2S2(358.5)；熔点178℃；Rf＝0.41(己烷/二烷8∶2)；1H(DMSO)δ＝7.80-7.70(3H，m，CH芳族)；7.60-7.40(5H，m，CH芳族)；7.40-7.20(3H，m，CH芳族)；7.20-7.00(3H，m，CH芳族，CH)。
MS(IS)M-(-H2O)＝359；元素分析计算值C70.36，H3.93，N7.81；实测值C70.10，H3.85，N7.49。
实施例4/21，1-二(苯并咪唑-2-基)丁烷(ST1435)的制备在无水的氩气氛围下，将6g的PPA与1,165g(11mmol)的1，2-苯二胺和1,153ml(5.5mmol)的丙基丙二酸二乙酯放置于装有搅拌器的烧瓶中。在完成加入后，反应混合物缓慢加热到150-155℃，然后保持在这个温度约16小时。在此期间结束时，在冷却后，向反应混合物中加入饱和碳酸氢钠溶液(100ml)和乙酸乙酯(150ml)。粗产物在快速色谱柱(流动相∶己烷∶THF 8∶2)纯化后，得到需要的产物。收率10％。
C18H18N4(290.3)；熔点在260℃时分解；Rf＝0.38(AcOEt/MeOH95∶0.5)；1H(DMSO+D2O)δ＝7.50-7.40(4H，m，CH芳族)；7.207.00(4H，m，CH芳族)；4.60-4.50(1H，t，CH)；2-40-2.20(2H，m，CH2)；1.40-1.20(2H，m，CH2)；1.00-0.90(3H，t，CH3)；MS(IS)M-＝289；元素分析计算值C74.45，H6.24，N19.29；实测值C74.21，H5.98，N18.90。
实施例5使用下面方案5中的合成制备实施例5的化合物方案5 N-氧代二苯并咪唑和S-氧代二苯并噻唑衍生物的制备在装有良好搅拌器的烧瓶中加入脱水剂(例如，多磷酸或其酯、亚硫酰氯、磷酸酐)(1.5-最多20mol)、丙二酸酯衍生物(1-2mol)和1，2-苯二胺或其衍生物(1-4mol)，得到二苯并咪唑，或加入2-硫苯胺或其衍生物，得到二苯并噻唑。在完成这些加入后，将混合物非常缓慢地加热到160-200℃并在此温度保持20-30小时。
在此期间结束时，在冷却的混合物中加入碱性水溶液和与水不混溶的有机溶剂(例如，二氯甲烷、乙酸乙酯、乙醚、四氢呋喃)。在溶解完成后，从水相中分离有机相并浓缩，得到半固体粗反应产物。
通过在硅胶柱上的直接相层析的方法分离和纯化所有终产物。
实施例5/1(苯并噻唑-2-基，苯并噻唑-3-氧化物-2-基)苯基甲烷(ST1424)的制备将6g的PPA(多磷酸)，2.54ml的2-氨基苯硫酚(工业90％)(23mmol)和2.60ml(11mmol)的苯基丙二酸二乙酯加入装有良好搅拌器的烧瓶中。混合物缓慢加热到140-160℃，然后保持在这个温度约16小时。
在此期间结束时，通过加入乙酸乙酯(300ml)和在剧烈摇动下加入饱和碳酸氢钠溶液(200ml)进行反应。从水相中分离有机相并真空浓缩。得到的固体在硅胶色谱柱(己烷∶二烷8∶2)上进行第一次纯化，然后在反相制备HPLC柱(Hibar柱，250×25mm，RP-18，流速10ml/min，RT，28min，UV检测器360nm)上第二次纯化。得到(苯并噻唑-2-基，苯并噻唑-3-氧化物-2-基)苯基甲烷，收率15％。
C21H14N2OS2(374.5)；熔点152℃；Rf＝0.33(己烷/二烷8∶2)；1H(DMSO)δ＝8.5(1H，s，NH)；8.14-8.08(2H，d，CH芳族)；8.04-7.98(2H，d，CH芳族)；7.80-7.68(2H，d，CH芳族)；7.60-7.40(7H，m，CH芳族)；MS(IS)M+(-H2O)＝357；元素分析计算值C67.38，H3.70，N7.47；实测值C67.39，H3.80，N7.39。
实施例6使用下面方案6中的合成制备实施例6的化合物，其中步骤A按照Diez-Barra E.等，Synth.Commun.，1993，23(13)，1783中描述的方法进行；和步骤B按照H.Lasta D.J.，Tetrahedron Lett.，1990，31(41)，5833中描述的方法进行。
方案6
步骤A咪唑的N-烷基衍生物的制备步骤BN-烷基咪唑的N-烷基-2-链烷酰基或N-烷基-2-芳酰基衍生物的制备步骤C双咪唑衍生物的制备在装有搅拌器的烧瓶中，于无水环境和惰性氛围下，将1摩尔N-烷基咪唑(根据Diez-Barra E.等，Synth.Commun.，1993，23(13)，1783中描述的方法制备)溶于无水有机溶剂(例如，己烷、乙醚、二烷或四氢呋喃)中。于低温下，向该溶液中(从-10到-70℃)加入摩尔量或微过量的碱性试剂的溶液或悬浮液(例如丁基锂、氢化钠、二烷基胺锂、氨基钠、叔丁基锂)。在加入结束后，在使混合物进一步反应一段时间后(从10分钟到1小时)，滴加相对于N-烷基咪唑化学计量或过量(1到2mmol)的N-烷基咪唑的酮衍生物的溶液(按照H.Lasta D.J.，TetrahedronLett.，1990，31(41)，5833中描述的方法制备)。
在初始温度下再进行30分钟后，反应混合物升温至室温(25-30℃)并进行搅拌，直至N-烷基咪唑完全消失。向反应混合物中加入有机溶剂和氯化钠的饱和水溶液。从水相分离出有机溶剂后，后者经硫酸钠干燥并浓缩。得到的固体进行硅胶层析或结晶，得到所需产物。
实施例6/1苯基、羟基、二(N，N-二苄基咪唑-2-基)甲烷(ST1440)的制备将10ml无水THF中的0.8g(5mmol)N-苄基咪唑(按照Diez-Barra E.等，Synth.Commun.，1993，23(13)，1783中描述的方法制备)冷却到-70℃。在达到该温度时，加入3.5ml(5.6mmol)正丁基锂在己烷(5.6mmol)中的1.6M溶液。随后滴加预先溶于THF(1.5ml)中的1.47g(5.6mmol)N-苄基-2-苯甲酰基咪唑(按照H.Lasta D.J.，Tetrahedron Lett.，1990，31(41)，5833中描述的方法制备)。在完成加入后，反应混合物升温到25℃并在搅拌下持续16小时。在此期间结束时，溶液用200ml的CH2Cl2稀释并与NaCl(100ml)饱和溶液一起剧烈摇动。从水相中分离的有机相用Na2SO4干燥并浓缩，得到的粗产物用乙酸乙酯结晶纯化，得到苯基、羟基、二(N，N-二苄基咪唑-2-基)甲烷，收率71.4％。
C27H24N4O(420.51)；熔点在160℃时分解；Rf＝0.72(AcOEt/NH398∶0.2)；1H(CDCl3)δ＝7.30-7.10(12H，m，CH芳族，OH)；7.00(2H，s，CH酰亚胺)；6.98-6.82(4H，m，CH芳族)；6.80(2H，s，CH酰亚胺)；5.408(4H，d，CH2)；MS(IS)M+＝421；元素分析计算值C77.11，H5.75，N13.32；实测值C77.07，H5.44，N13.45。
实施例7使用下面方案7中的合成制备实施例7的化合物，其中步骤A按照，Cornia M.等，Tetrahedronasymmetry 1997，8(17)，2905；Casiraghi G.等，Tetrahedron 1992，48(27)，5619中描述的方法，以及在实施例1步骤A中描述的方法进行。
方案7
步骤A吲哚盐及其衍生物的制备步骤B缩合反应制备双吲哚和双吲哚衍生物步骤A中的盐(1摩尔)溶于无水惰性有机溶剂(例如，氢氯化物溶剂、二烷、THF、乙醚)中并倾入碳酰氯(与有机溶剂，如CH2Cl2、甲苯、THF、乙醚)的冷溶液中(从-15到-50℃)。1小时后，将温度升高(0-50℃)并将溶液保持在该温度10-24小时。在此期间结束时，过滤反应混合物并浓缩液体。这样得到的固体在硅胶色谱柱上进行纯化，得到缩合产物。
实施例7/11，1-二吲哚-3-基氧代甲烷(ST1463)的制备将吲哚的镁盐(2.43g，11mmol)(按照Casiraghi G.等，Tetrahedron1992，48(27)，5619中描述的方法得到)溶于12ml的CH2Cl2中，然后倾入碳酰氯的甲苯(6.2ml)和CH2Cl2(10ml)的20％溶液中。反应混合物置于+5℃16小时。通过过滤从固体中分离有机相并浓缩至干。经过使用乙酸乙酯∶己烷6∶4作为流动相的硅胶柱纯化得到的固体后，得到黄色固体状二吲哚氧代甲烷。收率90％。
C17H12N2O(260.29)；熔点在300℃时分解；Rf＝0.54(己烷/乙酸乙酯4∶6)；1H(DMSO-D6)δ＝8.36-8.24(2H，d，CH芳族)；8.20(2H，s，CH吲哚)；7.90(2H，宽，NH)；7.60-7.50(2H，d，CH芳族)；7.30-7.10(4H，m，CH芳族)；MS(IS)M-＝259；元素分析计算值C77.84，H5.38，N10.68；实测值C77.79，H5.02，N10.62。
实施例8按照Diez-Barra E.等，Synth.Commun.，1993，23(13)，1783中描述的方法，使用下面方案8中的合成制备实施例8的化合物。
方案8 实施例8/1二(N-苄基吲哚-3-基)氧代甲烷(ST1473)的制备按照Diez-Barra E.等，Synth.Commun.，1993，23(13)，1783中描述的方法，从实施例7/1所述方法制备的产物开始制备化合物。
得到黄色固体。收率90％。
C31H24N2O(440.54)；熔点在305℃时分解；Rf＝0.52(己烷/乙酸乙酯7∶3)；1H(DMSO-D6)δ＝8.50-8.48(2H，m，CH芳族)；8.40-8.30(2H，m，CH芳族)；7.60-7.50(2H，m，CH芳族)；7.42-7.20(14H，m，CH芳族，吲哚)；5.62-5.58(4H，m，CH2)；MS(IS)M+＝441；元素分析计算值C84.51，H5.49，N6.35；实测值C84.19，H5.98，N6.29。
实施例9按照下面方案9中的合成制备实施例9的化合物。
方案9
氧代甲烷衍生物的烷基化和烷基化/脱水1摩尔氧代甲烷衍生物(实施例8/1中描述的方法制备)溶于无水溶剂(例如THF、二烷、乙醚)中，在低温下(-50到+10℃)加入相对于底物过量(2到10mol)的希望制备的衍生物的烷基盐(例如，锂盐、镁盐、铜盐、盐)。在完成加入后，将反应混合物的温度升高到室温(22到30℃)。在反应完成时，通过真空蒸发溶剂的方法浓缩溶液，并将由此得到的半固体用CH2Cl2稀释。
用水洗涤溶液和然后用NaCl饱和溶液洗涤。再次浓缩有机相并将得到的固体纯化，得到需要的产物。
实施例9/11，1-二(N-苄基吲哚-3-基)-1-丁烯和(N-苄基吲哚-3-基，N-苄基-2-丙基吲哚-3-基)氧代甲烷(ST1492和ST1494)的制备将实施例8/1中描述的化合物(1g，2.3mmol)溶于无水THF(13ml)中，并将得到的溶液冷却到+5℃。加入7ml乙醚中的氯化丙基镁的2M溶液。1小时后，加入100ml的CH2Cl2和50ml水。在浓缩至干前用100ml的NaCl饱和溶液洗涤有机相。这样得到的粗反应产物进行硅胶层析，用己烷∶乙酸乙酯的8∶2混合物洗脱。采用这种方式，从粗反应产物中分离终产物并纯化(两种化合物的收率10％)。
(ST1492)C34H30N2(466.63)；熔点在240℃时分解；Rf＝0.31(己烷/乙酸乙酯9∶1)；
1H(DMSO-D6)δ＝7.60-6.80(20H，m，CH芳族，吲哚)；6.20-6.00(1H，t，CH)；5.42(2H，s，CH2)；5.30(2H，s，CH2)；2.24-2.18(2H，q，CH2)；1.10-1.00(3H，t，CH3)；MS(IS)M-＝465；元素分析计算值C87.51，H6.48，N6.00；实测值C87.74，H6.48，N5.79；(ST1494)C34H30N2O(482.63)；熔点在325℃时分解；Rf＝0.68(己烷/乙酸乙酯7∶3)；1H(DMSO-D6)δ＝8.20-8.10(1H，m，CH芳族，吲哚)；8.00(1H，s，CH)；7.70-6.60(1H，m，CH)；7.40-7.00(16H，m，芳族，吲哚)；5.60(2H，s，CH2)；5.50(2H，s，CH2)；3.00-2.90(2H，q，CH2)；1.60-1.40(2H，m，CH2)；0.90-0.80(3H，t，CH3)；MS(IS)M-＝465；元素分析计算值C84.61，H6.26，N5.80；实测值C84.54，H6.38，N5.69。
实施例10使用下面方案10中的合成制备实施例10的化合物。
方案10 实施例10/1苯基二(1-N-苄基咪唑-2-基)甲烷(ST1447)的制备将按照实施例6/1中描述的方法制备的化合物0.84g(2mmol)和2g石墨一起溶于12ml的HCOOH中，得到的混合物在回流下加热24小时。在此期间结束时，溶液冷却并用50ml的MeOH稀释，在celite上过滤，然后浓缩至干。从粗反应产物中通过硅胶层析(洗脱溶剂己烷∶乙酸乙酯7∶3)分离终产物。收率40％。
C27H24N4(404.51)；熔点在＞200℃时分解；Rf＝0.66(己烷/乙酸乙酯7∶3)；1H(DMSO-D6)δ＝8.30-8.20(4H，m，CH芳族)；7.80-7.70(2H，m，CH芳族)；7.68-7.50(4H，m，CH芳族和酰亚胺)；7.40-7.20(10H，m，CH芳族，酰亚胺和CH)；5.70-5.60(4H，m，CH2)；MS(IS)M-＝403；元素分析计算值C80.16，H5.98，N13.85；实测值C80.10，H5.89，N13.54。
实施例11按照Diez-Barra E.等，Synth.Commun.；1993，23(13)，1783中描述的方法制备实施例11的化合物。
实施例11/11，1-二(N-苄基吲哚-3-基)丁烷(ST1442)的制备ST1385 1，1-二吲哚-3-基丁烷，290mg(1mmol)与四丁基化钾(280mg)和溴化四丁基铵(20mg)完全混合并掺杂。由此得到的混合物在室温下超声搅拌。随后于0℃加入640mg苄基氯(5mmol)和在室温继续超声搅拌2小时。在此期间结束时，用H2O/CHCl3处理反应混合物；分离氯仿相，用少量水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩至干。分离终产物并经硅胶色谱纯化，用己烷∶乙酸乙酯95∶5洗脱。得到产物351mg，收率78％。
C34H32N2(468)；熔点在＞210℃时分解；Rf＝0.53(己烷/乙醚＝8/2)；1H(CDCl3)δ＝7.55(2H，d，CH芳族)；7.16-7.05(10H，mm，CH芳族)；7.04-6.88(12H，mm，CH芳族)；5.22(4H，s，CH2芳族)；4.42(1H，t，CH)；2.13(2H，q，CH2)；1.40-1.23(2H，m，CH2)；0.98(3H，t，CH3)；MS(IS)M-＝467；元素分析计算值C87.13，H6.88，N5.17；实测值C86.83，H7.04，N4.99。
实施例11/2
1，1-二(N-甲基吲哚-3-基)丁烷(ST1534)的制备以ST1385和甲基碘为原料，使用与实施例11/1中描述的完全相同的方法制备标题化合物。收率84％。
C22H24N2(316)；熔点在＞200℃时分解；Rf＝0.45(己烷/AcOEt＝9/1)；1H(CDCl3)δ＝7.29(2H，d，CH芳族)；7.24(2H，d，CH芳族)；7.21(2H，t，CH芳族)；7.08(2H，t，CH芳族)；6.88(2H，s，CH芳族)；4.52(1H，s，CH)；3.72(6H，s，CH3)；2.22(2H，q，CH2)；1.56-1.39(2H，m，CH2)；0.99(3H，t，CH3)；MS(IS)M-＝315；元素分析计算值C83.50，H7.64，N8.85；实测值C82.98，H7.49，N8.72。
实施例11/35，5-双(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-1-戊醇(ST1974)的制备以ST1346和甲基碘为原料，使用与实施例11/1中描述的完全相同的方法制备标题化合物。收率75％。
C23H26N2O(346.47)；Rf＝0.25(己烷/AcOEt＝7∶3)；1H(CDCl3)δ＝7.62(2H，d，CH芳族)；7.35-7.15(4H，m，CH+CH芳族)；7.12-6.98(2H，m，CH芳族)；6.85(2H，s，CH芳族)；4.60(1H，t，CH)；3.75(6H，s，N-CH3)；3.65(2H，t，CH2O)；2.35-2.16(2H，m，CH2)；1.76-1.58(2H，m，CH2)；1.58-1.39(2H，m，CH2)；MS(IS)M-＝345；元素分析计算值C79.73，H7.56，N8.08；实测值C79.61，H7.49，N8.01。
实施例12使用Angyal S.J.，Beveridge R.J.，Carbohydr.Res.，1978，65，229中描述的方法制备实施例12的化合物。
实施例12/1(2S)-2，3-二羟基-1，1-二吲哚-3-基丙烷(ST1331)的制备使用Angyal S.J.，Beveridge R.J.，Carbohydr.Res.，1978，65，229中描述的方法，以实施例3/1中描述的方法制备的化合物为原料，以95％的收率得到标题化合物。
C19H18N2O2(346.47)；熔点在200℃时分解；(α)D＝+38.5°(0.5％CH3OH)；Rf＝0.5(乙酸乙酯)；1H(CDCl3)δ＝8.00(2H，宽，NH)；7.62-7.48(2H，dd，CH芳族)；7.26-7.20(2H，m，CH芳族)；7.20-6.86(6H，m，CH芳族)；4.64(1H，d，CH)；4.60-4.20(1H，d，CH)；3.80-3.26(2H，dd，CH)；1.80(2H，宽，OH)。
MS(IS)M-＝305；元素分析计算值(4％H2O，2.7％乙醚)C72.03，H6.60，N8.81；实测值C72.51，H6.47，N7.75。
实施例12/21，1-二吲哚-3-基-1-脱氧-D-甘露醇(ST1349)的制备使用Angyal S.J.，Beveridge R.J.，Carbohydr.Res.，1978，65，229中描述的方法，以实施例1步骤A的化合物为原料，得到标题化合物。收率84％。
C22H24N2O5(396)；熔点在60℃时分解；(α)D＝-38.6°(0.07％CH3OH)；Rf＝0.5(CHCl3/CH3OH＝7/3)；1H(DMSO-D6)δ＝10.60-10.70(2H，宽-s，NH)；7.50(2H，t，CH芳族)；7.25(2H，d，CH芳族)；7.13(2H，s，CH芳族)；6.90(2H，m，CH芳族)；6.80(2H，m，CH芳族)；5.00(1H，宽-s，CH)；4.00-4.40(5H，m，OH)；3.30-3.60(6H，m，CH2)；MS(IS)M-＝395；元素分析计算值(3％H2O)C65.18，H6.20，N6.87；实测值C65.00，H6.40，N6.35。
实施例13使用Sainbury M.，Hogan I.T.，Synthesis，1984，4，872中描述的方法制备实施例13的化合物。
实施例13/1
1，3-二乙酰氧基-2，2-(二吲哚-3-基)丙烷(ST1370)的制备使用Sainbury M.，Hogan I.T.，Synthesis，1984，4，872中描述的方法，将Ac2O和AcONa的摩尔数加倍，以实施例2/8的化合物为原料得到标题化合物。收率70％。
C23H22N2O4(390.4)；熔点183-185℃；Rf＝0.78(乙醚)；1H(CDCl3)δ＝8.10(2H，s，NH)；7.32-7.24(2H，d，CH芳族)；7.22-7.16(2H，m，CH芳族)；7.14-7.08(2H，d，CH芳族)；7.04-6.98(2H，t，CH芳族)；6.80-6.64(2H，t，CH芳族；4.84(4H，s，CH2)；1.90(6H，s，CH3)；MS(IS)M-＝390；元素分析计算值C70.75，H5.68，N7.17；实测值C70.50，H5.35，N6.83。
实施例13/25-乙酰氧基-1，1-二吲哚-3-基戊烷(ST1371)的制备使用Sainbury M.，Hogan I.T.，Synthesis，1984，4，872中描述的方法，以实施例2/4的化合物为原料，得到标题化合物。收率80％。
C23H24N2O2(360.4)；熔点在＞200℃时分解；Rf＝0.42(乙醚/己烷7∶3)；1H(CDCl3)δ＝7.80(2H，宽，NH)；7.62-7.48(2H，dd，CH芳族)；7.24-7.20(2H，d，CH芳族)；7.16-7.10(2H，m，CH芳族)；7.00-6.86(4H，m，CH芳族)；4.42-4.40(1H，t，CH)；4.00-3.84(2H，t，CH2)；2.22-1.86(2H，m，CH2)；1.90(3H，s，CH3)；1.80-1.60(2H，m，CH2)；1.50-1.40(2H，m，CH2)；MS(IS)M+＝361；元素分析计算值C76.57，H6.65，N7.77；实测值C76.27，H6.78，N7.25。
实施例13/31，1-二吲哚-3-基-1-脱氧五乙酰基-D-葡萄糖(ST1363)的制备使用Sainbury M.，Hogan I.T.，Synthesis，1984，4，872中描述的方法，使用过量10倍的Ac2O和AcONa，以实施例2/10的化合物为原料，得到标题化合物。收率70％。
C32H34N2O10(606.1)；熔点190℃；(α)D＝-23.8°(0.4％CHCl3)；Rf＝0.8(CHCl3/CH3OH 9∶1)；1H(CDCl3)δ＝8.00(2H，s，NH)；7.70-7.60(2H，m，CH芳族)；7.30-7.05(4H，m，CH芳族)；7.04-6.90(4H，m，CH芳族)；5.80-5.70(1H，t，CH)；5.40-5.20(2H，m，CH)；5.0(2H，m，CH)；4.00-3.80(2H，m，CH)；2.10(3H，s，CH3)；2.00(3H，s，CH3)；1.82(3H，s，CH3)；1.68(3H，s，Ac)；1.64(3H，s，Ac)；MS(IS)M-＝605；元素分析计算值(3.4％H2O)C65.18，H6.20，N6.87；实测值C65.10，H6.23，N6.40。
实施例141，1-二(吲哚-3-基)-5-甲磺酰氧基戊烷的制备(ST1488)使用Kim，J.H.；Yang，M.等，J.Chem.Soc.Perkin.Trans.，1；1998，(17)，2877-2880中描述的方法，以实施例2/4的化合物为原料，得到标题化合物。收率60％。
C22H24N2O3S(396)；熔点在＞200℃时分解；Rf＝0.18(Et2O/己烷＝6∶4)；1H(CDCl3)δ＝7.90(2H，s，NH)；7.3-7.5(2H，d，CH芳族)；6.95-7.10(2H，t，CH芳族)；6.90(1H，s，CH芳族)；4.20(1H，t，CH)；2.80(3H，s，CHsS)；1.60-2.40(8H，m，CH2)；MS(IS)M-＝395；元素分析计算值C66.66，H6.06，N7.07；实测值C66.54，H6.24，N6.98。
实施例15使用Tao，M.等，Bioorg.Med.Chem.Lett.，1996，6(24)，3009中描述的方法制备实施例15的化合物。
实施例15/1
苯基、羟基、二(咪唑基-2-基)甲烷(ST1441)的制备将4.20g(10mmol)实施例6/1的化合物和200ml甲醇中的1g的Pd(OH)2组成的混合物在60p.s.i.的H2压力下进行氢化。氢化反应在室温下进行16小时。
在此时间段结束时，过滤除去Pd并浓缩溶液；将得到的固体进行纯化。分离终产物并经硅胶(流动相AcOEt∶MeOH 1∶1)色谱纯化。收率98％。
C13H12N4(240.26)；熔点在200℃时分解；Rf＝0.65(AcOEt/MeOH/NH390∶10∶0.2)；1H(DMSO-D6)δ＝10-11.80(2H，宽，NH)；7.40-7.34(3H，m，CH芳族)；7.30-7.14(4H，m，CH酰亚胺)；7.20-6.8(4H，m，CH芳族，OH)；MS(IS)M+＝241；元素分析计算值C64.98，H5.03，N23.32；实测值C64.36，H5.23，N23.00。
实施例15/21，1-二(5-氨基吲哚-3-基)丁烷·2HCl(ST1437)的制备在2ml的15％(无水乙醇中)HCl存在下，在15p.s.i.下，用100mg的Pd/c的5％乙醇溶液氢化250mg(0.66mmol)ST1429，1，1-二(5-硝基吲哚-3-基)丁烷。4小时后还原结束；过滤溶液，浓缩成较少体积，然后在搅拌下加入丙酮。产物沉淀并真空过滤和干燥。得到216mg纯净产物，收率84％。
C20H22N4·2HCl(391)；熔点在248-243℃时分解；Rf＝0.62(CH3CN/EtOH＝6∶4)；1H(DMSO-D6)δ＝11.95(2H，宽，NH)；10.50(4H，宽，NH2)；7.55(2H，s，CH芳族)；7.50-7.25(3H，m，CH芳族)；7.10-6.90(2H，m，CH芳族)；4.35(1H，t，CH)；2.15(2H，q，CH2)；1.40-1.15(2H，m，CH2)；0.90(3H，t，CH3脂族)；MS(IS)M+＝319；元素分析计算值C61.38，H6.18，N14.31，Cl 18.11；实测值C61.08，H6.25，N14.02，Cl18.48。
实施例16使用Smith，S.O.等，J.Org.Chem.，1997，62(11)，3638中描述的方法制备实施例16的化合物。
实施例16/11，1-(二吲哚-3-基)-5-氟戊烷(ST1381)的制备将实施例2/4的化合物(318mg；1mmol)溶于CH2Cl2(20ml)中。在保持于25℃的溶液中加入DAST(200μl；1.5mmol)，并将混合物反应30分钟。
在此时间段结束时，向反应混合物中加入10％NaHCO3(10ml)和CH2Cl2(10ml)。分离有机相并经Na2SO4干燥和浓缩，直至得到固体。使用反相制备柱，通过HPLC分离和纯化产物(RP-18柱，流动相CH3CN∶H2O 60∶40)。收率15％。
C21H20N2(300)；熔点206-208℃时分解；Rf＝0.78(己烷/iPrOH＝9/1)；1H(DMSO-D6)δ＝10.40-10.80(2H，宽-s，NH)；7.52(1H，d，CH芳族)；7.45(1H，m，CH芳族)；7.37(1H，d，CH芳族)；7.20(1H，m，CH芳族)；7.07(1H，t，CH)；6.95(2H，m，CH)；6.68(1H，s，CH)；4.65(1H，宽-s，CH)；2.75-3.00(2H，m，CH2)；1.95-2.40(2H，m，CH2)；1.90-1.60(2H，m，CH2)；1.70(2H，m，CH2)；MS(IS)M-＝299；元素分析计算值C84.00，H6.66，N9.33；实测值C84.19，H6.50，N9.03。
实施例16/2(R，S)-5-氟-1，1-(吲哚-2-基，吲哚-3-基)戊烷(ST1421)的制备将实施例2/12的化合物(318mg；1mmol)溶于CH2Cl2(20ml)中。向保持于25℃的溶液中加入DAST(200μl；1.5mmol)并将混合物反应30分钟。
在此时间段结束时，向反应混合物中加入10％NaHCO3(10ml)和CH2Cl2(10ml)。分离有机相并经Na2SO4干燥和浓缩，直至得到固体。使用反相制备柱，经HPLC分离和纯化产物(RP-18柱，流动相CH3CN∶H2O 60∶40)。收率15％。
C21H21FN2(320)；熔点77-81℃；Rf＝0.44(己烷/iPrOH＝85/15)；1H(CH3CN)δ＝9.00-8.80(2H，宽-s，NH)；7.40(4H，m，CH芳族)；7.30(1H，宽-s，CH)；6.95(4H，m，CH芳族)；6.60(1H，s，H3′b)；4.65(1H，t，CH)；4.50-4.75(2H，t，CH2)；2.20(2H，m，CH2)；1.70-1.80(2H，m，CH2)；1.40(2H，m，CH2)；MS(IS)M-＝319；元素分析计算值C78.75，H6.56，F5.93，N8.75；实测值C78.85，H6.70，F5.90，N8.94。
实施例17双[1，1-二(N-羰基吲哚-3-基)丁烷](ST1533)的制备将580mg(2mmol)ST1385和500mg羰基二咪唑(3mmol)溶于10ml无水二甲亚砜中。反应保持在125℃下2小时并搅拌。在此时间段结束时，冷却反应混合物并缓慢加入200ml的冰水。产物沉淀并过滤，在过滤器上用冰水洗涤然后用甲醇结晶。得到520mg标题化合物。收率82.7％。
产物包括两种立体异构体的混合物，一个在顺位(65％)有两个丁链(butyric chains)和其余的在反位(35％)。
C21H14N2S2(358.5)；熔点178℃；Rf＝0.41(己烷/二烷8∶2)；1H(DMSO-D6)δ＝7.80-7.70(3H，m，CH芳族)；7.60-7.40(5H，m，CH芳族)；7.40-7.20(3H，m，CH芳族)；7.20-7.00(3H，m，CH芳族，CH)；MS(IS)M+(-H2O)＝359；元素分析计算值C70.36，H3.93，N7.81；实测值C70.10，H3.85，N7.49。
实施例183-(5-溴-1-(1H-吲哚-3-基)戊基)-1H-吲哚(ST1880)的制备使用Campbell，J.A.等，J.Org.Chem.，1996，61(18)，6313-6325中描述的方法，以ST1346为原料制备标题化合物。
将ST1346，318mg(1mmol)溶于20ml无水CH2Cl2；溶液冷却到-5℃，将首先是904mg三苯基膦(4mmol)，其次是1.324g四溴甲烷(4mmol)连续缓慢加入。反应混合物在-5℃放置42小时，然后，当反应完成时，浓缩至完全干燥。残余物在SiO2柱上用己烷∶乙酸乙酯8∶2作为洗脱液层析。得到297mg纯净的产物，收率78％。
C21H21BrN2(381.32)；Rf＝0.68(己烷/AcOEt＝6∶4)；1H(CDCl3)δ＝7.86(2H，宽-s，-NH)；7.66(2H，d，CH芳族)；7.34(2H，d，CH芳族)；7.27-7.16(2H，m，CH芳族)；7.16-7.03(2H，m，CH芳族)；6.37(2H，s，CH芳族)；4.53(1H，t，CH)；3.40(2H，t，CH2Br)；2.37-2.19(2H，m，CH2)；2.05-1.97(2H，m，CH2)；1.71-1.49(2H，m，CH2)；MS(IS)M-＝380；元素分析计算值C66.15，H5.55，Br20.95，N7.35；实测值C66.28，H5.51，Br20.64，N7.29。
实施例194-(5，5-二(1H-吲哚-3-基)戊基)-2-吗啉基甲基醚(ST1860)的制备按照Dutta，A.K.等；J.Med.Chem.，1996，39(3)，749-756中描述的方法，以ST1880和2-甲氧基吗啉为原料制备标题化合物，其中2-甲氧基吗啉按照Caviraghi，G.等，J.Heterocy.Chem.，18，825(1981)描述的方法制备。
将381mg(1mmol)ST1880，2-甲氧基吗啉234mg(2mmol)和精细研磨的K2CO3690mg(5mmol)与5ml的无水DMA完全混合，并在搅拌下加热到80℃5小时。在此时间段结束时，加入30ml的H2O并用乙酸乙酯(3×50ml)进行萃取。将有机相汇集，用少量水洗涤，经无水Na2SO4干燥并浓缩至干。残余物经SiO2色谱柱使用梯度从7∶3到4∶6的己烷∶乙酸乙酯纯化，得到160mg产物(收率38％)。
C26H31N3O2(417.55)；Rf＝0.19(己烷/AcOEt＝6∶4)；1H(CDCl3)δ＝7.93(2H，宽-s，-NH)；7.55(2H，d，CH芳族)；7.32(2H，d，CH芳族)；7.19-7.07(2H，m，CH芳族)；7.06-6.93(4H，m，2CH芳族)；4.60(1H，t，CH吗啉)；4.45(1H，t，CH偕)；4.02-3.89(1H，m，CH吗啉)；3.72-3.58(1H，m，CH吗啉)；3.42(3H，s，CH3)；2.52-2.43(2H，m，CH2)；2.42-2.28(2H，m，CH2吗啉)；2.28-2.15(2H，m，CH2)；1.82-1.47(4H，m，CH2e CH2吗啉)；1.47-1.35(2H，m，CH2)；MS(IS)M-＝416；元素分析计算值C74.79，H7.48，N10.06；实测值C74.98，H7.36，N9.93。
实施例20对敏感肿瘤细胞系(lines)的细胞毒性测试本测试用于评估人类细胞系MCF-7(人乳腺癌)、LoVo(人结肠腺癌)和MES-SA(人子宫肉瘤)的存活能力。以标量浓度，(500μM÷0.97μM)将肿瘤细胞与化合物一起温育24小时；然后除去化合物并在4小时后，使用sulforodamine B测试(J.Natl.Cancer Inst.，82，1107-1112)评估细胞存活。用处理成曲线-配合表(Am.J.Physiol.，1978，235，E97-E102)的IC50(抑制50％的细胞存活的分子浓度)评估化合物的抗增殖活性，并用μM±SD表达。
测试的化合物和得到的结果见下表1、2和3。
表1(对MCF-7细胞系的抗增殖活性)
(a)测试化合物的确认代码。
(b)测试化合物的化学名称。
(c)表达为IC50的抗增殖活性值(μM±S.D.)。
表2(对Mes-Sa细胞系的抗增殖活性)
(a)测试化合物的确认代码。
(b)测试化合物的化学名称。
(c)表达为IC50的抗增殖活性值(μM±S.D.)。
nd＝未确定。
表3(对LoVo细胞系的抗增殖活性)
(a)测试化合物的确认代码。
(b)测试化合物的化学名称。
(c)表达为IC50的抗增殖活性值(μM±S.D.)。
实施例21对抗药性肿瘤细胞系的细胞毒性测试本测试用于评估对阿霉素(约100倍)具有抗药性和对正定霉素、放射菌素D、盐酸米托蒽醌、长春新碱、长春碱、紫杉酚、秋水仙碱和依托泊甙具有交叉抗药性的人类细胞系的存活。
使用下面细胞系MCF-7-Dx(人乳腺癌)、LoVo-Dx(人结肠腺癌)和MES-SA Dx(人子宫肉瘤)。
测试的化合物在表4、5和6中给出。在结合使用阿霉素测试的化合物之前，(单独)使用测试化合物，如下评估细胞的细胞毒性以标量浓度，(500μM÷0.97μM)将细胞与化合物一起温育24小时；然后除去化合物并在48小时后使用上述的sulforodamine B测试评估细胞存活。用处理成上述曲线-配合表的IC50(抑制50％的细胞存活的分子浓度)评估化合物的抗增殖活性。
然后绘制单独阿霉素的曲线和在非毒性浓度(IC≤20)的测试化合物存在下的阿霉素曲线。
在表4、5和6中所示的IC50值显示出被化合物诱导的阿霉素活性的增强程度(MDR比例)。
表4(对MCF-7Dx细胞系的化学敏感活性)
(d)测试化合物的确认代码。
(e)测试化合物的化学名称。
(f)用MDR比例表示的化学敏感活性值，计算如下IC50阿霉素/IC50阿霉素结合亚毒性浓度的测试化合物。
*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001，****P＜0.0001是用上述的曲线-配合表计算的P值，用于比较测试化合物存在和不存在时的阿霉素曲线。
括弧内指出的是用于计算MDR比例的产物的亚毒性μM浓度。
左边栏中给出单独使用测试化合物的IC50值，用μM±S.D.表示；在处理IC50过程中，也评估测试化合物亚毒性浓度IC≤20的值。
表5(对Mes-Sa Dx细胞系的化学敏感活性)
(d)测试化合物的确认代码。
(e)测试化合物的化学名称。
(f)用MDR比例表示的化学敏感活性值，计算如下IC50阿霉素/IC50阿霉素结合亚毒性浓度的测试化合物。
*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001，****P＜0.0001是用上述的曲线-配合表计算的P值，用于比较测试化合物存在和不存在时的阿霉素曲线。
括弧内指出的是用于计算MDR比例的产物的亚毒性μM浓度。
左边栏中给出单独使用测试化合物的IC50值，用μM±S.D.表示；在处理IC50过程中，也评估测试化合物亚毒性浓度IC≤20的值。
表6(对LoVo Dx细胞系的化学敏感活性)
(d)测试化合物的确认代码。
(e)测试化合物的化学名称(f)用MDR比例表示的化学敏感活性值，计算如下IC50阿霉素/IC50阿霉素结合亚毒性浓度的测试化合物。
*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001，****P＜0.0001是用上述的曲线-配合表计算的P值，用于比较测试化合物存在和不存在时的阿霉素曲线。
括弧内指出的是用于计算MDR比例的产物的亚毒性μM浓度。
左边栏中给出单独使用测试化合物的IC50值，用μM±S.D.表示；在处理IC50过程中，也评估测试化合物亚毒性浓度IC≤20的值。
实施例22全顺式视黄酸(ATRA)对急性早幼粒细胞白血病细胞的化学敏感效果ATRA是急性早幼粒细胞白血病(APL)中的末期分化的有效诱导物。
临床研究证实，用ATRA治疗APL患者使得存活和event-free存活(EFS)增加。(Blood 72(2)567-72，1988；Blood 761704-09，1990；N.Engl.J.Med.324(20)1385-93，1991；Blood 78(6)1413-19，1991)。
服用ATRA的治疗剂量(10-6M)在治疗的病人中引起皮肤毒性或肝毒性类反应(ATRA综合病)(Blood 76260a(abstr. Suppl)，1990；Ann.Intern.Med.117(4)292-96，1992)。
为了验证使用较低剂量ATRA的可能性进行了试验，结果发现，由该化合物引起了副反应的减少，同时保持同样的治疗效果。
为了达到这个目的，使用了许多本发明描述的化合物，同时研究了它们增强ATRA的敏感性的能力及增强其对许多白血病细胞系的抗增殖性、细胞分化性和凋亡效果。
在如下进行的试验中，使用了两个APL细胞系。
使用的第一个细胞系是NB4细胞系，承担t(15；17)染色体易位，所述易位产生融合蛋白PML/RARα。该系对ATRA药理学剂量(10-7-10-6M)的分化作用非常敏感。
使用的第二个系是对ATRA响应的HL60细胞系(但其敏感度低于NB4细胞系)。该细胞系不出现上述的染色体易位。
HL60和NB4细胞以150,000细胞/ml的密度接种在含10％胎牛血清的RPMI1640培养介质中，并在黑暗中在最适度剂量的ATRA(NB45-10nM和HL600.5μM，分别地)剂量存在或不存在下用测试化合物处理，并在不更换培养介质的情况下返回到温育箱中温育3天。
最大的ATRA诱导的分化效果通常在处理的第三或第四天观察到，伴随着明显的生长停止。
用同样浓度的DMSO处理的对照培养基用于稀释测试化合物和ATRA，该载体在特殊试验条件下可自身分化。
通过分析氮蓝四唑(NBT)的还原评估细胞分化为了分析测试化合物对ATRA的分化效果，在处理的第三天从每一个样品中收集500,000个可存活细胞，在1,000rpm离心10分钟并悬浮在1ml含10％胎牛血清、1mg/ml氮蓝四唑(NBT)和100ngPMA(佛波醇12-豆蔻酸酯13-乙酸酯)的RPMI1640介质中。
这样再悬浮的细胞在黑暗中于37℃温育60分钟。
在温育的末期，细胞悬浮液以10,000rpm离心10分钟；得到的颗粒再悬浮在1ml含10％Triton X-100的PBS中并超声溶解。
在540nm波长读取样品的分光光度值移动含分化细胞的样品对准紫外光，对照样品和/或含未分化细胞的样品是无色的或至少几乎无色。
细胞循环的流式细胞荧光分析为了评定测试化合物对细胞循环不同周期的效果，在处理的第三天收集500,000个细胞，在1,000rpm离心10分钟，用PBS w/o(无钙和镁的PBS)洗涤两次并在50％PBS w/o+50％甲醇/丙酮(1∶4 v/v)中固定至少一个小时；然后按照上述方法离心细胞，用PBS w/o洗涤两次并再次离心。
然后在细胞颗粒中加入100μg/ml的安妥碘(propidium iodide)200μl和150KU/mg的核糖核酸酶200μl。
在黑暗中室温温育30分钟后，用流式细胞荧光计分析样品。
实施例22/1用5-羟基-1，1-二(吲哚-3-基)戊烷(ST1346)结合最适度剂量的ATRA处理的NB4细胞的分化在体外试验中，用剂量为1、5、10和50μM的ST1346和ATRA(0.5-0.01μM)单独或结合处理NB4细胞，显示测试化合物(ST1346)在诱导末期分化时基本上能够使ATRA(最适度剂量施用)敏感，在10μM剂量时已经达到最大效果。
得到的结果在表1中给出，并显示出结合处理得到AC50值1.5±0.5μM；(重叠诱导3.0)AC50(活化浓度)是测试化合物诱导50％分化的浓度。
重叠诱导是用测试化合物+ATRA处理的细胞样品的分化值对单独用ATRA处理的细胞样品的分化值的增加。该值提供测试化合物增强ATRA诱导细胞分化能力的迹象。
实施例22/2ST1346在ATRA存在和不存在下对NB4细胞系细胞循环效果的评估对单独用1、5、10、和50μM剂量的ST1346或结合最适度剂量的ATRA处理NB4细胞循环的效果进行评估。
得到的结果显示，高剂量的单独测试化合物引起生长停止(在细胞循环的G0/G1期)和凋亡，而本发明化合物与ATRA的结合引起循环的G0/G1期的戏剧性的生长停止(取决于剂量)，同时诱导细胞分化(表1)。
得到的结果在表7中给出。
应该注意到，当本发明化合物与ATRA联合施用时，即使在最高剂量，也丧失其凋亡效果。
表7(ST1346对于ATRA在NB4细胞循环的化学敏感效果)
实施例22/3ST1346在ATRA存在或不存在下诱导HL60细胞的末期分化的效果在这个试验中，评估了本发明化合物诱导HL60细胞的末期分化的效果。
在最适度剂量的ATRA存在或不存在下，绘制ST1346在1、5、10、和50μM对应HL60细胞剂量的曲线。
得到的结果见表2，显示本发明化合物以剂量依赖的方式，基本上能够活化ATRA诱导肿瘤细胞末期细胞分化，其AC50值14.8±1.6μM；重叠诱导2.7。
实施例22/4评估在ATRA存在或不存在下1，1-二(吲哚-3-基)-4-羟基丁烷(ST1707)对分化和NB4细胞循环效果为了评估测试化合物的增强分化能力，在最适度剂量的ATRA存在或不存在下，用标量剂量的1、5、10、和50μM ST1707处理NB4细胞。
得到的结果见表3，显示出测试化合物以剂量依赖的方式，有明显增强ATRA诱导白血病细胞的末期分化的能力(AC508.3±0.05μM；重叠诱导2.5)。
细胞循环分析得到的结果见表8，显示出当单独服用本发明化合物时，与对照组相比，不改变存在于细胞循环各期中细胞的百分比并且不诱导凋亡。当ST1707与ATRA结合施用时，它明显地诱导了作为细胞分化的标志物的细胞循环的G0/G1期细胞的剂量依赖停止。
表8(ST1707对于ATRA在NB4细胞循环的化学敏感效果)
实施例22/5
评估在ATRA存在或不存在下5-羟基-1，1-二(5，6-亚甲基-二氧吲哚-3-基)戊烷(ST1422)诱导NB4细胞末期分化的效果在这个试验中，在最适度剂量的ATRA存在或不存在下，评估剂量为1、5、10、和50μM的ST1422对NB4细胞的活性。得到的结果见表4，显示出上述NBT测试显示测试化合物在增加ATRA诱导末期分化上有显著的感应效果，AC50值9.8±0.1μM；重叠诱导1.85。
实施例22/6评估在ATRA存在或不存在下5-羟基-1，1-二(5，6-亚甲基二氧吲哚-3-基)戊烷(ST1422)诱导末期分化和HL60细胞循环的效果在这个试验中，在最适度剂量的ATRA存在或不存在下，评估剂量为1、5、10、和50μM的ST1422对末期分化和HL60细胞循环的诱导效果。得到的结果见表5，并且显示出本发明化合物在测试的肿瘤细胞系中对ATRA诱导的末期分化基本上能够引起相当地感应效果，AC50值13.6±2.6μM；重叠诱导2.2。
但是，在表9中报道的细胞循环分析得到的结果显示，即使在这种情况下，本发明的化合物能够诱导ATRA介入的在G0/G1期细胞生长停止。本发明的化合物，当单独测试时，显示对诱导凋亡无效果。
表9(ST1707对于ATRA在HL60细胞循环的化学敏感效果)
实施例22/7在ATRA存在或不存在下53-双(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-1-戊醇(ST1974)对NB4细胞的效果在这个试验中，在最适度剂量的ATRA存在或不存在下，评估本发明化合物在1、5、10、和50μM的剂量对NB4细胞的效果。
得到的结果在表6中报道，并显示本发明化合物以剂量依赖的方式基本上能够增加ATRA的分化效果，AC50值7.8±2.6μM；重叠诱导1.8。
实施例22/8在ATRA存在或不存在下5，5-双(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-1-戊醇(ST1974)在诱导末期分化和HL60细胞循环的效果在这个试验中，在最适度剂量的ATRA存在或不存在下，评估本发明化合物在1、5、10、和50μM的剂量对诱导末期分化和HL60细胞循环的效果。
得到的结果在表7中报道，并显示上述NBT测试显示本发明化合物对ATRA诱导HL60细胞的末期分化的能力具有剂量依赖的感应效果，AC50值9.5±2.6μM；重叠诱导1.6。
当本发明化合物与ATRA结合施用时，它诱导了细胞循环的G0/G1期的细胞的明显停止。
得到的结果在表10中给出。
表10(ST1974对于ATRA在HL60细胞循环的化学敏感效果)
实施例22/9在ATRA存在或不存在下4，4-二(1H-吲哚-3-基)-丁酸(ST1961)在诱导末期分化和NB4细胞循环的效果在这个试验中，在最适度剂量的ATRA存在或不存在下，评估本发明化合物在1、5、10、和50μM的剂量对诱导末期分化和NB4细胞循环的效果。
得到的结果在表8中显示NBT测试显示得到本发明化合物对于ATRA促进诱导末期分化的能力具有感应效果，AC50值6.6±2.0μM；重叠诱导1.4。
另外细胞循环分析得到的结果见表11显示，高剂量的测试化合物对ATRA在诱导在G0/G1期细胞停止的活性上基本上具有相当的增强效果。
表11(ST1961和ATRA的结合对NB4细胞循环的效果)
权利要求
1.式(I’)化合物 其中X表示(CH2)nCH3，其中n是1-3的整数；R表示H、羟基，所述羟基不被酯化或被C1-C4酰基酯化、单或二C1-C4烷酰基、羧基、烷氧基羰基、卤素、C1-C4烷基；Alk表示苄基；C1-C6烷基。
2.权利要求1的式(I’)化合物，是1，1-二(N-苄基吲哚-3-基)-1-丁烯。
3.含作为活性成分的权利要求1-2的式(I’)化合物，和至少一种药物可接受赋形剂和/或稀释剂的药物组合物。
4.权利要求3的组合物，其中式(I’)化合物与一种或多种已知抗肿瘤试剂结合施用。
5.权利要求4的组合物，其中抗肿瘤试剂选自烷基化试剂、拓扑异构酶抑制剂、抗微管蛋白试剂、嵌入化合物、抗代谢产物、天然产物，例如长春花生物碱、表鬼臼脂素、抗生素、酶、泰克瑟恩和细胞分化化合物。
6.权利要求5的组合物，其中细胞分化抗肿瘤化合物是全反式视黄酸。
7.权利要求1-2的式(I’)化合物用于制备具有抗肿瘤活性的药物的用途。
8.权利要求1-2的式(I’)化合物用于制备治疗肿瘤病变的药物的用途，其中肿瘤已经显示对用于其治疗的在先的抗生素的抗药性，其中所述式(I’)化合物对上述抗药性肿瘤产生化学敏感效果。
9.权利要求7或8的用途，其中肿瘤选自肉瘤、癌、类癌瘤、骨肿瘤、神经内分泌的肿瘤、淋巴系统白血病、急性早幼粒细胞白血病、脊髓白血病、单核细胞白血病、巨核细胞白血病和霍奇金氏病。
10.权利要求9的用途，其中肿瘤是急性早幼粒细胞白血病。
11.权利要求7或8的用途，其中式(I’)化合物与一种或多种已知抗肿瘤试剂结合使用。
12.权利要求11的用途，其中抗肿瘤试剂是全反式视黄酸。
全文摘要
本发明描述了通式(I)的双杂环化合物，用作抗肿瘤和化学敏感试剂。
文档编号A61K31/404GK1733722SQ20051007909
公开日2006年2月15日 申请日期2001年7月26日 优先权日2000年11月3日
发明者M·马兹, P·米讷逖, G·P·莫勒逖, G·吉安尼尼, E·伽拉逖尼, S·潘克, M·O·缇恩迪, C·皮萨诺 申请人:希格马托制药工业公司