专利名称：一种人参大黄注射液及其制备方法
技术领域：
本发明属于中药注射剂领域，具体涉及一种人参大黄注射液及其制备方法。
背景技术：
人参是一种名贵中药，它有很高药用价值，《神农本草经》认为，人参有"补五 脏、安精神、定魂魄、止惊悸、除邪气、明日开心益智"的功效，久服轻身延年"； 而大黄辛热燥烈，补火散寒，上助心阳，中温脾阳，下暧肾阳，可达表入里，温通
周身之阳气。
大黄在我国传统医学中应用已久，始载于我国现存最早的药学专著《神农本草 经》，因其色黄，故名。历代本草均有收载《千金方》称大黄为锦文大黄；《吴普 本草》称大黄为黄良、火参、肤如；李当之《药录》称其为将军；而《中药材手册》 则称之为川军。大黄具有泻下攻积，清热泻火，解毒止血，活血化淤，清利湿热的 功能。广泛用于治大便秘结、痈肿、疔疮、目赤肿痛、痄腮、喉痹、牙龈肿痛、血 热妄行引起的各种出血、淤血经闭、产后腹痛、跌打损伤、湿热泄痢、黄疸、水肿、 中风痰迷等等，有荡涤胃肠，推陈致新，安和五脏之功。
发明内容
本发明的目的在于提供一种人参大黄注射液。 本发明的另一 目的在于提供一种人参大黄注射液的制备方法。 具体而言，发明所述的人参大黄注射液由人参有效部位和大黄有效部位复配
制成注射剂，其中人参和大黄投料的重量比例为1: 1。 发明所述的大黄有效部位制备过程为
大黄粉碎，加4-7倍量水浸泡24小时，用盐酸调pH到2-5，加入纤维素酶和 淀粉酶，搅拌，置水浴保温，滤过，滤液上大孔树脂，用水洗脱除去糖类，再用3-5 倍体积的10%、 20%和30%、 50%、 70%和95%乙醇梯度洗脱，收集70%和95°/0乙 醇洗脱部分，减压回收乙醇至无醇味，离心，上清液用乙酸乙酯或正丁醇或二氯甲 烷或氯仿萃取，挥去溶剂即得大黄有效部位。
优选的大黄有效部位制备过程为
大黄粉碎，加4-5倍量水浸泡24小时，用盐酸调pH到3-4，加入纤维素酶和 淀粉酶，搅拌，置30-40。C水浴保温l-2小时，滤过，滤液上大孔树脂，用水洗脱 除去糖类，再用3-5倍体积的10%、 20%和30%、 50%、 70%和95%乙醇梯度洗脱， 收集70%和95%乙醇洗脱部分，减压回收乙醇至无醇味，离心，上清液用乙酸乙酯 或正丁醇或二氯甲垸萃取3-5次，挥去溶剂即得大黄有效部位。
所述的人参有效部位制备过程为
人参粉碎，加4-12倍量水浸泡24小时，用盐酸调pH到2-5，加入纤维素酶和 淀粉酶，搅拌，置30-45t:水浴保温2-6小时，滤过，滤液上大孔树脂，用水洗脱 除去糖类，再用3-5倍体积的10%、 20°/。和30%、 50%、 70%和95%乙醇梯度洗脱， 收集人参皂甙集中的乙醇洗脱部分；然后将处理后的人参用5-9倍量50-95%乙醇回 流提取2-5次,将乙醇洗脱部分与回流提取部分合并，减压回收乙醇至无醇味，离心， 上清液用乙酸乙酯或正丁醇萃取3-7次，挥去溶剂即得人参有效部位。
优选的人参有效部位制备过程为
人参粉碎，加8-12倍量水浸泡24小时，用盐酸调pH到3-4，加入纤维素酶 和淀粉酶，搅拌，置30-4(TC水浴保温4-6小时，滤过，滤液上大孔树脂，用水洗 脱除去糖类，再用3-5倍体积的10%、 20%和30%、 50%、 70%和95%乙醇梯度洗 脱，收集人参皂甙集中的乙醇洗脱部分；然后将处理后的人参用6-9倍量70-95% 乙醇回流提取3 - 5次，将乙醇洗脱部分与回流提取部分合并，减压回收乙醇至无醇 味，离心，上清液用乙酸乙酯或正丁醇萃取5-7次，挥去溶剂即得人参有效部位。
具体而言，人参大黄注射液制备过程为
取注射用水,加热至沸腾，加入大黄有效部位和人参有效部位搅拌使溶解，调 PH约3-5，加热至沸腾，药液冷藏8 —16小时，滤过，滤液加入活性炭，煮沸，微 孔滤膜滤过，滤液加入吐温-80，搅拌使溶解，加注射用水至定容,灌封于安瓶中， IO(TC蒸汽灭菌30-60分钟，即得。
上述的大孔树脂选自D101型、DA201型、SIP系列、GDX104型、LD605型、 LD601型、WLD型、H107型大孔树脂。
上述的纤维素酶是由葡聚糖内切酶、葡聚糖外切酶和1，3(3-葡萄糖苷酶组成的 混合物。
上述的淀粉酶是a淀粉酶。
上述的滤过用的微孔滤膜孔径为0.22-0.45pm。
本发明的人参大黄注射液对于类似配方下的人参大黄粉针、人参大黄冻干粉 针、人参大黄输液等注射剂型也有借鉴意义，使这些剂型的制备和实施也成为了可 能。
本发明所述人参大黄注射液，其性状为淡黄棕色的澄明液体。用法与用量为
肌内注射 一次2 4ml， 一日1 2次。静脉滴注， 一次20 100ml，(用5 10% 葡萄糖注射液250 500ml稀释后使用)。静脉推注， 一次5 20ml (用5 10%葡 萄糖注射液20ml稀释后使用)，或遵医嘱。
发明人基于简化工艺、减少人参中有效成分降解、降低大黄毒性成分的临床风 险和简化工艺的目的，完成了本发明。本发明与原专利的相比，它具有提高人参有 效成分的提取率，降低大黄毒性成分的过量提取的风险，操作简便，耗时短的突出 优势。令发明人惊喜的是，发明所得的人参大黄注射液的配伍稳定性也较好。
具体实施例方式
下面用实施例进一步描述本发明，有利于对本发明及其优点、效果更好的了解， 但所述实施例仅用于说明本发明而不是限制本发明。
实施例l一人参大黄注射液的制备
a. 大黄有效部位的制备
取lkg大黄粉碎，加4倍量水浸泡24小时，用盐酸调pH到3-4，加入纤维 素酶和淀粉酶，搅拌，置3 7'C水浴保温2小时，滤过，滤液上D101型大孔树脂， 用水洗脱除去糖类，再用3-5倍体积的10%、 20%和30%、 50%、 70%和95%乙醇 梯度洗脱，收集70%和95%乙醇洗脱部分，减压回收乙醇至无醇味，离心，上清液 用乙酸乙酯萃取5次，挥去溶剂即得大黄有效部位。
b. 人参有效部位制备
取0.5kg人参粉碎，加1 2倍量水浸泡24小时，用盐酸调pH到3 - 4 ，加入纤 维素酶和淀粉酶，搅拌，置3 7r水浴保温4-6小时，滤过，滤液上D101型大孔树脂，用水洗脱除去糖类，再用3-5倍体积的10%、 20%和30%、 50%、 70°/。和95% 乙醇梯度洗脱，收集20%和30%乙醇洗脱部分；然后将处理后的人参用9倍量7 0 %乙醇回流提取4次,将乙醇洗脱部分与回流提取部分合并，减压回收乙醇至无醇味， 离心，上清液用正丁醇萃取7次，挥去溶剂即得人参有效部位；
c .注射剂的制备
取注射用水,加热至沸腾，加入大黄有效部位和人参有效部位搅拌使溶解，调 PH约3-5，加热至沸腾，药液冷藏12小时，滤过，滤液加入活性炭，煮沸，用孔 径为0.22pm微孔滤膜滤过，滤液加入吐温-80，搅拌使溶解，加注射用水至定容， 灌封于2ml安瓶中，10(TC蒸汽灭菌45分钟，即得。
实施例2—人参大黄注射液的制备
a. 大黄有效部位的制备
取lkg大黄粉碎，加5倍量水浸泡24小时，用盐酸调pH到3-4，加入纤维素 酶和淀粉酶，搅拌，置4(TC水浴保温2小时，滤过，滤液上D101型大孔树脂，用 水洗脱除去糖类，再用3-5倍体积的10%、 20%和30%、 50%、 70%和95%乙醇梯 度洗脱，收集70%和95%乙醇洗脱部分，减压回收乙醇至无醇味，离心，上清液用 二氯甲烷萃取3-5次，挥去溶剂即得大黄有效部位。
b. 人参有效部位制备
取0.5kg人参粉碎，加l 2倍量水浸泡24小时，用盐酸调pH到3-4，加入纤 维素酶和淀粉酶，搅拌，置40。C水浴保温5小时，滤过，滤液上DIOI型大孔树脂， 用水洗脱除去糖类，再用3-5倍体积的10%、 20%和30%、 50%、 70%和95%乙醇 梯度洗脱，收集50%乙醇洗脱部分；然后将处理后的人参用6倍量7 0%乙醇回流
提取5次,将乙醇洗脱部分与回流提取部分合并，减压回收乙醇至无醇味，离心，上 清液用乙酸乙酯萃取5-7次，挥去溶剂即得人参有效部位；
C.注射剂的制备
取注射用水,加热至沸腾，加入大黄有效部位和人参有效部位搅拌使溶解，调 PH约3-5，加热至沸腾，药液冷藏12小时，滤液加入活性炭，煮沸，用孔径为0.22|_im 微孔滤膜滤过，滤液加入吐温-80，搅拌使溶解，加注射用水至定容,灌封于2ml安 瓶中，10(TC蒸汽灭菌45分钟，即得。
实施例3—人参大黄注射液的制备
a. 大黄有效部位的制备
取lkg大黄粉碎，加4倍量水浸泡24小时，用盐酸调pH到3-4，加入纤维 素酶和淀粉酶，搅拌，置3 7'C水浴保温2小时，滤过，滤液上DIOI型大孔树脂， 用水洗脱除去糖类，再用3-5倍体积的10%、 20%和30%、 50%、 70%和95%乙醇 梯度洗脱，收集70%和95%乙醇洗脱部分，减压回收乙醇至无醇味，离心，上清液 用乙酸乙酯萃取5次，挥去溶剂即得大黄有效部位。
b. 人参有效部位制备
取0.5kg人参粉碎，加1 2倍量水浸泡24小时，用盐酸调pH到3 - 4 ，加入纤 维素酶和淀粉酶，搅拌，置3 7"C水浴保温4-6小时，滤过，滤液上D101型大孔 树脂，用水洗脱除去糖类，再用3-5倍体积的10%、 20%和30%、 50%、 70%和95% 乙醇梯度洗脱，收集20%和30%乙醇洗脱部分；然后将处理后的人参用9倍量7 0 %乙醇回流提取4次,将乙醇洗脱部分与回流提取部分合并，减压回收乙醇至无醇味， 离心，上清液用正丁醇萃取7次，挥去溶剂即得人参有效部位； C.注射剂的制备
取注射用水，加热至沸腾，加入大黄有效部位和人参有效部位搅拌使溶解，调 PH约3-5，加热至沸腾，药液冷藏12小时，滤过，滤液加入活性炭，煮沸，用孔
径为0.22pm微孔滤膜滤过，滤液加入吐温-80，搅拌使溶解，加注射用水至定容, 灌封于2ml安瓶中，10(TC蒸汽灭菌45分钟，即得。
实施例4一人参大黄注射液的制备
a. 大黄有效部位的制备
取lkg大黄粉碎，力B5倍量水浸泡24小时，用盐酸调pH到3-4，加入纤维素 酶和淀粉酶，搅拌，置40'C水浴保温2小时，滤过，滤液上DIOI型大孔树脂，用 水洗脱除去糖类，再用3-5倍体积的10%、 20%和30%、 50%、 70%和95%乙醇梯 度洗脱，收集70%和95%乙醇洗脱部分，减压回收乙醇至无醇味，离心，上清液用 二氯甲垸萃取3-5次，挥去溶剂即得大黄有效部位；
b. 人参有效部位制备
取0.5kg人参粉碎，加1 2倍量水浸泡24小时，用盐酸调pH到3 - 4 ，加入纤 维素酶和淀粉酶，搅拌，置4(TC水浴保温5小时，滤过，滤液上DIOI型大孔树脂， 用水洗脱除去糖类，再用3-5倍体积的10%、 20%和30%、 50%、 70%和95%乙醇 梯度洗脱，收集20%、 30%和50%乙醇洗脱部分；然后将处理后的人参用6倍量7 0 %乙醇回流提取5次,将乙醇洗脱部分与回流提取部分合并，减压回收乙醇至无醇 味，离心，上清液用乙酸乙酯萃取5-7次，挥去溶剂即得人参有效部位；
c.注射剂的制备
取注射用水,加热至沸腾，加入大黄有效部位和人参有效部位搅拌使溶解，调 PH约3-5，加热至沸腾，药液冷藏12小时，滤过，滤液加入活性炭，煮沸，用孔 径为0.22pm微孔滤膜滤过，滤液加入吐温-80，搅拌使溶解，加注射用水至定容, 灌封于2ml安瓶中，10(TC蒸汽灭菌45分钟，即得。
实验例l一人参大黄注射液的性状和鉴别
样品实施例l-性状样品为淡黄棕色的澄明液体。鉴别
(1) 取本品各lml，置蒸发皿中，水浴上蒸干，残渣加醋酐0.5ml,使溶解,移入 试管中，沿试管壁加硫酸0.5ml，两液界面呈棕红色环。
(2) 取本品各30ml，置分液漏斗中，加氯仿30ml振摇，静置，取上层液蒸干， 残渣加水2ml使溶解,加水饱和的正丁醇10ml，超声处理30分钟，吸收上清液，加 氨试液3倍量，摇匀，放置分层，取上层液蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为供试 品溶液。另取人参对照药材lg，加乙醇30ml，置水浴上回流30分钟，滤过，滤液蒸 干，残渣加水30ml使溶解，滤过，滤液同法制成对照药材溶液。再取人参皂甙RM、 Re及Rgl对照品，加甲醇制成每lml各含2mg的混合溶液，作为对照品溶液。照 薄层色谱法(《中国药典(2 0 0 5版)》 一部附录VI B)试验，吸取供试品溶液 l(Hd、对照药材溶液20pl与对照品溶液2nl，分别点于同一硅胶G薄层板上,以氯仿 一醋酸乙酯一甲醇一水(15:40:22:10)l(TC以下放置的下层溶液为展开齐iJ，展开，取出， 晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105'C烘至斑点显色清晰。供试品色谱中,在与对 照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，在与对照品色谱相应的位置上，显 相同颜色的斑点。
实验例2 —人参大黄注射液的人参皂甙检测
样品实施例l-含量测定
对照品溶液的制备精密称取人参皂甙Rb,对照品，用甲醇制成每lml中含人 参皂甙Rbl3mg的溶液，即得。
标准曲线的制备精密吸取对照品溶液20、 30、 40、 50、 60pl,分别置具塞试管 中,水浴上挥去溶剂，放冷，各精密加5%香草酵冰醋酸溶液0.2ml,高氯酸0.8ml，摇 匀，置6(TC水浴中加热15分钟，取出，冰水浴冷却，加冰醋酸5ml，摇匀，以相 应试剂为空白,照分光光度法(《中国药典(2 0 0 5版)》一部附录V B)，在550nm 的波长处测定吸收度，以吸收度为纵坐标,浓度为横坐标，绘制标准曲线。
测定法精密吸取样品各10ml，置分液漏斗中，用氯仿振摇提取4次，每次 10ml,弃去氯仿层,水层再以水饱和的正丁醇提取4次，每次10ml，合并正丁醇液， 再用正丁醇饱和的水洗涤2次，每次10ml，弃去水液，正丁醇液置水浴上蒸干，残 渣加甲醇使溶解,定量转移至5ml量瓶中，并稀释至刻度，摇匀，即得。另精密量取 0.2。/。(g/ml)聚山梨酯80液10ml，同法处理作空白对照液。精密吸取上述供试品溶 液50A置具塞试管中，照标准曲线制备项下的方法"自水浴上挥去溶剂"起依法测定 吸收度，计算，即得。
各样品每lml含人参总皂甙以人参皂RbKCs4H92023)计，均大于0.5mg。 实验例3—人参大黄注射液的常规检验
样品实施例1-pH值各样品pH值在4.5 7.0内(《中国药典(2 0 0 5版)》一部附录VI1 G)。热原各样品按热原检查法(《中国药典(2 0 0 5版)》 一部附录XIIIA)检查，剂量按家兔体重lkg注射2ml，均符合规定。
溶血试验2%红血球混悬液的配制:取家兔心脏血，置有玻璃珠的容器内，振 摇数分钟，除去纤维蛋白元，使成脱纤维血，加生理盐水，摇匀，离心，倾去上清 液，沉淀的红血球再用生物盐水洗涤3 4次，至离心后上清液不显红色为止，然 后按所得红血球体积用生物盐稀释成2%混悬液，当天使用，用时摇匀。
试验方法取试管5支，编号，1 3号管分别加入供试品0.3、 0.3、 0.3及生 理盐水2.2、 2.2、 2.2ml,4号管加入生理盐水2.5ml (作阴性对照管)，5号管加入蒸 馏水2.5ml,置电热恒温箱内，保持36.5士.5。C的温度，观察3小时，各样品均无溶血 现象。
其他各样品均符合注射剂项下有关的各项规定(《中国药典(2 0 0 5版)》一 部附录I U)。
权利要求
1.一种人参大黄注射液，其特征在于由人参有效部位和大黄有效部位复配制成注射剂，其中人参和大黄投料的重量比例为1∶1。
2. 根据权利要求1所述的人参大黄注射液，其特征在于所述的大黄有效部位的制备 过程为大黄粉碎，加4-7倍量水浸泡24小时，用盐酸调pH到2-5，加入纤维素 酶和淀粉酶，搅拌，置水浴保温，滤过，滤液上大孔树脂，用水洗脱除去糖类，再 用3-5倍体积的10%、 20%和30%、 50%、 70%和95%乙醇梯度洗脱，收集70%和 95%乙醇洗脱部分，减压回收乙醇至无醇味，离心，上清液用乙酸乙酯或正丁醇或 二氯甲烷或氯仿萃取，挥去溶剂即得大黄有效部位。
3. 根据权利要求2所述的人参大黄注射液，其特征在于所述的大黄有效部位的制备 过程为大黄粉碎，加4-5倍量水浸泡24小时，用盐酸调pH到3-4，加入纤维素 酶和淀粉酶，搅拌，置30-40'C水浴保温1-2小时，滤过，滤液上大孔树脂，用水 洗脱除去糖类，再用3-5倍体积的10%、 20%和30%、 50%、 70%和95%乙醇梯度 洗脱，收集70%和95%乙醇洗脱部分，减压回收乙醇至无醇味，离心，上清液用乙 酸乙酯或正丁醇或二氯甲垸萃取3-5次，挥去溶剂即得大黄有效部位。
4. 根据权利要求1所述的人参大黄注射液，其特征在于所述的人参有效部位的制备 过程为人参粉碎，加4-12倍量水浸泡24小时，用盐酸调pH到2-5，加入纤维素 酶和淀粉酶，搅拌，置30-45'C水浴保温2-6小时，滤过，滤液上大孔树脂，用水 洗脱除去糖类，再用3-5倍体积的10%、 20%和30%、 50%、 70%和95%乙醇梯度 洗脱，收集人参皂甙集中的乙醇洗脱部分；然后将处理后的人参用5-9倍量50-95% 乙醇回流提取2-5次，将乙醇洗脱部分与回流提取部分合并，减压回收乙醇至无醇味， 离心，上清液用乙酸乙酯或正丁醇萃取3-7次，挥去溶剂即得人参有效部位。
5. 根据权利要求4所述的人参大黄注射液，其特征在于所述的人参有效部位的制备 过程为人参粉碎，加8-12倍量水浸泡24小时，用盐酸调pH到3-4，加入纤维素 酶和淀粉酶，搅拌，置30-4(TC水浴保温4-6小时，滤过，滤液上大孔树脂，用水 洗脱除去糖类，再用3-5倍体积的10%、 20%和30%、 50%、 70%和95%乙醇梯度 洗脱，收集人参皂甙集中的乙醇洗脱部分；然后将处理后的人参用6-9倍量70-95% 乙醇回流提取3 - 5次,将乙醇洗脱部分与回流提取部分合并，减压回收乙醇至无醇 味，离心，上清液用乙酸乙酯或正丁醇萃取5-7次，挥去溶剂即得人参有效部位。
6. 根据权利要求2-5任一所述的人参大黄注射液，其特征在于所述的人参大黄注射 液制备过程为取注射用水,加热至沸腾，加入大黄有效部位和人参有效部位搅拌使 溶解，调PH约3-5，加热至沸腾，药液冷藏8 — 16小时，滤过，滤液加入活性炭， 煮沸，微孔滤膜滤过，滤液加入吐温-80，搅拌使溶解，加注射用水至定容,灌封于 安瓶中，IOO'C蒸汽灭菌30-60分钟，即得。
7. 根据权利要求2-5任一所述的人参大黄注射液，其特征在于所述的大孔树脂选自 D101型、DA201型、SIP系列、GDX104型、LD605型、LD601型、WLD型、訓7型大孔树脂。
8. 根据权利要求2-5任一所述的人参大黄注射液，其特征在于所述的纤维素酶是由 葡聚糖内切酶、葡聚糖外切酶和1,3 P-葡萄糖苷酶组成的混合物。
9. 根据权利要求2-5任一所述的人参大黄注射液，其特征在于所述的淀粉酶是a淀 粉酶。
10. 根据权利要求2-5任一所述的人参大黄注射液，其特征在于所述的微孔滤膜孔径 为0.22-0.45pm。
全文摘要
本发明涉及一种人参大黄注射液及其制备方法，本发明具有提高人参有效成分的提取率，降低大黄毒性成分的过量提取的风险，操作简便，耗时短的突出优势；发明所得的人参大黄注射液的配伍稳定性也优于现有技术。本发明的人参大黄注射液，对于类似配方下的粉针、冻干粉针、输液等注射剂型也有借鉴意义。
文档编号A61K36/185GK101181363SQ20071017757
公开日2008年5月21日 申请日期2007年11月19日 优先权日2007年11月19日
发明者冬 刘, 司成桃, 武宏伟 申请人:北京诚创康韵医药科技有限公司