专利名称：：一种鼻咽清毒颗粒的质量控制方法
技术领域：
：本发明涉及中成药的质量控制方法，具体地说，本发明涉及一种鼻咽清毒颗粒的质量控制方法。技术背景鼻咽清毒颗粒是一种清热解毒、化痰散结的中成药(中药复方制剂)，在我国己应用多年，临床用于热毒蕴结鼻咽，鼻咽肿痛，以及鼻咽部慢性炎症，鼻咽癌放射治疗后分泌物增多等症，疗效肯定。鼻咽清毒颗粒由中药野菊花、苍耳子、重楼、茅莓根、两面针、夏枯草、龙胆、党参按照中成药颗粒的常规工艺制备而成。该标准收载于国家药品监督管理局国家药品标准。该标准的鉴定方法包括有(l)通过镁粉、盐酸使黄酮类物质呈红色的方法检测黄酮类成分，鼻咽清毒颗粒中野菊花、夏枯草含有黄酮类成分；(2)通过重氮对硝基苯酸使内酯类物质显红色的方法检测野菊花内酯，鼻咽清毒颗粒中野菊花含有野菊花内酯；(3)通过薄层色谱法检测鼻咽清毒颗粒中含有野菊花、夏枯草、龙胆苦苷，但前两者的化学鉴别法明显专属性不强，夏枯草的薄层色谱法专属性也不强，野菊花采用异辛烷-苯-氯仿-乙酸乙醋-甲酸(12:6:3:6:l)为展开剂拖尾严重，因此该方法难以有效鉴别鼻咽清毒颗粒，更由于无有效成分含量测定方法，不能有效控制其产品的质量。
发明内容本发明的目的就是为了克服目前鼻咽清毒颗粒的质量标准的缺点，提供一种专属性强、能更准确控制产品质量的鼻咽清毒颗粒的质量控制方法。本发明是这样实现的。本发明采用(l)薄层色谱法鉴别鼻咽清毒颗粒含有野菊花，并另以蒙花苷作为对照；(2)薄层色谱法鉴别鼻咽清毒颗粒中含有两面针；(3)采用高效液相色谱法检测鼻咽清毒颗粒中的龙胆苦苷含量。实际上，蒙花苷是野菊花的有效成份之一，而龙胆为鼻咽清毒颗粒主药4之一，龙胆苦苷为龙胆的有效成份之一，通过龙胆苦苷的含量反映制剂中的龙胆的含量。薄层色谱法鉴别鼻咽清毒颗粒中含有野菊花的较佳条件是取本品，加热水使溶解，放冷，用水饱和的正丁醇提取，合并正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇使溶解，滤过，滤液作为供试品溶液。另取野菊花对照药材，加水加热至沸腾，放冷，用水饱和的正丁醇提取，合并正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇使溶解，滤过，滤液制成对照药材溶液。再取蒙花苷对照品，加甲醇制成每lml含约0.2mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述三种溶液，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以正己烷-乙酸乙酉旨-丁酮-甲酸(2:5:5:i)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2%三氯化铝溶液，热风吹干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，分别显相同颜色的荧光斑点。薄层色谱法鉴别鼻咽清毒颗粒中含有两面针的较佳条件是取本品，加盐酸溶液(1—50，即将1体积的浓盐酸用水稀释至50体积)水浴加热使溶解，再加20X氢氧化钠溶液调pH值至1112，置分液漏斗中，加乙酸乙酯振摇提取，静置分层，合并上层液，蒸干，残渣加甲醇使溶解作为供试品溶液。另取两面针对照药材，加盐酸溶液(1—50)水浴加热20分钟，放冷，滤过，再加20X氢氧化钠溶液调pH值至1112，置分液漏斗中，加乙酸乙酯振摇提取，静置分层，合并上层液，蒸千，残渣加甲醇使溶解制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述供试品溶液、对照药材溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，薄层板置以正己烷-乙酸乙酯-甲醇-异丙醇-浓氨试液(20:5:i:i:o.12)为展开剂的展开缸中，预饱和20分钟，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。高效液相色谱法测定鼻咽清毒颗粒中的龙胆苦苷的较佳条件是含量测定照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VID)测定。色谱条件与系统适用性试验用十八垸基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水(23:77)为流动相；检测波长270nm。理论板数按龙胆苦苷峰计算应不低于3000。对照品溶液的制备精密称取龙胆苦苷对照品适量，加30%的甲醇制成每lml含40l^g的溶液，即得。供试品溶液的制备取本品，研细，取约lg，精密称定，置25ml容量瓶中，加30%甲醇至近刻度，超声处理10分钟，放冷，加30%甲醇至刻度，摇匀，取上清液，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液，注入液相色谱仪，测定，即得。本品每lg含龙胆以龙胆苦苷(C16H2。09)计，不得少于0.5mg。该测定方法经过方法学验证，具有分离度好、灵敏度高、准确度高等优点。回归方程为y二23239954.6745x+17336.0833(相关系数r=0.9999)，表明龙胆苦苷在0.008640.1728mg/ml浓度范围内具有良好的线性关系；准确度试验平均回收率为98.0%，RSD%=0.63%;重复性实验RSD%=0.40%。IO批供试品测定结果<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>本发明的鼻咽清毒颗粒的质量控制方法，克服了现有的化学鉴别方法专属性不强、原薄层色谱法夏枯草的专属性不强、原野菊花薄层色谱法存在无有效成份对照及拖尾严重、以及无有效成分含量测定方法的缺点，提高了鼻咽清毒颗粒质量控制方法的专属性和质量稳定性，确保了人们用药的安全和有效性。具体实施方式下面结合实施例对本发明作进一步说明。取申请人生产的批号为5072的鼻咽清毒颗粒。鉴别(1)取本品5g，加热水10ml使溶解，放冷，用水饱和的正丁醇提取2次，每次20ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇5ml使溶解，滤过，滤液作为供试品溶液。另取野菊花对照药材0.5g，加水20ml，加热至沸腾15分钟，自"放冷，用水饱和的正丁醇提取2次"起，同供试品溶液制备方法制成对照药材溶液。再取蒙花苷对照品，加甲醇制成每lml含0.2mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述三种溶液各2ul，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以正己烷-乙酸乙酯-丁酮-甲酸(2:5:5:i)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2%三氯化铝溶液，热风吹干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，分别显相同颜色的荧光斑点。(2)取本品20g，加盐酸溶液(1—50)50ml水浴加热使溶解，再加20%氢氧化钠溶液调pH值至1112，置分液漏斗中，加乙酸乙酯振摇提取2次，每次30ml，静置分层，合并上层液，蒸干，残渣加甲醇0.5ml使溶解作为供试品溶液。另取两面针对照药材0.25g，加盐酸溶液(1—50)50ml水浴加热20分钟，放冷，滤过，自"再加20X氢氧化钠溶液调pH值至1112"起，同供试品溶液制备方法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述供试品溶液6W、对照药材溶液114，分别点于同一硅胶G薄层板上，薄层板置以正己垸-乙酸乙酯-甲醇-异丙醇-浓氨试液(20:5:i:i:o.12)为展开剂的展开缸中，预饱和20分钟，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。检査应符合颗粒剂项下有关的各项规定(中国药典2005年版一部附录IC)。含量测定照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VID)测定。色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇_水(23:77)为流动相；检测波长270nm。理论板数按龙胆苦苷峰计算应不低于3000。对照品溶液的制备精密称取龙胆苦苷对照品适量，加30%的甲醇制成每lml含40Pg的溶液，即得。供试品溶液的制备取本品20g,研细，取约lg，精密称定，置25ml容量瓶中，加30%甲醇至近刻度，超声处理10分钟，放冷，加30%甲醇至刻度，摇匀，取上清液，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20W，注入液相色谱仪，测定，即得。'本品每lg含龙胆以龙胆苦苷(C,晶。OJ计，不得少于0.5mg。本批号产品每lg含有龙胆苦苷为1.0738mg。权利要求1、一种鼻咽清毒颗粒的质量控制方法，包括采用(1)薄层色谱法鉴别鼻咽清毒颗粒含有野菊花，并另以蒙花苷作为对照；(2)薄层色谱法鉴别鼻咽清毒颗粒中含有两面针；(3)采用高效液相色谱法检测鼻咽清毒颗粒中的龙胆苦苷含量。2、根据权利要求1所述的一种鼻咽清毒颗粒的质量控制方法，其特征在于薄层色谱法鉴别鼻咽清毒颗粒中含有野菊花的条件是取本品，加热水使溶解，放冷，用水饱和的正丁醇提取，合并正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇使溶解，滤过，滤液作为供试品溶液；另取野菊花对照药材，加水加热至沸腾，放冷，用水饱和的正丁醇提取，合并正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇使溶解，滤过，滤液制成对照药材溶液；再取蒙花苷对照品，加甲醇制成每lml含约0.2mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以正己烷-乙酸乙酯-丁酮-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2%三氯化铝溶液，热风吹干，置紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，分别显相同颜色的荧光斑点。3、根据权利要求1所述的一种鼻咽清毒颗粒的质量控制方法，其特征在于薄层色谱法鉴别鼻咽清毒颗粒中含有两面针的较佳条件是取本品，加盐酸溶液水浴加热使溶解，再加20X氢氧化钠溶液调pH值至1112，置分液漏斗中，加乙酸乙酯振摇提取，静置分层，合并上层液，蒸干，残渣加甲醇使溶解作为供试品溶液；另取两面针对照药材，加盐酸溶液水浴加热20分钟，放冷，滤过，再加20X氢氧化钠溶液调pH值至1112，置分液漏斗中，加乙酸乙酯振摇提取，静置分层，合并上层液，蒸干，残渣加甲醇使溶解制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液、对照药材溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，薄层板置以正己烷-乙酸乙酯-甲醇-异丙醇-浓氨试液为展开剂的展开缸中，预饱和20分钟，展开，取出，晾干，置紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。4、根据权利要求1所述的一种鼻咽清毒颗粒的质量控制方法，其特征在于高效液相色谱法测定鼻咽清毒颗粒中的龙胆苦苷的较佳条件是含量测定照高效液相色谱法测定；色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅垸键合硅胶为填充剂；甲醇-水为流动相；检测波长270nm;理论板数按龙胆苦苷峰计算应不低于3000;对照品溶液的制备精密称取龙胆苦苷对照品适量，加30%的甲醇制成每lml含40Pg的溶液，即得；供试品溶液的制备取本品，研细，取约lg，精密称定，置25ml容量瓶中，加30%甲醇至近刻度，超声处理10分钟，放冷，加30%甲醇至刻度，摇匀，取上清液，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液，注入液相色谱仪，测定，即得；本品每lg含龙胆以龙胆苦苷计，不得少于0.5mg。全文摘要一种鼻咽清毒颗粒的质量控制方法，包括采用(1)薄层色谱法鉴别鼻咽清毒颗粒含有野菊花，并另以蒙花苷作为对照；(2)薄层色谱法鉴别鼻咽清毒颗粒中含有两面针；(3)采用高效液相色谱法检测鼻咽清毒颗粒中的龙胆苦苷含量。本发明的鼻咽清毒颗粒的质量控制方法，克服了现有的化学鉴别方法专属性不强、原薄层色谱法夏枯草的专属性不强、原野菊花薄层色谱法存在无有效成份对照及拖尾严重、以及无有效成分含量测定方法的缺点，提高了鼻咽清毒颗粒质量控制方法的专属性和质量稳定性，确保了人们用药的安全和有效性。文档编号A61K36/88GK101306139SQ200810029030公开日2008年11月19日申请日期2008年6月26日优先权日2008年6月26日发明者冯倩玲,彭中芳,祈梁,郑清媛,鍶景希,黄夏敏申请人:广州奇星药业有限公司