专利名称：：灯盏乙素苷元氨基甲酸酯类衍生物、其制备方法和用途的制作方法
技术领域：
：本发明属药物化学领域，涉及一类新型的灯盏乙素苷元衍生物，具体涉及灯盏乙素苷元4，-位氨基甲酸酯类衍生物、其制备方法和在制备治疗血管性痴呆、阿尔茨海默氏病(早老性痴呆)等神经退行性疾病药物中的应用。
背景技术：
：血管性痴呆(VascularDementia,VD)是由各种类型的脑血管疾病(包括缺血性脑血管病、出血性脑血管疾病、急性和慢性缺氧性脑血管疾病等)所致的智能及认知功能障碍的临床综合征，其主要临床表现包括认知能力、记忆力和社会生活能力的减退以及情感、性格的改变，是一种慢性进行性疾病。在中国、日本等亚洲国家血管性痴呆是老年期痴呆的第一位原因；随着世界人口向老龄化的不断推进，脑血管病日益增多，血管性痴呆发病率有逐渐上升的趋势，严重影响老年人的工作和生活质量，并给社会和家庭带来沉重的经济和精神负担。因此，VD已成为当今老年医学与精神医学领域中一个重要的研究热点。血管性痴呆由于发病机制复杂，尚无能够阻断疾病发展的药物，目前临床治疗以改善脑部血液循环和脑代谢，加强脑部营养为主。近年来，国内外研究表明，在VD患者表现认知功能损伤的同时也经常伴有胆碱能系统的异常。VD患者海马区ChAT阳性神经元及纤维密度减低，脑内不同部位的ChAT活性下降，在VD患者脑脊液中的ACh浓度明显低于正常水平，并且其浓度降低的程度与痴呆的严重程度呈正相关；而脑缺血可以导致脑内乙酰胆碱酯酶活性上升；同时，也发现一些乙酰胆碱酯酶抑制剂如HuperzineA和Revastigmine，可以保护缺血造成的神经元损伤，且可以促进脑缺血后神经损伤和脑功能的恢复。这表明乙酰胆碱酯酶抑制剂也可用于血管性痴呆的治疗。灯盏花是菊科飞蓬属植物短葶飞蓬5"w'sca;^e(V朋d//aMMa^的全草，又名灯盏细辛、灯盏菊等，主要分布于我国南方各地。二十世纪70年代经临床验证，证明灯盏花粗提物对高血压、脑溢血、脑血栓形成、脑栓塞多发性神经炎、慢性珠网膜炎及其后遗症具有明显疗效，由此引起人们对灯盏花粗提物有效成分研究的广泛兴趣。经过多年研究，从灯盏花中分离鉴定了多种化学成分，如吡喃酮类、黄酮类、内酯类、氨基酸类、多糖类等，并发现灯盏乙素(又名野黄芩苷)是灯盏花提取物的主要活性成分，其粗提物作为心脑血管治疗药物已用于临床；研究表明，灯盏乙素还具有抗肿瘤、抗HIV病毒、抗肝纤维化、抗老年痴呆、神经保护等广泛药理活性。研究发现，采用灯盏花素治疗VD20天后，简易智能状态检查表(MMSE)，生活功能量表(ADL)，长谷川痴呆量表(HDS)，痴呆严重程度临床评定量表(WMS)评分均有显著改善，且全血粘度、血浆粘度、红细胞聚集指数、纤维蛋白原等血液流变学指标均下降，与对照组比较有显著性差异，同时，过氧化物歧化酶(SOD)明显上升，丙二酸(MDA)明显下降。表明灯盏花素对VD的治疗可能通过改善脑循环，增加血供，抑制再灌注蛋白激酶的激活及抑制C^+超载、减少自由基、减少兴奋性氨基酸的释放等途径阻止细胞凋亡，减轻脑缺血再灌注损伤而起作用；同时组织学染色发现灯盏花素减少了海马CA1区细胞病理改变，如细胞核固縮、细胞内水肿及椎体细胞层排列混乱等，证明了灯盏花素使血管性痴呆大鼠的症状得到改善，防止了由自由基引起的神经元损伤和钙离子增多，对于脑血管和血管性痴呆具有神经保护作用。此外，灯盏花素还可用于治疗老年痴呆。用灯盏花素片治疗老年痴呆，治疗组总有效率62.85%，对照组(喜得镇)总有效率36%，两组对比有显著差异；并且还发现，灯盏花素能明显改善东莨菪碱所致的小鼠学习、记忆障碍，明显改善乙醇所致的大、小鼠记忆再现障碍，并使二者的学习能力明显加强，与脑复素(脑活素，脑蛋白水解物)比较，作用相近或稍强。由于灯盏乙素存在溶解性差、生物利用度低、体内半衰期短、且毒副作用严重等问题，以灯盏乙素为先导物进行结构改造，以期发现药理活性及疗效更理想的治疗药物将具有重要意义。对灯盏乙素的体内代谢研究发现，灯盏乙素苷元为其活性代谢物，具有较强生物活性，因此，以灯盏乙素苷元为先导物，通过化学结构修饰，在其4，-位引入乙酰胆碱酯酶抑制活性药效基团——氨基甲酸酯，设计了一系列灯盏乙素苷元4'-位氨基甲酸酯衍生物，希望能从抗血栓、扩张脑血管、抗自由基、神经保护和增强中枢乙酰胆碱能神经功能等多作用靶点达到协同治疗血管性痴呆、阿尔茨海默氏病(早老性痴呆)。
发明内容本发明的目的在于提供一类新型的灯盏乙素苷元衍生物(灯盏乙素苷元4，-位氮基甲酸酯衍生物)；本发明的另一目的是公开该类化合物的制备方法；本发明的第三个目的是公开该类化合物在治疗血管性痴呆、阿尔茨海默氏病(早老性痴呆)等神经退行性疾病药物中的应用。本发明所提供的灯盏乙素苷元4'-位氨基甲酸酯衍生物的化学结构通式为<formula>formulaseeoriginaldocumentpage6</formula>式中R,、R2可以相同或不同，R,、R2代表H、C，C,2脂肪烷烃、C~C7脂肪环垸烃、取代的C3C7脂肪环烷烃、芳基、供电子或吸电子取代的芳基、C广C6脂肪醇及其酯、C广C6羧酸及其酯，或R,、R2分别与C、O及N原子环合形成四元环、五元环、六元环或七元环。本发明所提出的灯盏乙素苷元衍生物可通过以下方法制备得到<formula>formulaseeoriginaldocumentpage6</formula>上述化学反应式给出了灯盏乙素苷元4'-位氨基甲酸酯衍生物的合成方法。以灯盏乙素苷元(1)为起始原料，将其与二苯基二氯甲烷(2)反应，得6,7-(二苯基亚甲基二氧)-5,4'-二羟基黄酮(3)，6，7-位羟基被保护的苷元分别与氨基甲酰氯或异氰酸酯(R「H时)衍生物(4)縮合，得6,7-位羟基被保护的灯盏乙素苷元4，-位氨基甲酸酯衍生物(5)，所得中间体再经催化氢解除保护基，得灯盏乙素苷元4'-位氨基甲酸酯衍生物(I)。其具体制备方法描述如下灯盏乙素苷元(1)与二苯基二氯甲烷(2)经縮合反应得中间体(3)，反应中无需加入有机溶剂，其中，(1)与(2)反应时的摩尔投料比为1.0丄0~3.0，优选摩尔投料比为1.0:1.2~2.0;反应温度为100~230°C，优选反应温度为150°C200°C;反应时间为10分钟120分钟，优选反应时间为10分钟~1小时；中间体(3)在碱性和惰性溶剂条件下分别与氨基甲酰氯或异氰酸酯(R,=H时)衍生物(4)縮合，得6,7-(二苯基亚甲基二氧)-5-羟基-4'-氨基甲酸酯-黄酮衍生物(5)，其中，中间体(3)与(4)的摩尔投料比为1.0:1.0~3.0，优选摩尔投料比为1.0:1.2~1.5;反应所用碱为碱金属或碱土金属氢氧化物、碱金属或碱土金属碳酸盐、碱金属或碱土金属碳酸氢盐、有机叔胺类或季铵碱类(如三乙胺、三丁胺、三辛胺、吡啶、N，N-二甲基-a-苯乙胺、4-甲基吗啉、四丁基氢氧化铵)，优选碱为碳酸氢钠、碳酸钾、三乙胺、吡啶；碱用量与原料(4)的摩尔投料比为1.0~4.5:1.0，优选摩尔投料比为1.02.0:1.0;反应所用惰性溶剂为乙醚、四氢呋喃、ATJV-二甲基甲酰胺、二甲基亚砜、二氯甲烷、氯仿、C广C8脂肪酮、苯、正庚烷、甲苯、吡啶，优选溶剂为WiV-二甲基甲酰胺、丙酮、吡啶、四氢呋喃；反应温度为013(TC，优选反应温度为室温8(TC;縮合反应时间为2小时7天，优选反应时间为24~48小时；中间体(5)在催化剂和溶剂作用下得灯盏乙素苷元4，-位氨基甲酸酯衍生物(I)，其中，所用催化剂为5%Pd/C、10%Pd/C、10%Pd(OH)2/C，优选催化剂为10%Pd(OH)2/C;所用溶剂为C广C6脂肪醇、iV,-二甲基甲酰胺、四氢呋喃，优选溶剂为乙醇；反应温度为室温10(TC，优选反应温度为室温。本发明提供的灯盏乙素苷元4'-位氨基甲酸酯衍生物(I)可与合适的无机碱通过药学上常规成盐方法得到其药学上可接受的盐，所述无机碱为碱金属或碱土金属氢氧化物、碱金属或碱土金属碳酸盐、碱金属或碱土金属碳酸氢盐均可使用。本发明的灯盏乙素苷元4'-位氨基甲酸酯衍生物进行了如下的生物活性筛选1、乙酰胆碱酯酶抑制活性乙酰胆碱酯酶(AChE)酶源采用大鼠皮层5%匀浆(用75mmol，pH7.4，4'C磷酸缓冲液作匀浆介质)，实验前按10:1加4mmol丁酰胆碱酯酶(BuChE)的选择性抑制剂四异丙基焦磷酰胺(&o-OMPA)，37。C保温5分钟，用比色法测定AChE活力。在梨形管中加入碘化硫代乙酰胆碱0.3mmol，0.1mol/LpH7.4磷酸钠缓冲液1.0ml和浓度为10—4mol/L的目标化合物DMSO溶液0.1ml，加水补至4ml(包括后加酶液量，每个化合物的反应终浓度为2.5xl0—6mol/L)，于37'C保温5分钟后加入酶液0.1ml，再保温8分钟后加入3%的十二垸基磺酸钠(SDS)溶液1.0ml终止反应，最后加0.2%的5,5'-联硫-2，2'-硝基-苯甲酸(DTNB,Ellman's试剂)溶液1.0ml显色，产生黄色5-硫-2-硝基苯甲酸阴离子，用752C型紫外可见分光光度计于440nm测定光密度(An)，所有样品均测双管并测定三遍，以未加化合物的测定管光密度作为100%(Ae。ntrol)，化合物测定管光密度与之比较，降低的百分率即为酶抑制率(An/Ac。rtrolxl00%);试验中以10%和20%DMSO0.1ml作为溶剂对照，同时做了相对应的药物颜色对照，测定结果均已扣除溶剂对照及颜色对照的影响。部分目标化合物对乙酰胆碱酯酶抑制活性如表一所示2、化合物对H202诱导的PC12细胞损伤的保护作用筛选PC12细胞用含10%小牛血清的DMEM培养液，以lxl()S个/mL密度接种于96孔培养板上，接种体积为100pL/孔，随后放入含5%C02的37t:恒温培养箱内培养。培养24小时后，给药组中加相应浓度的化合物10nL/孔，终浓度为10—5mol/L，10—6mol/L，预孵育2小时(对照组与损伤组分别加10pL/LPBS，使其体积保持相等)。PC12细胞孵育2小时后，在给药组与损伤组中分别加入100pM&02损伤剂10^L/孔(对照组加10pL/孔PBS)，30分钟后，将各组的培养液均换成无小牛血清的RPMI1640培养液继续放入恒温培养箱内培养24小时，培养液体积仍为100^L/L。继续培养24小时后，各组中加入5mg/mLMTT100nL/孔，进行活细胞染色。待3小时后，各组中加入100。/。DMSO终止液100nL/孔，充分溶解混匀。在490nm的波长下测定各组的OD值。测试结果重复3次，用Duncan'stest方法统计，各组数值表示为均数土S.E.M.，以对照组为100%，给药组及损伤组值以对照组的百分比表示，测试结果如表二所示具体实施例方式通过下面的实施例可对本发明进行进一步的描述，然而，本发明的范围并不限于下述实施例。本领域的专业人员能够理解，在不背离本发明的精神和范围的前提下，可以对本发明进行各种变化和修饰。实施例l6，7-(二苯基亚甲基二氧)-5，4'-二羟基黄酮(3)的制备在反应瓶中依次加入灯盏乙素苷元13.3g(0.047mol)和二苯基二氯甲垸16.7g(0.070mol)，混合均匀，在惰气保护下升温至170。C反应1小时，冷却至室温后，加入适量氯仿，趁热抽滤，滤液减压蒸除溶剂，残余物用氯仿重结晶，得浅棕色针状结晶13.83g，mp:250~252°C，收率65.9%。NMR(DMSO陽^，400MHz)《13.18(brs,1H,5-OH)，10.41(brs，1H，4'-OH)，7.95(d,J=8.8Hz，2H,Ar，-H3,5),7.61(s,1H,Ar-H8),7.59~7.56(m,4H，Ph-H),7.51~7.47(m,6H,Ph-H),6.94(d，J=8.8Hz,2H,Ar，-H2，6),6.88(s,1H，Ar-H3);HR-TOFMSw/z:449.1036([C28H1806-H]+计算值449.1025)。实施例26，7-(二苯基亚甲基二氧)-5-羟基-4'-(7V-四氢吡咯甲酰氧基)-黄酮(5a)的制备将1.0g(2.21mmo1)中间体3、0.35mmol四氢吡咯甲酰氯、30mlWW-二甲基甲酰胺和5ml无水吡啶加入反应瓶中，室温搅拌反应15小时(反应进程用TLC跟踪)；反应结束后，加入适量冰水，抽滤，少量冰水洗涤滤饼，所得粗品经柱层析纯化(洗脱液氯仿-乙酸乙酯)，得淡黄色粉末固体0.593g，mp:226~228°C，收率49.0%。NMR(CDC13,400MHz)<S7.86(d,J=8.8Hz,2H,Ar，-H3,5),7.64~7.61(m，4H,Ph-H),7.41~7.37(m,6H，Ph-H),7.31(d，/=8.8Hz,2H，Ar，-H2,6)，6.65(s,1H，Ar-H8)，6.62(s,1H,Ar-H3),3.56(t,/=6.8Hz，2H,NCH2-Ha),3.53(t,/=6.8Hz，2H,NCHrHp),1.92(t,/=6.8Hz，2H,p-CH2-Ha)，1.87(t，■/=6.8Hz，2H，P-CH2-HP)。实施例36，7-(二苯基亚甲基二氧)-5-羟基-4'-(AVV-二甲基氨基甲酰氧基)-黄酮(5b)的制备操作过程同实施例2，只是将四氢吡咯甲酰氯用W7V-二甲基氨基甲酰氯替代，得6，7-(二苯基亚甲基二氧)-5-羟基-4'-(7V，7V-二甲基氨基甲酰氧基)-黄酮的淡黄色粉末固体，mp:230~232°C，收率71.2%。&NMR(CDC13,400MHz)&7.86(d,/=8.8Hz,2H,Ar，-H3,5),7.64~7.61(m，4H,Ph-H)，7.41~7.37(m,6H，Ph-H),7.28(d，《/=8.8Hz，2H,Ar，-H2,6),6.65(s,IH,Ar-H8),6.62(s,IH,Ar-H3),3.13(s,3H,CH3),3.04(s，3H,CH3)。实施例46，7-(二苯基亚甲基二氧)-5-羟基-4'-(iVV-二乙基氨基甲酰氧基)-黄酮(5c)的制备操作过程同实施例2，只是将四氢吡咯甲酰氯用AUV-二乙基氨基甲酰氯替代，得6,7-(二苯基亚甲基二氧)-5-羟基-4'-(WiV-二乙基氨基甲酰氧基)-黄酮的淡黄色粉末固体，mp:216~218°C，收率67.9%。'HNMR(CDC13,400MHz)《:7.86(d,J=8.8Hz,2H,Ar，-H3,5),7.64~7.60(m,4H,Ph-H),7.43~7.37(m，6H，Ph-H),7.29(d,/=8.8Hz,2H，Ar，-H2,6),6.66(s,IH,Ar-H8),6.63(s,IH,Ar-H3),3.46(q,/=6.8Hz,2H,NCH2)，3.41(q,/=6.8Hz,2H,NCH2),1.27(t,6.8Hz,3H,CH3),1.22(t,/=6.8Hz,3H,CH3)。实施例56，7-(二苯基亚甲基二氧)-5-羟基-4'-(AyV-二异丙基氨基甲酰氧基)-黄酮(5d)的制备操作过程同实施例2，只是将四氢吡咯甲酰氯用A^V-二异丙基氨基甲酰氯替代，得6,7-(二苯基亚甲基二氧)-5-羟基-4'-(iV，iV-二异丙基氨基甲酰氧基)-黄酮的淡黄色粉末固体，mp:239241。C，收率50.4%。^NMR(CDC13,400MHz)《7.86(d，/=8.8Hz，2H,Ar，-H3,5),7.64~7.61(m,4H,Ph-H),7.42~7.38(m,6H,Ph-H),7.29(d,/=8.8Hz，2H,Ar，-H2,6)，6.66(s,1H，Ar-H8),6.63(s，1H，Ar-H3)，4.11(q,/=6.8Hz,1H,NCH)，3.99(q,J=6.8Hz,1H,NCH)，1.35(d,/=6.8Hz,6H,2xCH3),1.32(d，J=6.8Hz,6H，2xCH3)。实施例66，7-(二苯基亚甲基二氧)-5-羟基-4'-(;V-吗啉甲酰氧基)-黄酮(5e)的制备操作过程同实施例2，只是将四氢吡咯甲酰氯用iV-吗啉甲酰氯替代，得6，7-(二苯基亚甲基二氧)-5-羟基-4'-(iV-吗啉甲酰氧基)-黄酮的淡黄色粉末固体，mp:>242。C，收率52.5%。&應R(CDC13，400MHz)&7.87(d,/=8.8Hz,2H,Ar，-H3,5),7.63~7.61(m,4H,Ph-H)，7.42~7.38(m，6H，Ph-H),7.28(d,/=8.8Hz，2H，Ar，-H2,6),6.65(s,1H，Ar-H8),6.63(s，1H,Ar-H3)，3'70(t，/=4.8Hz，2H,NCH2),3.60(t,/=4.8Hz,2H,NCH2),3.77(t,■/=4.8Hz,4H，2xOCH2)。实施例76，7-(二苯基亚甲基二氧)-5-羟基-4'-(W-甲基-7V-乙基氨基甲酰氧基)-黄酮(5f)的制备操作过程同实施例2，只是将四氢吡咯甲酰氯用iV-甲基-iV-乙基氨基甲酰氯替代，得6，7-(二苯基亚甲基二氧)-5-羟基-4'-(7V-甲基-iV-乙基氨基甲酰氧基)-黄酮的淡黄色粉末固体，mp:192~194。C，收率80.8%。&NMR(CDC13,400MHz)&7.86(d，/=8.8Hz,2H,Ar，-H3，5),7.64~7.60(m,4H,Ph-H)，7.42~7.36(m,6H,Ph-H),7.28(d,/=8.8Hz，2H,Ar，-H2，6),6.65(s,1H,Ar-H8)，6.62(s,1H，Ar-H3),3.50(q,/=7.2Hz,1H,NCH2)，3.43(q,■/=7.2Hz,1H,NCH2),3.09(s，1.5H，NCH3),3.01(s,1.5H,NCH3)，1.26(t,/=7.2Hz,1.5H,CH3),1.21(t,J二7.2Hz，1.5H,CH3)。实施例86，7-(二苯基亚甲基二氧)-5-羟基-4'-(iV-哌啶甲酰氧萄-黄酮(5g)的制备操作过程同实施例2，只是将四氢吡咯甲酰氯用W-哌啶甲酰氯替代，得6,7-(二苯基亚甲基二氧)-5-羟基-4'-(iV-哌啶甲酰氧基)-黄酮的淡黄色粉末固体，mp:220-222°C，收率86.7%。'HNMR(CDC13,400MHz)&7.88(d，《/=8.8Hz，2H，Ar，-H3,5)，7.66~7.62(m,4H,Ph-H),7.437.40(m，6H,Ph-H),7.29(d,J=8.8Hz,2H，Ar，-H2,6),6.67(s，1H，Ar-H8),6.64(s，1H,Ar-H3)，3.64(m，2H,NCH2),3.55(m,2H，NCH2)，L68(m,6H,3xCH2)。实施例96，7-(二苯基亚甲基二氧)-5-羟基-4'-[iV-(4-苄基)哌啶甲酰氧基l-黄酮(5h)的制备操作过程同实施例2，只是将四氢吡咯甲酰氯用iV-(4-苄基)哌啶甲酰氯替代，得6，7-(二苯基亚甲基二氧)-5-羟基-4'-[AK4-苄基)哌啶甲酰氧基]-黄酮的淡黄色粉末固体，mp:98~100。C，收率71.5%。NMR(CDC13,400MHz)《7.92(d,J=8.8Hz,1H，Ar，-H3,5)，7.85(d,/=8.8Hz，1H，Ar，-H3，5),7.64~7.59(m，4H，Ph-H),7.43~7.38(m，6H，Ph-H)，7.33~7.19(m，5H,Ph-H),7.17(d，/=8.8Hz,1H,Ar'-H2，6)，7.14(d,J=8.8Hz，1H,Ar，-H2,6),6.65(s,0.5H,Ar-H8),6.62(s,0.5H，Ar-H3),6.58(s,0.5H,Ar-H8),6.50(s,0.5H,Ar-H3),4.27(t,/=15.2Hz,2H，PhCH2),2.95(m，1H，NCH2),2.74(m，1H,NCH2),2.61(m,1H,NCH2),2.59(m,1H,NCH2)，1.76(m,1.5H,CHCH2),1.73(m,1.5H,CHCH2),1.33(m,1H,CH2),L27(m，1H，CH2)。实施例106，7-(二苯基亚甲基二氧)-5-羟基-4'-[7V-(4-甲基)哌嗪甲酰氧基-黄酮(5i)的制备操作过程同实施例2，只是将四氢吡咯甲酰氯用4-甲基-l-哌嗪甲酰氯盐酸盐替代，得6,7-(二苯基亚甲基二氧)-5-羟基-4'-[AH4-甲基)哌嗪甲酰氧基]-黄酮的淡黄色粉末固体，收率67.5%。实施例116/7-(二苯基亚甲基二氧)-5-羟基-4'-(丙氨基甲酰氧萄-黄酮(5j)的制备在反应瓶中加入1.0g(2.21mmol)中间体3、无水四氢呋喃30ml和无水三乙胺0.46ml(3.31mmol)，室温搅拌5分钟后，滴加丙氨基异氰酸酯0.225g(2.65mmol)溶于5ml四氢呋喃的溶液，4050"C保温搅拌反应6小时(反应进程用TLC监测)；反应结束后，减压蒸除溶剂，所得粗品经柱层析纯化(洗脱液二氯甲烷-乙酸乙酯)，得淡黄色粉末固体1.053g，收率89.0%。实施例125，6，7-三羟基-4'-(iV-四氢吡咯甲酰氧基)-黄酮(Ia)的制备在反应瓶中加入中间体5a0.547g(l.OOmmol)和乙醇25ml，搅拌均匀后加入10%Pd(OH)2/C40mg，然后通氢气室温搅拌反应48小时，反应结束后，过滤，少量乙醇洗涤滤饼，滤液减压蒸除溶剂，残余物经丙酮重结晶，得淡黄色粉末固体0.268g，mp:212~24°C，收率70.0%。^NMR(DMSO-A,400MHz)《12.68(brs,1H5-0H)，10.59(brs,1H，7-OH)，8.63(brs,1H,6-OH),S.O^d,/-8.8Hz，2H,Ar，-H3,5),7.34(d，J=8.8Hz，2H，Ar，-H2,6)，6.93(s,1H,Ar-H8),6.63(s,1H，Ar-H3),3.53(t,/=6.8Hz，2H,NCH2-Ha),3.36(t，</=6.8Hz,2H，NCH2-HP)，1.92(t,^6.8Hz,2H,p-CH2-Ha),1.87(t，>/=6.8Hz,2H，p-CH2-Hp);HR-TOFMS(+Q)m/z:384.1080([C20H17NO7+H]+计算值384.1083)。实施例135，6，7-三羟基-4'-(iY，W-二甲基氨基甲酰氧基)-黄酮(Ib)的制备操作过程同实施例12，只是将中间体5a用中间体5b替代，得5,6，7-三羟基-4'-(AUV-二甲基氨基甲酰氧基)-黄酮的淡黄色粉末固体，mp:>242°C，收率62.5%。&画R(DMS0-4400MHz)3:12.68(brs，1H,5-OH),10.61(brs，1H,7-OH),8.85(brs,1H,6-OH),8.10(d,/=8.8Hz,2H,Ar，-H3,5),7.33(d，《/=8.8Hz,2H，Ar，-H2,6)，6.94(s,1H，Ar-H8),6.63(s,1H,Ar-H3),3.07(s,3H,CH3),2.94(s,3H，CH3);HR-TOFMS(+Q)附/z:358.0卯0([d8H!5N07+H]+计算值358.0927)。实施例145，6，7-三羟基-4'-(AyV-二乙基氨基甲酰氧基)-黄酮(Ic)的制备操作过程同实施例12，只是将中间体5a用中间体5c替代，得5,6，7-三羟基-4'-(7V,iV-二乙基氨基甲酰氧基)-黄酮的淡黄色粉末固体，mp:182~184'C，收率47.7%。'HNMR(DMSO-A,400MHz)&12.68(brs,1H,5-OH),10.60(brs,1H,7-OH),8.85(brs，1H，6國OH),8.10(d,/=8.8Hz,2H,Ar，-H3,5),7.33(d，J=8.8Hz,2H,Ar，-H2,6)，6.94(s,1H,Ar-H8),6.63(s,IH,Ar-H3)，3.43(q,J=6.8Hz，2H,NCH2)，3.13(q,/=6.8Hz,2H，NCH2)，1.22("/=6.8Hz,3H,CH3)，1.13(t，《/=6.8Hz,3H,CH3);HR-TOFMS(+Q)w/z:386.1231([C2oHwN07+H〗+计算值386.1240)。实施例155，6，7-三羟基-4'-(7V,7V-二异丙基氨基甲酰氧基)-黄酮(Id)的制备操作过程同实施例12，只是将中间体5a用中间体5d替代，得5,6,7-三羟基-4'-(A^V-二异丙基氨基甲酰氧基)-黄酮的淡黄色粉末固体，inp:206208°C，收率63.0%。^NMR(DMSO-A,400MHz)&12.67(brs,1H,5-OH),10.56(brs，IH,7-OH),8.81(brs，IH,6-OH),8.09(d，/=8.8Hz,2H,Ar，-H3，5),7.30(d,/=8.8Hz，2H，Ar，-H2,6),6.92(s,1H，Ar-H8)，6.63(s,1H，Ar-H3),4.01(q,/=6.8Hz，2H,2xNCH),1.27(d，/=6.8Hz，12H,4xCH3);HR國TOFMS(+Q)w/z:414.1507([(:221123]^07+司+计算值414.1553)。实施例165，6，7-三羟基-4'-(JV-吗啉甲酰氧基)-黄酮(Ie)的制备操作过程同实施例12，只是将中间体5a用中间体5e替代，得5,6,7-三羟基-4'-(W-吗啉甲酰氧基)-黄酮的淡黄色粉末固体，mp:>242°C，收率47.2%。1HNMR(DMSO-4,400MHz)&12.66(brs，IH,5-OH),10.57(brs，1H，7-OH),8.81(brs，IH,6-OH)，8.10(d，/=8.8Hz，2H,Ar，-H3，5)，7.36(d，J=8.8Hz,2H,Ar，-H2,6)，6.93(s,IH,Ar-H8),6.63(s,IH,Ar-H3),3.67(t,/=4.8Hz,4H,2xNCH2),3.61(m,2H,OCH2),3.44(m,2H，OCH2);HR-TOFMS(+Q)附/z:400.1002([C2。HnN08+H]+计算值400.1032)。实施例175，6，7-三羟基-4'-(7V-甲基-7V-乙基氨基甲酰氧基)-黄酮(If)的制备操作过程同实施例12，只是将中间体5a用中间体5f替代，得5，6，7-三羟基-4'-(iV-甲基-7V-乙基氨基甲酰氧基)-黄酮的淡黄色粉末固体，mp:200~202°C，收率50.0%。NMR(DMSO-flf(5,400MHz)&12.67(brs,1H,5-OH),10.56(brs,1H,7隱OH),8.81(brs，1H,6-OH)，8.09(d,/=8.8Hz,2H，Ar，-H3,5),7.32(d,J=8.8Hz,2H，Ar，-H2,6),6.92(s,1H，Ar-H8),6.63(s，1H,Ar-H3)，3.45(q，7=7.2Hz，IH,NCH2)，3.38(q,/=7.2Hz,1H，NCH2)，3.05(s，1.5H，NCH3)，2.92(s,1.5H,NCH3),1.20(t,/=7.2Hz，1.5H,CH3),1.12(t,7.2Hz,1.5H,CH3);HR-TOFMS(+Q)w/z:372.1049([Ci9HnN07+H]+计算值372.1083)。实施例185，6，7-三羟基-4'-(7V-哌啶甲酰氧基)-黄酮(Ig)的制备操作过程同实施例12，只是将中间体5a用中间体5g替代，得5，6,7-三羟基-4'-(7V-哌啶甲酰氧基)-黄酮的淡黄色粉末固体，mp:196~198°C，收率55.4%。&NMR(DMSO-c4,400MHz)&12.69(brs，1H，5-OH)，10.60(brs，1H,7-OH),8.86(brs,1H,6-OH),8.09(d,J=8.8Hz，2H，Ar，-H3,5),7.33(d，/=8.8Hz,2H,Ar，-H2,6),6.94(s,1H，Ar-H8),6.63(s，1H,Ar-H3)，3.58(m，2H,NCH2),3.42(m,2H,NCH2)，1.60(m，6H，3xCH2);HR-TOFMS(+Q)w々398.1204([C2H,9N07+H]+计算值398.1240)。实施例195，6，7-三羟基-4'-[7V-(4-苄基)哌啶甲酰氧基]-黄酮(Ih)的制备操作过程同实施例12，只是将中间体5a用中间体5h替代，得5,6，7-三羟基-4'-[iV-(4-苄基)哌啶甲酰氧基]-黄酮的淡黄色粉末固体，mp:176~178°C，收率44.3%。!HNMR(CDC13，400MHz)&7.72(d,J=8.8Hz，1H，Ar，-H3,5)，7.68(d,J=8.8Hz，IH,Ar，-H3,5),7.34~7.17(m,5H，Ph-H)，7.19(d,/=8.8Hz，IH,Ar，-H2，6),7.13(d,8.8Hz,IHAr，-H2,6),6.51(s,0.5H,Ar-H8),6.50(s,0.5H,Ar-H3),6.42(s，0.5H,Ar-H8),6.13(s,0.5H,Ar-H3),4.29(t,/=15.2Hz,2H,PhCH2),2,97(m，IH,NCH2),2.85(m，IH,NCH2)，2.63(m,IH,NCH2),2.61(m,IH,NCH2),1.78(m,1.5H,CHCH2),1.75(m,1.5H,CHCH2),1.32(m,1H,CH2)，1.29(m,1H，CH2);HR-TOFMS(+Q)附/z:488.1687([(:281125>^07+司+计算值488.1709)。实施例205，6，7-三羟基-4'-7V-(4-甲基)哌嗪甲酰氧基]-黄酮(Ii)的制备操作过程同实施例12，只是将中间体5a用中间体5i替代，得5，6，7-三羟基-4'-[AK4-甲基)哌嗪甲酰氧基]-黄酮的淡黄色粉末固体，收率48.7%。HR-TOFMS(+Q)w/z:413.1340([(:211120]^207+11]+计算值413.1349)。实施例215,6，7-三羟基-4'-(丙氨基甲酰氧基)-黄酮(Ij)的制备操作过程同实施例12,只是将中间体5a用中间体5j替代，得5，6,7-三羟基-4'-(丙氨基甲酰氧基)-黄酮的淡黄色粉末固体，收率72.8%。HR-TOFMS(+Q)w/z:372.1068([C,9HnN07+H]+计算值372.1083)。实施例22生物活性测试结果表一部分目标物对乙酰胆碱酯酶抑制百分率<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>结论部分目标化合物对乙酰胆碱酯酶具有显著的抑制作用，且抑制活性较阳性对照药物-Rivastigmine强。表二部分目标物对抗H20z诱导的PC12细胞损伤测定结果<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>结论目标化合物对过氧化氢诱导的PC12细胞损伤均有不同程度的保护作用。本发明不限于上述实施例权利要求1.一类具有如下通式(I)的灯盏乙素苷元衍生物，及其药学上可接受的盐其特征在于R1、R2可以相同或不同，R1、R2代表H、C1～C12脂肪烷烃、C3～C7脂肪环烷烃、取代的C3～C7脂肪环烷烃、芳基、供电子或吸电子取代的芳基、C1～C6脂肪醇及其酯、C1～C6羧酸及其酯，或R1、R2分别与C、O及N原子环合形成四元环、五元环、六元环或七元环。2.如权利要求1所述化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于化合物的制备包括如下步骤<formula>formulaseeoriginaldocumentpage2</formula>以灯盏乙素苷元(1)为起始原料，将其与二苯基二氯甲烷(2)反应，得6，7-(二苯基亚甲基二氧)-5,4'-二羟基黄酮(3)，6,7-位羟基被保护的苷元分别与氨基甲酰氯或异氰酸酯(R产H时)衍生物(4)縮合，得6,7-位羟基被保护的灯盏乙素苷元4，-位氨基甲酸酯衍生物(5)，所得中间体再经催化氢解除保护基，得灯盏乙素苷元4'-位氨基甲酸酯衍生物(I)。3.如权利要求1所述化合物的制备方法，其特征在于灯盏乙素苷元(1)与二苯基二氯甲烷(2)经缩合反应得中间体(3)，反应中无需加入有机溶剂，其中，(1)与(2)反应时的摩尔投料比为1.0:1.03.0;反应温度为100~230°C;反应时间为10分钟120分钟。4.如权利要求1所述化合物的制备方法，其特征在于，中间体(3)在碱性和惰性溶剂条件下分别与氨基甲酰氯或异氰酸酯(R产H时)衍生物(4)縮合，得6,7-(二苯基亚甲基二氧)-5-羟基-4'-氨基甲酸酯-黄酮衍生物(5)，其中，中间体(3)与(4)的摩尔投料比为1.0丄03.0;反应所用碱为碱金属或碱土金属氢氧化物、碱金属或碱土金属碳酸盐、碱金属或碱土金属碳酸氢盐、有机叔胺类或季铵碱类(如三乙胺、三丁胺、三辛胺、吡啶、N,N-二甲基-oc-苯乙胺、4-甲基吗啉、四丁基氢氧化铵)；碱用量与原料(4)的摩尔投料比为1.04.5:1.0;反应所用惰性溶剂为乙醚、四氢呋喃、A^V-二甲基甲酰胺、二甲基亚砜、二氯甲烷、氯仿、C3Cs脂肪酮、苯、正庚垸、甲苯、吡啶；反应温度为0~130°C;縮合反应时间为2小时7天。5.如权利要求1所述化合物的制备方法，其特征在于，中间体(5)在催化剂和溶剂作用下得灯盏乙素苷元4，-位氨基甲酸酯衍生物(I)，其中，所用催化剂为5%Pd/C、10°/。Pd/C、10%Pd(OH)2/C;所用溶剂为C广C6脂肪醇、AUV-二甲基甲酰胺、四氢呋喃；反应温度为室温10(TC。6.如权利要求1所述化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，所述的药学上可接受的盐是(I)与碱金属或碱土金属氢氧化物、碱金属或碱土金属碳酸盐、碱金属或碱土金属碳酸氢盐所形成的盐。7.如权利要求1所述的灯盏乙素苷元衍生物，在治疗血管性痴呆、阿尔茨海默氏病(早老性痴呆)等神经退行性疾病药物中的应用。全文摘要本发明涉及一类新型的灯盏乙素苷元4’-位氨基甲酸酯衍生物(I)，以及它的制备方法和用途。药理实验证明，这类化合物具有明显的乙酰胆碱酯酶抑制活性和对H<sub>2</sub>O<sub>2</sub>诱导的PC12细胞损伤均有不同程度的保护作用，因而可用于制备在治疗血管性痴呆、阿尔茨海默氏病(早老性痴呆)等神经退行性疾病药物中的应用。文档编号A61P25/00GK101337956SQ200810045869公开日2009年1月7日申请日期2008年8月22日优先权日2008年8月22日发明者贝吴,怡沈,勇邓,钟裕国申请人:四川大学