专利名称：：一种治疗艾滋病无症状hiv感染期的中药片的制作方法
技术领域：
：本发明涉及医药领域，特别是一种治疗艾滋病无症状HIV感染期的中药片(又称扶正排毒1号)。二、
背景技术：
艾滋病全称为获得性免疫缺陷综合征(AcquiredImmunodeficiencySyndrome,AIDS),由人类免疫缺陷病毒(HumanImmunodeficiencyVirus,HIV)感染引起，导致被感染者免疫功能的部分或完全丧失，CD4+T淋巴细胞数量的减少，功能降低，继而发生多系统、多器官、多病原体的复合感染(机会性感染)和肿瘤等。人体从HIV感染到AIDS发病，需要经历很长一段时间，大致经过三个时期潜伏期、无症状期、最后发展成AIDS。在全球研究艾滋病的热潮中，许多领域取得了较大的进展，尤其在抗病毒治疗方面表现突出，国际上通用的鸡尾酒疗法(HAART)，取得了令人振奋的效果，但并不能完全清除体内的艾滋病病毒，早期应用存在诸多潜在危险，如药物毒性、病毒变异及耐药性等，使相当数量的患者不适宜或不能使用抗病毒治疗。WHO根据临床症状、CD4+细胞计数以及血桨HIV-RNA进行临床分期，制定并推荐抗病毒治疗指征。大量的无症状HIV感染者不适宜抗病毒治疗，任其发展至艾滋病期才给予抗病毒治疗。据报道，中国约有70万人感染艾滋病病毒，其中艾滋病病人约8.5万例，而其余大部分皆处于无症状感染期。因此基于中医"治未病"的学术思想，把此期作为中医药治疗艾滋病的黄金切入点，实施对无症状HIV感染者早期干预的临床研究，以期研制出针对无症状HIV感染者进行早期干预的中药新药，已成为中医药治疗艾滋病的热点和重点。三、
发明内容针对上述情况，本发明之目的就是提供一种治疗艾滋病无症状HIV感染期的中药片，以解决不适合抗病毒治疗的艾滋病无症状HIV感染期的治疗问题，其解决的技术方案是，本发明药物采用西洋参50g80g、黄芪130g170g、白术130g170g、防风100g130g、女贞子130g170g、山茱萸100g130g、南沙参100g150g、紫草100g130g、连翘100g130g、白花蛇舌草130g170g、甘草40g80g作中药原料制成，其中西洋参粉碎成细粉备用；白术、防风、连翘碎断，用多功能提取罐(水蒸汽蒸馏)提取白术、防风、连翘三药的芳香水256ml，再进行油水分离，得挥发油，提取挥发油后的水液与药渣备用；提挥发油后的药渣与其余七味药加中药原料总重量6-8倍的水煎煮三次，每次煎1-2小时，合并三次煎液及提油后的水液，静置48小时，滤过，滤液、减压浓縮至稠膏，干燥，粉碎，加入上述备用的西洋参细粉、挥发油及适量的糊精，混匀，制粒，压片，包衣，即得，可制成片或胶囊还可加蜂蜜制成蜜丸，本发明产品有效用于艾滋病无症状HIV感染期的治疗，其生产方法新颖、独特、科学，具有重要的临床意义。四附图为本发明的工艺流程图。五具体实施方式以下结合附图对本发明的具体实施方式作详细说明。由附图给出，本发明在具体实施时是由西洋参50g80g、黄芪130g170g、白术130g170g、防风100g130g、女贞子130g170g、山茱萸100g130g、南沙参100g150g、紫草100g130g、连翘100g130g、白花蛇舌草130g170g、甘草40g80g作中药原料制成，其中西洋参粉碎成细粉备用；白术、防风、连翘碎断，用多功能提取罐(水蒸汽蒸馏)提取白术、防风、连翘三药的芳香水256ml，再进行油水分离，得挥发油，提取挥发油后的水液与药渣备用；提挥发油的药渣其余七味加水煎煮三次，第一次加中药原料总重量的8倍量水，煎煮2小时，第二、三次各加中药原料总重量的6倍量水，煎煮各1小时，合并三次煎液及提油后的水液，静置48小时，滤过，滤液、减压浓縮至相对密度为1.20的稠膏，采用热风循环烘干箱，温度不超过65。C-8(TC干燥，粉碎，加入上述备用的西洋参细粉、挥发油及适量的糊精，混匀，制粒，压片，包衣，即得。实施例1:西洋参65g、黄芪150g、白术150g、防风115g、女贞子150g、山茱萸115g、南沙参125g、紫草115g、连翘115g、白花蛇舌草150g、甘草60g作中药原料制成，其中西洋参粉碎成细粉备用；白术、防风、连翘碎断，用多功能提取罐(水蒸汽蒸馏)提取白术、防风、连翘三药的芳香水256ml，再进行油水分离，得挥发油，提取挥发油后的水液与药渣备用；提挥发油后的药渣与其余七味加水煎煮三次，第一次加中药原料总重量的8倍量水，煎煮2小时，第二、三次各加中药原料总重量6倍量水，煎煮各1小时，合并三次煎液及提油后的水液，静置48小时，滤过，滤液、减压浓缩至相对密度为1.20的稠膏，采用热风循环烘干箱，温度不超过7(TC干燥，粉碎，加入上述备用的西洋参细粉、挥发油及适量的糊精，混匀，制粒，压片，包衣。所说的糊精加入量是表示视最后中药原料制取物的多少而定，作为附加剂的糊精作用一则起粘合剂(赋型剂)作用，二则，如中药原料制取的药物量不足，即作填充料(辅料)以补足所需药物量，如按组方计划制0.37g的1000片口服本发明药片，但最后药物得量只够制950片，只得再加0.37gX50片重量的糊精作填料，以补其不足，糊精同中药原料制得物混合均匀后，再制成0.37g重的1000片药片(其它类同，略)。在上述药物，其中，西洋参取根，洗净泥土，切片，晒干，补气养阴，清热生津，用于气虚阴亏，内热，咳喘痰血，虚热烦倦，消渴，口燥咽干。黄芪洗净泥土，切片、晒干，补气生血，固表排脓，用于气虚诸证，卫虚自汗，血虚证，久败疮。白术洗净，切片，晒干，补脾益气，燥湿利水，固表止汗，用于脾虚湿胜，食少泄泻，痰饮胀满，水肿浮肿，风湿身痛，表虚自汗。防风洗净去杂质泥土，切片、晒干，解表散寒，祛风解痉，用于风寒感冒，头痛寒热，风寒湿痹，关节疼痛，破伤风之牙关紧急，四肢痉挛。女贞子洗净泥土，蒸熟，晒干，滋补肝肾，乌发明目，用于肝肾精血不足，须发早白，头晕目昏。山茱萸取果实以沸水稍煮，去核取皮肉晒干，滋补肝肾，涩精止汗，用于腰膝痠软，头晕目眩，阳痿遗精，小便频数，月经过多，大汗不止。南沙参洗净经沸水烫后去皮，切片，晒干，润肺止咳，养胃生津，用于肺阴不足，咳嗽咽干，发热，胃津不足，口渴欲呕，食少。紫草洗净去泥土杂质，切片，晒干，活血凉血，解毒透疹，滑肠，用于预防麻疹，血热毒盛，痘疹欲出不畅，斑疹紫黑，干燥不润，外科痈肿。连翘洗净，蒸熟，晒干，清热解毒，消痈散结，用于上焦诸热，风热表证，外科热毒，痈肿疮疖，疔毒瘰疬，恶疮发背，斑疹诸毒。白花蛇舌草洗净泥土，切碎，晒干，解毒抗癌，活血利尿，用于各种癌症，急性阑尾炎。甘草洗净去泥土，切片，晒干，补脾益气，调和诸药，清热解毒，用于调和诸药，使之不争，缓和其峻。由上述情况可知，本发明中药片具有益气滋阴，清热解毒之功效，适用于气阴两虚、内蕴热毒型无症状HIV感染者，而临床实践和动物实验也完全证明了此药的有效作用，具体资料如下-一、临床资料1、选择病例标准①符合西医无症状HIV感染期的诊断标准；②年龄1865岁；③200/mm3《CD4+T淋巴细胞计数〈600/mm3;④未使用抗病毒药物及其它中药治疗者；⑤签署知情同意书。2、无症状HIV感染期诊断标准依照中华人民共和国国家HIV/AIDS的诊断标准(GB16000-1995，2001年修订版)执行。2.1.1流行病史不安全性生活史；静脉注射毒品史；输入未经抗HIV抗体检测的血液和血制品史；HIV抗体阳性所生的子女；其它(如职业暴露或医源性感染史)。2.1.2临床表现常无任何表现，可有全身淋巴结肿大。既往可有发热、头痛、乏力、咽痛、全身不适等症状；传染性单核细胞增多症者；颈、腋及枕部淋巴结肿大；脑膜脑炎或急性多发性神经炎；皮疹；肝脾肿大。2.1.3实验室检查HIV抗体阳性，并经过确认试验确认；患者血浆中HIV-RNA阳性。2.1.4确诊标准患者近期内有流行病学史和临床表现中的现象，再结合实验室检查即可确诊，或仅实验室检查中的第一项就可以确诊。3、治疗方案每曰口服本发明中药片，每次5片，每片0.37g，每日3次，温开水冲服。每3个月为1疗程，共观察4个疗程。4、疗效评定标准(1)症状与体征显效临床症状体征改善明显，总积分下降>3/4;有效临床症状体征改善较明显，总积分下降》l/3;稳定临床症状体征改善不明显，总积分下降<1/3;无效临床症状体征无改善或加重，总积分不下降，或有所增加。注凡治疗前症状体征积分为0者，不适合用尼莫地平法计算改善比；若治疗后积分不变视为有效，若治疗后积分增加，视为无效。(2)免疫指标有效疗后CD4+升高》50/mm、稳定疗后CD4+升高或下降〈50/mmV无效疗后CD4+下降》50/mm3。5、统计处理临床统计共69例无症状HIV感染者均为有偿献血感染的农村患者。男39例，女30例，男女病例之比为1:0.77;年龄在30岁到61岁之间(平均43.22±8.09岁)；感染时间在1985年至2004年之间，大部分在1990年至1994年之间，均于2002年至2005年在某区防疫站确诊，平均病程12.97±3.08年。扶正排毒1号治疗3个月、6个月、9个月和12个月后，对症状体征的有效率分别为75.36%、84.06%、78.26%和95.59%，对CD4+计数的有效率分别为56.25%、73.91%、59.70%和69.12%。分层统计结果提示，扶正排毒1号对CD4+在200400/mm3之间的无症状HIV感染者干预作用较好，提示扶正排毒1号对无症状HIV感染者的症状体征和免疫功能的改善有着较好的效果。临床研究提示，该药未发现不良反应，安全有效。6、结论由上述情况表明，本发明中药片对治疗艾滋病无症状HIV感染者效果明显，可有效减轻或控制无症状HIV感染者相关症状体征的出现，稳定或提高感染者的免疫功能，尤其对CD4+在200400/mm3之间的无症状HIV感染者干预作用较好，有重要的临床应用价值(意义)。二、动物模型实验情况为确保本发明中药片积极作用，申请人还作了大量的动物模型实验，有关情况如下(一)对环磷酰胺(CY)致免疫抑制小鼠免疫功能的影响1、实验动物小鼠，昆明种，由河南省医学实验动物中心提供，动物合格证号豫医动字410115。2、实验方法与统计学处理(1)对环磷酰胺(CY)致免疫抑制小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响取小鼠60只，体重1821g，雌雄各半，随机均匀分为6组，其中5组造CY致小鼠免疫抑制模型，于给药的第l、2、3天，分别腹腔注射80mg/kg的环磷酰胺(40mg/ml，0.2ml/10g)，于第1天，造模5组分别灌服大、中、小剂量的扶正排毒1号混悬液(0.15g/ml，0.10g/ml、0.05g/ml，0.2ml/10g)，香菇多糖片混悬液(5mg/ml，0.2ml/10g)及同体积的生理盐水(0.2ml/10g)。另有1组为空白对照组，仅灌同体积的生理盐水(0.2ml/10g)。每天给药1次，连续给药7天。于第7天早上每鼠均腹腔注射5%鸡红细胞生理盐水液0.5ml，于第7天灌胃给药后2h，给鸡红细胞后4h，脱颈椎处死小鼠。腹腔注入汉氏液2.5ml，轻揉小鼠腹部，然后剪开小鼠腹部皮肤，在腹膜上剪一小孔，用吸管吸取腹腔液2ml置于试管中，混匀，吸取少许腹腔液滴于载玻片上，液点大小约1.5cmX2cm。将载玻片放在辅有湿纱布的搪瓷盘中，37°C孵育30min，生理盐水冲去附着的细胞，瑞氏染液染色，自来水冲洗晾干，显微镜下观察小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬情况，并计算吞噬百分率和吞噬指数，如表1所示。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage8</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage8</formula>表1扶正排毒1号对CY致免疫抑制小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响(±s)<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>林表示与模型组比P<0.01从上表可看出，与空白对照组比，模型组小鼠腹腔巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬百分率和吞噬指数均显著降低(P<0.01)，说明造免疫抑制模型成功。与模型组比，大、中、小剂量扶正排毒1号组和香菇多糖片组均可显著提高免疫抑制小鼠腹腔巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬百分率和吞噬指数(P〈0.01)。以大、中剂量扶正排毒1号组作用为强。(2)对CY致免疫抑制小鼠溶血素形成的影响取小鼠60只，体重1821g，雌雄各半，随机均匀分为6组，其中5组造CY免疫抑制模型。于给药第l、2、3天，分别腹腔注射80mg/kg环磷酰胺生理盐水液(4mg/ml，0.2ml/10g)，于造模型第1天，造模5组分别灌服大、中、小剂量的扶正排毒1号混悬液(0.15g/ml、0.10g/ml、0.05g/ml，0.2ml/10g)香菇多糖片混悬液(5mg/ml，0.2ml/10g)及同体积的生理盐水(0.2ml/10g)。另有一组为空白对照组，每鼠仅灌同体积的生理盐水(0.2ml/10g)。每天给药1次，连续给药7天。于给药第1天各组小鼠均腹腔注射5%鸡红细胞生理盐水混悬液(0.2ml/只)进行免疫，于最后1次给药后2h，小鼠眼眶取血，离心，分离血清。用生理盐水1:100稀释后，取lml稀释液与5%鸡红细胞混悬液0.5ml、10%补体0.5ml(豚鼠血清，用鸡红细胞预先饱和6h)混匀，37。C孵育30min,冰水中终止反应。另设不加补体的空白管作对照，吸取各管上清液于UV-2000型分光光度计540nm处比色，测定各组溶血素形成情况，结果见表2。(3)对CY致免疫抑制小鼠溶血空斑形成的影响取小鼠60只，体重1821g，雌雄各半，随机均匀分为6组，其中5组造免疫抑制模型，于给药第l、2、3天分别腹腔注射80mg/kg的环磷酰胺生理盐水溶液(4mg/ml，0.2ml/10g)。于造模第1天，造模5组分别灌服大、中、小剂量的扶正排毒1号混悬液(0.15g/ml、0.10g/ml、0.05g/ml,0.2ml/10g)，香菇多糖片混悬液(5mg/ml，0.2ml/10g)及同体积的生理盐水(0.2ml/10g)，另有1组为空白对照组，每鼠仅灌同体积生理盐水(0.2ml/10g)。每天给药1次，连续给药7天。于给药第l天各组小鼠均腹腔注射5%鸡红细胞生理盐水混悬液(0.2ml/只)进行免疫。于最后1次给药后2h，脱颈椎处死小鼠，解剖小鼠，取出脾脏，将两个小鼠脾脏放在一起，用匀浆器匀浆，并调整脾细胞混悬液中脾细胞数为5X106个/ml。取脾细胞混悬液0.5ml，与0.2%鸡红细胞混悬液和1:10的豚鼠血清0.5ml混匀。另设不加补体的空白管，37。C孵育lh，离心，取上清液于UV-2000型分光光度计413nm处比色，测各组溶血空斑形成情况，如表2所示。表2扶正排毒1号对CY致免疫抑制小鼠溶血素、溶血空斑形成的影响(i±;y)<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>**表示与模型组比P<0.01从上表可看出，与空白对照组比，模型组溶血素和溶血空斑形成(OD值)均显著减少(P<0.01)，说明造免疫抑制模型成功。与模型组比，大、中、小剂量扶正排毒1号组和香菇多糖组均可显著促进免疫抑制小鼠溶血素和溶血空白斑的形成，OD值显著升高(P<0.01)，以大、中剂量扶正排毒l号组作用为优。(4)对CY致免疫抑制小鼠淋巴细胞细胞转化的影响取小鼠60只，体重1812g，雌雄各半，随机均匀分为6组，其中5组造免疫抑制模型，于给药第l、2、3天，分别腹腔注射80mg/kg环磷酰胺生理盐水液(4mg/ml，0.2ml/10g)造免疫抑制模型。于给药第1、2、3天每鼠肌注PHA80mg/kg(8mg/ml，0.lml/10g)。于造模第1天，造模5组分别灌服大、中、小剂量的扶正排毒1号混悬液(0.15g/ml，0.10g/ml、0.05g/ml，0.2ml/10g)，香菇多糖片混悬液(5mg/ml，0.2ml/10g)及同体积的生理盐水(0.2ml/10g)，另有l组为空白对照组，仅给同体积生理盐水(0.2ml/10g)。每天给药1次，连续给药7天。于最后1次给药后2h，小鼠剪尾取血，推片，瑞氏染液染色，油镜观察，计算外周淋巴细胞转化百分率，如表3所示。表3扶正排毒1号对CY致免疫抑制小鼠外周血淋巴细胞转化的影响(3f±s)<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>林表示与模型组比p〈0.01从上表可看出，与空白对照组比，模型组淋巴细胞转化百分率显著降低(p<0.01)，说明造免疫抑制模型成功。与模型组比，大、中、小剂量扶正排毒1号组和香菇多糖组均可使淋巴细胞转化率显著提高(P<0.01)，以大、中剂量扶正排毒l号组作用为优。(二)扶正排毒1号对氢化可的松致免疫抑制小鼠免疫功能的影响1、实验动物小鼠，昆明种，河南省医学实验动物中心提供，动物合格证号豫医动字410115。2、实验方法与统计学处理(1)对氢化可的松致免疫抑制小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响取小鼠60只，体重1821g，雌雄各半，随机均匀分为6组，其中5组造氢化可的松免疫抑制小鼠模型，于给药的前6天，每天分别皮下注射50mg/kg的氢化可的松注射液(2.5mg/ml，0.lml/10g，分上午、下午两次皮下注射给药，每天总用量为50mg/kg)。于造模第1天，造模5组分别灌服大、中、小剂量的扶正排毒1号混悬液(0.15g/ml、0.10g/ml、0.05g/ml，0.2ml/10g)、香菇多糖片混悬液(5mg/ml,0.2ml/10g)及同体积的生理盐水(0.2ml/10g)。另有一组为空白对照组，每鼠仅灌同体积的生理盐水(0.2ml/10g)。每天给药1次，连续给药7天。于7天早上各组小鼠均腹腔注射5%鸡红细胞生理盐水混悬液0.5ml，于第7天灌胃给药后2h，给鸡红细胞后4h,脱颈椎处死小鼠。腹腔注入汉氏液2.5ml,轻揉小鼠腹部，然后剪开小鼠腹部皮肤，在腹膜上剪一小孔，用吸管吸取腹腔液2ml置于试管中，混匀，吸取少许腹腔液滴于载玻片上，液点大小约为1.5cmX2cm。将载玻片放在辅有湿纱布的搪瓷盘中，37'C孵育30min，生理盐水冲去附着的细胞，瑞氏染液染色，自来水冲洗凉干，显微镜下观察小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬情况，并计算吞噬百分率和吞噬指数，如表4所示。IOO个巨噬细胞吞噬鸡红细胞的巨噬细胞数infw存哩白分伞=-xl(JU%100工俯+匕^ioo个巨噬细胞中吞噬的鸡红细胞总数表4扶正排毒1号对氢化可的松致免疫抑制小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响(±s)组别动物数(只)剂量(g/kg)吞噬百分率(％)吞噬指数空白对照组1048.5±5.7*"0.65±0.10'模型组1035.3±7.10.55±0.10香菇多糖片组100.148.7±8.3**0.67±0.11*大剂量扶正排毒1号组10352.8±7.6"0.82±0.08**中剂量扶正排毒1号组10255.6±7.2**0.84士0.07"小剂量扶正排毒1号组10145.9±7.1**0.66±0.10*林表示与模型组比P<0.01，*表示与模型组比P<0.05从上表可看出，与空白对照组比，模型组小鼠腹腔巨噬细胞吞噬百分率显著降低(P<0.01)，吞噬指数明显降低(P<0.05)，说明造免疫抑制模型成功。与模型组比，大、中、小剂量扶正排毒1号组和香菇多糖片组均可显著提高免疫抑制小鼠腹腔巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬百分率(P<0.01)，大、中剂量扶正排毒1号组可显著提高腹腔巨噬细胞吞噬指数(P<0.01)，小剂量扶正排毒1号组和香菇多糖片组可明显提高腹腔巨噬细胞吞噬指数(P<0.05)。以大、中剂量扶正排毒1号组作用为强。(2)对氢化可的松致免疫抑制小鼠溶血素形成的影响取小鼠60只，体重1821g，雌雄各半，随机均匀分为6组，其中5组造氢化可的松免疫抑制模型。于给药前6天，每天分别皮下注射50mg/kg氢化可的松注射液(2.5mg/ml,0.lml/10g，分上午、下午两次皮下注射给药，每天总用量为50mg/kg)，于造模第1天，造模5组分别灌服大、中、小剂量的扶正排毒l号混悬液(0.15g/ml、0.10g/ml、0.05g/ml，0.2ml/10g)，香菇多糖片混悬液(5mg/ml，0.2ml/10g)及同体积的生理盐水(0.2ml/10g)。另有一组为空白对照组，每鼠仅灌同体积的生理盐水(0.2ml/10g)。每天给药1次，连续给药7天。于给药第1天各组小鼠均腹腔注射5%鸡红细胞生理盐水混悬液0.2ml/只，进行免疫，于最后l次给药后2h，小鼠眼眶取血，离心，分离血清。用生理盐水1:IOO稀释后，取lml稀释液与5%鸡红细胞混悬液0.5ml、10X补体0.5ml(豚鼠血清，用鸡红细胞预先饱和6h)混匀，37。C孵育30min，冰水中终止反应。另设不加补体的空白管作对照，吸取各管上清液于UV-2000型分光光度计540nm处比色，测定各组溶血素形成情况，结果见表5。(3)对氢化可的松致免疫抑制小鼠溶血空斑形成的影响取小鼠60只，体重1821g，雌雄各半，随机均匀分为6组，其中5组造免疫抑制模型，于给药前6天，每天分别皮下注射50mg/kg的氢化可的松注射液(2.5mg/ml，0.lml/10g，分上午、下午两次皮下注射给药，每天总用量为50mg/kg)。于造模第1天，造模5组分别灌服大、中、小剂量的扶正排毒1号混悬液(0.15g/ml、0.10g/ml、0.05g/ml,0.2ml/10g)，香菇多糖片混悬液(5mg/ml，0.2ml/10g)及同体积的生理盐水(0.2ml/10g)。另有1组为空白对照组，每鼠仅灌同体积生理盐水(0.2ml/10g)。每天给药1次，连续给药7天，于给药第1天各组小鼠均腹腔注射5%鸡红细胞生理盐水混悬液0.2ml/只进行免疫。于最后l次给药后2h，脱颈椎处死小鼠，解剖小鼠，取出脾脏，将两个小鼠脾脏放在一起，用匀浆器匀浆，并调整脾细胞混悬液中脾细胞数为5Xl()6个/ml。取脾细胞混悬液0.5ml，与0.2%鸡红细胞混悬液和l:10的豚鼠血清0.5ml混匀。另设不加补体的空白管，37。C孵育lh，离心，取上清液于UV-2000型分光光度计413nm处比色，测各组溶血空斑形成情况，如表5所示。表5扶正排毒1号对氢化可的松致免疫抑制小鼠溶血素、溶血空斑形成的影响(i±S)<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>从上表可看出，与空白对照组比，模型组溶血素和溶血空斑OD值均显著降低(P<0.01)，说明造免疫抑制模型成功。与模型组比，大、中、小剂量扶正排毒1号组和香菇多糖组均可显著促进小鼠溶血素和溶血空斑的形成，其OD值显著升高(P<0.01)，以大、中剂量扶正排毒1号组作用为最优。(4)对氢化可的松致免疫抑制小鼠外周血淋巴细胞细胞转化的影响取小鼠60只，体重1821g，雌雄各半，随机均匀分为6组，其中5组造氢化可的松免疫抑制模型，于给药前6天每天皮下注射50mg/kg的氢化可的松注射液(2.5mg/ml，0.lml/10g，分上午、下午两次皮下注射给药，每天总用量为50mg/kg),于给药第l、2、3天每鼠加肌注PHA80mg/kg(8mg/ml，0.lml/10g)。造模5组于第1天开始分别灌服大、中、小剂量的扶正排毒1号混悬液(0.15g/ml、0.10g/ml、0.05g/ml，0.2ml/10g)，香菇多糖片混悬液(5mg/ml，0.2ml/10g)及同体积的生理盐水(0.2ml/10g)，每天给药1次，连续给药7天，另有一组为空白对照组，仅给同体积生理盐水(0.2ml/10g)。于最后l次给药后2h，小鼠剪尾取血，推片，瑞氏染液染色，油镜观察，计算外周血淋巴细胞转化百分率，如表6所示。表6扶正排毒1号对氢化可的松致免疫抑制小鼠外周学淋巴细胞转化的影响(f±s)ii动物数(只)剂量(g/kg)淋巴细胞转化率(％)空白对照组==肌3±4.4"模型组100.132.5±4.5香菇多糖片组100.151,9±10.4"大剂量扶正排毒l号组10360.9士5.0"中剂量扶正排毒l号组10254.8土6.7"小剂量扶正排毒l号组10149.3±5.9"W表示与模型组比P〈0.01从上表可看出，与空白对照组比，模型组外周血淋巴细胞转化率显著降低(P<0.01),说明造免疫抑制模型成功。与模型组比，大、中、小剂量扶正排毒1号组和香菇多糖片组均可使外周血淋巴细胞转化率显著升高(P<0.01)。以大剂量扶正排毒1号组作用为强。(三)扶正排毒1号对环磷酰胺致免疫抑制小鼠CD4、CD8水平的影响扶正排毒l号以3g/kg、2g/kg、lg/kg的剂量给环磷酰胺所致免疫低下小鼠连续7天灌服用，可显著提高免疫抑制小鼠CD4、CD4/CD8水平。1实验目的扶正排毒1号主要有西洋参、黄芪、连翘、白花蛇舌草、甘草等药组成，具有扶正固本，祛邪排毒之功，适用于无症状mv感染者的临床治疗。为验证其作用特点，观察了其对CY致免疫功能低下小鼠CD4、CD8水平的影响。2实验方法结果2.1实验药品扶正排毒1号，由河南中医学院第三附属医院提供，批号050601，香菇多糖片，由浙江国家药业有限公司生产，批号040902;注射用环磷酰胺(CY)，由上海华联制药有限公司生产，批号050201;快速瑞氏染液，迈克科技有限公司生产，批号040602;KH2P04郑州化学试剂一厂生产，批号031218;Na2HP04，天津市福晨化学试剂厂生产，批号030925;MgS04，西安化学试剂厂生产，批号030927;KC1，北京化工厂生产，批号030201;CaCl2天津市科密欧化学试剂开发中心生产，批号030325;胎牛血清，天津市正江高科技有限公司生产，批号050210;肝素钠，上海第一生化药业有限公司生产，批号041001;McAB血球试剂，WuT4，武汉生物制品研究所生产，批号041101;McAB血球试剂，WuT8，武汉生物制品研究所生产，批号041101;淋巴细胞分离液，上海恒信化学试剂有限公司生产，批号050106。2.2试剂配制Hank，s原液甲液氯化钾4g、氯化钠80g、硫酸镁(含7H20)20g、双蒸水40mL;乙液氯化钙1.4g、双蒸水100mL;丙液甲和乙混合溶液；丁液磷酸氢二钠0.6g、磷酸二氢钾0.6g、葡萄糖10.0g、双蒸水400mL、酚红(10g/L)16mL;将丙液和乙液充分混合，最后加双蒸水至lOOOmL，置4"C冰箱备用。Hank，s应用液的配制取Hank，s原液1份加双蒸水9份混合分装，69.75kPa(10P/cm2)20min高压灭菌，4。C冰箱备用，PH6.8-7.2。反应液的配制即用Hank，s应用液配制成20X的胎牛血清。单抗配制每只单抗加0.5ml反应液，摇匀。2.3实验动物小鼠，昆明种，II级，河南省医学实验动物中心，动物合格证号豫医动字710115。2.4实验仪器主要仪器名称DL-5低速大容量离心机，北京医疗器械修理厂生产；JA1103N电子天平，上海民桥精密科学仪器有限公司生产。3实验方法与结果取小鼠36只，雌雄各半，体重18-21g，随机均匀分为6组，其中5组造CY致免疫低下模型，于给药的第l、2、3天，分别腹腔注射80mg/kg的环磷酰胺(40mg/ml，0.2ml/10g)，于第1天造模型5组分别灌服大、中、小剂量的扶正排毒1号混悬液(0.18g/ml、0.12g/ml、0.06g/ml，0.2ml/10g)，香菇多糖片混悬液(5mg/ml，0.2ml/10g)及同体积的生理盐水(0.2ml/10g)。另有一组为空白对照组，仅灌同体积的生理盐水(0.2ml/10g)。每天给药1次，连续给药7天。第7给药后lh，摘眼球取血，肝素抗凝，花环法检测小鼠CD4、CD8水平。花环法检测T亚步骤抗凝血置37°C恒温水浴30min，每管血加生理盐水稀释(1:3)，取一干净玻璃试管加淋巴细胞分离液3ml，用毛细吸管将稀释血液混匀，沿管壁将稀释血液加在淋巴细胞分离液上面，3000转/分，离心20min。离心后用毛细吸管吸出淋巴细胞层置于试管中，用生理盐水清洗2次，2000转/分，离心10min。再根据试管底部细胞数加适量生理盐水稀释，20°C倾斜，室温静置45min。CD4、CD8单抗(McAB血球试剂)分别加入试管内，每管25ul，再将分离的淋巴细胞分别加入各试管中，每管25ul，500转/分，离心5min,取出室温静置45min，放4°C冰箱静置1小时。取出涂片，瑞氏染色lmin，冲洗，镜检200个淋巴细胞，计算花环形成细胞的百分率。<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>*表示与模型组比PO.05,**表示与模型组比PO.01从上表可看出，与空白对照组比，模型组小鼠CD4、CD8水平和CD4/CD8比值均显著降低(P〈O.OD，说明造免疫抑制模型成功。与模型组比，大、中、小剂量扶正排毒1号组和香菇多糖片组均可显著提高免疫抑制小鼠CD4水平(P〈0.01)，大、小剂量扶正排毒1号组和香菇多糖片组均可显著提高CD4/CD8比值(P〈0.01)，中剂量扶正排毒1号组可明显提高CD4/CD8比值(P〈0.05)。以大剂量扶正排毒1号组对CD4水平的提高作用为强。3小结扶正排毒1号可显著提高对环磷酰胺(CY)致免疫抑制小鼠的免疫功能，使外周血CD4水平和CD4/CD8比值显著提高，以大剂量扶正排毒1号组作用为好。上述情况表明，本发明药物(中药片)可有效达到显著提高免疫抑制小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能，显著促进溶血素和溶血空斑形成，显著促进外周血淋巴细胞的转化，从而实现稳定或提高无症状HIV感染者的免疫功能，具有重要的临床价值。权利要求1.一种治疗艾滋病无症状HIV感染期的中药片，其特征在于，由西洋参50g～80g、黄芪130g～170g、白术130g～170g、防风100g～130g、女贞子130g～170g、山茱萸100g～130g、南沙参100g～150g、紫草100g～130g、连翘100g～130g、白花蛇舌草130g～170g、甘草40g～80g作中药原料制成，其中西洋参粉碎成细粉备用；白术、防风、连翘碎断，用多功能提取罐提取白术、防风、连翘三药的芳香水256ml，再进行油水分离，得挥发油，提取挥发油后的水液与药渣备用；提挥发油的药渣其余七味加水煎煮三次，第一次加中药原料总重量的8倍量水，煎煮2小时，第二、三次各加中药原料总重量的6倍量水，煎煮各1小时，合并三次煎液及提油后的水液，静置48小时，滤过，滤液、减压浓缩至相对密度为1.20的稠膏，采用热风循环烘干箱，温度不超过65℃-80℃干燥，粉碎，加入上述备用的西洋参细粉、挥发油及适量的糊精，混匀，制粒，压片，包衣。2、根据权利要求1所述的一种治疗艾滋病无症状HIV感染期的中药片，其特征在于，由西洋参65g、黄芪150g、白术150g、防风115g、女贞子150g、山茱萸115g、南沙参125g、紫草115g、连翘115g、白花蛇舌草150g、甘草60g作中药原料制成，其中西洋参粉碎成细粉备用；白术、防风、连翘碎断，用多功能提取罐提取白术、防风、连翘三药的芳香水256ml，再进行油水分离，得挥发油，提取挥发油后的水液与药渣备用；提挥发油后的药渣与其余七味加水煎煮三次，第一次加中药原料总重量的8倍量水，煎煮2小时，第二、三次各加中药原料总重量6倍量水，煎煮各1小时，合并三次煎液及提油后的水液，静置48小时，滤过，滤液、减压浓縮至相对密度为1.20的稠膏，采用热风循环烘干箱，温度不超过70'C干燥，粉碎，加入上述备用的西洋参细粉、挥发油及适量的糊精，混匀，制粒，压片，包衣。全文摘要本发明涉及一种治疗艾滋病无症状HIV感染期的中药片，以解决不适合抗病毒治疗的艾滋病无症状HIV感染期的治疗问题，该中药片用西洋参50g～80g、黄芪130g～170g、白术130g～170g、防风100g～130g、女贞子130g～170g、山茱萸100g～130g、南沙参100g～150g、紫草100g～130g、连翘100g～130g、白花蛇舌草130g～170g、甘草40g～80g作中药原料制成，其中西洋参粉碎；白术、防风、连翘提取芳香水，油水分离得挥发油，药渣与其余七味药加水煎煮三次，合并煎液及提油后的水液，静置，滤过，减压浓缩，干燥，粉碎，加入西洋参细粉、挥发油及适量的糊精，混匀，制粒，压片，本发明有效用于艾滋病无症状HIV感染期的治疗，有重要的临床意义。文档编号A61K36/74GK101278998SQ20081004982公开日2008年10月8日申请日期2008年5月22日优先权日2008年5月22日发明者刘学伟,刘景超,磊张,勃彭,苗明三,郭会军申请人:河南中医学院