专利名称：：含有效成分拉坦前列素的澄明滴眼剂的制作方法
技术领域：
：本发明涉及一种含治疗青光眼药物4立坦前列素作为有效成分的澄明和稳定的滴眼剂。
背景技术：
：拉坦前列素是一种以化学名为异丙基(Z)-7[(1R,2R,3R,5S)3,5-二羟基-2-[(3R)-3-羟基-戊苯基]环戊基]5-庚酸为代表的治疗青光眼的前列腺素型药物。拉坦前列素是一种选^#性的FP受体激动剂并且通过促进水性体液的流出降低眼内压(参见，例如日本专利No.2721414)。拉坦前列素的给药途径是滴眼，并且在商业上可获得含拉坦前列素0.005%的滴眼剂(商品名西拉坦滴眼剂)。本发明的一个目的在于提供一种拉坦前列素滴眼剂更好的制剂。作为滴眼剂的防腐剂，从效果的角度和其类似(用途)来说苯扎氯铵(在下文中缩写为"BAK")应用最广泛。然而，尽管BAK具有优良的防腐作用，但当它以高浓度被使用时BAK会引起角膜病症。因此，当BAK加入到滴眼剂时，则希望尽可能地降低它的浓度。说明书中所述的BAK指含[C6HsCH2N(CH3)2R]Cl所表示化学结构的化合物混合品，其中烷基(以R表示)是<:81112-<:181137。BAK在日本，美国和欧洲药典中被定义如下日本药局方BAK由[C6HsCH2N(CH3)2R]Cl表示，其中R是指QH，2-d8H37并且主要包括d2H25和C]4H29。美国药典BAK是一种由[C6H5CH2N(CH3)2R]C1表示的烷基千基二甲基氯化铵混合物。其中R是所有或一些较CgH!7高级的烷基官能团混合物并主要包括<:121125，C14H24oC16H33。欧洲药典BAK是一种烷基千基二曱基氯化铵的混合物，其中烷基具有Cs到Qs的链长。另一方面，通常加入等渗剂到滴眼剂中以保持等渗性并以无机盐如氯化钠的碱金属盐例和如氯化镁的碱土金属盐为例。更进一步，通常加入緩冲液到滴眼剂中以防止pH的变化，并以如磷酸钠、硼酸钠的无机盐和如醋酸钠，柠檬酸钠和碳酸钠的有机盐为例。商业上可获得的拉坦前列素滴眼剂中均包含等渗剂和緩冲剂。本发明制备并研究了含有这些广泛应用的添加剂的拉坦前列素滴眼剂。结果，令人惊奇地它被证明在O.015。/。或更高浓度的BAK中没有发现白色混浊，却在0.01。/。或更低浓度的BAK中有发现。那是因为疏水拉坦前列素和BAK形成了一种复合物，同时由于盐例如添加剂所引起的盐析作用，拉坦前列素-BAK复合物一皮沉淀。本发明揭示了该事实，出人意料的是，直到BAK浓度低至0.01%或更低时该复合物并没有沉淀。虽然商业上可获^寻的^立坦前列素滴眼剂(商品名西^立坦滴眼剂)含有0.02。/。的BAK,没有产生白色混法的问题。然而，如上所述，尽管BAK是一种优良的防腐剂，当以高浓度应用时它会引起角膜病症。因此，当BAK加入到滴眼剂中时，则希望尽可能地降4氐它的浓度。发明详述首先研究防止白色混浊的各种添加剂，本发明人发现可以通过添加表面活性剂能防止白色混浊。通过专注于BAK的种类所完成的深入研究发现，可以不釆用上述含8到18个碳原子烷基的化学结构形式表示的混合化合物，而是采用烷基含12个碳原子的BAK可以防止白色混浊出现。更进一步地，本发明考虑到盐如等渗剂的使用可以引起白色混浊并专注于这种等渗剂而完成精确研究。结果，发现采用非离子等渗剂作为等渗剂能防止白色混浊。即，已发现获得含有效成分拉坦前列素和防腐剂苯扎氯铵的澄明滴眼剂，其中采用至少一种选自以下l)到3)的方法防止由制剂变化引起的白色混浊；1)加入表面活性剂，2)采用由式[C6H5CH2N(CH3)2R]C1(其中R是含12个碳原子的烷基)表示的苯扎氯铵作防腐剂和3)加入非离子等渗剂作为等渗剂。上述三种方式可以单独或合用。本发明滴眼剂的有效成分拉坦前列素的浓度优选0.001到0.01%(W/V),尤其优选0.005%(W/V)。本发明的第一种方法是加入表面活性剂。当加入表面活性剂时，可以不依赖于所采用的等渗剂和BAK，防止白色混浊的澄明拉坦前列素滴眼剂。表面活性剂的实例是聚山梨酯80,聚氧乙烯氩化蓖麻油60,聚氧35蓖麻油，聚乙二醇一硬脂酸酯，聚乙烯二醇(macrogo1)4000,卵磷脂，蔗糖酯，聚氧乙烯烷基醚，聚氧硬脂酸盐，聚氧乙烯-聚氧丙烯二醇及其类似物，优选聚山梨酯80,聚氧乙烯氢化蓖麻油60,聚氧35蓖麻油。表面活性剂的浓度优选0.001到0.5%。本发明的朵二种方法是采用[C6H5CH2N(CH3)2R]C1(其中R是含12个碳原子的烷基)结构式所代表的苯扎氯铵作防腐剂。在说明书中所述含12个碳原子的苯扎氯铵(在下文中缩写为"BAK-C12")指从[C6H5CH2N(CH3)2R]C1化学结构式表示的苯扎氯铵，并且它的烷基(结构式中以R表示)是(:121125。采用BAK-d2作防腐剂可以不依赖于所采用的等渗剂，防止白色混法的澄明拉坦前列素滴眼剂。采用商业上可获得的BAK-C！2。BAK-d2的浓度优选0.01。/。(W/V)或更低。当BAK浓度过低时，不能显现出足够的防腐作用。因此，更优选的BAK浓度是在0.003到0.01(W/V)的范围中。本发明的第三种方法是加入非离子等渗剂作为等渗剂。采用非离子等渗剂可以不依赖于所采用的BAK，防止白色混浊的澄明拉坦前列素滴眼剂。当使用非离子等渗剂时，可以减少滴眼剂中盐的总量。结果，盐析作用的影响降低，并且藉此防止白色混浊，.非.禽子等渗剂可以是通常用于滴眼剂.的任何物质，并尤其以甘油，甘露糖醇，聚乙二醇，丙二醇，海藻糖，蔗糖及其类似物。非.离子等渗剂的浓度可以调整到每种物质能等渗的浓度。通过添加一种pH緩—液，一种pH调节剂，一种增溶剂咸一种增粘剂可以任意地制务本发明的滴眼剂。PH緩冲凌^实例是如磷酸钠，磷酸二氬钠，磷酸氢二钠，磷酸钾，磷酸-氬钾和磷酸氢二钾.的磷酸盐；.如硼酸钠和硼酸,钾的硼酸盐，如柠檬酸钠和柠檬酸二钠的柠檬盐，和如'碳酸钠和碳酸氢钠的磷酸盐。PH调节剂的:'实例是盐酸，柠檬酸，磷醵，醋酸,氢氧化钠，氢氧化钾及其类'似物。助溶剂^实例是l聚山梨酯80,.聚氧乙烯氢化蓖麻油60，聚乙烯二醇4000及其类似物。增粘剂的实例是羟丙烷基甲基纤维素，羟丙烷基纤维素，聚乙烯醇，羧基乙烯共聚物，聚乙烯吡，，各娃'酮及其类似物。在笫一和第二种方法中可以加入如氯化钠，氯4匕钾，氯化4弓或氯化镁的盐作为等渗剂。本发明的滴眼剂pH优选调节为3到8，更优选的是4到7.本发明的滴眼剂可以采用广泛应用的工艺制备，实现本发明的最佳;漢式方法l)的实施例实施例l-l在纯水(约90ml)中溶解结晶磷酸二氢铀(0.2g)，氯化钠(0.8g),聚山梨酯80.,(O.Olg)和苯扎氯铵(O.Olg)，调节pH到6.7,并加入纯水到溶液中使得总体积为100n]!而产生一种载体，载体(100ml)加入到^立坦前列素(5mg),并且在约g(TC水吝加热时搅拌混合物使拉坦前列素在载尿中溶解。.溶液温度恢复到室温；并随后确定pH为6.7。实施例l-2在純水(约90ml)中溶解结晶磷酸二氢钠(0.2g),氯化钠.(0.8g)，聚氧乙烯氩化蓖麻油60(0.01g)和苯扎氯铵(0.01g),调节pH到6.7,并加入纯水到溶液中使得总体积为100ml而产生一种载体。载体(100ml)加入到拉坦前列素(5mg),并且在约80°C水浴加热时搅拌混合物使拉坦前列素在载体中溶解。溶液温度恢复到室温，并随后确定pH为6,7。实施例l-3在纯水(约90ml)中溶解结晶磷酸二氩钠(0.2g)，氯化钠(0.8g),聚氧35蓖麻油60(O.Olg)和苯扎氯铵(O.Olg)，调节pH到6.7,并加入纯水到溶液中使得总体积为100ml而产生一种载体。载体(100ml)加入到拉坦前列素(5mg),并且在约80。C水浴加热时搅拌混合物使拉坦前列素在载体中溶解。溶液温度恢复到室温，并随后确定pH为6.7。方法2)的实施例实施例2-l在纯水(约90ml)中溶解结晶磷酸二氢钠(0.2g),氯化钠(0.8g),聚氧乙烯氲化蓖麻油60(O.Olg)和BAK-Cu(O.Olg)，用1N氢氧化钠水溶液调节pH到6.7，并加入纯水到溶液中使得总体积为100ml而产生一种载体。载体(100ml)加入到^立坦前列素(5mg)，并且在约80。C水浴加热时搅拌混合物使拉坦前列素在载体中溶解。溶液温度恢复到室温，并随后确定pH为6.7。实施例2-2在纯水(约90ml)中溶解结晶磷酸二氢钠(0.2g),氯化钠(0.8g),和BAK-d2(0.005g),用lN氢氧化钠水;容液调节pH到6.7，并加入纯水到溶液中使得总体积为100ml而产生一种载体。载体(100ml)加入到拉坦前列素(5mg),并且在约80。C水浴加热时搅拌混合物使拉坦前列素在载体中溶解。溶液温度恢复到室温，并随后确定pH为6,7。方法3)的实施例实施例3-l在纯水(约90ml)中溶解结晶磷酸二氢钠(0.2g),稠甘油(2.3g)和BAK(0.01g),用1N氩氧化钠水溶液调节pH到6.7,并加入纯水到溶液中使得总体积为100ml而产生一种载体。载体(100ml)加入到拉坦前列素(5mg),并且在约80。C水浴加热时搅拌混合物使拉坦前列素在载体中溶解。溶液温度恢复到室温，并随后确定pH为6.7。实施例3-2在纯水(约90ml)中溶解结晶磷酸二氢钠(0.2g),甘露糖醇(4.5g)和BAK(0.01g),用1N氢氧化钠水溶液调节pH到6.7,并加入纯水到溶液中使得总体积为100ml而产生一种载体。载体(100ml)加入到拉坦前列素(5mg)，并且在约80。C水浴加热时搅拌混合物Y吏拉坦前列素在载体中溶解。溶液温度恢复到室温，并随后确定pH为6.7。实施例3-3在纯水(约卯ml)中溶解结晶磷酸二氢钠(0.2g),聚乙二醇400(8.0g)和BAK(0.01g),用lN氢氧化钠水溶液调节pH到6.7,并加入纯水到溶液中使得总体积为100ml而产生一种载体。载体(100ml)加入到拉坦前列素(5mg),并且在约80。C水浴加热时搅拌混合物使拉坦前列素在载体中溶解。溶液温度恢复到室温，并随后确定pH为6.7。实施例3-4在纯水(约90ml)中溶解结晶磷酸二氢钠(0.2g),丙二醇(10g)和BAK(0.01g),用1N氢氧化钠水溶液调节pH到6.7，并加入纯水到溶液中使得总体积为100ml而产生一种载体。载体(100ml)加入到拉坦前列素(5mg),并且在约80。C水洛加热时搅拌混合物^L拉坦前列素在载体中溶解。溶液温度恢复到室温，并随后确定pH为6.7。实施例3-5在纯水(约90ml)中溶解结晶磷酸二氬钠(0.2g),海藻糖(9.0g)和BAK(0.01g),用1N氢氧化钠水溶液调节pH到6.7,并加入纯水到溶液中使得总体积为100ml而产生一种载体。载体(100ml)加入到拉坦前列素(5mg),并且在约8(TC水浴加热时搅拌混合物使拉坦前列素在载体中溶解。溶液温度恢复到室温，并随后确定pH为6.7。实验l:拉坦前列素残值比率的测定和外观的观察1)如下制备对比制剂1到4。在100ml玻璃烧杯中放入纯水(约卯ml)。在纯水中溶解结晶磷酸二氢钠(0.2g)，氯化钠(0.9g),用lN氢氧化钠水溶液调节pH到6.7,并加入纯水到溶液中使得总体积为100ml而产生一种载体。载体(100ml)加入到拉坦前列素(5mg),并且在约80°C水浴加热时搅拌混合物使拉坦前列素在载体中溶解。溶液温度恢复到室温，并随后确定pH为6.7。加入注射用水到溶液中调节体积到100ml。在玻璃试管中精密放入10ml的拉坦前列素溶液，其中加入50,100,100或200ili1的1。/。的BAK溶液(在以上化学结构式中烷基R含12,14和16个碳原子的混合化合物)，并将其混合。这些制剂如表l所示。2)如下制备制剂1到3。在100ml玻璃烧杯中放入纯水(约90ml)。在纯水中溶解结晶磷酸二氢钠(0.2g)，氯化钠(0.9g)和各种表面活性剂，其各自的浓度如表2所示。用氢氧化钠水溶液或稀盐酸调节pH到6.7,并加入纯水到溶液中使得总体积为100ml而产生一种载体。载体(100ml)加入到拉坦前列素(5mg),并且在约80。C水浴加热时搅拌混合物使拉坦前列素在载体中溶解。溶液温度恢复到室温，并随后确定pH为6.7。加入注射用水到溶液中调节体积到100ml。在玻璃试管中精密放入10ml的拉坦前列素溶液，其中加入IOOili1的1。/。的BAK溶液(在以上化学结构式中烷基R含12,14和16个碳原子的混合化合物)，并将其混合。这些制剂如表2所示。3)如下制备制剂4和5。在100ml玻璃烧杯中放入纯水(约90ml)。在纯水中溶解结晶磷酸二氢钠(0.2g),氯化钠(0.9g),用lN氢氧化钠水溶液调节pH到6.7,并加入纯水到溶液中使得总体积为100ml而产生一种载体。载体U00ml)加入到拉坦前列素(5mg),并且在约80°C水浴加热时搅拌混合物使拉坦前列素在载体中溶解。溶液温度恢复到室温，并随后确定pH为6.7。加入注射用水到溶液中调节体积到100ml。在玻璃试管中精密放入10ml的拉坦前列素溶液，其中加入50或100wl的1%的BAK-d2溶液，并将其混合。这些制剂如表3所示。4)如下制备制剂6到10。在100ml玻璃烧杯中放入纯水(约90ml)。在纯水中溶解结晶磷酸二氩納(0.2g)和各种非离子等渗剂以使得各种浓度如表4所示的值，用氢氧化钠水溶液或稀盐酸调节pH到6.7，并加入纯水到溶液中使得总体积为100ml而产生一种载体。载体(100ml)加入到拉坦前列素(5mg)，并且在约80。C水浴加热时搅拌混合物使拉坦前列素在载体中溶解。溶液温度恢复到室温，并随后确定pH为6.7。加入注射用水到溶液中调节体积到1OOml。在玻璃试管中精密放入1Oml的拉坦前列素溶液，其中加入100jLi1的1%的BAK溶液(在以上化学结构式中烷基R含12，14和16个;炭原子的混合化合物)，并爿夸其混合。这些制剂如表4所示。5)观察通过上述方法制备的每种溶液的外观，并在25ml混合烧瓶中精密抽取lml的每种溶液。用0.22-iam的过滤膜过滤9毫升每种剩余的溶液。6)采用高效液相色谱法测定过滤前后溶液中拉坦前列素的浓度，并计算残值比率。表l<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>(表中的单位％(W/V),q.s:足量)表2<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>表3<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>表4<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>(表中的单位％(W/V),q.s:足量)结果表5表示对比制剂l到4的外观观察结果和残值比率测定。含0.02%或0.015Q/。BAK的对比制剂l和2加入到4立坦前列素，外观是无色透明，并且残值比率是96.8到99.4%。那就是说，制剂没有变化。然而，在含0.01。/o或0.005。/。BAK的对比制剂3和4中观察到白色混浊，并且残值比率降低。那就是说，制剂已经改变。表6表示制剂1到3(方法l)的外观观察结果和残值比率测定。在对比制剂3和4中观察到白色混浊，并且残值比率降低。相反地，含表面活性剂的制剂1到3中没有发现白色混浊，并且残值比率保持高值，即97.2到99.8%。这些结果表明当加入表面活性剂到含拉坦前列素和BAK的制剂中，表面活性剂防止制剂变化，并且藉此得到稳定和澄明的滴眼剂。表7表示制剂4到5(方法2)的外观观察结果和残值比率测定。采用BAK的对比制剂3和4，发现白色混浊，并且残值比率降低。相反地，在含BAKd2替代BAK的制剂4和5中，没有发现白色混浊，并且残值比率是97.3到98.2%。那就是说，制剂没有变化。这些结果表明当加入替代BAK的BAKQ2到含拉坦前列素的制剂中，BAKCu防止制剂变化，并且藉此得到稳定和澄明的滴眼剂。表8表示制剂6到10的外观观察结果和残值比率测定。采用氯化钠作为等渗剂的对比制剂3和4，发现白色混浊，并且残值比率降低。相反地，在含非离子等渗剂替代氯化钠的制剂6到10中没有发现白色混浊，并且残值比率是94.6到98.6%。那就是说，制剂没有变化。这些结果表明当加入等渗剂到含拉坦前列素和BAK的制剂中，该剂防止制剂变化，并且藉此得到稳定和澄明的滴眼剂。表5<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>表6<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>表7<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>表8<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>实验2:抗微生物效价检测根据日本药局方第十三改正版所述的抗微生物效价检测方法完成上述实施例l-l,2-l和3-l的抗^L生物效i^介检测。表9中表示检测结果。在细菌的情形下，在任何实施例中都没有检测到细菌。在真菌的情况下，在接种四星期后没有检测到真菌或者数量较所接种的真菌有显著的减少。因此，发现展示了足够的防腐作用。<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>工业实用性即使降低BAK浓度亦可通过添加表面活性剂则可以提供澄明的拉坦前列素滴眼剂。另外，通过采用BAKC!2作为防腐剂，即4吏BAK浓度降低也可以提供澄明的拉坦前列素滴眼剂。更进一步地，加入非离子等渗剂，即使BAK浓度降低也可以提供澄明的拉坦前列素滴眼剂而BAK浓度甚至更低。权利要求1、含有效成分拉坦前列素和防腐剂苯扎氯铵的澄明滴眼剂，其特征在于，通过含有苯扎氯铵防止制剂变化引起的白色混浊，所述苯扎氯铵由式[C6H5CH2N(CH3)2R]Cl表示，其中R是含12个碳原子的烷基。2、如权利要求l所述的滴眼剂，其特征在于，拉坦前列素的浓度为0.001~0.01%W/V,苯扎氯铵的浓度为0.003~0.01%W/V。3、如权利要求l所述的滴眼剂，其特征在于，拉坦前列素的浓度为0.005。/oW/V,苯扎氯铵的浓度为0.003~0.01%W/V。4、通过使用苯扎氯铵防止含有效成分拉坦前列素和防腐剂苯扎氯铵的滴眼剂中由制剂变化引起的白色混浊的方法，所述苯扎氯铵由式[C6H5CH2N(CH3)2R]Cl表示，其中R是含12个碳原子的烷基。5、如权利要求4所述的防止白色混浊的方法，其特征在于，拉坦前列素的浓度为0.001~0.01%W/V,苯扎氯铵的浓度为0.003~0.01%W/V。6、如权利要求4所述的防止白色混浊的方法，其特征在于，拉坦前列素的浓度为0.005y。W/V,苯扎氯铵的浓度为0.003~0.01%W/V。全文摘要本发明的目的在于提供一种拉坦前列素滴眼剂更好的制剂。本发明提供一种含有效成分拉坦前列素和防腐剂苯扎氯铵的澄明滴眼剂，其中采用表示为[C<sub>6</sub>H<sub>5</sub>CH<sub>2</sub>N(CH<sub>3</sub>)<sub>2</sub>R]Cl结构的苯扎氯铵(其中R是含12个碳原子的烷基)防止制剂变化引起的白色混浊。文档编号A61K9/08GK101278936SQ20081009021公开日2008年10月8日申请日期2003年9月8日优先权日2002年9月9日发明者木村章男,浅田博之申请人:参天制药株式会社