一种胃肠安丸的质量控制方法

专利名称：：一种胃肠安丸的质量控制方法
技术领域：
：本发明涉及一种药品质量控制方法，具体说是涉及一种胃肠安丸的质量控制方法。
背景技术：
：腹泻可分为感染性和非感染性两类。感染性腹泻又分为细菌感染和病毒感染；非感染性腹泻则可由饮食不当、食物过敏、生活规律的改变、气候突变甚至情绪紧张等多种原因引起。祖国医学认为泄泻是指排便次数增多、粪便清稀，甚至如水样而言。泄泻的主要病变在于脾胃与大小肠。其致病原因有感受外邪、饮食所伤、七情不和、湿邪内阻及脏腑虚弱等。临床所见湿邪致病有寒湿与湿热之分。脾胃功能胀碍是由多种因素引起，有外邪影响、脾胃本身虚弱、肝脾不和及肾肠不足等均可导致脾胃功能失常而发生泄泻。调查数据显示，腹泻在城市人口中发病率达到0.4次/人，农村人口发病率达0.5次/人。腹泻虽然是小病，但发病原因也是多种多样的，并随时代、环境而改变。可以说，今天的腹泻与20年前的腹泻从发病机理看，已经有本质的改变。随着时代的发展，人们生活水平基本达到小康，卫生条件大大改善，由细菌感染导致的腹泻比例越来越少，相反，由于生活节奏加快，生存竞争激烈，压力大造成的功能性腹泻比例明显上升。一项研究表明，我国的腹泻病人大约30%需要抗生素来治疗，70%不需要也不应该使用抗生素治疗。消费者也越来越注意到黄连素、氟哌酸等产品的不良反应，以及滥用抗生素所带来的危害。腹泻市场除了黄连素、氟哌酸等低端抗生素产品外，近年来也引入了一些非抗生素产品，比如思密达、培菲康等，但定位在高端消费人群，对于大多数消费人群来说，其价格定位与消费者对腹泻这样的小病的消费定位是不相符的。专家分析认为，在城市市场腹泻主要是以病毒性为主，在农村以细菌性感染为主，假如按照市场细分的原则来讲，目前很多产品都难以覆盖整个市场。对于肠道菌群失调者，可用微生态活菌制剂，提供有益菌，改进肠道环境，改善肠道吸收，运动状态。如双歧杆菌活菌制剂(丽珠肠乐胶囊)、培菲康胶囊、地衣芽孢杆菌活菌制剂(整肠生胶囊)；肠黏膜保护剂双八体蒙脱石(思密达)，保护肠粘膜，能抑制固定霉素，促进肠粘膜病变修复；含木馏油成分制剂能抑制肠液的过量分泌。胃肠安丸主要用于治疗消化不良引起的腹泻，肠炎，菌痢，脘腹胀满，腹痛，食积乳积，其药理作用高于同类产品抗腹泻、抗菌、抗病毒、调节胃肠功能四种功能并存。但中药自身成分的复杂性使中成药很难保证其产品质量的稳定。
发明内容本发明所要解决的问题是提供一种胃肠安丸的质量控制方法，通过此质量控制方法，可控制该胃肠安丸的质量。本发明的胃肠安丸，是由下列重量配比的原料药制成木香100600g、沉香100600g、枳壳100600g、檀香90360g、大黄90360g、朱砂75300g、厚朴100600g、麝香4.518g、巴豆霜60240g、川芎90360g和大枣5002000g。5本发明优选的胃肠安丸，是由下列重量配比的原料药制成木香300g、沉香300g、枳壳300g、檀香180g、大黄180g、朱砂150g、厚朴300g、麝香9g、巴豆霜120g、川芎180g和大麥1000g。本发明最佳的胃肠安丸，其中的枳壳为麸炒枳壳；厚朴为姜炙厚朴；大枣为去核的大枣、麝香为人工麝香。本发明胃肠安丸的质量控制方法，其中该方法包括如下含量测定中的一种或两种A、阿魏酸C1QH1Q04含量的测定用高效液相色谱法测定用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈_0.085%磷酸为流动相；检测波长为316nm;理论板数按阿魏酸峰计算应不低于5000;对照品溶液的制备取阿魏酸对照品520mg，置50200ml量瓶中，加3585%甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀；取阿魏酸对照品溶液1.56ml置20100ml量瓶中，加3585%甲醇至刻度，摇匀，即得；供试品溶液的制备取本品粉末14g，精密称定，置50200mL具塞锥形瓶中，精密加入3585%甲醇1050ml，称定重量，超声处理1560分钟，放冷，再称定重量，用3585%甲醇补足减失的重量，摇匀，经滤膜滤过，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各2.510ii1，注入液相色谱仪，测定，即得；B、大黄素C15H1Q05和大黄酚C15H1Q04含量的测定色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-O.1%磷酸为流动相；检测波长为254nm;理论板数按大黄素峰计算应不低于3000;对照品溶液的制备精密称取大黄素对照品520mg，大黄酚对照品7.530mg，分别置50200ml量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀；分别精密量取大黄素、大黄酚溶液各0.52ml置520ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得；供试品溶液的制备取本品粉末14g，精密称定，置50200mL具塞锥形瓶中，精密加入甲醇1050ml，称定重量，加热回流0.52小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，再精密量取续滤液2.510ml，置烧瓶中，挥去溶剂，加416%盐酸溶液520ml，超声处理14分钟，用少量三氯甲烷洗涤容器，并入分液漏斗中，分取三氯甲烷层，酸液再用三氯甲烷提取23次，每次520mL，合并三氯甲烷液，减压回收溶剂至于，残渣加甲醇使溶解，转移至520ml容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，经滤膜滤过，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各2.510ii1，注入液相色谱仪，测定，即得。本发明优选的胃肠安丸的质量控制方法，其中该方法包括如下含量测定中的一种或两种A、阿魏酸C1QH1Q04含量的测定用高效液相色谱法测定用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈_0.085%磷酸为流动相；检测波长为316nm;理论板数按阿魏酸峰计算应不低于5000;对照品溶液的制备取阿魏酸对照品812mg，置80120ml量瓶中，加5075%甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀；取阿魏酸对照品溶液24ml置4060ml量瓶中，加5075%甲醇至刻度，摇匀，即得；供试品溶液的制备取本品粉末1.53g，精密称定，置80120mL具塞锥形瓶中，精密加入5075%甲醇2030ml，称定重量，超声处理2040分钟，放冷，再称定重量，用5075%甲醇补足减失的重量，摇匀，经滤膜滤过，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各46ii1，注入液相色谱仪，测定，即得；B、大黄素C15H1Q05和大黄酚C15H1Q04含量的测定色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-0.1%磷酸为流动相；检测波长为254nm;理论板数按大黄素峰计算应不低于3000;对照品溶液的制备精密称取大黄素对照品812mg，大黄酚对照品1020mg，分别置80120ml量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀；分别精密量取大黄素、大黄酚溶液各0.81.5ml置815ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得；供试品溶液的制备取本品粉末1.53g，精密称定，置80120mL具塞锥形瓶中，精密加入甲醇2030ml，称定重量，加热回流0.51.5小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，再精密量取续滤液46ml，置烧瓶中，挥去溶剂，加610%盐酸溶液815ml，超声处理13分钟，用少量三氯甲烷洗涤容器，并入分液漏斗中，分取三氯甲烷层，酸液再用三氯甲烷提取3次，每次812mL，合并三氯甲烷液，减压回收溶剂至干，残渣加甲醇使溶解，转移至815ml容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，经滤膜滤过，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各46ii1，注入液相色谱仪，测定，即得。本发明优选的胃肠安丸的质量控制方法，其中该方法包括如下含量测定中的一种或两种A、阿魏酸Q。H^4的测定用高效液相色谱法测定用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈_0.085%磷酸为流动相，其中乙腈0.085%磷酸体积比为17:83;检测波长为316nm;理论板数按阿魏酸峰计算应不低于5000;对照品溶液的制备取阿魏酸对照品10mg，置100ml量瓶中，加70X甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀；取阿魏酸对照品溶液3ml置50ml量瓶中，加70%甲醇至刻度，摇匀，即得；供试品溶液的制备取本品粉末2g，精密称定，置lOOmL具塞锥形瓶中，精密加入70%甲醇25ml，称定重量，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用70%甲醇补足减失的重量，摇匀，经O.45ym滤膜滤过，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5iU，注入液相色谱仪，测定，即得；B、大黄素QA。Os和大黄酚Q孔。04的测定色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-0.1%磷酸为流动相，其中甲醇0.1%磷酸体积比为85:15;检测波长为254nm;理论板数按大黄素峰计算应不低于3000;对照品溶液的制备精密称取大黄素对照品10mg，大黄酚对照品15mg，分别置100ml量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀；分别精密量取大黄素、大黄酚溶液各1ml置10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得；供试品溶液的制备取本品粉末(过80目筛)约2g，精密称定，置lOOmL具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，称定重量，加热回流1小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，再精密量取续滤液5ml，置烧瓶中，挥去溶剂，加8%盐酸溶液10ml，超声处理2分钟，用少量三氯甲烷洗涤容器，并入分液漏斗中，分取三氯甲烷层，酸液再用三氯甲烷提取三次，每次10mL，合并三氯甲烷液，减压回收溶剂至干，残渣加甲醇使溶解，转移至10ml容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，经O.45iim滤膜滤过，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各各5iU，注入液相色谱仪，测定，即得。本发明的胃肠安丸的质量控制方法，还可以在上述含量测定的方法中包括如下含厚朴酚C18H1802与和厚朴酚C18H1802的含量测定色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-乙腈-水为流动相，甲醇-乙腈-水之比为50:20:40;检测波长为294nm;理论板数按厚朴酚峰计算应不低于4000;对照品溶液的制备分别取厚朴酚对照品、和厚朴酚对照品适量，精密称定，加甲醇分别制成每lml含厚朴酚60iig、每lml含和厚朴酚10iig的溶液，即得；供试品溶液的制备取本品3g，研细，取0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入氯仿50ml，称定重量，静置过夜，超声处理1.5小时，放冷，再称定重量，用氯仿补足减失的重量，滤过，精密量取续滤液15ml，蒸干，残渣用甲醇溶解并转移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20iU，注入液相色谱仪，测定，即得。本发明胃肠安丸的质量控制方法中，流动相溶液的配制比例是按体积比配制。本发明胃肠安丸的质量控制方法中，本品胃肠安丸每克含川芎以阿魏酸Q^。04计不得少于0.040mg。本发明胃肠安丸的质量控制方法中，本品胃肠安丸每克含大黄以大黄素Q孔。05和大黄酚C15H1Q04的总量计不得少于0.20mg。本发明胃肠安丸的质量控制方法中，本品胃肠安丸每克含厚朴以厚朴酚C18H1802与和厚朴酚C18H1802的总量计，不得少于1.Omg。本发明中所述的本品是指胃肠安丸。对于本领域技术人员而言，根据本发明所公开的技术内容，本领域技术人员将很清楚本发明的其它实施方案，本发明实施例仅作为示例。在不违反本发明主旨及范围的情况下，可对本发明进行各种改变和改进。例如，使用不同的检测仪器所获得的测定结果可能有所不同，但只要使用本发明所述的质量控制方法，均在本发明保护范围之内。对于本发明而言，按照本发明提供的质量控制方法来控胃肠安丸中士的宁和马钱子碱的含量以控制本发明胃肠安丸的质量，以确胃肠安丸的疗效。下面通过本发明药物胃肠安丸(按照实施例6制备方法获得)有效成分含量测定来说明本发明含量测定方法的有益效果。试验例11.原料(药材)质量标准1.1木香本品为菊科植物木香Aucklandial即paDecne.的干燥根。秋、冬二季采挖，除去泥沙及须根，切段，大的再纵剖成瓣，干燥后撞去粗皮。本品应符合中国药典2005年版第一部第41页木香项下的有关规定。1.2沉香本品为瑞香科植物白木香Aquilariasinensis(Lour.)Gilg含有树脂的木材。全年均可采收，割取含树脂的木材，除去不含树脂的部分，阴干。本品应符合中国药典2005年版第一部第128页沉香项下的有关规定。1.3枳壳(麸炒)本品为芸香科植物酸橙CitrusaurantiumL.及其栽培变种的干燥未成熟果实。7月果皮尚绿时采收，自中部横切为两半，晒干或低温干燥。炮制枳壳除去杂质，洗净，润透，切薄片，干燥后筛去碎落的瓤核。本品为不规则弧状条形薄片，长达5cm，宽达1.3cm。切面外果皮棕褐色至褐色，中果皮黄白色至黄棕色，近外缘有12列点状油室，内侧有的有少量紫褐色瓤囊。麸炒枳壳取枳壳片，照麸炒法(附录IID)炒至色变深。本品为不规则弧状条形薄片，色较深，有的有焦斑。本品应符合中国药典2005年版第一部第171页枳壳项下的有关规定。1.4檀香本品为檀香科植物檀香SantalumalbumL.树干的心材。本品应符合中国药典2005年版第一部第264页檀香项下的有关规定。1.5大黄本品为蓼科植物掌叶大黄RheumpalmatumL.、唐古特大黄RheumtanguticumMaxim.exBalf.或药用大黄RheumofficinaleBaill.的干燥根及根茎。秋末茎叶枯萎或次春发芽前采挖，除去细根，刮去外皮，切瓣或段，绳穿成串干燥或直接干燥。本品应符合中国药典2005年版第一部第17页大黄项下的有关规定。1.6厚朴(姜制)本品为木兰科植物厚朴MagnoliaofficinalisRehd.etWils.或凹叶厚朴MagnoliaofficinalisRehd.etWils.var.bilobaRehd.etWils.的干燥干皮、根皮及枝皮。46月剥取，根皮及枝皮直接阴干；干皮置沸水中微煮后，堆置阴湿处，"发汗"至内表面变紫褐色或棕褐色时，蒸软，取出，巻成筒状，干燥。炮制厚朴刮去粗皮，洗净，润透，切丝，晒干。本品为弯曲丝条状，断面纤维性，外表面黄棕色，内表深紫褐色。姜厚朴取厚朴丝，照姜汁炙法(附录IID)炒干。本品为弯曲丝条状，断面纤维性，呈紫褐色。本品应符合中国药典2005年版第一部第176页厚朴项下的有关规定。1.7朱砂本品为硫化物类矿物辰砂族辰砂，主含硫化荥(HgS)。采挖后，选取纯净者，用磁铁吸净含铁的杂质，再用水淘去杂石和泥沙。本品应符合中国药典2005年版第一部第92页朱砂项下的有关规定。1.8麝香本品为鹿科动物林麝MoschusberezovskiiFlerov、马麝MoschussifanicusPrzewalski或原麝MoschusmoschiferusLi皿aeus成熟雄体香囊中的干燥分泌物。野麝多在冬季至次春猎取，猎获后，割取香囊，阴干，习称"毛壳麝香";剖开香囊，除去囊壳，习称"麝香仁"。家麝直接从其香囊中取出麝香仁，阴干或用干燥器密闭干燥。本品应符合中国药典2005年版第一部第266页麝香项下的有关规定。1.9巴豆霜本品为巴豆的炮制加工品。本品应符合中国药典2005年版第一部第55页巴豆霜项下的有关规定。1.10大枣(去核)本品为鼠李科植物枣ZiziphusjujubaMill.的干燥成熟果实。秋季果实成熟时采收，晒干。炮制除去杂质，洗净，晒干。用时破开或去核。本品应符合中国药典2005年版第一部第15页大枣项下的有关规定。1.11川芎本品为伞形科植物川芎LigusticumchuanxiongHort.的干燥根茎。夏季当茎上的节盘显著突出，并略带紫色时采挖，除去泥沙，晒后炕干，再去须根。本品应符合中国药典2005年版第一部第28页川芎项下的有关规定。含量测定照高效液相色谱法(附录VID)测定。1.仪器与试药1.l仪器条件仪器岛津LC_2010AHT型高效液相色谱仪检测器UV/VIS检测波长316nm流速0.80mL/min柱温25。C柱压6.2Mpa进样量5uL超声仪KUD0SSK8200LH(上海科导超声仪器有限公司)电子天平SartoriusCP225D/CP224S(北京赛多利斯仪器系统有限公司)1.2色谱条件色i普柱Diamonsil5iiC18250X4.6mm流动相乙腈-O.085%磷酸(17:83)1.3试剂与试药阿魏酸对照品批号110773-200611;均购自中国药品生物制品检定所(供含量测定用)试剂均为分析纯；乙腈为色谱纯(fisherscience);水为去离子水。胃肠安丸(批号20070625、20080425、20080429);由天津中新药业集团股份有限公司乐仁堂制药厂提供。2.实验方法的考察2.1色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈_0.085%磷酸(17:83)为流动相；检测波长为316nm。理论板数按阿魏酸峰计算应不低于5000。2.2提取条件的选择由于川芎为原粉入药，且中国药典2005年版第一部第28页川芎无含量测定项，故本实验按照中国药典2005年版第一部第89页同为伞形科植物的当归为参考并按照含量测定供试品溶液制备项下制备供试品。2.3测定条件的选择2.3.l流动相的选择实验结果表明用乙腈_0.085%磷酸(17:83)为流动相，阿魏酸色谱峰与其他成分的色谱峰分离良好。2.3.2波长的选择照中国药典2005年版第一部第89页当归的含量测定项下选择316m为检测波长。2.3.3对照品溶液的制备阿魏酸对照品贮备液的制备称取阿魏酸对照品25.65mg，精密称定，置100mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，制成每lmL含0.2565mg的对照品溶液，作为阿魏酸对照品贮备液。阿魏酸对照品溶液的制备精密量取上述对照品贮备液lmL置25mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，制成每lmL含0.01026mg的对照品溶液，作为阿魏酸对照品溶液。2.4方法学实验2.4.1色谱条件与系统适用性实验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈_0.085%磷酸(17:83)为流动相；检测波长为316nm。理论板数按阿魏酸峰计算应不低于5000。2.4.2线性关系考察精密吸取上述对照品溶液1.0、2.0、4.0、5.0、6.0、8.0、10.0iU，依次进样分析，测定峰面积，结果见表l。进样量(吗)0.010260.020520.041040.05130.061560.082080.1026~~~-峰面积710901413362911283747204419225卯628736413以进样量为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，见图1。经统计学计算得到回归方程Y=7.236X106X_3.643X103r=0.9999结果表明阿魏酸在0.010260.1026iig范围内线性关系良好。2.4.3精密度试验阿魏酸对照品精密度试验精密吸取阿魏酸(浓度为10.26iig/ml)对照品溶液5iiL，重复进样6次，按上述色谱条件测定峰面积积分值，计算相对标准偏差为1.78%，结果见表2。表2阿魏酸对照品精密度实验结果<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>实验结果表明，对照品的精密度峰面积平均值为372200;相对标准偏差为1.78%，符合要求。样品精密度试验(阿魏酸)精密吸取供试口c3口溶液(批号为20070625)5yL，重复进样6次，按上述色谱条件测定峰面积积分值，计算相对标准偏差为1.96%，结果见表3。表3样品精密度实验结果<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>实验结果表明，样品中阿魏酸的峰面积平均值为174467.3;相对标准偏差为1.96%，符合要求。2.4.4回收试验取本品粉末(批号为20070625;过80目筛)lg，共6份，精密称定，置25ml量瓶中，分别加入阿魏酸对照品适量(C=0.2565mg/mL;V=0.50mL)，按供试品制备与测定项下操作，计算回收率，阿魏酸回收率为99.60%，相对标准偏差RSD为0.50%，结果见表4表4阿魏酸回收率试验结果<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>实验结果表明，阿魏酸回收率为99.60%，相对标准偏差RSD为0.50%，符合要求。2.4.5重现性试验取同一批号(批号为:20070625)的样品粉末(过80目筛)，称取6份，约2.0g，精密称定，按供试品制备与测定项下操作，测定峰面积积分值，计算阿魏酸的相对标准偏差为1.51%，结果见表5。表5重现性试验结果(n=2)<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>实验结果表明，重现性实验相对标准偏差RSD为1.87%，符合要求。2.4.6专属性试验按样品处方取除川芎以外的药味，照制法项下操作制备阴性样品，按供试品制备方法制成阴性对照样品，用与供试品相同的色谱条件测定，结果表明，阴性对照样品在川芎中的阿魏酸出峰处无峰，见附图。2.4.7稳定性试验将制备好的供试品溶液进样分析，每隔2小时进样，按上述色谱条件测定峰面积积分值，计算相对标准偏差RSD为1.53%。表明供试品在8小时内稳定，结果见表6。表6稳定性试验结果检测时间(h)阿魏酸峰面积峰面积平均值RSD0■17228921733594169597171475.60.90%61719018170232实验结果表明，稳定性实验相对标准偏差RSD为0.90%，符合要求。2.4.8不同批号胃肠安丸中阿魏酸的含量测定结果对照品溶液的制备精密称取阿魏酸对照品10mg，置100ml量瓶中，加70%甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀；精密量取阿魏酸对照品溶液3ml置50ml量瓶中，加70%甲醇至刻度，摇匀，即得(每1ml含阿魏酸6g)。供试品溶液的制备取本品粉末(过80目筛)约2g，精密称定，置lOOmL具塞锥形瓶中，精密加入70%甲醇25ml，称定重量，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用70%甲醇补足减失的重量，摇匀，经0.45iim滤膜滤过，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5iU，注入液相色谱仪，测定，即得。共测定了3批胃肠安丸中阿魏酸的含量，结果见表7。表7样品中阿魏酸含量测定结果批号阿魏酸含量(mg/g)平均值(mg/g)总平均值(mg/g)200706250.060600.058290.05945200804250.066230.065870.066050.05927200804290.052710.051920.05231限量本品每克含川芎以阿魏酸((V^。0》计不得少于0.040mg。180gX0.10%(假设理论值)+3019g=0.05962mg/g(理论含量值)试验例2本品中有效成分含量测定含量测定照高效液相色谱法(附录VID)测定。1.仪器与试药l.l仪器条件仪器岛津LC_2010AHT型高效液相色谱仪检测器UV/VIS检测波长254nm流速1.OmL/min柱温40。C柱压6.0Mpa进样量5uL超声仪KUD0SSK8200LH(上海科导超声仪器有限公司)电子天平SartoriusCP225D/CP224S(北京赛多利斯仪器系统有限公司)1.2色谱条件色i普柱Diamonsil5iiC18250X4.6mm流动相:甲醇-O.1%磷酸(85:15)1.3试剂与试药大黄素对照品批号为110756-200110大黄酚对照品批号为110796-200615均购自中国药品生物制品检定所(供含量测定用)试剂均为分析纯；甲醇为色谱纯(fisherscience);水为去离子水。胃肠安丸(批号20070625、20080425、20080429);由天津中新药业集团股份有限公司乐仁堂制药厂提供。2.实验方法的考察2.1色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-0.1%磷酸(85:15)为流动相；检测波长为254nm。理论板数按大黄素峰计算应不低于3000。2.2提取条件的选择由于大黄为原粉入药，故本实验按照中国药典2005年版第一部第17页大黄含量测定供试品溶液制备项下制备供试品。2.3测定条件的选择2.3.l流动相的选择实验结果表明用甲醇-O.1%磷酸(85:15)为流动相，大黄素与大黄酚色谱峰与其他成分的色谱峰分离良好。2.3.2波长的选择照中国药典2005年版第一部第17页大黄的含量测定项下选择254nm为检测波长。2.3.3对照品溶液的制备大黄素对照品贮备液的制备称取大黄素对照品10.10mg，精密称定，置lOOmL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，制成每lmL含0.lOlOmg的对照品溶液作为大黄素对照品贮备液。大黄酚对照品贮备液的制备称取大黄酚对照品16.18mg，精密称定，置100mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，制成每lmL含O.1618mg的对照品溶液作为大黄酚对照品贮备液。大黄素和大黄酚混合对照品溶液的制备精密吸取上述对照品贮备液各lmL置同一lOmL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，制成每lmL含大黄素10.10yg和大黄酚16.18iig的混合对照品溶液。2.4方法学实验2.4.1色谱条件与系统适用性实验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-O.1%磷酸(85:15)为流动相；检测15波长为254nm。理论板数按大黄素峰计算应不低于3000。2.4.2线性关系考察大黄素线性精密吸取上述对照品溶液1.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0iU，依次进样分析，测定峰面积，结果见表8。表8大黄素线性关系考察结果<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>以进样量为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，见图6。经统计学计算得到回归方程Y=4.778X106X_6.730X103r=0.9999结果表明大黄素在0.010100.1010iig范围内线性关系良好。大黄酚线性精密吸取上述对照品溶液1.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0iU，依次进样分析，测定峰面积，结果见表9。表9大黄酚线性关系考察结果<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>以进样量为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，见图7。经统计学计算得到回归方程Y=6.599X106X_2.215X104r=0.9999结果表明大黄素在0.016180.1618yg范围内线性关系良好。2.4.3精密度试验对照品精密度试验(大黄素)精密吸取大黄素(浓度为10.10iig/ml)对照品溶液5yL，重复进样6次，按上述色谱条件测定峰面积积分值，计算相对标准偏差为1.48%，结果见表10。表10精密度实验结果<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>实验结果表明，对照品精密度相对标准偏差为1.48%，符合要求。对照品精密度试验(大黄酚)精密吸取大黄素(浓度为16.18g/ml)对照品溶液5yL，重复进样6次，按上述色谱条件测定峰面积积分值，计算相对标准偏差为1.40%，结果见表11。表ll精密度实验结果<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>实验结果表明，对照品精密度相对标准偏差为1.40%，符合要求。样品精密度试验(大黄素)精密吸取供试品溶液(批号为20070625)5yL，重复进样6次，按上述色谱条件测定峰面积积分值，计算相对标准偏差为1.05%，结果见表12。表12样品精密度实验结果次数大黄素峰面积峰面积平均值RSD118體21845313182436183507.171.05%4聽531840036182319实验结果表明，对照品精密度相对标准偏差为1.05%，符合要求。样品精密度试验(大黄酚)精密吸取供试品溶液(批号为20070625)5yL，重复进样6次，按上述色谱条件测定峰面积积分值，计算相对标准偏差为0.38%，结果见表13。表13样品精密度实验结果次数大黄酚峰面积峰面积平均值RSD153599325368143534605535230.170.38%45332475327526537970实验结果表明，对照品精密度相对标准偏差为0.38%，符合要求。2.4.4回收试验(大黄素)取本品粉末(批号为20070625;过80目筛)lg，共6份，精密称定，分别加入大黄素对照品适量，按供试品制备与测定项下操作，计算回收率，大黄素回收率为96.77%，相对标准偏差RSD为0.10%，结果见表14。表14大黄素回收率试验结果称样量样品中大黄加入大黄测得量回收率平均回收率<table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table>实验结果表明，大黄素回收率为96.77X，相对标准偏差RSD为0.10%，符合要求。回收试验(大黄酚)取本品粉末(批号为20070625;过80目筛)lg，共6份，精密称定，分别加入大黄酚对照品适量，按供试品制备与测定项下操作，计算回收率，大黄酚回收率为97.94%，相对标准偏差RSD为1.69%，结果见表15。表15大黄素回收率试验结果<table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table>实验结果表明，大黄酚回收率为97.94%，相对标准偏差RSD为1.69%，符合要求。2.4.5重现性试验(大黄素)取同一批号(批号为20070625)的样品粉末(过80目筛)，称取6份，约2.0g，精密称定，按供试品制备与测定项下操作，测定峰面积积分值，计算大黄素的相对标准偏差为1.51%，结果见表16。表16重现性试验结果(n=2)<table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table>实验结果表明，重现性实验相对标准偏差RSD为1.51%，符合要求。重现性试验(大黄酚)取同一批号(批号为20070625)的样品粉末(过80目筛)，称取6份，约2.Og，精密称定，按供试品制备与测定项下操作，测定峰面积积分值，计算大黄酚的相对标准偏差为1.33%，结果见表17。表17重现性试验结果(n=2)<table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table>实验结果表明，重现性实验相对标准偏差RSD为1.33%，符合要求。2.4.6专属性试验按样品处方取除大黄以外的药味，照制法项下操作制备阴性样品，按供试品制备方法制成阴性对照样品，用与供试品相同的色谱条件测定，结果表明，阴性对照样品在大黄出峰处无峰，见附图。2.4.7稳定性试验(大黄素)将制备好的供试品溶液进样分析，每隔2小时进样，按上述色谱条件测定峰面积积分值，计算相对标准偏差RSD为1.53%。表明供试品在8小时内稳定，结果见表18。表18稳定性试验结果(大黄素)检测时间(h)大黄素峰面积峰面积平均值RSD018750421845314189924185879.81.53%61847528182688实验结果表明，稳定性实验相对标准偏差RSD为1.53%，符合要求。稳定性试验(大黄酚)将制备好的供试品溶液进样分析，每隔2小时进样，按上述色谱条件测定峰面积积分值，计算相对标准偏差RSD为1.09%。表明供试品在8小时内稳定，结果见表19。表19稳定性试验结果(大黄酚)检测时间(h)大黄酚峰面积峰面积平均值RSD053498225377644543328536763.41.09%65399398527804实验结果表明，稳定性实验相对标准偏差RSD为1.09%，符合要求。2.4.8不同批号胃肠安丸中大黄素及大黄酚的含量测定结果对照品溶液的制备精密称取大黄素对照品10mg，大黄酚对照品15mg，分别置100ml量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀；分别精密量取大黄素、大黄酚溶液各1ml置10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得(大黄素每1ml中含lOi!g、大黄酚每1ml中含15iig)。供试品溶液的制备取本品粉末(过80目筛)约2g，精密称定，置lOOmL具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，称定重量，加热回流1小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，再精密量取续滤液5ml，置烧瓶中，挥去溶剂，加8%盐酸溶液10ml，超声处理2分钟，用少量三氯甲烷洗涤容器，并入分液漏斗中，分取三氯甲烷层，酸液再用三氯甲烷提取三次，每次10mL，合并三氯甲烷液，减压回收溶剂至干，残渣加甲醇使溶解，转移至10ml容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，经0.45iim滤膜滤过，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5iU，注入液相色谱仪，测定，即得。共测定了3批胃肠安丸中大黄素及大黄酚的含量，结果见表20。表20样品中大黄素及大黄酚含量测定结果21<table>tableseeoriginaldocumentpage22</column></row><table>限量本品每克含大黄以大黄素(C15H1Q05)和大黄酚(C15H1Q04)的总量计不得少于0.20mg。图1:阿魏酸(110773-200611)对照品图2:胃肠安丸(批号20070625)供试品图3:胃肠安丸(批号20070625)样加标图4:阴性样品和对照品图5:阿魏酸线形6:大黄素线形7:大黄酚线性8:大黄素(110756-200110)及大黄酚(110796-200615)对照图9:胃肠安丸(批号20070625)供试品图10:胃肠安丸(批号20070625)样加标图11:阴性样品具体实施方式以下通过实施例进一步阐述本发明药物的制备方法。实施例1a.取木香100g、沉香100g、枳壳100g、檀香90g、大黄90g、朱砂75g、厚朴100g、人工麝香4.5g、巴豆霜60g、川芎90g和大枣500g备用;b.以上十一味，巴豆霜、麝香分别粉碎成细粉；朱砂水飞成极细粉；其余沉香等八味粉碎成细粉，与巴豆霜、麝香粉末配研，混匀，过筛，用水泛丸，低温干燥，用朱砂包衣，打光，阴干，即得。实施例2a.取木香600g、沉香600g、枳壳600g、檀香360g、大黄360g、朱砂300g、厚朴600g、麝香18g、巴豆霜240g、川芎360g和大枣2000g备用;b.以上十一味，巴豆霜、麝香分别粉碎成细粉；朱砂水飞成极细粉；其余沉香等八味粉碎成细粉，与巴豆霜、麝香粉末配研，混匀，过筛，用水泛丸，低温干燥，用朱砂包衣，打光，阴干，即得。实施例3a.取木香150g、沉香200g、枳壳200g、檀香360g、大黄90g、朱砂150g、厚朴300g、麝香5g、巴豆霜100g、川芎150g和大枣800g备用;b.以上十一味，巴豆霜、麝香分别粉碎成细粉；朱砂水飞成极细粉；其余沉香等八味粉碎成细粉，与巴豆霜、麝香粉末配研，混匀，过筛，用水泛丸，低温干燥，用朱砂包衣，打光，阴干，即得。实施例4a.取木香400g、沉香300g、枳壳400g、檀香200g、大黄200g、朱砂250g、厚朴500g、人工麝香10g、巴豆霜200g、川芎180g和大枣1500g备用;b.以上十一味，巴豆霜、麝香分别粉碎成细粉；朱砂水飞成极细粉；其余沉香等八味粉碎成细粉，与巴豆霜、麝香粉末配研，混匀，过筛，用水泛丸，低温干燥，用朱砂包衣，打光，阴干，即得。实施例5a.取木香500g、沉香5000g、枳壳100g、檀香90g、大黄360g、朱砂75g、厚朴600g、麝香18g、巴豆霜60g、川芎90g和大枣2000g备用;b.以上十一味，巴豆霜、麝香分别粉碎成细粉；朱砂水飞成极细粉；其余沉香等八味粉碎成细粉，与巴豆霜、麝香粉末配研，混匀，过筛，用水泛丸，低温干燥，用朱砂包衣，打光，阴干，即得。实施例6a.取木香300g、沉香300g、麸炒枳壳300g、檀香180g、大黄180g、朱砂150g、姜炎厚朴300g、人工麝香9g、巴豆霜120g、川芎180g和去核的大枣1000g备用;b.以上十一味，巴豆霜、麝香分别粉碎成细粉；朱砂水飞成极细粉；其余沉香等八味粉碎成细粉，与巴豆霜、麝香粉末配研，混匀，过筛，用水泛丸，低温干燥，用朱砂包衣，打光，阴干，即得。2权利要求一种胃肠安丸的质量控制方法，其特征在于，该方法包括如下含量测定中的一种或两种A、阿魏酸C10H10O4含量的测定用高效液相色谱法测定用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-0.085％磷酸为流动相；检测波长为316nm；理论板数按阿魏酸峰计算应不低于5000；对照品溶液的制备取阿魏酸对照品5～20mg，置50～200ml量瓶中，加35～85％甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀；取阿魏酸对照品溶液1.5～6ml置20～100ml量瓶中，加35～85％甲醇至刻度，摇匀，即得；供试品溶液的制备取本品粉末1～4g，精密称定，置50～200mL具塞锥形瓶中，精密加入35～85％甲醇10～50ml，称定重量，超声处理15～60分钟，放冷，再称定重量，用35～85％甲醇补足减失的重量，摇匀，经滤膜滤过，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各2.5～10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；B、大黄素C15H10O5和大黄酚C15H10O4含量的测定色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-0.1％磷酸为流动相；检测波长为254nm；理论板数按大黄素峰计算应不低于3000；对照品溶液的制备精密称取大黄素对照品5～20mg，大黄酚对照品7.5～30mg，分别置50～200ml量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀；分别精密量取大黄素、大黄酚溶液各0.5～2ml置5～20ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得；供试品溶液的制备取本品粉末1～4g，精密称定，置50～200mL具塞锥形瓶中，精密加入甲醇10～50ml，称定重量，加热回流0.5～2小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，再精密量取续滤液2.5～10ml，置烧瓶中，挥去溶剂，加4～16％盐酸溶液5～20ml，超声处理1～4分钟，用少量三氯甲烷洗涤容器，并入分液漏斗中，分取三氯甲烷层，酸液再用三氯甲烷提取2～3次，每次5～20mL，合并三氯甲烷液，减压回收溶剂至干，残渣加甲醇使溶解，转移至5～20ml容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，经滤膜滤过，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各2.5～10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。2.权利要求1所述胃肠安丸的质量控制方法，其特征在于，该方法包括如下含量测定中的一种或两种A、阿魏酸C1QH1Q04含量的测定用高效液相色谱法测定用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈一0.085%磷酸为流动相；检测波长为316nm;理论板数按阿魏酸峰计算应不低于5000;对照品溶液的制备取阿魏酸对照品812mg，置80120ml量瓶中，加5075%甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀；取阿魏酸对照品溶液24ml置4060ml量瓶中，加5075%甲醇至刻度，摇匀，即得；供试品溶液的制备取本品粉末1.53g，精密称定，置80120mL具塞锥形瓶中，精密加入5075%甲醇2030ml，称定重量，超声处理2040分钟，放冷，再称定重量，用5075%甲醇补足减失的重量，摇匀，经滤膜滤过，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各46iU，注入液相色谱仪，测定，即得；B、大黄素C15H1Q05和大黄酚C15H1Q04含量的测定色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-0.1%磷酸为流动相；检测波长为254nm;理论板数按大黄素峰计算应不低于3000;对照品溶液的制备精密称取大黄素对照品812mg，大黄酚对照品1020mg，分别置80120ml量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀；分别精密量取大黄素、大黄酚溶液各0.81.5ml置815ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得；供试品溶液的制备取本品粉末1.53g，精密称定，置80120mL具塞锥形瓶中，精密加入甲醇2030ml，称定重量，加热回流0.51.5小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，再精密量取续滤液46ml，置烧瓶中，挥去溶剂，加610%盐酸溶液815ml，超声处理13分钟，用少量三氯甲烷洗涤容器，并入分液漏斗中，分取三氯甲烷层，酸液再用三氯甲烷提取3次，每次812mL，合并三氯甲烷液，减压回收溶剂至干，残渣加甲醇使溶解，转移至815ml容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，经滤膜滤过，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各46iU，注入液相色谱仪，测定，即得。3.权利要求2所述胃肠安丸的质量控制方法，其特征在于，方法如下A、阿魏酸C1QH1Q04的测定用高效液相色谱法测定用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-0.085%磷酸为流动相，其中乙腈0.085%磷酸体积比为17:83;检测波长为316nm;理论板数按阿魏酸峰计算应不低于5000;对照品溶液的制备取阿魏酸对照品10mg，置100ml量瓶中，加70%甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀；取阿魏酸对照品溶液3ml置50ml量瓶中，加70%甲醇至刻度，摇匀，即得；供试品溶液的制备取本品粉末2g，精密称定，置100mL具塞锥形瓶中，精密加入70%甲醇25ml，称定重量，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用70%甲醇补足减失的重量，摇匀，经O.45iim滤膜滤过，即得;测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5iU，注入液相色谱仪，测定，即得；B、大黄素C15H1Q05和大黄酚C15H1Q04的测定色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-0.1%磷酸为流动相，其中甲醇0.1%磷酸体积比为85:15;检测波长为254nm;理论板数按大黄素峰计算应不低于3000;对照品溶液的制备精密称取大黄素对照品10mg，大黄酚对照品15mg，分别置100ml量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀；分别精密量取大黄素、大黄酚溶液各lml置10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得；供试品溶液的制备取本品粉末(过80目筛)约2g，精密称定，置100mL具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，称定重量，加热回流1小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，再精密量取续滤液5ml，置烧瓶中，挥去溶剂，加8%盐酸溶液10ml，超声处理2分钟，用少量三氯甲烷洗涤容器，并入分液漏斗中，分取三氯甲烷层，酸液再用三氯甲烷提取三次，每次10mL，合并三氯甲烷液，减压回收溶剂至干，残渣加甲醇使溶解，转移至10ml容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，经O.45iim滤膜滤过，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各各5iU，注入液相色谱仪，测定，即得。4.权利要求1-3任一所述胃肠安丸的质量控制方法，其特征在于，该方法还包括如下含量测定厚朴酚C18H1802与和厚朴酚C18H1802的含量测定色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇_乙腈_水为流动相，甲醇-乙腈-水之比为50:20:40;检测波长为294nm;理论板数按厚朴酚峰计算应不低于4000;对照品溶液的制备分别取厚朴酚对照品、和厚朴酚对照品适量，精密称定，加甲醇分别制成每lml含厚朴酚60iig、每lml含和厚朴酚10iig的溶液，即得；供试品溶液的制备取本品3g，研细，取0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入氯仿50ml，称定重量，静置过夜，超声处理1.5小时，放冷，再称定重量，用氯仿补足减失的重量，滤过，精密量取续滤液15ml，蒸干，残渣用甲醇溶解并转移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20iU，注入液相色谱仪，测定，即得。5.权利要求13任一所述胃肠安丸的质量控制方法，其特征在于，本品每克含川芎以阿魏酸C1QH1Q04计不得少于0.040mg。6.权利要求13任一所述胃肠安丸的质量控制方法，其特征在于，本品每克含大黄以大黄素C15H1Q05和大黄酚C15H1Q04的总量计不得少于0.20mg。7.权利要求4所述胃肠安丸的质量控制方法，其特征在于，本品每克含厚朴以厚朴酚C18H1802与和厚朴酚C18H1802的总量计，不得少于1.Omg。8.权利要求18任一所述胃肠安丸，其特征在于，是由下列重量配比的原料药制成木香100600g、沉香100600g、枳壳100600g、檀香90360g、大黄90360g、朱砂75300g、厚朴100600g、麝香4.518g、巴豆霜60240g、川尊90360g和大麥5002000g。9.权利要求8所述胃肠安丸，其特征在于，是由下列重量配比的原料药制成木香300g、沉香300g、枳壳300g、檀香180g、大黄180g、朱砂150g、厚朴300g、麝香9g、巴豆霜120g、川尊180g和大麥1000g。10.权利要求9所述胃肠安丸，其特征在于，枳壳为麸炒枳壳；厚朴为姜炙厚朴；大枣为去核的大枣、麝香为人工麝香。全文摘要本发明涉及一种胃肠安丸的质量控制方法。该中药组合物是由木香、沉香、枳壳、檀香、大黄、厚朴、朱砂、麝香、巴豆霜、大枣、川芎制成。采用本发明质量控制方法可以有效的控制胃肠安丸的质量。文档编号A61P1/14GK101757293SQ20081015442公开日2010年6月30日申请日期2008年12月24日优先权日2008年12月24日发明者杨瑾,王伟,王春晨,王磊,袁学海,郝忻,陈坚申请人:天津中新药业集团股份有限公司乐仁堂制药厂