一种治疗卵巢早衰的中药组合物及其制备方法

专利名称：一种治疗卵巢早衰的中药组合物及其制备方法
技术领域：
本发明涉及一种中药组合物，具体涉及一种治疗卵巢早衰的中药组合物及其制备 方法与应用。
背景技术：
卵巢早衰(Premature Ovarian Failure, P0F)是指妇女40岁以前因某种原因引 起以闭经、不孕、雌激素缺乏及促性腺激素升高为特征的一种疾病。患者的卵泡内无卵母 细胞或虽有原始细胞，但对促性腺激素无反应，表现为雌激素水平低下、促性腺激素水平升 高。临床上患者表现为闭经、不孕，兼有面色潮红、烘热汗出、情绪波动、白带减少、性欲低 下、阴部干燥、生殖器及第二性征逐渐退化的类更年期症状，影响患者的生活质量。现代医学认为本病病因复杂，目前还不是十分清楚。理论上P0F发病机制为先天 性卵泡数量少、卵泡闭锁增加、卵泡成熟障碍等。中医学认为，本病属“血枯”、“血隔”、“闭 经”、“不孕”等范畴。其病因有学者将其归纳为以下几个方面肾气不足，肾精亏耗是本病 发病的基本病因；气血虚弱，是本病发病的重要病因；其次情志郁结，气血暗耗，冲任失调 或六淫时毒，浸淫胞脉，扰乱冲任是本病发病的主要诱因。在治疗方面，西医不外乎恢复，保养，替代卵巢功能这几方面。到目前为止还没有 确切有效的方法能恢复卵巢的功能。常用的治法有激素替代疗法(HRT)，诱导排卵，辅助 赠卵技术，自体或异体卵巢移植技术，免疫抑制治疗，补充钙剂或降钙素治疗。中医治疗以肾为本，常见的有⑴单方验方治疗，如归肾丸加减、一贯煎加减等； (2)成药治疗，如乌鳖口服液、仙乐雄胶囊等；(3)中药人工周期治疗；(4)中西医结合治疗， 如中西药人工周期疗法等；(5)针灸治疗等。主要是通过补肾益气、养血活血来改善症状。近10年来P0F的发生率有升高趋势，其发病率在妇女中占1 % 3%，占继发性闭 经的2% 10%。由于其可导致自主神经功能紊乱，新陈代谢障碍，雌激素靶器官萎缩及退 行性变从而产生躯干及精神症状，表现为不孕，并因体内低雌激素水平而出现一系列症状， 如潮热、出汗、阴道干涩、白带减少、头晕、情绪波动、失眠及性欲减退、骨质疏松，严重影响 妇女的生活质量，是当今生殖医学和生殖健康研究的热点和难点。西医治疗采用HRT方法， 停用后复发率高，且长期应用可能诱发子宫内膜癌、乳腺癌，而且患有子宫肌瘤、乳腺增生、 糖尿病及血栓等血液系统疾病的患者，不宜采取，还有部分妇女对激素的使用有心理障碍。 因此，探讨中药治疗取代激素治疗很有必要。发明人在多年的科研实践和临床经验中反复总结，发现了本发明的组合物对治疗 卵巢早衰具有良好的效果，本发明组合物的处方由熟地黄、山茱萸、当归、白芍、淫羊藿、丹 参等中药组成。方中熟地黄、山茱萸滋阴补肝肾，为君药；当归、白芍、丹参补血、活血通经； 淫羊藿补肾阳；丹参还可清心除烦。本发明组合物主要用于肝肾阴虚型卵巢早衰。

发明内容
本发明的目的是提供一种治疗卵巢早衰的中药组合物；
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本发明的另一目的是提供一种治疗卵巢早衰的中药组合物的制备方法。本发明的目的是通过以下技术方案实现的一种治疗卵巢早衰的中药组合物，该组合物是由包含如下重量份的中药原料制成 的熟地黄2 6 山茱萸2 6 当归2 6 白芍2 6淫羊藿2 6 丹参1 3。上述中药组合物优选的原料药与重量配比为熟地黄2 山茱萸2 当归2 白芍2淫羊藿2 丹参1。上述中药组合物优选的原料药与重量配比为熟地黄3 山茱萸3 当归2 白芍2淫羊藿2 丹参1。上述中药组合物优选的原料药与重量配比为熟地黄3 山茱萸3 当归2 白芍2淫羊藿2 丹参2。以上中药组合物的制备方法为(1)取丹参，加入4 12倍量70% 90%乙醇提取1 3次，每次0. 5 2小时，
合并提取液，浓缩干燥，得干膏I ；(2)取白芍、淫羊藿加入8 20倍量水提取1 3次，每次0. 5 2. 5小时，合并 提取液，浓缩，放冷，加入乙醇使含醇量达60 % 75 %，静置，取上清液浓缩至浸膏，放冷， 加入乙醇使含醇量达75 % 90 %，静置，取上清液浓缩至浸膏，干燥，得干膏II ；(3)取当归、熟地、山茱萸加入4 12倍量水提取1 3次，每次1 3小时，合并 提取液，浓缩至浸膏，放冷，加入乙醇使含醇量达15 % 30 %，搅拌，离心，取上清液，加入 乙醇使含醇量达75% 95%，静置，取沉淀部分干燥，得干膏III ；(4)取以上I、II、III三份干膏粉碎，混勻，加入适量辅料，制成所需中药制剂。该制备方法的优选为(1)取丹参，加入8倍量90%乙醇回流提取两次，每次1小时，减压浓缩至相对密 度为1. 15 1. 20的浸膏，减压干燥，得干膏I ；(2)取白芍、淫羊藿加入16倍量与14倍量水分别煎煮提取2次，每次1. 5小时，合 并提取液，减压浓缩至相对密度为1. 10 1. 15的浸膏，放冷，加入乙醇使含醇量达70%，静 置12小时，上清液减压浓缩至相对密度为1. 10 1. 15的浸膏，放冷，加入乙醇使含醇量达 80%，静置12小时，上清液减压浓缩至相对密度为1. 20的浸膏，减压干燥，的干膏II。(3)取当归、熟地、山茱萸加入8倍量水煎煮提取2次，每次2小时，合并提取液，减 压浓缩至相对密度为1. 10 1. 15的浸膏，放冷，加入乙醇使含醇量达20%，充分搅拌，离 心，取上清液，加入乙醇使含醇量达85%，静置12小时，取沉淀部分常压干燥，得干膏III ；(4)取以上I、II、III三份干膏粉碎，混勻，加入适量辅料，制成所需中药制剂。本发明的中药组合物，还可以是由如下重量份的中药原料制成的熟地黄2 6 山茱萸2 6 当归2 6 白芍2 6淫羊藿2 6 丹参1 3 桂枝2 6。
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该中药组合物优选的原料药与重量配比为熟地黄2 山茱萸2 当归2 白芍2淫羊藿2 丹参1桂枝2。以上中药组合物的制备方法为(1)取丹参，加入4 12倍量70% 90%乙醇提取1 3次，每次0. 5 2小时，
合并提取液，浓缩干燥，得干膏I ；(2)取白芍、淫羊藿加入8 20倍量水提取1 3次，每次0. 5 2. 5小时，合并 提取液，浓缩，放冷，加入乙醇使含醇量达60 % 75 %，静置，取上清液浓缩至浸膏，放冷， 加入乙醇使含醇量达75 % 90 %，静置，取上清液浓缩至浸膏，干燥，得干膏II ；(3)取当归、熟地、山茱萸加入4 12倍量水提取1 3次，每次1 3小时，合并 提取液，浓缩至浸膏，放冷，加入乙醇使含醇量达15% 30 %，搅拌，离心，静置，取上清液， 加入乙醇使含醇量达75% 95%，静置，取沉淀部分干燥，得干膏III ；(4)取桂枝加入4 12倍量水提取1 3次，每次1 3小时，合并提取液，浓缩 至浸膏，备用；药渣加入4 12倍量70% 90%乙醇提取1 3次，每次1 3小时，合并 提取液，浓缩至浸膏，与水提取得到的浸膏合并，混勻，干燥，得干膏VI ；(5)取以上I、II、III、VI四份干膏粉碎，混勻，加入适量辅料，制成所需中药制剂。该制备方法的优选为(1)取丹参，加入8倍量90%乙醇回流提取两次，每次1小时，减压浓缩至相对密 度为1. 15 1. 20的浸膏，减压干燥，得干膏I ；(2)取白芍、淫羊藿加入16倍量与14倍量水分别煎煮提取2次，每次1. 5小时，合 并提取液，减压浓缩至相对密度为1. 10 1. 15的浸膏，放冷，加入乙醇使含醇量达70%，静 置12小时，上清液减压浓缩至相对密度为1. 10 1. 15的浸膏，放冷，加入乙醇使含醇量达 80%，静置12小时，上清液减压浓缩至相对密度为1. 20的浸膏，减压干燥，的干膏II。(3)取当归、熟地、山茱萸加入8倍量水煎煮提取2次，每次2小时，合并提取液，减 压浓缩至相对密度为1. 10 1. 15的浸膏，放冷，加入乙醇使含醇量达20%，充分搅拌，离 心，取上清液，加入乙醇使含醇量达85%，静置12小时，取沉淀部分常压干燥，得干膏III ；(4)取桂枝加入8倍量水煎煮提取2次，每次2小时，合并提取液，浓缩至浸膏，备 用；药渣加入8倍量90%乙醇回流提取2次，每次2小时，合并提取液，浓缩至浸膏，与水提 取得到的浸膏合并，混勻，干燥，得干膏VI ；(5)取以上I、II、III、VI四份干膏粉碎，混勻，加入适量辅料，制成所需中药制剂。本发明的中药组合物，还可以是由如下重量份的中药原料制成的熟地黄2 6 山茱萸2 6 当归2 6 白芍2 6淫羊藿2 6 丹参1 3桃仁2 6。该中药组合物优选的原料药与重量配比为熟地黄2 山茱萸2 当归2 白芍2淫羊藿2 丹参1桃仁2。以上中药组合物的制备方法为(1)取丹参，加入4 12倍量70% 90%乙醇提取1 3次，每次0. 5 2小时，
合并提取液，浓缩干燥，得干膏I ；
(2)取白芍、淫羊藿加入8 20倍量水提取1 3次，每次0. 5 2. 5小时，合并 提取液，浓缩，放冷，加入乙醇使含醇量达60 % 75 %，静置，取上清液浓缩至浸膏，放冷， 加入乙醇使含醇量达75 % 90 %，静置，取上清液浓缩至浸膏，干燥，得干膏II ；(3)取当归、熟地、山茱萸加入4 12倍量水提取1 3次，每次1 3小时，合并 提取液，浓缩至浸膏，放冷，加入乙醇使含醇量达15% 30 %，搅拌，离心，静置，取上清液， 加入乙醇使含醇量达75% 95%，静置，取沉淀部分干燥，得干膏III;(4)取桃仁加入4 12倍量水提取1 3次，每次1 3小时，合并提取液，浓缩 至浸膏，备用；药渣加入4 12倍量70% 90%乙醇提取1 3次，每次1 3小时，合并 提取液，浓缩至浸膏，与水提取得到的浸膏合并，混勻，干燥，得干膏VI ；(5)取以上I、II、III、VI四份干膏粉碎，混勻，加入适量辅料，制成所需中药制剂。该制备方法的优选为(1)取丹参，加入8倍量90%乙醇回流提取两次，每次1小时，减压浓缩至相对密 度为1. 15 1. 20的浸膏，减压干燥，得干膏I ；(2)取白芍、淫羊藿加入16倍量与14倍量水分别煎煮提取2次，每次1. 5小时，合 并提取液，减压浓缩至相对密度为1. 10 1. 15的浸膏，放冷，加入乙醇使含醇量达70%，静 置12小时，上清液减压浓缩至相对密度为1. 10 1. 15的浸膏，放冷，加入乙醇使含醇量达 80%，静置12小时，上清液减压浓缩至相对密度为1. 20的浸膏，减压干燥，的干膏II。(3)取当归、熟地、山茱萸加入8倍量水煎煮提取2次，每次2小时，合并提取液，减 压浓缩至相对密度为1. 10 1. 15的浸膏，放冷，加入乙醇使含醇量达20%，充分搅拌，离 心，取上清液，加入乙醇使含醇量达85%，静置12小时，取沉淀部分常压干燥，得干膏III ；(4)取桃仁加入8倍量水煎煮提取2次，每次2小时，合并提取液，浓缩至浸膏，备 用；药渣加入8倍量90%乙醇回流提取2次，每次2小时，合并提取液，浓缩至浸膏，与水提 取得到的浸膏合并，混勻，干燥，得干膏VI ；(5)取以上I、II、III、VI四份干膏粉碎，混勻，加入适量辅料，制成所需中药制剂。本发明的中药组合物，还可以是由如下重量份的中药原料制成的熟地黄2 6 山茱萸2 6 当归2 6 白芍2 6淫羊藿2 6 丹参1 3知母2 6。该中药组合物优选的原料药与重量配比为熟地黄2 山茱萸2 当归2 白芍2淫羊藿2 丹参1知母2。以上中药组合物的制备方法为(1)取丹参，加入4 12倍量70% 90%乙醇提取1 3次，每次0. 5 2小时，
合并提取液，浓缩干燥，得干膏I ；(2)取白芍、淫羊藿加入8 20倍量水提取1 3次，每次0. 5 2. 5小时，合并 提取液，浓缩，放冷，加入乙醇使含醇量达60 % 75 %，静置，取上清液浓缩至浸膏，放冷， 加入乙醇使含醇量达75 % 90 %，静置，取上清液浓缩至浸膏，干燥，得干膏II ；(3)取当归、熟地、山茱萸加入4 12倍量水提取1 3次，每次1 3小时，合并 提取液，浓缩至浸膏，放冷，加入乙醇使含醇量达15% 30 %，搅拌，离心，静置，取上清液， 加入乙醇使含醇量达75% 95%，静置，取沉淀部分干燥，得干膏III;
(4)取知母加入4 12倍量水提取1 3次，每次1 3小时，合并提取液，浓缩 至浸膏，备用；药渣加入4 12倍量70% 90%乙醇提取1 3次，每次1 3小时，合并 提取液，浓缩至浸膏，与水提取得到的浸膏合并，混勻，干燥，得干膏VI ；(5)取以上I、II、III、VI四份干膏粉碎，混勻，加入适量辅料，制成所需中药制剂。该制备方法的优选为(1)取丹参，加入8倍量90%乙醇回流提取两次，每次1小时，减压浓缩至相对密 度为1. 15 1. 20的浸膏，减压干燥，得干膏I ；(2)取白芍、淫羊藿加入16倍量与14倍量水分别煎煮提取2次，每次1. 5小时，合 并提取液，减压浓缩至相对密度为1. 10 1. 15的浸膏，放冷，加入乙醇使含醇量达70%，静 置12小时，上清液减压浓缩至相对密度为1. 10 1. 15的浸膏，放冷，加入乙醇使含醇量达 80%，静置12小时，上清液减压浓缩至相对密度为1. 20的浸膏，减压干燥，的干膏II。(3)取当归、熟地、山茱萸加入8倍量水煎煮提取2次，每次2小时，合并提取液，减 压浓缩至相对密度为1. 10 1. 15的浸膏，放冷，加入乙醇使含醇量达20%，充分搅拌，离 心，取上清液，加入乙醇使含醇量达85%，静置12小时，取沉淀部分常压干燥，得干膏III ；(4)取知母加入8倍量水煎煮提取2次，每次2小时，合并提取液，浓缩至浸膏，备 用；药渣加入8倍量90%乙醇回流提取2次，每次2小时，合并提取液，浓缩至浸膏，与水提 取得到的浸膏合并，混勻，干燥，得干膏VI ；(5)取以上I、II、III、VI四份干膏粉碎，混勻，加入适量辅料，制成所需中药制剂。本发明的中药组合物处方中熟地黄中多糖成分具有补血和抗衰老作用，山茱萸中 多糖成分有抗氧化及抗衰老作用，当归中水溶性成份具有补血和调节免疫和物质代谢的功 能。因此，熟地黄、山茱萸、当归采用加水煎煮、浓缩，浸膏经两次醇沉，取沉淀减压干燥，得 到多糖部分。白芍中总皂苷类成分具有免疫调节、护肝、改善睡眠、抗缺氧作用，淫羊藿苷对 卵泡颗粒细胞分泌E2有直接刺激作用，也促进肾上腺皮质细胞分泌皮质酮，丹参的脂溶性 类有效成分具有抗血小板聚集和抗血栓形成，改善微循环作用，抗氧化损伤和高脂损伤，多 途径发挥心肌、肝细胞保护作用和抗炎等多种作用。所以，丹参采用醇提浓缩干燥的方法制 备中间体，淫羊藿、白芍采用水煎煮醇沉，浸膏减压干燥。本发明还提供了采用药剂学中常规的制药方法和上述的制备方法将本发明的中 药组合物制备成片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂、软胶囊、口服液等制剂的技术方案。本发明的中药组合物可以用来治疗卵巢早衰，发明人对本发明提供的技术方案进 行了药效学实验研究，用以证明本发明中药组合物的治疗作用。下述实验用于进一步说明 本发明的效果，但不限制本发明。本发明组合物对卵巢早衰的实验研究1试验材料1. 1 药物本发明组合物实施例1组合物药物中间体(以下简称“实施例1药物”)17-雌二醇Sigma，批号 016kll94 ；1. 2 动物Balb/c小鼠雌性，8 9周龄，18 22g，来源上海西普尔-必凯实验动物公司， 合格证号SCXK (沪)2003-0002
1. 3 试剂猪卵透明带蛋白(pZP4)，复旦大学附属妇产科研究所免疫室自制，制备参见实验 方法磷酸盐缓冲液(PBS,pH7. 4) :Na2HP04 1. 44g, KH2P04 0 . 24g, NaCl 8. Og, KC1 0. 2g, 加蒸馏水定容至1000ml，高压灭菌后于室温保存异丙基硫代-D-半乳糖苷(IPTG)上海申能博彩生物科技公司Ni-NTA Agarose :Qiagen，批号 12190983离心超滤管(5KD):Milipore, Amicon Ultra-15BCA-100蛋白定量试剂盒上海申能博彩生物科技有限公司完全弗氏佐剂(CFA):Sigma，批号 054k8931不完全弗氏佐剂(IFA) :Sigma，批号025k8910胎牛血清(FBS):GIBC0，批号 4987161640 培养液GIBC0，批号 31800刀豆蛋白(ConA):Sigma，批号 C 2010羧甲基纤维素钠(CMC-Na)国药集团上海化学试剂公司，批号F2000027小鼠脾脏淋巴细胞分离液(EZ-S^jp Mouse)达科为生物技术公司，批号 33R020703羊抗鼠雌二醇(E2)测定试剂盒(ELISA):Adlitteram diagnosticlaboratories, Inc.批号 0708辣根过氧化物酶标记的羊抗小鼠IgG抗体，上海华美生物工程公司，批号576807包被缓冲液(0. 05M碳酸盐缓冲，pH9. 6) :Na2C03 1. 59g，NaHC032. 93g，加蒸馏水定 容至 1000ml ；洗涤缓冲液(PBST，pH7.4) :PBS+0. 05% Tween-20封闭液及抗体稀释液PBST+5% FCS底物缓冲液(pH5.0) 0. 2M Na2HP04 (28 . 4g/L) 25. 7ml, 0. 1M 柠檬酸(19. 2g/ L)24. 3ml，加蒸馏水 50mlTMB(四甲基联苯胺)使用液TMB(10mg/5ml无水乙醇)0. 5ml，底物缓冲液 (PH5. 5) 10ml,0. 75% H20232 u 1 ；终止液(2M H2S04)蒸馏水178. 3ml，逐滴加入浓硫酸(98% )21. 7ml ；1.4 仪器洁净操作台(细菌)上海净化设备厂垂直面对面超净台(细胞)上海上净净化设备公司振荡培养箱国华电器有限公司，BS-2F低温离心机:Beckman, GS—15R小型台式离心机:Eppendorf,5424型电泳图像分析系统仪Alpha Innotech. Corporation酶标仪Bio_Rad，Model 3550C02 培养箱Heal Force，HF90荧光正置显微镜0LYMPUS，BX51
电热恒温水浴槽上海精宏实验设备公司，DKB-8A液闪发光测定仪美国PerkinElmer(PE)公司，MicroBeta 1450微量振荡器江苏海门其林医用仪器厂，MH-1型电子天平:METTER AE260 Delta RangepH 仪Fisher Scientific，Model 102实验方法2. 1重组猪卵透明带蛋白(pZP4)的表达与纯化将pET28a(+)-pZP4重组质粒转化到BL21(DE3)大肠杆菌中。含重组质粒的大肠 杆菌于37°C振荡培养至0D600达到0. 6，加入终浓度为0. 5mmol/L的IPTG，37°C诱导表达 5h，离心收集菌液沉淀。因为重组蛋白在大肠杆菌中以包涵体形式存在，故在变性条件下使 用Ni-NTA Agarose纯化蛋白。将蛋白纯化洗脱液装入离心超滤管中，PBS(pH7. 4)4°C脱盐 浓缩，收集到的蛋白溶液经0. 22 P m滤器过滤后，分装保存于一 20°C备用。使用BCA蛋白定 量试剂盒对蛋白溶液定量。2. 2卵巢早衰小鼠模型制备、分组给药2. 2.1模型制备每天上午9:00取雌性Balb/c小鼠阴道脱落细胞制备涂片，于光学显微镜下观察 其性周期。2周后筛选出性周期正常小鼠90只，随机选取10只小鼠作为正常对照组，其余 小鼠以6His-pZP4重组蛋白作为抗原进行免疫制备卵巢早衰小鼠模型。方法如下将50iU 含有5 y g抗原的PBS溶液与50 u 1 CFA充分乳化，于小鼠两后脚掌和皮下进行多点注射。 之后每隔2周以等量抗原与IFA乳化液加强免疫1次，共加强免疫2次。正常对照组小鼠 同时以100 ill缓冲液PBS进行免疫。2. 2. 2分组给药第3次免疫后第7天于小鼠眼球后静脉丛取血，离心取血清测定E2。根据E2含量 筛选出造模成功小鼠50只，随机分为5组，每组10只，分别为本发明实施例1药物的高、 中、低三个剂量组(15. 0,7. 5,3. 75g/kg)、雌激素组(0. 13mg/kg)及模型对照组(与正常对 照组给予等量的0. 5% CMC-Na)。实施例1药物的人临床用量为60g生药/d，换算成小鼠 临床等效剂量60 X 0. 0026 X 50 = 7. 8g生药/kg，此剂量即为中剂量，2倍临床等效剂量为 高剂量，0.5倍临床等效剂量为低剂量。卵巢早衰及卵巢储备功能下降，目前一般用雌激素 补充疗法，人临床用量为lmg/d，换算成小鼠临床等效剂量为1X0. 0026X50 = 0. 13mg/kg。 各组小鼠每天灌胃一次(雌激素组灌胃3天，间隔1天)，给药容积为0. 2ml/10g，共给药20 天。于末次给药后一小时从小鼠眼球后静脉丛取血，分离出血清，-20°C储存备用。并行颈 椎脱白处死小鼠，无菌条件下摘取脾脏及卵巢。2. 3检测指标2. 3. 1阴道脱落细胞涂片观察每天用无菌棉签蘸适量生理盐水取雌性Balb/c小鼠阴道脱落细胞制备涂片，于 光学显微镜下观察其性周期随时间的变化。2. 3.2血清E2的测定ELISA方法测定。2. 3. 3重组抗原体外诱导脾淋巴细胞增殖反应
无菌条件下取小鼠脾脏研磨，于200目尼龙网过滤收集细胞，以小鼠脾脏淋巴 细胞分离液分离淋巴细胞。台盼蓝染色检测细胞活率> 95%，以含20%胎牛血清的 RPMI-1640培养液制备细胞悬液，调整细胞浓度为2X106cells/ml。取细胞悬液100 yl 加入96孔圆底细胞培养板内(3复孔)，随后加入100 ill RPMI-1640培养液稀释的重组 6His-pZP4抗原(10u g/ml,20u g/ml)或ConA(20 y g/ml，阳性对照)及 RPMI-1640 (空白对 照)，置于37°C ,5% C02培养箱中培养72h。培养结束前18h，每孔加20 u l3H_TdR(30 u Ci/ ml)。将每孔细胞用多头细胞收集仪收集至净化滤纸上，红外线干燥后，放入闪烁液中，于3 射线计数仪测量cpm值。计算细胞增殖活性，以刺激指数(stimulateindex，SI)表示SI =(抗原刺激后cpm值-抗原未刺激cpm值)/抗原未刺激cpm值。2. 3. 4ELISA方法测定血清抗pZP4抗体滴度96孔酶标板每孔加入100 ill含有0. 5 ii g重组6His-pZP4蛋白的包被缓冲液，4°C 过夜。PBST洗板3次，含5%小牛血清的PBST溶液37°C封闭lh。再洗板3次，将血清按一 定比例进行3倍倍比稀释后于37°C孵育lh，PBS作为阴性对照。再洗板6次，用辣根过氧 化物酶标记的羊抗小鼠IgG抗体(1 1000稀释)37°C孵育lh。再洗板6次，于各反应孔 中加入临时配制的TMB底物溶液100111，371孵育151^11，最后用211 H2S04 50 yl终止显色 反应。以630nm为参照波长，测定0D450。抗血清最高稀释度呈阳性者(0D450彡0. 2)，其 稀释度的倒数即为抗血清效价。2. 3. 5自身免疫性卵巢组织炎形态学观察收集的卵巢经10%中性福尔马林固定，由实验设计非知情人员进行石蜡包埋、切 片，常规HE染色，在光学显微镜下计数黄体及各个时期滤泡数量。2. 4统计学分析应用统计软件SPSS 11. 5. 0的多因素方差分析模块进行数据分析，P < 0. 05表示 差异有统计学意义。3实验结果3. 1阴道脱落细胞涂片改变卵巢的主要功能表现为周期性排卵及分泌相应性激素水平的周期性变化，同时， 伴有阴道上皮细胞学的周期性变化。由于雌二醇分泌减少，造成动情周期延长，动情期缩 短、动情间期延长，所以动情周期的紊乱可以作为反映性激素分泌与代谢失衡的敏感指标。 小鼠动情周期一般为4 5天，包括动情前期、动情期、动情后期和动情间期。第2次免疫 后2周，正常对照组动情周期无明显变化，而抗原免疫组大多数小鼠周期变的不规则，主要 表现为动情期延长至2 4天或动情间期延长至3 5天。第3次免疫后1周，依据血清 E2含量筛选出造模成功小鼠50只，随机分为实施例1药物的高、中、低三个剂量组，雌激素 组和模型对照组5组，每组10只。在随后的3周内，正常对照组动情周期未见明显变化；模 型对照组大部分小鼠周期延长至7 9天，或持续处于动情间期；雌激素组周期紊乱，以动 情期延长为主，或持续处于动情期；实施例1药物的低剂量组小鼠周期变化与模型对照组 小鼠相似；实施例1药物的中剂量组小鼠周期不规则，表现为动情期或间期延长；实施例1 药物的高剂量组小鼠周期大多数为6 7天，动情期2 3天，间期3 4天。3. 2各组小鼠的血清E2含量比较与模型组相比，雌激素组小鼠和实施例1药物的高剂量组小鼠的血清氏浓度明显升高，其差别具有显著性意义(P < 0. 01)，见表1。
表1各组小鼠的血清E2浓度 注与正常组比较，AP<0.01 ；与模型组比较广P<0.013. 3重组抗原体外诱导脾淋巴细胞增殖能力的测定不同浓度的重组6His_pZP4蛋白在体外均可诱导免疫后小鼠脾淋巴细胞发生增 殖，且增殖能力有正相关趋势。与模型组比较，重组抗原诱导实施例1的本发明组合物中、 高剂量组小鼠脾淋巴细胞的增殖能力显著降低(P < 0. 05)，诱导雌激素组小鼠脾淋巴细胞 的增殖能力没有明显变化(P > 0. 05)，见表2。表2重组抗原对各组小鼠脾淋巴细胞增殖反应的作用(SI，I 士SD) 注与模型组比较，*P < 0. 05 ；正常组中抗原未刺激的cpm值高于抗原刺激后的 cpm值3. 4各组小鼠血清抗pZP4抗体效价比较雌激素组小鼠和实施例1药物各组小鼠的血清抗PZP4抗体滴度较模型组小鼠都 有下降，但只有实施例1药物高剂量组的差异具有统计学意义(P < 0. 05)，见表3。表3药物对小鼠抗pZP4抗体滴度的影响 注与模型组相比，乍< 0.05;正常组的抗体滴度低于1 100
3. 5自身免疫性卵巢组织损伤的形态学分析实验结果见表4。表4小鼠卵巢病理变化平均积分值(X±SD)
正常组 模型组 雌激素组 实施例1药物高
剂量组 实施例1药物中
剂量组 实施例1药物低 剂量组注与模型组比较，*P< 0. 05，**P < 0.01光镜下见模型组小鼠的卵巢组织表现为各期卵泡数量较正常组明显减少，包括原 始卵泡、初级卵泡、次级卵泡；黄体数量减少，多数呈萎缩状态，体积较小，中央部有较为明 显的退行性变；卵巢间质致密，有多量闭锁卵泡和间质腺(发育退变的卵泡)，未见明显的 炎症细胞浸润。雌激素组和实施例1药物低、中、高剂量组各组小鼠卵巢组织各期卵泡数 及黄体数较正常组少，但较模型组增多，部分黄体细胞发育良好，部分有萎缩现象。其中 实施例1药物高剂量组小鼠初级卵泡和次级卵泡的数量与模型组比较具有统计学差异(P < 0. 05)。4.结论上述各项检测指标结果表明，本研究成功地建立了自身免疫性卵巢损伤的小鼠动 物模型；实施例1药物灌服模型组小鼠后，能改善卵巢的生殖内分泌功能和卵巢内各期卵 泡和黄体的发育状况，并可在一定程度上抑制自身免疫损伤作用。三种不同剂量比较，以实 施例1药物高剂量组的效果最佳，由此可以证明，本发明实施例1药物具有治疗卵巢早衰的 作用。采用与上述实验相同的方法对本发明实施例11组合物药物中间体(以下简称“实 施例11药物”)、实施例14组合物药物中间体(以下简称“实施例14药物”)的进行实验 研究。实验结果见表5、6、7、8、9、10、11、12 各组小鼠的血清E2含量比较，结果见表5，表6。表5各组小鼠的血清E2浓度
14 注与正常组比较，AP<0.01 ；与模型组比较广P < 0. 01表6各组小鼠的血清氏浓度 注与正常组比较，△P<0.01；与模型组比较**P<0.01重组抗原体外诱导脾淋巴细胞增殖能力的测定，结果见表7，表8 。 表7重组抗原对各组小鼠脾淋巴细胞增殖反应的作用(SI，I 士SD) 注与模型组相比较，*P<0.05；正常组中抗原未刺激的CPM值高于抗原刺激后的cpm值表8重组抗原对各组小鼠脾淋巴细胞增殖反应的作用(SI，Ｘ±ＳＤ) 注与模型组比较，*P < 0. 05 ；正常组中抗原未刺激的cpm值高于抗原刺激后的cpm值
各组小鼠血清抗PZP4抗体效价比较，结果见表9、表10。 表9药物对小鼠抗pZP4抗体滴度的影响 注与模型组相比，乍< 0.05;正常组的抗体滴度低于1 100
表10药物对小鼠抗pZP4抗体滴度的影响
注与模型组相比，乍< 0.05;正常组的抗体滴度低于1 100 自身免疫性卵巢组织损伤的形态学分析，结果见表11，表12。 表11小鼠卵巢病理变化平均积分值彳X±SD) 注与模型组比较，*P< 0. 05，**P < 0.01表12小鼠卵巢病理变化平均积分值(X±SD)
注与模型组比较，*P< 0. 05, **P < 0.01结论上述各项检测指标结果表明，实施例11药物与实施例14药物灌服模型组小 鼠后，能改善卵巢的生殖内分泌功能和卵巢内各期卵泡和黄体的发育状况，并可在一定程 度上抑制自身免疫损伤作用。三种不同剂量比较，以实施例11药物与实施例14药物的高 剂量组的效果最佳。综上实验可以证明，本发明的中药组合物可以有效治疗卵巢早衰。有益效果1、本发明组合物的处方由熟地黄、山茱萸、当归、白芍、淫羊藿、丹参等中药组成。 方中熟地黄、山茱萸滋阴补肝肾，当归、白芍、丹参补血、活血通经；淫羊藿补肾阳；丹参还 可清心除烦。本发明的中药组合物组方合理，配伍得当，通过实验研究表明，本发明组合物 对于治疗肝肾阴虚型卵巢早衰，效果显著。2、本发明的中药组合物处方中熟地黄中多糖成分具有补血和抗衰老作用，山茱萸 中多糖成分有抗氧化及抗衰老作用，当归中水溶性成份具有补血和调节免疫和物质代谢的 功能。因此，熟地黄、山茱萸、当归采用加水煎煮、浓缩，浸膏经两次醇沉，取沉淀减压干燥， 得到多糖部分。白芍中总皂苷类成分具有免疫调节、护肝、改善睡眠、抗缺氧作用，淫羊藿苷 对卵泡颗粒细胞分泌E2有直接刺激作用，也促进肾上腺皮质细胞分泌皮质酮，丹参的脂溶 性类有效成分具有抗血小板聚集和抗血栓形成，改善微循环作用，抗氧化损伤和高脂损伤， 多途径发挥心肌、肝细胞保护作用和抗炎等多种作用。所以，丹参采用醇提浓缩干燥的方法 制备中间体，淫羊藿、白芍采用水煎煮醇沉，浸膏减压干燥。将以上膏粉碎，混勻，即得本发 明组合物。本发明提供的制备方法简便，易操作，而且可以有效地提取得到组合物的有效成 分。3、本发明提供了多种药物剂型的制备方法，将本发明组合物制备成一定的药物剂 型能够更加地方便服用，提高治疗效果。
具体实施例方式实施例1:胶囊剂处方熟地黄180g 山茱萸180g 当归180g白芍180g 淫羊藿180g 丹参90g
制备方法(1)取丹参，加入8倍量90%乙醇提取2次，每次1小时，合并提取液， 减压回收乙醇并浓缩至60°C相对密度为1. 15 1. 20的浸膏，减压干燥，得干膏I ；(2)取白芍、淫羊藿加入16倍量与14倍量水分别提取2次，每次1. 5小时，合并提 取液，减压浓缩至60°C相对密度为1. 10 1. 15的浸膏，放冷，加入乙醇使含醇量达70%， 静置12小时，上清液减压浓缩至60°C相对密度为1. 10 1. 15的浸膏，放冷，加入乙醇使含 醇量达80%，静置12小时，上清液减压浓缩至60°C相对密度为1. 20的浸膏，减压干燥，的 干膏II。(3)取当归、熟地、山茱萸加入8倍量水提取2次，每次2小时，合并提取液，减压浓 缩至60°C相对密度为1. 10 1. 15的浸膏，放冷，加入乙醇使含醇量达20%，充分搅拌，离 心，取上清液，加入乙醇使含醇量达85%，静置12小时，取沉淀部分常压干燥，得干膏III ；(4)取以上I、II、III三份干膏粉碎，混勻，即为本发明中药组合物药物中间体，加 入适量二氧化硅，干燥，粉碎，过筛，装入胶囊，制1000粒。功能主治用于卵巢早衰。用法用量口服。一次3 5粒，一日3次。实施例2 胶囊剂熟地黄240g 山茱萸240g 当归160g白芍160g 淫羊藿160g丹参80g制备方法⑴取丹参，加入4倍量70 %乙醇提取3次，每次0. 5小时，合并提取
液，浓缩干燥，得干膏I ；(2)取白芍、淫羊藿加入8倍量水煎煮提取3次，每次0.5小时，合并提取液，浓缩， 放冷，加入乙醇使含醇量达60 %，静置，取上清液浓缩至浸膏，放冷，加入乙醇使含醇量达 75%，静置，取上清液浓缩至浸膏，干燥，得干膏II ；(3)取当归、熟地、山茱萸加入4倍量水煎煮提取3次，每次1小时，合并提取液， 浓缩至浸膏，放冷，加入乙醇使含醇量达15 %，搅拌，离心，取上清液，加入乙醇使含醇量达 75%，静置，取沉淀部分干燥，得干膏III ；(4)取以上I、II、III三份干膏粉碎，混勻，即为本发明中药组合物药物中间体，加 入适量辅料(如二氧化硅、糊精、淀粉、磷酸盐、碳酸盐、甘露醇、山梨醇、山梨酸或钾盐、木 糖醇、麦芽糖、葡萄糖、果糖、右旋糖苷、甘氨酸、淀粉、蔗糖、乳糖、甘露糖醇等稀释辅料中的 一种或多种)，干燥，粉碎，过筛，装入胶囊，制1000粒，即得。功能主治用于卵巢早衰。用法用量口服。一次3 5粒，一日3次。实施例3 胶囊剂熟地黄210g山茱萸210g当归140g白芍140g 淫羊藿140g丹参140g。制备方法⑴取丹参，加入5倍量75%乙醇回流提取3次，每次0. 5小时，合并提
取液，浓缩干燥，得干膏I ；(2)取白芍、淫羊藿加入9倍量水提取3次，每次0. 5小时，合并提取液，浓缩， 放冷，加入乙醇使含醇量达60 %，静置，取上清液浓缩至浸膏，放冷，加入乙醇使含醇量达 75%，静置，取上清液浓缩至浸膏，干燥，得干膏II ；
(3)取当归、熟地、山茱萸加入12倍量水提取1次，每次3小时，合并提取液，浓 缩至浸膏，放冷，加入乙醇使含醇量达15 %，搅拌，离心，取上清液，加入乙醇使含醇量达 75%，静置，取沉淀部分干燥，得干膏III ；(4)取以上I、II、III三份干膏粉碎，混勻，即为本发明中药组合物药物中间体，加 入适量辅料(如二氧化硅、糊精、淀粉、磷酸盐、碳酸盐、甘露醇、山梨醇、山梨酸或钾盐、木 糖醇、麦芽糖、葡萄糖、果糖、右旋糖苷、甘氨酸、淀粉、蔗糖、乳糖、甘露糖醇等稀释辅料中的 一种或多种)，干燥，粉碎，过筛，装入胶囊，制1000粒，即得。实施例4 颗粒剂熟地黄240g 山茱萸240g 当归240g白芍160g 淫羊藿80g 丹参160g。制备方法⑴取丹参，加入6倍量75 %乙醇提取3次，每次0. 5小时，合并提取
液，浓缩干燥，得干膏I ；(2)取白芍、淫羊藿加入10倍量水提取3次，每次0. 5小时，合并提取液，浓缩， 放冷，加入乙醇使含醇量达60 %，静置，取上清液浓缩至浸膏，放冷，加入乙醇使含醇量达 75%，静置，取上清液浓缩至浸膏，干燥，得干膏II ；(3)取当归、熟地、山茱萸加入11倍量水提取1次，每次3小时，合并提取液，浓 缩至浸膏，放冷，加入乙醇使含醇量达15 %，搅拌，离心，取上清液，加入乙醇使含醇量达 75%，静置，取沉淀部分干燥，得干膏III ；(4)取以上I、II、III三份干膏粉碎，混勻，即为本发明中药组合物药物中间体，加 入适量辅料(如二氧化硅、糊精、淀粉、磷酸盐、碳酸盐、甘露醇、山梨醇、山梨酸或钾盐、木 糖醇、麦芽糖、葡萄糖、果糖、右旋糖苷、甘氨酸、淀粉、蔗糖、乳糖、甘露糖醇等稀释辅料中 的一种或多种)，干燥，粉碎，加入合适的粘合剂(固体粘合剂如PEG200、PEG300、PEG400、 PEG600、PEG800、PEG1000、PEG1500、微晶纤维素等或液体粘合剂如乙醇、明胶浆、淀粉浆、糖 浆等一种或多种)，制粒，整粒制成颗粒剂lOOOg，即得。功能主治用于卵巢早衰。用法用量口服。一次3 5克，一日3次。实施例5 片剂熟地黄180g 山茱萸180g 当归180g白芍120g 淫羊藿180g丹参120g。制备方法(1)取丹参，加入7倍量80%乙醇提取2次，每次1小时，合并提取液， 浓缩干燥，得干膏I ；(2)取白芍、淫羊藿加入11倍量水提取2次，每次1小时，合并提取液，浓缩，放冷， 加入乙醇使含醇量达65 %，静置，取上清液浓缩至浸膏，放冷，加入乙醇使含醇量达80 %， 静置，取上清液浓缩至浸膏，干燥，得干膏II ；(3)取当归、熟地、山茱萸加入10倍量水提取2次，每次2小时，合并提取液，浓
缩至浸膏，放冷，加入乙醇使含醇量达20 %，搅拌，离心，取上清液，加入乙醇使含醇量达 80%，静置，取沉淀部分干燥，得干膏III ；(4)取以上I、II、III三份干膏粉碎，混勻，即为本发明中药组合物药物中间体，入 适量辅料(如二氧化硅、糊精、淀粉、磷酸盐、碳酸盐、甘露醇、山梨醇、山梨酸或钾盐、木糖醇、麦芽糖、葡萄糖、果糖、右旋糖苷、甘氨酸、淀粉、蔗糖、乳糖、甘露糖醇及其他药剂学常用 的稀释辅料等一种或多种)，混合，干燥，粉碎，加入适量的粘合剂(固体粘合剂如PEG200、 PEG300、PEG400、PEG600、PEG800、PEG1000、PEG1500、高分子材料聚乙烯吡咯烷酮、羧甲基纤 维素钠、甲基纤维素、低取代羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、海藻酸钠等或液体粘合剂 如乙醇、明胶浆、淀粉浆等一种或多种)，制颗粒，加入润滑剂(如硬脂酸镁、滑石粉、硬脂富 马酸钠等一种或多种)，整粒，总混，压制成1000片，即得。功能主治用于卵巢早衰。用法用量口服。一次3 5片，一日3次。实施例6:软胶囊熟地黄300g 山茱萸150g 当归300g白芍100g 淫羊藿100g丹参100g。制备方法(1)取丹参，加入8倍量80%乙醇回流提取2次，每次1小时，合并提取 液，浓缩干燥，得干膏I ；(2)取白芍、淫羊藿加入12倍量水煎煮提取2次，每次1小时，合并提取液，浓缩， 放冷，加入乙醇使含醇量达65 %，静置，取上清液浓缩至浸膏，放冷，加入乙醇使含醇量达 80%，静置，取上清液浓缩至浸膏，干燥，得干膏II ；(3)取当归、熟地、山茱萸加入9倍量水煎煮提取2次，每次2小时，合并提取液， 浓缩至浸膏，放冷，加入乙醇使含醇量达20 %，搅拌，离心，取上清液，加入乙醇使含醇量达 80%，静置，取沉淀部分干燥，得干膏III ；(4)取以上I、II、III三份干膏粉碎，混勻，即为本发明中药组合物药物中间体，加 入适量辅料(如二氧化硅、糊精、淀粉、磷酸盐、碳酸盐、甘露醇、山梨醇、山梨酸或钾盐、木 糖醇、麦芽糖、葡萄糖、果糖、右旋糖苷、甘氨酸、淀粉、蔗糖、乳糖、甘露糖醇等稀释辅料中的 一种或多种)，干燥，粉碎，与合适的辅料(如PEG200、PEG300、PEG400、PEG600、PEG800、 PEG1000、PEG1500及植物油系列等，防腐剂如山梨酸或钾盐、苯甲酸和丙酸等；增溶剂如吐 温系列等一种或多种，抗氧化剂如亚硫酸氢钠、硫代硫酸钠等一种或多种)，以任何方式混 勻后，装入胶囊中，制成1000粒软胶囊，即得。功能主治用于卵巢早衰。用法用量口服。一次3 5粒，一日3次。实施例7: 口服液熟地黄150g 山茱萸150g 当归300g白芍250g 淫羊藿100g丹参150g。制备方法(1)取丹参，加入9倍量85%乙醇提取2次，每次1小时，合并提取液， 浓缩干燥，得干膏I ；(2)取白芍、淫羊藿加入13倍量水提取2次，每次1. 5小时，合并提取液，浓缩， 放冷，加入乙醇使含醇量达70 %，静置，取上清液浓缩至浸膏，放冷，加入乙醇使含醇量达 85%，静置，取上清液浓缩至浸膏，干燥，得干膏II ；(3)取当归、熟地、山茱萸加入8倍量水提取2次，每次1. 5小时，合并提取液，浓 缩至浸膏，放冷，加入乙醇使含醇量达25 %，搅拌，离心，取上清液，加入乙醇使含醇量达 85%，静置，取沉淀部分干燥，得干膏III ；
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(4)取以上I、II、III三份干膏粉碎，混勻，即为本发明中药组合物药物中间体，加 入到沸水里，热处理适当时间，冷藏，滤过，加入辅料娇味剂的如蔗糖、蜂蜜、木糖醇、甜菊 糖、麦芽糖醇等一种或多种；防腐剂如山梨酸或钾盐、苯甲酸和丙酸等一种或多种；增溶剂 如吐温系列等，抗氧化剂如亚硫酸氢钠、硫代硫酸钠等等一种或多种)，滤过，灌封，制成 lOOOmL，灭菌，即得。功能主治用于卵巢早衰。用法用量口服。一次3 5毫升，一日3次。实施例8 浓缩丸熟地黄200g 山茱萸150g 当归200g白芍200g 淫羊藿200g丹参50g。制备方法⑴取丹参，加入10倍量85%乙醇提取1次，每次1. 5小时，合并提取
液，浓缩，得浸膏I ；(2)取白芍、淫羊藿加入14倍量水煎煮提取1次，每次1. 5小时，合并提取液，浓 缩，放冷，加入乙醇使含醇量达70 %，静置，取上清液浓缩至浸膏，放冷，加入乙醇使含醇量 达85%，静置，取上清液浓缩，得浸膏II ；(3)取当归、熟地、山茱萸加入7倍量水煎煮提取3次，每次1小时，合并提取液， 浓缩至浸膏，放冷，加入乙醇使含醇量达25 %，搅拌，离心，取上清液，加入乙醇使含醇量达 90%，静置，取沉淀部分，得浸膏III ；(4)取以上I、II、III三份浸膏，混勻，即为本发明中药组合物药物中间体，泛制成 丸，低温干燥，制成浓缩丸5000粒，即得。功能主治用于卵巢早衰。用法用量口服。一次10 15粒，一日3次。实施例9:咀嚼片熟地黄275g 山茱萸165g 当归110g白芍110g 淫羊藿220g丹参110g。制备方法⑴取丹参，加入11倍量90%乙醇回流提取1次，每次1. 5小时，合并
提取液，浓缩干燥，得干膏I ；(2)取白芍、淫羊藿加入15倍量水提取1次，每次2小时，合并提取液，浓缩，放冷， 加入乙醇使含醇量达75 %，静置，取上清液浓缩至浸膏，放冷，加入乙醇使含醇量达90 %， 静置，取上清液浓缩至浸膏，干燥，得干膏II ；(3)取当归、熟地、山茱萸加入6倍量水提取3次，每次1小时，合并提取液，浓缩至 浸膏，放冷，加入乙醇使含醇量达30 %，搅拌，离心，取上清液，加入乙醇使含醇量达95 %， 静置，取沉淀部分干燥，得干膏III ；(4)取以上I、II、III三份干膏粉碎，混勻，即为本发明中药组合物药物中间体， 加入适量辅料(如二氧化硅、糊精、淀粉、磷酸盐、碳酸盐、甘露醇、山梨醇、山梨酸或钾盐、 木糖醇、麦芽糖、葡萄糖、果糖、右旋糖苷、甘氨酸、淀粉、蔗糖、乳糖或甘露糖醇等稀释辅料 中的一种或多种)混合，干燥，粉碎，得到细粉与适量的粘合剂(固体粘合剂如PEG200、 PEG300、PEG400、PEG600、PEG800、PEG1000、PEG1500、高分子材料聚乙烯吡咯烷酮、羧甲基纤 维素钠、甲基纤维素、低取代羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、海藻酸钠等等或液体粘合剂如乙醇、淀粉浆、糊精浆等一种或多种)混合制颗粒，加入适量矫味剂(如甘露醇、蔗糖、 木糖醇、甜菊糖、麦芽糖醇、薄荷脑、四丁醇、橙皮油、桂皮油、各种香精等一种或多种)、润滑 剂(如硬脂酸镁、滑石粉、硬脂富马酸钠、月桂醇硫酸镁等一种或多种)、崩解剂(如羧甲基 淀粉钠、交联羧甲基纤维素钠、交联聚乙烯吡咯烷酮、低取代羟丙基纤维素、预胶化淀粉、微 晶纤维素、大豆多糖、海藻酸、处理琼脂等一种或多种)整粒，总混，压制成1000片，即得。功能主治用于卵巢早衰。用法用量口服。一次3 5片，一日3次。实施例10 滴丸熟地黄200g 山茱萸120g 当归200g白芍200g 淫羊藿160g丹参120g。制备方法⑴取丹参，加入12倍量90%乙醇提取1次，每次2小时，合并提取液，
浓缩干燥，得干膏I ；(2)取白芍、淫羊藿加入16倍量水煎煮提取1次，每次2. 5小时，合并提取液，浓 缩，放冷，加入乙醇使含醇量达75 %，静置，取上清液浓缩至浸膏，放冷，加入乙醇使含醇量 达90%，静置，取上清液浓缩至浸膏，干燥，得干膏II ；(3)取当归、熟地、山茱萸加入5倍量水煎煮提取3次，每次1小时，合并提取液， 浓缩至浸膏，放冷，加入乙醇使含醇量达30 %，搅拌，离心，取上清液，加入乙醇使含醇量达 95%，静置，取沉淀部分干燥，得干膏III ；(4)取以上I、II、III三份干膏粉碎，混勻，即为本发明中药组合物药物中间体，将 聚乙二醇-4000与浸膏粉以1 6 1 5的比例熔融混合，甲基硅油作冷却剂，滴制成滴 丸1000粒，即得。功能主治用于卵巢早衰。用法用量口服。一次3 5粒，一日3次。实施例11 胶囊剂处方熟地黄180g 山茱萸180g 当归180g 白芍180g淫羊藿180g丹参90g 桂枝180g制备方法(1)取丹参，加入8倍量90%乙醇提取2次，每次1小时，合并提取液， 减压回收乙醇并浓缩至60°C相对密度为1. 15 1. 20的浸膏，减压干燥，得干膏I ；(2)取白芍、淫羊藿加入16倍量与14倍量水分别提取2次，每次1.5小时，合并提 取液，减压浓缩至60°C相对密度为1. 10 1. 15的浸膏，放冷，加入乙醇使含醇量达70%， 静置12小时，上清液减压浓缩至60°C相对密度为1. 10 1. 15的浸膏，放冷，加入乙醇使含 醇量达80%，静置12小时，上清液减压浓缩至60°C相对密度为1. 20的浸膏，减压干燥，的 干膏II。(3)取当归、熟地、山茱萸加入8倍量水提取2次，每次2小时，合并提取液，减压浓 缩至60°C相对密度为1. 10 1. 15的浸膏，放冷，加入乙醇使含醇量达20%，充分搅拌，离 心，取上清液，加入乙醇使含醇量达85%，静置12小时，取沉淀部分常压干燥，得干膏III ；(4)取桂枝加入8倍量水提取2次，每次2小时，合并提取液，浓缩至浸膏，备用； 药渣加入8倍量75%乙醇提取2次，每次2小时，合并提取液，浓缩至浸膏，与水提取得到的浸膏合并，混勻，干燥，得干膏VI ；(5)取以上I、II、III、VI四份干膏粉碎，混勻，即为本发明中药组合物药物中间体， 加入适量二氧化硅，干燥，粉碎，过筛，装入胶囊，制1000粒。功能主治用于卵巢早衰。用法用量口服。一次3 5粒，一日3次。实施例12:颗粒剂熟地黄240g 山茱萸240g 当归240g 白芍160g淫羊藿80g 丹参160g 桂枝100g制备方法⑴取丹参，加入6倍量75%乙醇回流提取3次，每次0. 5小时，合并提
取液，浓缩干燥，得干膏I ；(2)取白芍、淫羊藿加入10倍量水煎煮提取3次，每次0. 5小时，合并提取液，浓 缩，放冷，加入乙醇使含醇量达60 %，静置，取上清液浓缩至浸膏，放冷，加入乙醇使含醇量 达75%，静置，取上清液浓缩至浸膏，干燥，得干膏II ；(3)取当归、熟地、山茱萸加入11倍量水煎煮提取1次，每次3小时，合并提取液， 浓缩至浸膏，放冷，加入乙醇使含醇量达15 %，搅拌，离心，取上清液，加入乙醇使含醇量达 75%，静置，取沉淀部分干燥，得干膏III ；(4)取桂枝加入6倍量水煎煮提取2次，每次3小时，合并提取液，浓缩至浸膏，备 用；药渣加入6倍量80%乙醇回流提取3次，每次1小时，合并提取液，浓缩至浸膏，与水煎 煮提取得到的浸膏合并，混勻，干燥，得干膏VI ；(5)取以上I、II、III、VI四份干膏粉碎，混勻，即为本发明中药组合物药物中间体， 加入适量辅料(如二氧化硅、糊精、淀粉、磷酸盐、碳酸盐、甘露醇、山梨醇、山梨酸或钾盐、 木糖醇、麦芽糖、葡萄糖、果糖、右旋糖苷、甘氨酸、淀粉、蔗糖、乳糖、甘露糖醇等稀释辅料中 的一种或多种)，干燥，粉碎，加入合适的粘合剂(固体粘合剂如PEG200、PEG300、PEG400、 PEG600、PEG800、PEG1000、PEG1500、微晶纤维素等或液体粘合剂如乙醇、明胶浆、淀粉浆、糖 浆等一种或多种)，制粒，整粒制成颗粒剂lOOOg，即得。功能主治用于卵巢早衰。用法用量口服。一次3 5克，一日3次。实施例13 片剂熟地黄240g 山茱萸240g 当归240g 白芍160g淫羊藿80g 丹参160g 桂枝180g制备方法(1)取丹参，加入7倍量80%乙醇提取2次，每次1小时，合并提取液， 浓缩干燥，得干膏I ；(2)取白芍、淫羊藿加入11倍量水提取2次，每次1小时，合并提取液，浓缩，放冷， 加入乙醇使含醇量达65 %，静置，取上清液浓缩至浸膏，放冷，加入乙醇使含醇量达80 %， 静置，取上清液浓缩至浸膏，干燥，得干膏II ；(3)取当归、熟地、山茱萸加入10倍量水提取2次，每次2小时，合并提取液，浓
缩至浸膏，放冷，加入乙醇使含醇量达20 %，搅拌，离心，取上清液，加入乙醇使含醇量达 80%，静置，取沉淀部分干燥，得干膏III ；(4)取桂枝加入12倍量水提取3次，每次1小时，合并提取液，浓缩至浸膏，备用；药渣加入9倍量85%乙醇提取2次，每次3小时，合并提取液，浓缩至浸膏，与水提取得到的 浸膏合并，混勻，干燥，得干膏VI ；(5)取以上I、II、III、VI四份干膏粉碎，混勻，即为本发明中药组合物药物中间 体，入适量辅料(如二氧化硅、糊精、淀粉、磷酸盐、碳酸盐、甘露醇、山梨醇、山梨酸或钾盐、 木糖醇、麦芽糖、葡萄糖、果糖、右旋糖苷、甘氨酸、淀粉、蔗糖、乳糖、甘露糖醇及其他药剂 学常用的稀释辅料等一种或多种)，混合，干燥，粉碎，加入适量的粘合剂(固体粘合剂如 PEG200、PEG300、PEG400、PEG600、PEG800、PEG1000、PEG1500、高分子材料聚乙烯吡咯烷酮、 羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、低取代羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、海藻酸钠等或液 体粘合剂如乙醇、明胶浆、淀粉浆等一种或多种)，制颗粒，加入润滑剂(如硬脂酸镁、滑石 粉、硬脂富马酸钠等一种或多种)，整粒，总混，压制成1000片，即得。功能主治用于卵巢早衰。用法用量口服。一次3 5片，一日3次。实施例14 胶囊剂处方熟地黄180g 山茱萸180g 当归180g 白芍180g淫羊藿180g丹参90g 桃仁180g。制备方法⑴取丹参，加入8倍量90%乙醇提取2次，每次1小时，合并提取液， 减压回收乙醇并浓缩至60°C相对密度为1. 15 1. 20的浸膏，减压干燥，得干膏I ；(2)取白芍、淫羊藿加入16倍量与14倍量水分别提取2次，每次1. 5小时，合并提 取液，减压浓缩至60°C相对密度为1. 10 1. 15的浸膏，放冷，加入乙醇使含醇量达70%， 静置12小时，上清液减压浓缩至60°C相对密度为1. 10 1. 15的浸膏，放冷，加入乙醇使含 醇量达80%，静置12小时，上清液减压浓缩至60°C相对密度为1. 20的浸膏，减压干燥，的 干膏II。(3)取当归、熟地、山茱萸加入8倍量水提取2次，每次2小时，合并提取液，减压浓 缩至60°C相对密度为1. 10 1. 15的浸膏，放冷，加入乙醇使含醇量达20%，充分搅拌，离 心，取上清液，加入乙醇使含醇量达85%，静置12小时，取沉淀部分常压干燥，得干膏III (4)取桃仁加入8倍量水提取2次，每次2小时，合并提取液，浓缩至浸膏，备用； 药渣加入8倍量75%乙醇提取2次，每次2小时，合并提取液，浓缩至浸膏，与水提取得到的 浸膏合并，混勻，干燥，得干膏VI ；(5)取以上I、II、III、VI四份干膏粉碎，混勻，即为本发明中药组合物药物中间体， 加入适量二氧化硅，干燥，粉碎，过筛，装入胶囊，制1000粒。功能主治用于卵巢早衰。用法用量口服。一次3 5粒，一日3次。实施例15 软胶囊熟地黄300g 山茱萸150g 当归300g 白芍100g淫羊藿100g丹参100g 桃仁180g。制备方法⑴取丹参，加入8倍量80%乙醇回流提取2次，每次1小时，合并提取 液，浓缩干燥，得干膏I ；(2)取白芍、淫羊藿加入12倍量水提取2次，每次1小时，合并提取液，浓缩，放冷，加入乙醇使含醇量达65 %，静置，取上清液浓缩至浸膏，放冷，加入乙醇使含醇量达80 %， 静置，取上清液浓缩至浸膏，干燥，得干膏II ；(3)取当归、熟地、山茱萸加入9倍量水提取2次，每次2小时，合并提取液，浓缩至 浸膏，放冷，加入乙醇使含醇量达20 %，搅拌，离心，取上清液，加入乙醇使含醇量达80 %， 静置，取沉淀部分干燥，得干膏III ；(4)取桃仁加入12倍量水提取3次，每次1小时，合并提取液，浓缩至浸膏，备用； 药渣加入9倍量75%乙醇回流提取2次，每次1. 5小时，合并提取液，浓缩至浸膏，与水提取 得到的浸膏合并，混勻，干燥，得干膏VI ；(5)取以上I、II、III、VI四份干膏粉碎，混勻，即为本发明中药组合物药物中间体， 加入适量辅料(如二氧化硅、糊精、淀粉、磷酸盐、碳酸盐、甘露醇、山梨醇、山梨酸或钾盐、 木糖醇、麦芽糖、葡萄糖、果糖、右旋糖苷、甘氨酸、淀粉、蔗糖、乳糖、甘露糖醇等稀释辅料中 的一种或多种)，干燥，粉碎，与合适的辅料(如PEG200、PEG300、PEG400、PEG600、PEG800、 PEG1000、PEG1500及植物油系列等，防腐剂如山梨酸或钾盐、苯甲酸和丙酸等；增溶剂如吐 温系列等一种或多种，抗氧化剂如亚硫酸氢钠、硫代硫酸钠等一种或多种)，以任何方式混 勻后，装入胶囊中，制成1000粒软胶囊，即得。功能主治用于卵巢早衰。用法用量口服。一次3 5粒，一日3次。实施例16: 口服液熟地黄300g 山茱萸150g 当归300g 白芍100g淫羊藿100g丹参100g 桃仁150g。制备方法(1)取丹参，加入9倍量85%乙醇提取2次，每次1小时，合并提取液， 浓缩干燥，得干膏I ；(2)取白芍、淫羊藿加入13倍量水煎煮提取2次，每次1. 5小时，合并提取液，浓 缩，放冷，加入乙醇使含醇量达70 %，静置，取上清液浓缩至浸膏，放冷，加入乙醇使含醇量 达85%，静置，取上清液浓缩至浸膏，干燥，得干膏II ；(3)取当归、熟地、山茱萸加入8倍量水煎煮提取2次，每次1. 5小时，合并提取液， 浓缩至浸膏，放冷，加入乙醇使含醇量达25 %，搅拌，离心，取上清液，加入乙醇使含醇量达 85%，静置，取沉淀部分干燥，得干膏III ；(4)取桃仁加入7倍量水煎煮提取3次，每次1. 5小时，合并提取液，浓缩至浸膏， 备用；药渣加入10倍量85%乙醇提取1次，3小时，合并提取液，浓缩至浸膏，与水煎煮提取 得到的浸膏合并，混勻，干燥，得干膏VI ；(5)取以上I、II、III、VI四份干膏粉碎，混勻，即为本发明中药组合物药物中间体， 加入到沸水里，热处理适当时间，冷藏，滤过，加入辅料娇味剂的如蔗糖、蜂蜜、木糖醇、甜 菊糖、麦芽糖醇等一种或多种；防腐剂如山梨酸或钾盐、苯甲酸和丙酸等一种或多种；增溶 剂如吐温系列等，抗氧化剂如亚硫酸氢钠、硫代硫酸钠等等一种或多种)，滤过，灌封，制成 lOOOmL，灭菌，即得。功能主治用于卵巢早衰。用法用量口服。一次3 5毫升，一日3次。实施例17 浓缩丸
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处方熟地黄180g 山茱萸180g 当归180g 白芍180g淫羊藿180g丹参90g 知母180g。制备方法(1)取丹参，加入8倍量90%乙醇提取2次，每次1小时，合并提取液， 减压回收乙醇并浓缩至60°C相对密度为1. 15 1. 20的浸膏，减压干燥，得干膏I ；(2)取白芍、淫羊藿加入16倍量与14倍量水分别提取2次，每次1. 5小时，合并提 取液，减压浓缩至60°C相对密度为1. 10 1. 15的浸膏，放冷，加入乙醇使含醇量达70%， 静置12小时，上清液减压浓缩至60°C相对密度为1. 10 1. 15的浸膏，放冷，加入乙醇使含 醇量达80%，静置12小时，上清液减压浓缩至60°C相对密度为1. 20的浸膏，减压干燥，的 干膏II。(3)取当归、熟地、山茱萸加入8倍量水提取2次，每次2小时，合并提取液，减压浓 缩至60°C相对密度为1. 10 1. 15的浸膏，放冷，加入乙醇使含醇量达20%，充分搅拌，离 心，取上清液，加入乙醇使含醇量达85%，静置12小时，取沉淀部分常压干燥，得干膏III ；(4)取桃仁加入8倍量水提取2次，每次2小时，合并提取液，浓缩至浸膏，备用； 药渣加入8倍量75%乙醇提取2次，每次2小时，合并提取液，浓缩至浸膏，与水提取得到的 浸膏合并，混勻，干燥，得干膏VI ；(5)取以上I、II、III、VI四份干膏粉碎，混勻，即为本发明中药组合物药物中间体， 泛制成丸，低温干燥，制成浓缩丸5000粒，即得。功能主治用于卵巢早衰。用法用量口服。一次10 15粒，一日3次。实施例18 咀嚼片熟地黄300g 山茱萸150g 当归300g 白芍100g淫羊藿100g丹参100g 知母130g。制备方法(1)取丹参，加入8倍量80%乙醇回流提取2次，每次1小时，合并提取 液，浓缩干燥，得干膏I ；(2)取白芍、淫羊藿加入12倍量水煎煮提取2次，每次1小时，合并提取液，浓缩， 放冷，加入乙醇使含醇量达65 %，静置，取上清液浓缩至浸膏，放冷，加入乙醇使含醇量达 80%，静置，取上清液浓缩至浸膏，干燥，得干膏II ；(3)取当归、熟地、山茱萸加入9倍量水煎煮提取2次，每次2小时，合并提取液， 浓缩至浸膏，放冷，加入乙醇使含醇量达20 %，搅拌，离心，取上清液，加入乙醇使含醇量达 80%，静置，取沉淀部分干燥，得干膏III ；(4)取桃仁加入12倍量水煎煮提取3次，每次1小时，合并提取液，浓缩至浸膏，备 用；药渣加入9倍量75%乙醇回流提取2次，每次1. 5小时，合并提取液，浓缩至浸膏，与水 煎煮提取得到的浸膏合并，混勻，干燥，得干膏VI ；(5)取以上I、II、III、VI四份干膏粉碎，混勻，即为本发明中药组合物药物中间 体，加入适量辅料(如二氧化硅、糊精、淀粉、磷酸盐、碳酸盐、甘露醇、山梨醇、山梨酸或钾 盐、木糖醇、麦芽糖、葡萄糖、果糖、右旋糖苷、甘氨酸、淀粉、蔗糖、乳糖或甘露糖醇等稀释辅 料中的一种或多种)混合，干燥，粉碎，得到细粉与适量的粘合剂(固体粘合剂如PEG200、 PEG300、PEG400、PEG600、PEG800、PEG1000、PEG1500、高分子材料聚乙烯吡咯烷酮、羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、低取代羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、海藻酸钠等等或液体粘合 剂如乙醇、淀粉浆、糊精浆等一种或多种)混合制颗粒，加入适量矫味剂(如甘露醇、蔗糖、 木糖醇、甜菊糖、麦芽糖醇、薄荷脑、四丁醇、橙皮油、桂皮油、各种香精等一种或多种)、润滑 剂(如硬脂酸镁、滑石粉、硬脂富马酸钠、月桂醇硫酸镁等一种或多种)、崩解剂(如羧甲基 淀粉钠、交联羧甲基纤维素钠、交联聚乙烯吡咯烷酮、低取代羟丙基纤维素、预胶化淀粉、微 晶纤维素、大豆多糖、海藻酸、处理琼脂等一种或多种)整粒，总混，压制成1000片，即得。功能主治用于卵巢早衰。用法用量口服。一次3 5片，一日3次。实施例19 滴丸熟地黄300g 山茱萸150g 当归300g 白芍100g淫羊藿100g丹参100g 知母170g。制备方法(1)取丹参，加入9倍量85%乙醇回流提取2次，每次1小时，合并提取 液，浓缩干燥，得干膏I ；(2)取白芍、淫羊藿加入13倍量水提取2次，每次1. 5小时，合并提取液，浓缩， 放冷，加入乙醇使含醇量达70 %，静置，取上清液浓缩至浸膏，放冷，加入乙醇使含醇量达 85%，静置，取上清液浓缩至浸膏，干燥，得干膏II ；(3)取当归、熟地、山茱萸加入8倍量水提取2次，每次1. 5小时，合并提取液，浓 缩至浸膏，放冷，加入乙醇使含醇量达25 %，搅拌，离心，取上清液，加入乙醇使含醇量达 85%，静置，取沉淀部分干燥，得干膏III ；(4)取桃仁加入7倍量水提取3次，每次1.5小时，合并提取液，浓缩至浸膏，备用； 药渣加入10倍量85%乙醇提取1次，3小时，合并提取液，浓缩至浸膏，与水提取得到的浸 膏合并，混勻，干燥，得干膏VI;(5)取以上I、II、III、VI四份干膏粉碎，混勻，即为本发明中药组合物药物中间体， 将聚乙二醇-4000与浸膏粉以1 6 1 5的比例熔融混合，甲基硅油作冷却剂，滴制成 滴丸1000粒，即得。功能主治用于卵巢早衰。用法用量口服。一次3 5粒，一日3次。
2权利要求
一种治疗卵巢早衰的中药组合物，其特征在于该组合物是由包含如下重量份的中药原料制成的熟地黄 2～6 山茱萸2～6 当归2～6 白芍2～6淫羊藿 2～6 丹参1～3。
2.如权利要求1所述的中药组合物，其特征在于该组合物是由如下重量份的中药原料 制成的熟地黄2山茱萸2当归2白芍2 淫羊藿2丹参1。
3.如权利要求1所述的中药组合物，其特征在于该组合物是由如下重量份的中药原料 制成的熟地黄3山茱萸3当归2白芍2 淫羊藿2丹参1。
4.如权利要求1所述的中药组合物，其特征在于该组合物是由如下重量份的中药原料 制成的熟地黄3山茱萸3当归2白芍2 淫羊藿2丹参2。
5.如权利要求1所述的中药组合物，其特征在于该组合物是由如下重量份的中药原料 制成的熟地黄2 6 山茱萸2 6 当归2 6 白芍2 6 淫羊藿2 6丹参1 3 桂枝2 6。
6.如权利要求1所述的中药组合物，其特征在于该组合物是由如下重量份的中药原料 制成的熟地黄2 6 山茱萸2 6 当归2 6 白芍2 6 淫羊藿2 6 丹参1 3 桃仁2 6。
7.如权利要求1所述的中药组合物，其特征在于该组合物是由如下重量份的中药原料 制成的熟地黄2 6 山茱萸2 6 当归2 6 白芍2 6 淫羊藿2 6 丹参1 3 知母2 6。
8.如权利要求1 4所述的中药组合物，其特征在于制备方法为(1)取丹参，加入4 12倍量70% 90%乙醇提取1 3次，每次0.5 2小时，合并 提取液，浓缩干燥，得干膏I ；(2)取白芍、淫羊藿加入8 20倍量水提取1 3次，每次0.5 2. 5小时，合并提取 液，浓缩，放冷，加入乙醇使含醇量达60 % 75 %，静置，取上清液浓缩至浸膏，放冷，加入 乙醇使含醇量达75 % 90 %，静置，取上清液浓缩至浸膏，干燥，得干膏II ；(3)取当归、熟地、山茱萸加入4 12倍量水提取1 3次，每次1 3小时，合并提取 液，浓缩至浸膏，放冷，加入乙醇使含醇量达15% 30 %，搅拌，离心，静置，取上清液，加入 乙醇使含醇量达75% 95%，静置，取沉淀部分干燥，得干膏III ；(4)取以上I、II、III三份干膏粉碎，混勻，加入适量辅料，制成所需中药制剂。
9.如权利要求8所述的中药组合物制备方法，其特征在于(1)取丹参，加入8倍量90%乙醇提取2次，每次1小时，合并提取液，减压回收乙醇并 浓缩至相对密度为1. 15 1. 20的浸膏，减压干燥，得干膏I ；(2)取白芍、淫羊藿加入16倍量与14倍量水分别提取2次，每次1.5小时，合并提取 液，减压浓缩至相对密度为1. 10 1. 15的浸膏，放冷，加入乙醇使含醇量达70%，静置，上 清液减压浓缩至相对密度为1. 10 1. 15的浸膏，放冷，加入乙醇使含醇量达80%，静置，上 清液减压浓缩至相对密度为1. 20的浸膏，减压干燥，的干膏II。(3)取当归、熟地、山茱萸加入8倍量水提取2次，每次2小时，合并提取液，减压浓缩至 相对密度为1. 10 1. 15的浸膏，放冷，加入乙醇使含醇量达20%，充分搅拌，离心，，静置， 取上清液，加入乙醇使含醇量达85%，静置，取沉淀部分常压干燥，得干膏III ；(4)取以上I、II、III三份干膏粉碎，混勻，加入适量辅料，制成所需中药制剂。
10.如权利要求5所述的中药组合物，其特征在于制备方法为(1)取丹参，加入4 12倍量70% 90%乙醇提取1 3次，每次0.5 2小时，合并 提取液，浓缩干燥，得干膏I ；(2)取白芍、淫羊藿加入8 20倍量水提取1 3次，每次0.5 2. 5小时，合并提取 液，浓缩，放冷，加入乙醇使含醇量达60 % 75 %，静置，取上清液浓缩至浸膏，放冷，加入 乙醇使含醇量达75 % 90 %，静置，取上清液浓缩至浸膏，干燥，得干膏II ；(3)取当归、熟地、山茱萸加入4 12倍量水提取1 3次，每次1 3小时，合并提取 液，浓缩至浸膏，放冷，加入乙醇使含醇量达15% 30%，搅拌，离心，静置，取上清液，加入 乙醇使含醇量达75% 95%，静置，取沉淀部分干燥，得干膏III ；(4)取桂枝加入4 12倍量水提取1 3次，每次1 3小时，合并提取液，浓缩至浸 膏，备用；药渣加入4 12倍量70% 90%乙醇提取1 3次，每次1 3小时，合并提取 液，浓缩至浸膏，与水提取得到的浸膏合并，混勻，干燥，得干膏VI ；(5)取以上I、II、III、VI四份干膏粉碎，混勻，加入适量辅料，制成所需中药制剂。
11.如权利要求6所述的中药组合物，其特征在于制备方法为(1)取丹参，加入4 12倍量70% 90%乙醇提取1 3次，每次0.5 2小时，合并 提取液，浓缩干燥，得干膏I ；(2)取白芍、淫羊藿加入8 20倍量水提取1 3次，每次0.5 2. 5小时，合并提取 液，浓缩，放冷，加入乙醇使含醇量达60 % 75 %，静置，取上清液浓缩至浸膏，放冷，加入 乙醇使含醇量达75 % 90 %，静置，取上清液浓缩至浸膏，干燥，得干膏II ；(3)取当归、熟地、山茱萸加入4 12倍量水提取1 3次，每次1 3小时，合并提取 液，浓缩至浸膏，放冷，加入乙醇使含醇量达15% 30%，搅拌，离心，静置，取上清液，加入 乙醇使含醇量达75% 95%，静置，取沉淀部分干燥，得干膏III ；(4)取桃仁加入4 12倍量水提取1 3次，每次1 3小时，合并提取液，浓缩至浸 膏，备用；药渣加入4 12倍量70% 90%乙醇提取1 3次，每次1 3小时，合并提取 液，浓缩至浸膏，与水提取得到的浸膏合并，混勻，干燥，得干膏VI ；(5)取以上I、II、III、VI四份干膏粉碎，混勻，加入适量辅料，制成所需中药制剂。
12.如权利要求7所述的中药组合物，其特征在于制备方法为(1)取丹参，加入4 12倍量70% 90%乙醇提取1 3次，每次0.5 2小时，合并 提取液，浓缩干燥，得干膏I ；(2)取白芍、淫羊藿加入8 20倍量水提取1 3次，每次0.5 2. 5小时，合并提取 液，浓缩，放冷，加入乙醇使含醇量达60 % 75 %，静置，取上清液浓缩至浸膏，放冷，加入 乙醇使含醇量达75 % 90 %，静置，取上清液浓缩至浸膏，干燥，得干膏II ；(3)取当归、熟地、山茱萸加入4 12倍量水提取1 3次，每次1 3小时，合并提取 液，浓缩至浸膏，放冷，加入乙醇使含醇量达15% 30%，搅拌，离心，静置，取上清液，加入 乙醇使含醇量达75% 95%，静置，取沉淀部分干燥，得干膏III ；(4)取知母加入4 12倍量水提取1 3次，每次1 3小时，合并提取液，浓缩至浸 膏，备用；药渣加入4 12倍量70% 90%乙醇提取1 3次，每次1 3小时，合并提取 液，浓缩至浸膏，与水提取得到的浸膏合并，混勻，干燥，得干膏VI ；(5)取以上I、II、III、VI四份干膏粉碎，混勻，加入适量辅料，制成所需中药制剂。
13.如权利要求8 12所述的制备方法，其特征在于采用药剂学中常规的制药方法制 备成片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂、软胶囊、口服液体制剂。
14.如权利要求1 7所述的中药组合物，其特征在于该组合物在制备治疗卵巢早衰药 物中的应用。
全文摘要
本发明提供了一种治疗卵巢早衰的中药组合物，该组合物是由包含如下重量份的中药原料制成的熟地黄2～6重量份，山茱萸2～6重量份，当归2～6重量份，白芍2～6重量份，淫羊藿2～6重量份，丹参1～3重量份。本发明还提供了上述的中药组合物的制备方法，可将中药组合物制备成片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂、软胶囊、口服液体制剂的技术方案。
文档编号A61P15/08GK101850016SQ20091013407
公开日2010年10月6日 申请日期2009年3月31日 优先权日2009年3月31日
发明者刘涛, 孙永城, 尚强, 李淼, 王振中, 章晨峰, 萧伟, 邹燕萍 申请人:江苏康缘药业股份有限公司