专利名称：治疗糖尿病的药物的制作方法
技术领域：
本发明是一种治疗糖尿病的药物。
背景技术：
糖尿病是一种常见的代谢性内分泌疾病，因其发病率、死亡率、致残率高，严重危害人类健康，而日益受到医学界的广泛关注。从临床发病情况来看，其中绝大部分为II型糖尿病，其临床症状是血和尿中的葡萄糖含量超出正常范围。血糖水平主要受胰岛素和胰高血糖素调节。胰高血糖素通过一系列反应加快糖原分解。增加体内葡萄糖浓度，相反胰岛素则加快糖原合成，降低血糖浓度。在体内，胰高血糖素首先合成前体物，经翻译加工后形成胰高血糖素样肽GLP-1和GLP-2。其中GLP-1具有促进胰脏中β细胞增殖，刺激胰岛素生成的生理功能。但是GLP-1在体内会迅速被二肽基肽酶IV(dipeptidy I peptidase IV，DPP IV)降解失活，其半衰期不足2分钟。所以在临床治疗II型糖尿病方面不能充分发挥其应有功能。1992年，科学家从美国西南部与墨西哥北部地区的希拉毒蜥(Heloderma suspectum)唾液中分离了天然肽(Exendin-4)，exenatide为Exendin-4的人工合成物，其由39个氨基酸残基组成(主要成分结构His-Gly-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Leu-Ser-Lys-Gln-Met-Glu-Glu-Glu-Ala-Val-Arg-Leu-Phe-Ile-Glu-Trp-Leu-Lys-Asn-Gly-Gly-Pro-Ser-Ser-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser-NH2)，不仅与GLP一1具有相同功能，而且对DPP IV具有很高耐受性，成为具有广阔应用前景的治疗II型糖尿病新药。艾塞那肽(exenatide)已知的药理作用包括1.显著增加葡萄糖依赖性促胰岛素分泌，在血糖水平正常或低血糖时不刺激胰岛素的分泌。2.抑制II型糖尿病患者胰高血糖素分泌，并在高血糖时降低胰高血糖素浓度，但不减弱正常胰高血糖对低血糖的反应。3.抑制就餐后胃肠道动力及分泌功能，延迟胃排空，从而有利于就餐后的血糖控制。4.降低食欲，减少事物摄入。5.刺激β细胞增生或胚胎胰岛素成熟分化，抑制β细胞凋亡，从而增加β细胞的数量。6.恢复II型糖尿病患者丧失的胰岛素第一时相反应，显著增加第一时相及第二时相胰岛素的分泌，改善II型糖尿病患者的空腹及就餐后血糖水平。
在一项为期30周的随机双盲安慰剂对照研究中，733例联合使用二甲双胍和磺酰脲类药物治疗不理想的II型糖尿病患者[(Hb A1c的基线水平在(8.2±1.0％)]，首先2次/日皮下注射艾塞那肽5μg或安慰剂，二甲双胍治疗组仍维持原有剂量，磺酰脲类治疗组则随机分成有效剂量(MAX)和最低推荐剂量(MIN)组。结果显示治疗30周时，患者Hb A1c显著降低，疗效与艾塞那肽有量效关系，且2个剂量给药组患者体重均显著减轻。
目前已有公司将其开发成注射剂型-艾塞那肽(exenatide，商品名Byetta)，能够有效刺激胰岛素分泌、抑制高血糖分泌和减缓胃排空速度，降低食欲，减少事物摄入和减轻体重，可以有效治疗II型糖尿病，尤其用于改善和控制二甲双胍和磺酰脲类药物治疗不理想的II型糖尿病患者的治疗。该药获得FDA批准并已于2005年上市。但目前仅有此一种剂型上市销售，给药方式为为皮下注射。而皮下、肌肉注射造成的医疗事故是护理工作中的多发事故，主要表现形式有1.由于操作不熟练或病人紧张、不配合等造成的断针。2.器械消毒不彻底、周围环境污染、注射部位消毒不彻底等导致的注射部位化脓感染。3.注射操作不当引发的神经麻痹甚至致残致死。且糖尿病为慢性疾病，需要长期给药，因此市售产品在使用过程中给患者带来持续性痛苦、不便及安全隐患。本项发明制备的与载体结合的艾塞那肽(exenatide)复合物通过载体技术携带艾塞那肽(exenatide)透过鼻腔及胃肠道黏膜屏障进入血液循环从而起到治疗作用，避免目前皮下注射给药方式给患者带来的痛苦和不便。同时，原料中磷酸盐和钙盐为人体骨骼、牙齿主要主成部分，为人体必须物质，极大程度避免了由于载体不能被生物降解或者降解产物具有毒副作用给人体带来的安全隐患。
针对艾塞那肽(exenatide)作为皮下注射在治疗糖尿病中存在的弊端，发明人于2009年7月22日向中国专利局提供了名称为“治疗糖尿病的口服药物及其制备方法”和“治疗糖尿病的鼻腔滴剂及其制备方法”的发明专利申请，申请号分别为200910181747.0和200910181748.5，上述专利公开的技术方案采用磷酸钙纳米粒子改变了艾塞那肽注射剂型的给药途径，减轻了皮下注射给药方式给患者带来的痛苦和不便。同时，原料中磷酸盐和钙盐为人体骨骼、牙齿主要主成部分，为人体必须物质，极大程度避免了由于载体不能被生物降解或者降解产物具有毒副作用给人体带来的安全隐患。
皂苷是一类较为复杂的化合物，在自然界分布广泛，许多植物如人参、三七、威灵仙、知母、苦瓜、远志、辽东槐木、桔梗、柴胡、麦冬、广东匙羹藤、知母、西洋参、玉米须等都含有种类丰富的皂苷。大量研究实践表明，皂苷类物质具有多种生物活性功能，比如抗肿瘤、抗血栓、降低胆固醇、抗氧化、抗病毒、免疫调节等。近年来通过对皂苷类物质的深入研究发现其中人参总皂苷、辽东槐木总皂苷、麦冬总皂苷、苦瓜总皂苷、广东匙羹藤总皂苷、知母总皂苷、西洋参总皂苷、玉米须总皂苷等还具有降血糖功能，目前，人们正通过深入研究，逐步揭示皂的苷降血糖机理，如上海交通大学附属瑞金医院内分泌代谢病临床医学中心研究人员发现人参皂苷具有降血糖作用，并且发现其中人参皂苷Re为降血糖主要成分，其降血糖机理是人参皂苷Re能够增强胰岛素的作用，起到“类胰岛素”作用，此外，他们还发现另外一种人参皂苷Rb1具有类似胰岛素增敏剂样的作用，从而也能发挥降血糖作用。又如西安交通大学医学院公共卫生系与第四军医大学药理学系用三七总皂苷对小鼠进行糖耐量，实验结果表明三七皂苷能够较快抑制小鼠餐后血糖的上升。
将艾塞那肽和皂苷类化合物复配，尤其是将磷酸钙纳米粒子与艾塞那肽和皂苷类化合物复配后，形成一种新的治疗糖尿病的药物，目前未见报道。
发明内容
本发明的的目的在于针对目前治疗糖尿病的药物使用中存在的问题，结合申请人在先申请的200910181747.0和200910181748.5，提供一种治疗糖尿病效果更好的治疗糖尿病的药物。
本发明的目的是摘要实现的一种治疗糖尿病的药物，包括有效活性成分和药用辅料，其特征在于有效活性成分占成品药物的重量百分比为0.001～90％，所述的有效活性成分艾塞那肽和皂苷类化合物组成，在有效活性成分中，皂苷类化合物的重量百分比分别为1～99.1％。
在本发明中所述的皂苷类化合物为人参总皂苷，或三七总皂苷，或威灵仙总皂苷，或知母总皂苷，或远志总皂苷，或桔梗总皂苷，或柴胡总皂苷。
在本发明中有效药物成分与磷酸钙纳米粒子混合，混合体中磷酸钙纳米粒子占有的重量百分比为10～80％。
在本发明中磷酸钙纳米粒子由浓度为0.001-1mol/L的钙盐溶液、磷酸盐溶液、枸橼酸盐溶液按照1～20∶1～20∶1～10的体积比混合后获得含有磷酸钙纳米粒子的水性溶液。
在本发明中所述的钙盐可以是硫酸钙、氯化钙等钙盐，所述的磷酸盐可以是磷酸纳、磷酸二氢纳、磷酸氢二纳、磷酸二氢铵、磷酸一氢钠等磷酸盐，所述的枸橼酸盐为枸橼酸钾、枸橼酸镁、枸橼酸纳等枸橼酸盐，含有磷酸钙纳米粒子的水性溶液的pH＝6～7。
在本发明中所述的药用辅料为粉剂药物，或片剂药物，或丸剂药物，或冲剂药物的常用添加剂；为含有水剂药物常用辅料的注射用水。
本发明的优点在于有效成分中含有艾塞那肽与皂苷类化合物，中西结合，优势互补，提高了治疗糖尿病的效果；有效成分中的磷酸钙纳米粒子提供了一种新的药物携带方式，磷酸钙纳米粒子中的磷酸盐和钙盐为人体骨骼、牙齿主要主成部分，为人体必须物质，极大程度避免了由于载体不能被生物降解或者降解产物具有毒副作用给人体带来的安全隐患。
具体实施例方式 实施例1 有效活性成分的合成 精密称取艾塞那肽(exenatide)0.01g溶解于1ml去离子水中制成艾塞那肽(exenatide)溶液；精密称取人参总皂苷100mg溶解于10mL去离子水中制成人参总皂苷水溶液，将上述2种溶液按照1∶10的体积比混合后室温搅拌48小时，即得到艾塞那肽(exenatide)和人参总皂苷结合的有效活性成分溶液，在有效活性成分溶液中，艾塞那肽(exenatide)与人参总皂苷的重量比为1∶100(人参总皂苷约占99.01％)。
实施例2 有效活性成分溶液的药效试验 实验动物 ICR小鼠，18-20g，雄性，30只。
实验药物 试验组实施例1提供的有效活性成分溶液，葡萄糖，其中，有效活性成分溶液用水稀释，稀释后艾塞那肽浓度0.5mg/ml，人参总皂苷浓度50mg/ml。
对照组200910181748.5号专利中实施例1提供的鼻腔滴剂，葡萄糖，其中，鼻腔滴剂稀释后有效药物艾塞那肽浓度0.5mg/ml。
空白组葡萄糖 实验方法 将实验大鼠预养3天，分为试验组、对照组和空白组，每组10只小鼠；试验前一天禁食12h。实验开始时先检测0小时血糖，然后试验组和对照组分别鼻腔给药(药剂中的艾塞那肽的含量相同)、灌胃葡萄糖(2.5g/kg，浓度10％)，空白组只灌胃葡萄糖(2.5g/kg，浓度10％)，使用电子血糖测试仪于0.5小时，1小时，2小时测量血糖含量。
表1有效活性成分溶液给药时间-血糖浓度列表 各组血糖含量检测平均值结果如表1，其中对照组的检测数据为后续的实施例5的共用数据；空白组的检测数据为后续的实施例5和实施例7的共用数据。
实施例3 精密称取氯化钙1.0g溶解于500ml去离子水中制成氯化钙溶液；精密称取磷酸氢二纳1.0g溶解于500ml去离子水中制成磷酸氢二纳溶液；精密称取枸橼酸纳0.4g溶解于80ml去离子水中制成枸橼酸纳溶液，氯化钙溶液、磷酸氢二纳溶液和枸橼酸纳溶液按照2∶2∶1的体积比混合后室温搅拌48小时，超声处理后，离心，弃去上清，形成含有磷酸钙纳米粒子溶液，溶液中的磷酸钙纳米粒子的浓度为0.5mg/ml。
实施例4 将实施例1获得的有效活性成分与实施例3获得的含有磷酸钙纳米粒子的溶液按照1∶1混合搅拌2小时，离心，弃去上清，获得磷酸钙纳米粒子与艾塞那肽和人参总皂苷的复合物。
将该复合物用注射用水稀释成含艾塞那肽(exenatide)0.01-0.5mg/ml，人参皂苷1-100mg/ml，按照200910181748.5号专利中实施例1相同的药用辅料和方法配制鼻腔滴剂，即按照溶剂体积百分比加入焦亚硫酸盐0.05％，氯化钠0.9％，新洁尔灭0.01％，混合后检测pH，当pH≠6-7时用pH调节剂调节pH，获得本发明的鼻腔滴剂。
实施例5、 鼻腔滴剂的降血糖效果研究 实验动物 ICR小鼠，18-20g，雄性，10只。
实验药物 试验组实施例4提供的鼻腔滴剂，葡萄糖，其中，鼻腔滴剂用水稀释，稀释后艾塞那肽浓度0.5mg/ml，人参总皂苷浓度50mg/ml。
对照组200910181748.5号专利中实施例1提供的鼻腔滴剂，葡萄糖，其中，鼻腔滴剂稀释后有效药物艾塞那肽浓度0.5mg/ml(未重复实验)。
空白组葡萄糖(未重复实验)。
实验方法 将实验大鼠预养3天，分为实验组、对照组和空白组，其中，实验组和对照组每组10只小鼠，对照组采用了实施例2中对照组的试验数据，空白组采用了实施例2中空白组的试验数据；试验前一天禁食12h。实验开始时先检测0小时血糖，然后给试验组鼻腔给药(药剂中的艾塞那肽的含量与对照组相同)、灌胃葡萄糖(2.5g/kg，浓度10％)，使用电子血糖测试仪于0.5小时，1小时，2小时测量血糖含量。各组血糖含量检测平均值结果如表2 表2鼻腔给药时间-血糖浓度列表 实施例6 将实施例1获得的有效活性成分与实施例3获得的含有磷酸钙纳米粒子的溶液按照1∶1混合搅拌2小时，离心，弃去上清，获得磷酸钙纳米粒子与艾塞那肽和人参总皂苷的复合物。
将上述复合物按照200910181747.0号专利中实施例3相同的药用辅料和方法配制口服药物粉剂药用辅料选择淀粉、糊精、硬脂酸镁，将它们加入实施例1中获得的复合物得到药物粉剂，其中淀粉加入量为药物粉剂的40-49.9％(重量百分比，下同)，糊精加入量为药物粉剂的40％，硬脂酸镁加入量为药物粉剂的10％，混合均匀，获得治疗糖尿病的口服药物粉剂。
实施例7 口服药物粉剂的降血糖效果研究 实验动物 ICR小鼠，18-20g，雄性，20只。
实验药物 实验组实施例6获得的口服药物粉剂，葡萄糖，其中口服药物粉剂用水稀释后艾塞那肽浓度0.5mg/ml，人参皂苷浓度50mg/ml。
对照组200910181747.0号专利中实施例3提供的口服药物粉剂，葡萄糖，其中，口服药物粉末用水稀释，稀释后艾塞那肽浓度0.5mg/ml。
空白组葡萄糖(未重复实验)。
试验方法 实验大鼠预养3天，分为实验组、对照组和空白组，其中，实验组和对照组每组10只小鼠，空白组采用了实施例2中空白组的试验数据；试验前一天禁食12h。实验开始时先检测0小时血糖，然后实验组和对照组均灌胃给药0.5ml/只，给药剂量为250μg/200g(药剂中的艾塞那肽的含量相同)；试验组和对照组口服药物粉剂以后灌胃葡萄糖(葡萄糖剂量为2.5g/kg，浓度为10％)。使用电子血糖测试仪于0.5小时，1小时，2小时测量血糖含量。各组血糖含量检测平均值结果如表3 表3口服药物粉剂时间-血糖浓度列表 由实施例5和实施例7可见，本发明与仅含有艾塞那肽的相同剂型进行比较可见，由于药物有效成分中添加了皂苷类化合物，使降血糖效果得到显著提高。
实施例8 单独使用人参总皂苷药效试验 实验动物 ICR小鼠，18-20g，雄性，20。
实验药物 试验组人参总皂苷浓度50mg/ml的水溶液、葡萄糖。
空白组葡萄糖 实验方法 将实验大鼠预养3天，分为试验组和空白组，每组10只小鼠；试验前一天禁食12h。实验开始时先检测0小时血糖，然后给试验组鼻腔给药、灌胃葡萄糖(2.5g/kg，浓度10％)，空白组只灌胃葡萄糖(2.5g/kg，浓度10％)，使用电子血糖测试仪于0.5小时，1小时，2小时测量血糖含量。各组血糖含量检测平均值结果如表4 表4人参总皂苷溶液给药时间-血糖浓度列表 实施例9 麦冬总皂苷药效试验 实验动物 ICR小鼠，18-20g，雄性，20。
实验药物 试验组1麦冬总皂苷浓度50mg/ml的水溶液、葡萄糖。
试验组2仿照例1方法制备得到的艾塞那肽-麦冬总皂苷口服药物粉剂(其区别仅在于用麦冬总皂苷直接替换实施例1中的人参总皂苷)，葡萄糖，其中口服药物粉剂用水稀释后艾塞那肽浓度0.5mg/ml，麦冬总皂苷浓度50mg/ml 实验方法 将实验大鼠预养3天，分为试验组1和试验组2，每组10只小鼠；试验前一天禁食12h。实验开始时先检测0小时血糖，然后给试验组1和试验组2鼻腔给药、灌胃葡萄糖(2.5g/kg，浓度10％)，使用电子血糖测试仪于0.5小时，1小时，2小时测量血糖含量。各组血糖含量检测平均值结果如表5 表5麦冬总皂苷制剂给药时间-血糖浓度列表 由实施例8可见，单独使用皂苷类化合物，降血糖效果并不明显；由实施例9可见，将本发明与单独使用相同剂量的皂苷类化合物型进行比较，只有在药物有效成分中同时含有艾塞那肽和皂苷类化合物，才能使降血糖效果得到显著提高。
以上各实施例不是对本发明的具体限制，具体实施时，本领域的技术人员在选择皂苷类化合物时可以选择人参总皂苷，或辽东槐木总皂苷，或麦冬总皂苷，或苦瓜总皂苷，或广东匙羹藤总皂苷，或知母总皂苷，或西洋参总皂苷，或玉米须总皂苷等；在选择药用辅料时可以粉剂药物，或片剂药物，或丸剂药物，或冲剂药物中的常用添加剂，或含有水剂药物常用辅料的注射用水；或在权利要求的范围内改变有效活性成分的比例等等。任何熟悉本领域的技术人员，在不脱离本发明技术方案范围情况下，利用上述揭示的方法内容对本发明技术方案做出许多可能的变动和修饰，例如，药物的剂型选择为片剂、水剂、胶囊、注射剂等，均属于权利要求书保护的范围。
权利要求
1.一种治疗糖尿病的药物，包括有效活性成分和药用辅料，其特征在于有效活性成分占成品药物的重量百分比为0.001～90％，所述的有效活性成分艾塞那肽和皂苷类化合物组成，在有效活性成分中，皂苷类化合物的重量百分比为1～99.1％。
2.根据权利要求1所述的治疗糖尿病的药物，其特征在于所述的皂苷类化合物为人参总皂苷，或辽东槐木总皂苷，或麦冬总皂苷，或苦瓜总皂苷，或广东匙羹藤总皂苷，或知母总皂苷，或西洋参总皂苷，或玉米须总皂苷。
3.根据权利要求1或2所述的治疗糖尿病的药物，其特征在于有效药物成分与磷酸钙纳米粒子混合，混合体中磷酸钙纳米粒子占有的重量百分比为10～80％。
4.根据权利要求3所述的治疗糖尿病的药物，其特征在于磷酸钙纳米粒子由浓度为0.001-1mol/L的钙盐溶液、磷酸盐溶液、枸橼酸盐溶液按照1～20∶1～20∶1～10的体积比混合后获得含有磷酸钙纳米粒子的水性溶液。
5.根据权利要求4所述的治疗糖尿病的药物，其特征在于所述的钙盐可以是硫酸钙、氯化钙等钙盐，所述的磷酸盐可以是磷酸纳、磷酸二氢纳、磷酸氢二纳、磷酸二氢铵、磷酸一氢钠等磷酸盐，所述的枸橼酸盐为枸橼酸钾、枸橼酸镁、枸橼酸纳等枸橼酸盐，含有磷酸钙纳米粒子的水性溶液的pH＝6～7。
6.根据权利要求1或2所述治疗糖尿病的药物，其特征在于所述的药用辅料为粉剂药物，或片剂药物，或丸剂药物，或冲剂药物的常用添加剂；为含有水剂药物常用辅料的注射用水。
7.根据权利要求3所述治疗糖尿病的药物，其特征在于所述的药用辅料为粉剂药物，或片剂药物，或丸剂药物，或冲剂药物的常用添加剂；为含有水剂药物常用辅料的注射用水。
全文摘要
本发明涉及一种治疗糖尿病的药物，包括有效活性成分和药用辅料，其特征在于有效活性成分占成品药物的重量百分比为0.001～90％，所述的有效活性成分由艾塞那肽和皂苷类化合物组成，在有效活性成分中，皂苷类化合物的重量百分比为1～99.1％。其优点在于有效成分中含有艾塞那肽与皂苷类化合物，中西结合，优势互补，提高了治疗糖尿病的效果；有效成分中的磷酸钙纳米粒子提供了一种新的药物携带方式，磷酸钙纳米粒子中的磷酸盐和钙盐为人体骨骼、牙齿主要主成部分，为人体必须物质，极大程度避免了由于载体不能被生物降解或者降解产物具有毒副作用给人体带来的安全隐患。
文档编号A61P3/10GK101810849SQ20101015012
公开日2010年8月25日 申请日期2010年4月20日 优先权日2010年4月20日
发明者张学智, 河清, 江桥, 管晓虹 申请人:南京凯瑞尔纳米生物技术有限公司