专利名称：一种用于清除血液毒素的血液净化吸附剂及其制备方法
技术领域：
本发明涉及生物医学技术领域，特别涉及一种用于清除血液毒素的血液净化吸附剂及其制备方法。
背景技术：
自身免疫性疾病是由于免疫系统发生紊乱，识别并损害自身正常细胞、组织、器官所引发的一类疾病。自身免疫性疾病病情多样，已经明确的达40余种，常见的有甲状腺疾病、系统性红斑狼疮、类风湿关节炎、系统性硬化等。自身免疫性疾病具有相当高的致残率或病死率，我国也是这类疾病的多发区。据流行病学统计，我国系统性红斑狼疮患者超过100万，为全球之最。类风湿关节炎在我国的发病率高达O. 35%-0.4%，致残率达15%。目前，针对自身免疫性疾病还没有特效的治疗药物，如何控制其病情发展，减轻急性发病给患者带来的危险和痛苦是当前临床医疗技术研究的热点之一。
自身免疫性疾病的发病机制可能与遗传、感染、药物及环境等因素有关。患者体内蓄积自身抗体和免疫复合物是自身免疫性疾病的重要特征，自身抗体的致病性在一部分自身免疫性疾病中得到证实。对于这些疾病，通过体外清除的方式降低病人血液中自身抗体和免疫复合物的浓度能够明显改善症状，对疾病起到缓解和治疗作用。采用蛋白A免疫吸附对患者进行血液净化治疗是目前临床上治疗自身免疫性疾病的重要手段。这种吸附剂利用金黄色葡萄球菌蛋白A对抗体的特异性作用，将其作为固定化配基从患者体内吸附去除致病抗体。自从上世纪80年代应用于自身免疫性疾病治疗以来，蛋白A吸附剂对多种疾病的治疗有效性已经得到证实，并获得美国FDA批准，成为多种自身免疫性疾病的推荐疗法。 但是，蛋白A吸附剂也存在一些缺陷，限制了它的广泛使用。首先，蛋白A作为一种蛋白质配基，其生产成本高昂，给患者带来沉重的经济负担；此外，蛋白质配基稳定性不高，为吸附剂的生产、运输、保存、使用带来不便，如果治疗过程中出现配基脱落也会给患者安全带来风险。因此，临床中需要一种新型的抗体吸附剂，它能够具有和蛋白A吸附剂相当的治疗效果，同时物理化学性质稳定而且成本相对低廉，使血液净化技术能够被用于更多急重症患者的救治。发明内容
本发明实施例所要解决的技术问题在于，提供一种用于清除血液毒素的血液净化吸附剂及其制备方法，其治疗效果明显，吸附力强，不仅对大分子量IgG、IgM型抗体及其免疫复合物具有较好的吸附能力，而且对于小分子量的疏水分子β 2微球蛋白也有较好的吸附能力。另外，其物理化学性能稳定，耐强酸强碱和有机溶剂，成本低廉。
为达到上述技术效果，本发明实施例提供了一种用于清除血液毒素的血液净化吸附剂，所述血液净化吸附剂是采用2-氨基-5-甲基吡啶作为配基，通过化学偶联固定在固相载体之上；所述固相载体材料采用多孔微球的形式，其胶孔透过分子量为11，00-5，100，000。
优选地，通过化学偶联固定在所述固相载体上的2-氨基-5-甲基吡啶的偶联密度为O. 8 2. 8mmoI /g干基质。
优选地，所述固相载体为纤维素、琼脂糖或壳聚糖。
优选地，所述固相载体为经过活化剂活化的载体；所述活化剂为环氧氯丙烷、环氧溴丙烷或N，N'羰基二咪唑。
相应地，本发明实施例提供了一种用于清除血液毒素的血液净化吸附剂的制备方法，所述制备方法包括用活化剂对固相载体进行活化，所述活化剂为环氧氯丙烷、环氧溴丙烷或N，N'羰基二咪唑；采用2-氨基-5-甲基吡啶作为配基，通过化学偶联固定在所述经过活化的固相载体之上，得到血液净化吸附剂；其中，所述固相载体材料采用多孔微球的形式，其胶孔透过分子量为 11，000 5，100，000。
优选地，所述制备方法包括在氢氧化钠水溶液中用活化剂环氧氯丙烷对固相载体进行活化，反应时间为1.2飞.0h，反应温度为25 75°C，PH值为8 14，其中所述活化剂环氧氯丙烷的用量占所述固相载体的体积比为1/Γ1/2 ；在乙醇体系中，采用2-氨基-5-甲基吡啶作为配基，通过化学偶联固定在所述经过活化的固相载体之上，得到血液净化吸附剂；其中，所述固相载体材料采用多孔微球的形式，其胶孔透过分子量为 11，000 5，100，000。
优选地，所述制备方法包括在丙酮体系中用活化剂N，N'羰基二咪唑对固相载体进行活化，反应时间为O.3 6. Oh,反应温度为2(T50°C，PH值为4 9，其中所述活化剂N，N'羰基二咪唑的用量占所述固相载体的体积比为1ΑΓ1/3 ；在丙酮体系中，采用2-氨基-5-甲基吡啶作为配基，通过化学偶联固定在所述经过活化的固相载体之上，得到血液净化吸附剂；其中，所述固相载体材料采用多孔微球的形式，其胶孔透过分子量为 11，000 5，100，000。
优选地，所述环氧氯丙烷在反应体系的浓度为5 12% ；所述N，N'羰基二咪唑在反应体系的浓度为8 25%。
优选地，通过化学偶联固定在所述固相载体上的2-氨基-5-甲基吡啶的偶联密度为O. 8 2. 8mmoI /g干基质。
优选地，所述固相载体为纤 维素、琼脂糖或壳聚糖。
实施本发明具有如下有益效果一、偶联2-氨基-5-甲基吡啶的吸附剂采用的固相载体为球形颗粒，它们具有足够的强度，透过的分子量在11，000^5, 100, 000之间，透过的分子量尤其是11，800^5, 000, 000之间。而β 2微球蛋白生物分子量为11，800，免疫复合物尤其是IgM免疫复合物分子量则要大的多，一般为500，00(Tl，000，000。因此，偶联2-氨基-5-甲基吡啶的吸附剂不仅对大分子量IgG、IgM型抗体及其免疫复合物具有较好的吸附能力，而且对于小分子量的疏水分子β 2微球蛋白(β 2微球蛋白是一种由淋巴细胞、血小板、多形核白细胞产生的一种小分子球蛋白)也有较好的吸附能力。
故偶联2-氨基-5-甲基吡啶的吸附剂通过亲脂疏水的作用和毒素疏水点的相互作用力来清除血液毒素，并对以下病症有良好的治疗作用，包括系统性红斑狼疮患者体内的抗核抗体(主要为IgG型抗体),重症肌无力患者体内的(主要为IgG型抗体)，类风湿性关节炎患者体内的类风湿因子(主要为IgM型免疫复合物)，尿毒症患者体内的β 2微球蛋白。
二、本血液净化吸附剂所采用的配基2-氨基-5-甲基吡啶，化学和物理稳定性高， 它不仅与蛋白质之间具有良好的生物兼容性而且由于2-氨基-5-甲基吡啶具有氨基等活性官能团，使其更利于与亲和载体相连接，特别是2-氨基-5-甲基吡啶对IgG、IgM型抗体及其免疫复合物合合疏水分子β 2微球蛋白具有特异性作用，即良好的吸附性，另外，2-氨基-5-甲基吡啶的价格相对于蛋白A要低很多，容易实现工业化。因而，用2-氨基-5-甲基吡啶取代蛋白A用于血液净化治疗免疫系统疾病的理想选择。
三、采用2-氨基-5-甲基吡啶为配基通过化学偶联所形成的化学键非常稳定，在使用过程中不会出现脱落，物理化学性能稳定。
四、采用2-氨基-5-甲基吡唳为配基的血液净化吸附剂能够耐受强酸、强碱、和有机溶剂等苛刻条件的医用级处理，而不会影响其结构和吸附性能。
图1是本发明一种用于清除血液毒素的血液净化吸附剂的制备方法的流程图；图2是本发明一种用于清除血液毒素的血液净化吸附剂的又一制备方法的流程图；图3是本发明一种用于清除血液毒素的血液净化吸附剂的再一制备方法的流程图。
具体实施方式
为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合附图对本发明作进一步地详细描述。
本发明实施例提供了一种用于清除血液毒素的血液净化吸附剂，所述血液净化吸附剂是采用2-氨基-5-甲基吡啶作为配基，通过化学偶联固定在固相载体之上；所述固相载体材料采用多孔微球的形式，其胶孔透过分子量为11，00(Γ5，100，000。
优选地，所述固相载体材料采用多孔微球的形式，其胶孔透过分子量为 11，800 5，000, 000。
本发明采用的配基2-氨基-5-甲基吡啶，化学式为]
权利要求
1.一种用于清除血液毒素的血液净化吸附剂，其特征在于，所述血液净化吸附剂是采用2-氨基-5-甲基吡啶作为配基，通过化学偶联固定在固相载体之上； 所述固相载体材料采用多孔微球的形式，其胶孔透过分子量为11，00(Γ5，100，000。
2.如权利要求1所述的血液净化吸附剂，其特征在于，通过化学偶联固定在所述固相载体上的2-氨基-5-甲基吡啶的偶联密度为O. 8^2. 8mmol/g干基质。
3.如权利要求2所述的血液净化吸附剂，其特征在于，所述固相载体为纤维素、琼脂糖或壳聚糖。
4.如权利要求3所述的血液净化吸附剂，其特征在于，所述固相载体为经过活化剂活化的载体； 所述活化剂为环氧氯丙烷、环氧溴丙烷或N，N'羰基二咪唑。
5.一种用于清除血液毒素的血液净化吸附剂的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括 用活化剂对固相载体进行活化，所述活化剂为环氧氯丙烷、环氧溴丙烷或N，N'羰基二咪唑； 采用2-氨基-5-甲基吡啶作为配基，通过化学偶联固定在所述经过活化的固相载体之上，得到血液净化吸附剂； 其中，所述固相载体材料采用多孔微球的形式，其胶孔透过分子量为11，000 5，100，000。
6.如权利要求5所述的血液净化吸附剂的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括 在氢氧化钠水溶液中用活化剂环氧氯丙烷对固相载体进行活化，反应时间为1.2飞.0h，反应温度为25 75°C，PH值为8 14，其中所述活化剂环氧氯丙烷的用量占所述固相载体的体积比为1/Γ1/2 ； 在乙醇体系中，采用2-氨基-5-甲基吡啶作为配基，通过化学偶联固定在所述经过活化的固相载体之上，得到血液净化吸附剂； 其中，所述固相载体材料采用多孔微球的形式，其胶孔透过分子量为11，000 5，100，000。
7.如权利要求5所述的血液净化吸附剂的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括 在丙酮体系中用活化剂N，N'羰基二咪唑对固相载体进行活化，反应时间为O.3 6. Oh,反应温度为2(T50°C，PH值为4 9，其中所述活化剂N，N'羰基二咪唑的用量占所述固相载体的体积比为1ΑΓ1/3 ； 在丙酮体系中，采用2-氨基-5-甲基吡啶作为配基，通过化学偶联固定在所述经过活化的固相载体之上，得到血液净化吸附剂； 其中，所述固相载体材料采用多孔微球的形式，其胶孔透过分子量为11，000 5，100，000。
8.如权利要求6或7所述的血液净化吸附剂的制备方法，其特征在于，所述环氧氯丙烷在反应体系的浓度为5 12% ； 所述N，N'羰基二咪唑在反应体系的浓度为8 25%。
9.如权利要求8所述的血液净化吸附剂的制备方法，其特征在于，通过化学偶联固定在所述固相载体上的2-氨基-5-甲基吡啶的偶联密度为O. 8^2. 8mmol/g干基质。
10.如权利要求9所述的血液净化吸附剂的制备方法，其特征在于，所述固相载体为纤维素、琼脂糖或壳聚糖。
全文摘要
本发明公开了一种用于清除血液毒素的血液净化吸附剂，其采用2-氨基-5-甲基吡啶作为配基，通过化学偶联固定在固相载体之上；固相载体材料采用多孔微球的形式，其胶孔透过分子量为11,000~5,100,000。相应地，本发明公开了一种用于清除血液毒素的血液净化吸附剂的制备方法，包括用活化剂对固相载体进行活化，活化剂为环氧氯丙烷、环氧溴丙烷或N,N′羰基二咪唑；采用2-氨基-5-甲基吡啶作为配基，通过化学偶联固定在经过活化的固相载体之上，得到血液净化吸附剂。采用本发明，对IgG、IgM型抗体及其免疫复合物和疏水分子β2微球蛋白都有较好的吸附能力。物理化学性能稳定，耐强酸强碱和有机溶剂，成本低廉。
文档编号A61M1/38GK103028376SQ20111029275
公开日2013年4月10日 申请日期2011年9月29日 优先权日2011年9月29日
发明者黄飞飞, 孔耀中, 廖兴华 申请人:佛山市博新生物科技有限公司