专利名称：一种桑白皮桑黄酮g/h、桑根皮素的提取方法
技术领域：
本发明涉及药物化学领域，具体地说是涉及一种桑白皮桑黄酮G/H、桑根皮素的提取方法。
背景技术：
桑白皮，为桑科植物桑alba L.的根皮，主产于河南省、安徽省、四川省、湖南省、河北省、广东省。以河南省、安徽省产量大，并以亳桑皮质量佳。冬季采挖，洗净，刮去表面黄色粗皮，纵向剖开皮部，以木锤轻击，使皮部与木部分尚，剥取皮部晒干。桑皮扭曲成槽筒，残留栓皮黄棕色，质韧纵裂纤维，泻肺平喘消水肿，修复组织细胞，平复疤痕功效。其主要化学成分为黄酮化合物，包括桑黄酮G，桑黄酮H及桑根皮素等。现代药理作用1、修复组织细胞桑白皮有修复受损组织细胞，淡化疤痕，利水消肿之功效。2、降血压作用。3、其他作用桑白皮煎剂2g/kg给兔灌胃6小时内排尿量及其氯化物明显增加，7 24小时 恢复正常。现有提取桑白皮的方法多是采用热回流提取。热回流提取方法是利用乙醇为提取溶媒，对浸出液加热蒸馏，其中挥发性溶剂馏出后又被冷凝，重新回到浸出器中继续参与浸提过程，循环进行，直至有效成分桑白皮黄酮成分被浸提完全。具体操作为取桑白皮f2mm的粗粉，装入3吨多功能提取罐中，加入10倍量60%乙醇，热回流提取两次，每次4h。然而利用热回流提取方法提取桑白皮桑根酮提取次数多、提取时间长、提取含量较低。而且热回流提取需要连续加热，在加热回流过程中会造成乙醇大量挥发损失，乙醇用量较大，并且在提取药渣中还会残留大量乙醇溶剂，造成大量溶剂消耗，增加了产品成本。此外热回流提取需要蒸汽加热，因此需要消耗大量热能源，产生废气、浓烟等环境污染问题，对环保造成一定的负担。
发明内容
有鉴于此，本发明目的是针对现有技术桑白皮黄酮成分提取率低的缺陷，提供一种提取率高的桑根酮的提取方法。为实现本发明的目的，本发明采用如下技术方案
一种桑白皮桑黄酮G/H、桑根皮素的提取方法，包括
步骤I、取桑白皮粗粉加入乙醇溶液浸泡，然后在300MPa的真空密闭条件下超高压提取8min，收集提取液，过滤，滤液备用，所述乙醇溶液的含水量为30飞0% ；
步骤2、取过滤所得药渣离心，收集离心所得清液；
步骤3、合并步骤I所得滤液和步骤2所得清液，浓缩至无醇味，加入纯化水充分搅拌，在2(T30°C下沉降，离心，取沉淀即得。超高压提取全称为“超高冷等静压”，是指在常温下用10(Tl000MPa的流体静压力作用于药液上，使提取溶剂渗透到药物细胞内，在预定压力下保持一段时间使有效成分达到溶解平衡后迅速卸压，由于细胞内外渗透压力差突然增大，可使细胞内有效成分穿过细胞的各种膜转移到细胞外的提取液中，达到了提取有效成分的目的。本发明所述提取方法采用超高压提取技术，在升压阶段使桑白皮固体粉末组织细胞内外形成超高的压力差，提取溶剂乙醇在超高压力推动下迅速渗透到桑白皮内部维管束和腺细胞内。随着压力迅速升高，桑白皮细胞体积被压缩，如果超过其形变极限，会导致桑白皮细胞破裂，细胞内的物质与溶剂接触被溶解；如果没有超过细胞的形变极限，乙醇在高压作用下，进入桑白皮粉末组织细胞内，有效成分溶解在乙醇中。在保压阶段300MPa超高压力引起体系的体积变化，推动了化学平衡的移动，溶剂的渗透、溶质的溶解快速达到平衡。随后在卸压阶段，桑白皮组织细胞的压力从几百兆帕的超高压迅速减小为常压，在反方向压力作用下，发生流体以及药物基质体积的爆破膨胀，对桑白皮粉末组织细胞的细胞壁、细胞膜、质膜、核膜、液泡、微管等形成强烈的冲击致使发生变形。如果变形超过了其变形极限，导致细胞结构出现松散、孔洞、破裂等结构变化，各种黄酮类等有效成分和乙醇溶剂充分接触，溶解了有效成分的乙醇溶液会向细胞外迅速扩散；如果在反方向压力作用下组织细胞的细胞壁的变形没有超过其变形极限(在高压作用下通透性增大)，细胞内部已经溶解了桑根酮活性成分的乙醇溶剂在高渗透压差下快速转移到细胞外，达到提取的目 向外扩散的同时产生的冲击力越强，引起的湍动效应越强烈，形成的孔洞、碎片越多，一定质量的药物基质的有效比表面会越大，有效成分扩散的传质阻力就会越小、与溶剂接触也就会更充分，提取率越高，因此卸压时间一般在几秒钟之内完成，优选为< 2s。优选的，所述超高压提取为先将桑白皮粗粉用60%乙醇浸泡4小时，之后在5min内升压至300MPa，维持8min，然后在几秒钟之内将压力降至零。优选的，本发明所述提取方法步骤I所述乙醇溶液的含水量为40%，即用体积分数为60%的乙醇提取。优选的，步骤I所述乙醇溶液的重量为桑白皮粗粉重量的6 12倍，更优选为7倍。优选的，步骤I所述浸泡的时间为3 5h，更优选为4h。本发明所述提取方法步骤2将提取液过滤所得药渣离心，离出残留其中的乙醇提取液，避免损失乙醇提取液中桑白皮黄酮成分，同时可大大降低乙醇的消耗。优选的，步骤2所述离心为在3000 5000r/min,离心10 20min,更优选为4000r/min,离心15min。优选的，步骤3所述蒸馏水体积为合并的步骤I所得滤液和步骤2所得清液浓缩至无醇味的浓缩液总体积的4飞倍，更优选为5倍。优选的，步骤3所述沉降的时间为6 10h，更优选为8h。优选的，步骤3所述离心为在2000 4000r/min,离心10 20min,更优选为3000r/min,离心 15min。本发明所述提取方法步骤3还包括纯化水洗涤浓缩液，真空干燥步骤。本发明所述桑根酮的提取方法在300MPa超高压力状态下，一次性加入所需乙醇溶剂，在密闭状态下，提取桑根酮，溶剂与桑白皮组织细胞中的有效成分充分接触溶解，并转移到提取液中，提取时间短，提取率高。而且密闭状态没有溶剂的损失，同时提取后药渣离心收集残余的乙醇，降低了有机溶媒的消耗，节约了生产成本。此外本发明所述提取方法所需温度较低，能耗低，节能环保。
具体实施例方式本发明实施例公开了一种桑根酮的提取方法。本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。本发明的方法已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文所述的方法进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。为实现本发明的目的，本发明采用如下技术方案
一种桑白皮桑黄酮G/H、桑根皮素的提取方法，包括
步骤I、取桑白皮药材2mm的粗粉，加入7 12倍重量的60% 70%乙醇，密封浸泡3飞小时，置于超高压提取设备内胆中，在常温状态下，在5min时间内压力升到300MPa，维持8min 左右，然后在2秒钟之内瞬间将压力降至为零。收集超高压提取液，将提取液过滤，滤液备用；
步骤2、将残余药渣装入过滤布袋中，300(T5000r/min，离心l(T20min，收集离心所得
清液；
步骤3、将步骤I所得滤液和步骤2所得上清液合并，60°C下回收乙醇，真空浓缩至无醇味，加入4 6倍量纯化水充分搅拌，在20 25°C下，沉降6 10小时，200(T4000r/min离心l(T20min，取沉渣，真空干燥即得。为了进一步理解本发明，下面结合实施例对本发明进行详细说明。实施例I :
取桑白皮药材f 2mm的粗粉100 g，装入药用真空复合袋中，加入7倍量60%乙醇，密封，浸泡4小时，置于超高压提取设备内胆中，在5min时间内，压力升到300MPa，维持8min左右，然后在2秒钟之内瞬间将压力降至为零。收集超高压提取液，将提取液过滤，滤液备用。将残余药渣装入100目过滤布袋中，5000r/min，离心15min，收集离心所得清液与滤液合并，60°C下回收乙醇，真空浓缩至无醇味，加入5倍量纯化水充分搅拌，在2(T25°C下，沉降8小时，3000r/min离心15min，取沉渣，真空干燥即得桑白皮提取物5. 4 g，收率为5. 4%。桑根酮含量为=35. 6%。其中桑黄酮G13. 01%,桑黄酮H9. 22%，桑根皮素13. 37%。实施例2
取桑白皮药材f 2mm的粗粉100 g，装入药用真空复合袋中，加入7倍量70%乙醇，密封，浸泡4小时，置于超高压提取设备内胆中，在5min时间内压力升到300MPa，维持8min左右，然后在2秒钟之内瞬间将压力降至为零。收集超高压提取液，将提取液过滤，滤液备用。将残余药渣装入100目过滤布袋中，5000r/min，离心15min，收集离心所得上清液与滤液合并，60°C下回收乙醇，真空浓缩至无醇味，加入5倍量纯化水充分搅拌，在2(T25°C下，沉降8小时，3000r/min离心15min，取沉渣，真空干燥即得桑白皮提取物5g，收率为5%，桑根酮含量为33. 49 %。其中桑黄酮G12. 24%，桑黄酮H8. 67%，桑根皮素12. 58%。实施例3
取桑白皮药材f 2mm的粗粉100 g，装入药用真空复合袋中，加入10倍量60%乙醇，密封，浸泡4小时，置于超高压提取设备内胆中，在5min时间内压力升到300MPa，维持8min左右，然后在2秒钟之内瞬间将压力降至为零。收集超高压提取液，将提取液过滤，滤液备用。将残余药渣装入100目过滤布袋中，5000r/min，离心15min，收集离心所得上清液与滤液合并，60°C下回收乙醇，真空浓缩至无醇味，加入5倍量纯化水充分搅拌，在2(T25°C下，沉降8小时，3000r/min离心15min，取沉渣，真空干燥即得桑白皮提取物5. 4 g，收率为5. 4%，桑根酮含量为35. 02%。其中桑黄酮G12. 8%，桑黄酮H9. 06%,桑根皮素13. 16%。实施例4
取桑白皮药材f 2mm的粗粉100 g，装入药用真空复合袋中，加入5倍量60%乙醇，密封，浸泡4小时，置于超高压提取设备内胆中，在5min时间内压力升到300MPa，维持8min左右，然后在2秒钟之内瞬间将压力降至为零。收集超高压提取液，将提取液过滤，滤液备用。将残余药渣装入100目过滤布袋中，5000r/min，离心15min，收集离心所得上清液与滤液合并，60°C下回收乙醇，真空浓缩至无醇味，加入5倍量纯化水充分搅拌，在2(T25°C下，沉降8小时，3000r/min离心15min，取沉渣，真空干燥即得桑白皮提取物5. 2 g，收率为5. 2%，桑根 酮含量为33%。其中桑黄酮G12. 06%,桑黄酮H8. 53%，桑根皮素12. 41%。实施例5
取桑白皮药材f 2mm的粗粉100 g，装入药用真空复合袋中，加入7倍量60%乙醇，密封，浸泡4小时，置于超高压提取设备内胆中，在5min时间内压力升到300MPa，维持8min左右，然后在2秒钟之内瞬间将压力降至为零。收集超高压提取液，将提取液过滤，滤液备用。将残余药渣装入100目过滤布袋中，5000r/min，离心15min，收集离心所得上清液与滤液合并，60°C下回收乙醇，真空浓缩，真空干燥即得桑白皮提取物21. 7g，收率为21. 7 %，桑根酮含量为17. 2%。其中桑黄酮G6. 29%，桑黄酮H4. 45%，桑根皮素6. 46%。实施例6
取桑白皮药材f 2mm的粗粉100 g，装入药用真空复合袋中，加入7倍量70%乙醇，密封，浸泡4小时，置于超高压提取设备内胆中，在5min时间内压力升到300MPa，维持8min左右，然后在2秒钟之内瞬间将压力降至为零。收集超高压提取液，将提取液过滤，滤液备用。将残余药渣装入100目过滤布袋中，5000r/min，离心15min，收集离心所得上清液与滤液合并，60°C下回收乙醇，真空浓缩，真空干燥即得桑白皮提取物17g，收率为17 %，桑根酮含量为15. 8%。其中桑黄酮G5. 17%,桑黄酮H3. 98%，桑根皮素6. 65%。实施例I :热回流提取方法
取桑白皮药材f 2mm的粗粉100 g，装入药用真空复合袋中，加入10倍量60%乙醇，密封，浸泡4小时，回流提取4小时，过滤，剩余药渣再加入7倍量60%乙醇回流提取4小时，过滤，合并滤液，浓缩至无醇味，加入5倍量蒸馏水洗，沉降8小时，弃去上清液，取沉渣，真空干燥即得桑白皮提取物5 g，收率为5 %，桑根酮含量为30. 56%。其中桑黄酮Gll. 17%，桑黄酮H7. 91%，桑根皮素11. 48%。以上实施例的说明只是用于帮助理解本发明的方法及其核心思想。应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以对本发明进行若干改进和修饰，这些改进和修饰也落入本发明权利要求的保护范围内。
权利要求
1.一种桑白皮桑黄酮G/H、桑根皮素的提取方法，其特征在于，包括 步骤I、取桑白皮粗粉加入乙醇溶液浸泡，然后在300MPa的真空密闭条件下超高压提取8min，收集提取液，过滤，滤液备用，所述乙醇溶液的含水量为30飞0% ； 步骤2、取过滤所得药渣离心，收集离心所得清液； 步骤3、合并步骤I所得滤液和步骤2所得清液，回收乙醇，浓缩至无醇味，加入纯化水充分搅拌，在2(T30°C下沉降，离心，取沉淀即得。
2.根据权利要求I所述提取方法，其特征在于，所述超高压提取具体为先将桑白皮粗粉用60%的乙醇常温浸泡4小时，之后在5min内升压至300MPa，维持8min，然后在几秒钟之内将压力降至零，整个提取过程是在常温下操作，无需加热。
3.根据权利要求I所述提取方法，其特征在于，步骤I所述乙醇溶液的含水量为30 50%。
4.根据权利要求I所述提取方法，其特征在于，步骤I所述乙醇溶液的用量为桑白皮粗粉重量的疒12倍。
5.根据权利要求I所述提取方法，其特征在于，步骤I所述浸泡的时间为3 5h。
6.根据权利要求I所述提取方法，其特征在于，步骤2所述离心转数为300(T5000r/min,离心时间为10 20min。
7.根据权利要求I所述提取方法，其特征在于，步骤3所述纯化水体积为合并的步骤I所得滤液和步骤2所得清液浓缩至无醇味的浓缩液总体积的4飞倍。
8.根据权利要求I所述提取方法，其特征在于，步骤3所述沉降的时间为6 10h。
9.根据权利要求I所述提取方法，其特征在于，步骤3所述离心转数为3(KKT5000r/min,离心时间为10 20min。
10.根据权利要求I所述提取方法，其特征在于，纯化水洗涤沉降后，离心，取沉淀物真空干燥。
全文摘要
本发明涉及药物化学领域，公开了一种桑白皮桑黄酮G/H、桑根皮素的提取方法。本发明所述桑白皮桑黄酮G/H、桑根皮素的提取方法在300MPa超高压力状态下，一次性加入所需乙醇溶剂，在密闭状态下，常温提取桑黄酮G/H、桑根皮素，溶剂与桑白皮组织细胞中的有效成分充分接触溶解，并转移到提取液中，提取时间短，提取率高。而且密闭状态没有溶剂的损失，同时提取后药渣离心收集残余的乙醇，降低了有机溶媒的消耗，节约了生产成本。此外本发明所述提取方法是在常温状态下进行，能耗低，节能环保。
文档编号A61P7/10GK102716190SQ20121022611
公开日2012年10月10日 申请日期2012年7月3日 优先权日2012年7月3日
发明者冯涛, 白凤英, 金爱玉 申请人:吉林省宏久生物科技股份有限公司