专利名称：一种叶酸偶联抗体药物及其制备方法与应用的制作方法
技术领域：
本发明属于生物医药领域，具体的说，涉及一种叶酸偶联抗体药物(FOLATE-GSH-IgG偶联物)、其制备方法以及其在治疗肿瘤及自身免疫性疾病中的应用。
背景技术：
叶酸(Folate)是1941年由米切尔(H. K. Mitchell)从菠菜中提取纯化的，由喋啶，对氨基苯甲酸和谷氨酸残基组成的一种水溶性B族维生素，其分子式为C19H19N7O6,化学结构式如下所示
权利要求
1. 一种FOLATE-GSH-IgG偶联物，其结构如式(I)、(II)或(III)所示
2.根据权利要求I所述的FOLATE-GSH-IgG偶联物，其特征在于，所述的IgG为IgGl、IgG2、IgG3 或 IgG4。
3.根据权利要求I所述的FOLATE-GSH-IgG偶联物，其特征在于，所述的偶联物具有式(2)- (10)之一所示的结构
4.权利要求I所述的FOLATE-GSH-IgG偶联物的制备方法，包括如下步骤 (1)、将FOLATE与轻基琥拍酰亚胺(N-hydroxysuccinimide,NHS)反应生成活化的NHS-F0LATE ； (2)、将NHS-F0LATE与GSH反应生成F0LATE-GSH，两者通过酰胺键相连； (3)、对IgGN-末端的氨基进行活化，反应式如下所示
5.权利要求I所述的FOLATE-GSH-IgG偶联物的制备方法，包括如下步骤 (1)、将FOLATE与轻基琥拍酰亚胺酯(N-hydroxysuccinimide,NHS)反应生成活化的NHS-FOLATE ； (2)、将NHS-FOLATE与GSH反应生成FOLATE-GSH，两者通过酰胺键相连； (3)、以还原剂处理IgG分子，使IgG成为具有反应活性巯基(-SH)的IgG半抗体或IgG重链；通过巯基连接物对其进行活化，所述的巯基连接物选自I，8-bis-Maleimidodiethyleneglycol (BM(PEG)2)、BM(PEG)n PEG Crosslinkers、1，4-bismaleimidobutane(ΒΜΒ)λI, 4bismaleimidyl-2, 3-dihydroxybutane (BMDB)、bismaleimidohexane (BMH)ΛBis-Maleimidoethane (BMOE)、1，4_Di_[3 ' -(2 ' -pyridyldithio)-propionamido]butane (DPDPB)、Dithio-bismaleimidoethane (DTME)、Tris [2-maleimidoethyl] amine(TMEA)及其结构类似物，反应后生成如下结构的偶联物
6.根据权利要求4-5任一项所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(I)-(4)中，步骤(3)在步骤(I)和(2)之前或与其同步进行。
7.一种药物组合物，其包含有效剂量的权利要求I所述的FOLATE-GSH-IgG偶联物和药学上可接受的载体或辅料。
8.根据权利要求24所述的药物组合物，其为冻干粉针或注射液。
9.权利要求I所述的FOLATE-GSH-IgG偶联物在制备治疗肿瘤细胞叶酸受体高表达类型肿瘤药物中的用途。
10.权利要求I所述的FOLATE-GSH-IgG偶联物在制备治疗叶酸受体高表达类型自身免疫性疾病药物中的用途。
全文摘要
本发明涉及一种FOLATE-GSH-IgG偶联物、其制备方法以及其在治疗肿瘤及自身免疫性疾病中的应用。FOLATE意指叶酸(Folate)或其类似物，将FOLATE与谷胱甘肽(GSH)通过酰胺键生成FOLATE-GSH；同时，对IgG末端的氨基进行活化，或通过将IgG还原处理为半抗体或重链抗体，这两种活化的IgG与FOLATE-GSH偶联后形成FOLATE-GSH-IgG。所述的FOLATE-GSH-IgG偶联物在叶酸受体高表达类型的癌症患者或自身免疫性疾病患者体内，能特异性地与疾病细胞表面高表达的叶酸受体结合，然后通过IgG激活抗体或补体系统介导细胞毒作用，并增强生物应答调节，而对于叶酸受体几乎无表达的正常细胞并不会产生细胞毒作用。这一发明提高了抗体药物和免疫增强剂的靶向性，解决了现有技术中癌症和自身免疫性疾病治疗药物对正常细胞的损害问题。
文档编号A61K31/519GK102827272SQ201210299910
公开日2012年12月19日 申请日期2010年11月8日 优先权日2010年11月8日
发明者刘颖, 其他发明人请求不公开姓名 申请人:武汉华耀生物医药有限公司