血必净注射液对电离辐射诱导小鼠造血损伤的保护作用的制作方法
【专利摘要】本发明涉及血必净注射液用于预防和治疗辐射诱导造血系统损伤。通过现代药理学实验证明，小鼠在受照前后注射血必净注射液，可对辐射诱导的造血系统损伤具有一定的缓解作用，提示该药物可用于治疗辐射诱导的造血系统损伤。对于放疗患者，进行血必净注射液注射治疗，有利于保护骨髓细胞功能，缓解造血系统损伤。
【专利说明】血必净注射液对电离辐射诱导小鼠造血损伤的保护作用
【技术领域】
[0001]本发明涉及血必净注射液在预防治疗辐射诱导造血系统疾病中的用途。
【背景技术】
[0002]人体中造血系统对辐射高度敏感，其辐射损伤是急性放射病中感染、除血、贫血等并发症发生的重要基础，是急性放射病预防诊治研究中的关键问题。研究表明急性放射病在接受放疗或核辐射暴露后很快发生，主要是快速增殖的造血祖细胞损伤所致，而照射对处于静止期的造血干细胞的影响程度较轻。电离辐射照射后造血功能损伤严重，形成急性骨髓抑制，由此引发的感染和出血等并发症可导致辐射暴露者较高的发病率和死亡率。
[0003]近年来研究和临床试验结果证实，机体在受到辐射照射后，只要体内残留有少量的造血干/祖细胞，就可以用各种造血生长因子刺激造血干/祖细胞增殖、分化，加速骨髓造血功能的重建，减少急性骨髓抑制的发病率和死亡率。目前已有多种造血生长因子如粒细胞集落刺激因子，粒细胞/巨噬细胞集落刺激因子，白细胞介素_3，白细胞介素11、促红细胞生成素和促血小板生成素等应用于大剂量放、化疗病人和Y射线照射所致事故性急性放射病病人的临床救治工作，但疗效有待进一步确认。
[0004]中药血必净注射液是在中医药理论指导下，从36组中药复方中筛选组方而成。该药由红花、丹参、赤芍、川穹、当归五味中药组成，临床上用于治疗呼吸系统和泌尿系统炎症及多器官功能障碍综合症等多种疾病。现代药理学研究表明，其单味红花、丹参和赤芍均可作用于细胞的凋亡通路，影响bcl-2, bax及caspase3蛋白的表达。丹参，当归和川穹有抗炎作用，能影响Cox-2酶及炎症因子IL-10，TGF-β等的表达。在治疗胃肠方面，仅有张云杰等发现血必净注射液可减轻小肠缺血再灌注所致肠黏膜损伤，尚未见血必净注射液对造血系统辐射损伤防护研究的报`道。
[0005]本发明人在实验中首次发现:血必净注射液在防治辐射诱导的造血损伤中具有明显的保护作用。
【发明内容】
[0006]本发明要解决的技术问题是寻找能够有效预防保护辐射诱导造血系统损伤的药物。
[0007]因此，本发明的目的在于提供血必净注射液在预防或治疗辐射诱导造血系统损伤中的应用。
【专利附图】
【附图说明】
[0008]图1血必净注射液对辐射暴露小鼠骨髓细胞CFU-GM能力的影响。小鼠照射剂量为2Gy。照射后分别给予生理盐水、血必净注射液(0.4ml/kg，)，每处理组5只，所有小鼠在照射前给药3天，照射后继续给药5天。照射6天后，取骨髓细胞，进行CFU-GM能力检测。结果表明血必净注射液对小鼠骨髓细胞的克隆形成能力有显著保护作用。[0009]图2血必净注射液对辐射暴露小鼠存活率的影响(9Gy)。前期利用ICR雄性小鼠，建立了辐射诱导肠道损伤模型。照射剂量为9Gy，剂量率为0.73Gy/min。血必净组ICR小鼠建模后腹腔注射0.4mg/kg血必净注射液，每日一次，持续8天。观察ICR小鼠15天生存率，血必净可显著提高小鼠15d生存率，表明血必净注射液对小鼠肠道辐射损伤有防护作用。
【具体实施方式】
[0010]血必净注射液在预防和治疗辐射诱导造血系统损伤中的应用。所述的辐射诱导造血系统损伤，包括:接受放射治疗的肿瘤患者、辐射暴露的工作人员、意外辐射性同位素暴
露人员。
[0011]本发明所述的造血系统损伤，包括外周血白细胞下降、骨髓增生不良或再生障碍性贫血等。
[0012]本发明对辐射诱导造血系统损伤的实验内容主要包括以下几个方面:
[0013]1.血必净注射液可显著提高全身照射的小鼠生存率
[0014]2.血必净注射液对接收全身照射的小鼠造血系统功能损伤有保护作用
[0015]下面通过药效学 实验进一步说明血必净注射液在预防或治疗辐射诱导造血系统损伤作用的药理实验情况。
[0016]一、实验方法
[0017]1、骨髓单个核细胞分离
[0018]无菌取小鼠股骨，含2% FCS的Hanks液冲洗骨髓，Ficoll分离，制备单个核细胞悬液，洗涤，计数调整所需的细胞浓度后待用。
[0019]2、集落形成(克隆)能力测定
[0020]分装甲基纤维素培养基，_20°C保存。用前置于2-8°C冰箱内或室温下解冻；分离小鼠骨髓细胞，胎盘蓝染色计数细胞调整细胞浓度加入M3534，振荡器充分混匀，静置待气泡消失，用3ml注射器连接16#平头注射器针头，加入24孔板放入湿盒，置入37°C，5% C02培养箱中培养14天。
[0021]从培养第5天开始在倒置显微镜下进行观察。低倍观察集落形成情况，细胞数^ 30为阳性集落，集落形成率以每105个细胞形成的集落数表示。
[0022]3、外周血常规参数测定小鼠照射后第6日，小鼠称重，眼球取血200 μ 1，EDTA-K3抗凝，用三分类血细胞计数仪测定外周血白细胞数(WBC)、红细胞数(RBC)、血红蛋白含量(HGB)、血小板计数(PLT)等指标。
[0023]4、全身照射小鼠生存率测定全身照射后，定期称重，每日观察小鼠死亡情况。
[0024]二、实验结果与讨论
[0025]1、血必净注射液对辐射暴露小鼠外周血计数的影响
[0026]小鼠按照射剂量为2Gy，分为三组，5只/组。照射前后分别给予生理盐水、血必净注射液(0.4ml/kg，)，腹腔注射，照射前给药3天，照射后连续给药5天。照射后第6天，取骨髓细胞及外周血。结果发现如表1所示，2Gy照射对小鼠外周血白细胞计数有抑制作用，而血必净注射液在2Gy照射后对小鼠外周血白细胞有明显的保护作用，与照射组相比，P < 0.05.[0027]表1血必净注射液对受照小鼠外周血的影响
[0028]
【权利要求】
1.血必净注射液在治疗和预防辐射诱导造血系统损伤中的应用。
2.在权利要求1所述的应用，其中所述辐射诱导的造血系统损伤，包括接受放射治疗的肿瘤患者、辐射暴露的工作人员、意外辐射性同位素暴露的人员。
3.在权利要求1所述的应用，其特征在于所述的造血系统损伤，包括外周血白细胞下降、骨髓增生不良或再生障碍性贫血 等造血系统疾病。
【文档编号】A61P7/06GK103800454SQ201210458076
【公开日】2014年5月21日 申请日期:2012年11月15日 优先权日:2012年11月15日
【发明者】李德冠, 姚小青, 孟爱民, 王月英, 吴红英, 路璐, 王小春, 王营营, 常建辉 申请人:中国医学科学院放射医学研究所, 天津红日药业股份有限公司