一种中药组合物及其应用的制作方法
【专利摘要】本发明提供了一种中药提取物组合物，按重量百分比由丹参提取25%-30%、黄芪提取物35%-40%、三七提取物30%-35%、芦荟提取物2-5%组成。各提取物分别以丹参、黄芪、三七、芦荟做原料，药材经拣选、清洗、干燥、粉碎成粗颗粒，用纯化水或食用酒精回流提取，滤液流经苯乙烯型非极性或弱极性大孔吸附树脂洗脱，超滤，减压浓缩、干燥粉碎即得。本发明的中药组合物具有治疗心血管疾病的同时，治疗其便秘、免疫低下的并发症，且组合物中各提取物成分的配伍达到了协同增效的效果。
【专利说明】一种中药组合物及其应用
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种治疗心血管疾病及免疫低下和便秘并发症的药物，具体说是以中药材丹参、黄芪、三七、芦荟为原料制备的提取物组成的组合物，可以制成颗粒剂、胶囊剂、散剂、丸剂等剂型，属中药制剂领域。
【背景技术】
[0002]心血管疾病严重危害人类健康。目前治疗心血管疾病的中药制剂较多，多数为:活血化瘀类、血管扩张剂类、开窍类、治疗性血管新生剂类的中药材组合物、中药提取物组合物或中药有效成分，但都仅针对心血管疾病本身的治疗。
[0003]心血管疾病的发病机理是多因素的，它会伴随很多并发症，同时这些并发症也会促进心血管疾病本身的加重和恶性进展，严重影响患者生活质量，并可能导致心血管事件的提前发生，比如:便秘、免疫低下。
[0004]心血管疾病患者排大便时因腹内压急剧升高，反射性影响心率及冠状动脉血流量，诱发或加重病情，甚至导致不可逆的死亡。因此心血管患者治理好便秘的并发症非
常重要。
[0005]冠心病的发病机理与机体免疫应答和免疫调节紊乱密切相关。个体对炎症刺激的强烈(应答)反应，免疫功能紊乱造成免疫病理损伤，使血管内皮细胞增生及血小板聚集，促进微血栓形成 ，并可介导和扩大内毒素的多种生物作用，加重免疫调节网络失衡，直接地引起血管内皮细胞、多种细胞因子的相互作用而导致免疫病理损伤可能是其重要因素。冠心病的发病机理是多因素综合的结果，与机体体液免疫功能密切相关。因此，冠心病患者适时给予免疫调节治疗，对阻止血管内皮细胞免疫病理损伤的形成具有重要意义。
[0006]心血管疾病和其常见并发症便秘、免疫低下是互相影响的，有互相促进的。因而，在治疗心血管疾病的同时必须关注和加强对并发症便秘、免疫低下的治疗；在对症治疗便秘、免疫低下并发症时，也不可忽视对心血管疾病的根治。
[0007]然而，还没有一种治疗心血管疾病的同时，能够治疗免疫低下、便秘并发症的中药制剂开发上市。。
【发明内容】
[0008]本发明的目的在于提供一种新的以丹参、黄芪、三七、芦荟为原料制备的具有治疗心血管疾病及便秘、免疫低下并发症中药提取物组合物，可以制成颗粒剂、胶囊剂、散剂、丸剂等剂型。
[0009]本发明的另一目的在于证明上述中药提取物组合物比单独应用丹参提取物、黄芪提取物、三七提取物、芦荟提取物治疗心血管疾病及便秘、免疫低下并发症效果要好，起到协同增效的有益效果。
[0010]本发明提出的复方丹芪提取物，按重量百分比组分有丹参提取物25%-30%、黄芪提取物35%-40%、三七提取物30%-35%、芦荟提取物2_5%组成。
[0011]本发明提出的丹参、黄芪、三七、芦荟的生产制备方法是以分别以丹参、黄芪、三七、芦荟做原料，药材经拣选、清洗、干燥、粉碎成粗颗粒，用纯化水或食用酒精回流提取，用大孔吸附树脂法、超滤法进行精制，所得的活性成分纯度高，杂质去除率高。本发明提供的组分配方合理，使人体对其中的药用活性成分能更好地吸收。其特征在于制备步骤如下:
(1)丹参提取物的制备:将丹参拣选、洗净、烘干、粉碎成粗颗粒，用60%-80%的食用酒精进行回流提取三次，溶剂用量为10-8倍药材量，每次1.5小时，过滤，滤液减压浓缩至相对密度为1:1.15±0.05，加水稀释至5倍药材量，滤过，滤液流经苯乙烯型非极性或弱极性大孔吸附树脂，用2-3倍柱体积量纯化水洗涤树脂，再用2-4倍柱体积量的50%-90%的乙醇洗脱，收集洗脱液，超滤，滤液减压浓缩至相对密度1:1.20±0.05，真空干燥，粉碎成过100目筛的细粉，即得所用丹参提取物；
(2)黄芪提取物的制备:将黄芪拣选、洗净、烘干、粉碎成粗颗粒，用纯化水回流提取两次，溶剂用量为10-8倍药材量，每次2小时，过滤，滤液减压浓缩至相对密度为1: 1.15±0.05，加乙醇两次沉淀，沉淀加水稀释至5倍药材量，滤过，滤液流经苯乙烯型非极性或弱极性大孔吸附树脂，用2-4倍柱体积量的20%-50%的乙醇洗脱，收集洗脱液，超滤，滤液减压浓缩至相对密度1:1.10-1.15，加乙醇至含醇量90%，收集沉淀，真空干燥，粉碎成过100目筛的细粉，即得所用黄芪提取物；
(3)三七提取物的制备:将三七拣选、洗净、烘干、粉碎成粗颗粒，用60%-80%的食用酒精进行回流提取三次，溶剂用量为10-8倍药材量，每次1.5小时，过滤，滤液减压浓缩至相对密度为1:1.15±0.05，加水稀释至5倍药材量，滤过，滤液流经苯乙烯型非极性或弱极性大孔吸附树脂，用水洗涤树脂至流出液Molich反应阴性，再用2-5倍柱体积量的50%-90%的乙醇洗脱，收集洗脱液，加入1%活性炭，回流加热0.5小时，冷却至室温后，超滤，滤液减压浓缩至相对密度1:1.20±0.05，真空干燥，粉碎成过100目筛的细粉，即得所用三七提取物；
(4)芦荟提取物的制备:将芦荟拣选、洗净、烘干、粉碎成粗颗粒，用30%-70%的食用酒精进行回流提取两次，溶剂用量为15-10倍药材量，每次I小时，过滤，滤液减压浓缩至相对密度为1:1.15±0.05，加水稀释至5倍药材量，滤过，滤液流经苯乙烯型非极性或弱极性大孔吸附树脂，以水为洗脱剂洗脱至流出液Molich反应阴性，收集水洗脱液另行处理，树脂柱再用2-5倍柱体积量的50%-90%的乙醇洗脱，收集洗脱液，两种洗脱液过滤后，分别减压浓缩至相对密度1: 1.20±0.05，真空干燥，粉碎成过100目筛的细粉，即得所用芦荟提取物；
(5)复方丹芪提取物的制备:将丹参提取物、黄芪提取物、三七提取物、芦荟提取物按比例称量配料，混合均匀，制成组合物，每100g组合物含丹参素> 326mg、三七总皂苷^ 2255mg、芦荟苷> 3Imgo该组合物可制成颗粒剂、胶囊剂、散剂、丸剂等剂型。
[0012]本发明提供的复方丹芪提取物组合物能够在治疗心血管疾病的同时，治疗便秘、免疫低下的并发症，且各组分的配伍起到了协同增效的作用。
【具体实施方式】[0013]实施例1:复方丹芪提取物组合物的制备。
[0014](I)丹参提取物的制备:取经拣选、洗净、烘干、粉碎成粗颗粒的丹参200kg，用70%的食用酒精进行回流提取三次，每次1.5小时，溶剂用量依次为2000L、1800L、1800L，过滤，滤液减压浓缩至相对密度为1:1.142，加水稀释至1000L，滤过，滤液流经苯乙烯型非极性或弱极性大孔吸附树脂，用2倍柱体积量纯化水洗涤树脂，再用4倍柱体积量的60%乙醇洗脱，收集后3倍量的洗脱液，超滤，滤液减压浓缩至相对密度1: 1.184，真空干燥，粉碎成过100目筛的细粉，即得所用丹参提取物。
[0015](2)黄芪提取物的制备:取经拣选、洗净、烘干、粉碎成粗颗粒的黄芪200kg，用纯化水回流提取两次，每次2小时，溶剂用量依次为2000LU800L，过滤，滤液减压浓缩至相对密度为1:1.136，加3倍量乙醇沉淀，沉淀加水过滤，浓缩至相对密度为1:1.165，加6倍量乙醇沉淀，沉淀加水稀释至1000L，滤过，滤液流经苯乙烯型非极性或弱极性大孔吸附树脂，用4倍柱体积量的30%乙醇洗脱，收集后3倍量的洗脱液，超滤，滤液减压浓缩至相对密度1:1.130，加乙醇至含醇量90%，收集沉淀，真空干燥，粉碎成过100目筛的细粉，即得所用黄芪提取物。
[0016](3)三七提取物的制备:取经拣选、洗净、烘干、粉碎成粗颗粒的优质三七200kg，用70%的食用酒精进行回流提取三次，每次1.5小时，溶剂用量依次为2000L、1800L、1800L,过滤，滤液减压浓缩至相对密度为1:1.146，加水稀释至至1000L，滤过，滤液流经苯乙烯型非极性或弱极性大孔吸附树脂，用水洗涤树脂至流出液Molich反应阴性，再用5倍柱体积量的70%乙醇洗脱，收集后4倍量的洗脱液，加入1%活性炭，回流加热0.5小时，冷却至室温后，超滤，滤液减压浓缩至相对密度1:1.226，真空干燥，粉碎成过100目筛的细粉，即得所用三七提取物。
[0017](4)芦荟提取物的制备:取经拣选、洗净、烘干、粉碎成粗颗粒的芦荟200kg，用50%的食用酒精进行回流提取两次，每次I小时，溶剂用量依次为2400L、2000L，过滤，滤液减压浓缩至相对密度为1:1.160，加水稀释至1000L，滤过，滤液流经苯乙烯型非极性或弱极性大孔吸附树脂，以水为洗脱剂洗脱至流出液Molich反应阴性，收集水洗脱液另行处理，树脂柱再用4倍柱体积量的60%乙醇洗脱，收集洗脱液，两种洗脱液过滤后，分别减压浓缩至相对密度1:1.212，真空干燥，粉碎成过100目筛的细粉，即得所用芦荟提取物。
[0018](5)复方丹芪提取物的制备:按比例称量将丹参提取物26kg、黄芪提取物37kg、三七提取物34kg、芦荟提取物3kg，混合均匀，即得每100g含丹参素> 326mg、总皂苷≥2255mg、芦荟苷 ≤31mgο
[0019]实验例2:
实施例1所得复方丹芪提取物组合物对心气虚小鼠保护作用的研究 实验材料
1、实验动物:昆明种小鼠，雌雄兼用，体重为(20±2)g，合格证号:SCXK(沪)2003-0003，由上海斯莱克实验动物有限责任公司提供；
2、药品与试剂
受试药:丹参提取物(按实施例1步骤I方法制备所得)、黄芪提取物(按实施例1步骤2方法制备所得)、三七提取物(按实施例1步骤3方法制备所得)、芦荟提取物(按实施例I步骤4方法制备所得)、丹参提取物+三七提取物(按实施例1步骤I方法制得所得的丹参提取物与按实施例1步骤3方法制备所得三七提取物，按照重量比例为13:17混合均匀制得)、复方丹芪提取物(实施例1制备所得);
试剂:心得安(常州康普药业)，垂体后叶素注射液(沈阳济世制药有限公司)，SOD (超氧化物歧化酶)试剂盒(南京建成生物工程研究所)，MDA (丙二醛)试剂盒(南京建成生物工程研究所)，LDH (乳酸脱氢酶)试剂盒(南京建成生物工程研究所)，CK (肌酸激酶)试剂盒(南京建成生物工程研究所)。
[0020]实验方法和结果 建立小鼠心气虚模型
昆明种小鼠80只，随机分为8组，正常组、模型组、丹参提取物组、黄芪提取物组、三七提取物组、芦荟提取物组、丹参提取物+三七提取物组、复方丹芪提取物组。除正常组常规饲养外其余各组小鼠处理如下:
实验全过程连续控食(24d)，每只小鼠每日喂饲料75g/kg体重；
每日强迫负重(按小鼠自身重量5%计算)连续游泳IOmin ；
实验20d后，每日灌服心得安溶液0.5ml (含心得安lmg/ml)，连续用药4d;
造模第23d空腹注射垂体后叶素0.2ml (5U/ml)；
造模24d后，观察造模小鼠体重减轻，精神萎靡，皮毛槁枯，呼吸频率加快，游泳时间缩短，心率加快，显示造模成功；
造模成功后，正常组合模型组每日灌胃等容积蒸馏水，其余各组小鼠每日灌胃相应药物300mg/kg,连续给药14d。`
[0021]检测指标
实验结束后，小鼠断头处死，立即取心脏，置于4°C生理盐水中洗去残血，并用滤纸吸干，制成10%心肌生理盐水匀浆后离心被测。按照试剂盒操作法测定小鼠心肌匀浆中S0D、MDA、CK、LDH。
[0022]结果
上述实验结果以均值土标准偏差(X土s)表示，统计学检验采用组间比较t检验，结果见表1。
[0023]表1各组小鼠心肌匀浆中SOD、MDA、CK及LDH值变化Cris) (n=10)
【权利要求】
1.一种中药组合物，其特征在于，所述组合物按重量百分比由丹参提取物25%-30%、黄芪提取物35%-40%、三七提取物30%-35%、芦荟提取物2_5%组成，其中各提取物的制备方法如下: (1)丹参提取物的制备:将丹参拣选、洗净、烘干、粉碎成粗颗粒，用60%-80%的食用酒精进行回流提取三次，溶剂用量为10-8倍药材量，每次1.5小时，过滤，滤液减压浓缩至相对密度为1:1.15±0.05，加水稀释至5倍药材量，滤过，滤液流经苯乙烯型非极性或弱极性大孔吸附树脂，用2-3倍柱体积量纯化水洗涤树脂，再用2-4倍柱体积量的50%-90%的乙醇洗脱，收集洗脱液，超滤，滤液减压浓缩至相对密度1:1.20±0.05，真空干燥，粉碎成过100目筛的细粉，即得所用丹参提取物； (2)黄芪提取物的制备:将黄芪拣选、洗净、烘干、粉碎成粗颗粒，用纯化水回流提取两次，溶剂用量为10-8倍药材量，每次2小时，过滤，滤液减压浓缩至相对密度为1: 1.15±0.05，加乙醇两次沉淀，沉淀加水稀释至5倍药材量，滤过，滤液流经苯乙烯型非极性或弱极性大孔吸附树脂，用2-4倍柱体积量的20%-50%的乙醇洗脱，收集洗脱液，超滤，滤液减压浓缩至相对密度1:1.10-1.15，加乙醇至含醇量90%，收集沉淀，真空干燥，粉碎成过100目筛的细粉，即得所用黄芪提取物； (3)三七提取物的制备:将三七拣选、洗净、烘干、粉碎成粗颗粒，用60%-80%的食用酒精进行回流提取三次，溶剂用量为10-8倍药材量，每次1.5小时，过滤，滤液减压浓缩至相对密度为1:1.15±0.05，加水稀释至5倍药材量，滤过，滤液流经苯乙烯型非极性或弱极性大孔吸附树脂，用水洗涤树脂至流出液Molich反应阴性，再用2-5倍柱体积量的50%-90%的乙醇洗脱，收集洗脱液，加入1%活性炭，回流加热0.5小时，冷却至室温后，超滤，滤液减压浓缩至相对密度1: 1.20±0.05，真空干燥，粉碎成过100目筛的细粉，即得所用三七提取物； (4)芦荟提取物的制备:将芦荟拣选、洗净、烘干、粉碎成粗颗粒，用30%-70%的食用酒精进行回流提取两次，溶剂用量为15-10倍药材量，每次I小时，过滤，滤液减压浓缩至相对密度为1:1.15±0.05，加水稀释至5倍药材量，滤过，滤液流经苯乙烯型非极性或弱极性大孔吸附树脂，以水为洗脱剂洗脱至流出液Molich反应阴性，收集水洗脱液另行处理，树脂柱再用2-5倍柱体积量的50%-90%的乙醇洗脱，收集洗脱液，两种洗脱液过滤后，分别减压浓缩至相对密度1:1.20±0.05，真空干燥，粉碎成过100目筛的细粉，即得所用芦荟提取物。
2.按权利要求1所述的组合物，其特征在于，每100g组合物含丹参素≤326mg、三七总皂苷≤2255mg、芦荟苷≤3Imgο
3.权利要求1或2所述的组合物和药学上可接受的任何载体制成的颗粒剂。
4.权利要求1或2所述的组合物和药学上可接受的任何载体制成的胶囊剂。
5.权利要求1或2所述的组合物和药学上可接受的任何载体制成的散剂。
6.权利要求1或2所述的组合物和药学上可接受的任何载体制成的丸剂。
7.权利要求1-6所述之一的中药组合物在制备治疗具有便秘、免疫低下并发症的心血管疾病的药物中的应用。
【文档编号】A61P37/04GK103860818SQ201210540614
【公开日】2014年6月18日 申请日期:2012年12月14日 优先权日:2012年12月14日
【发明者】陶俊, 王征, 唐昌娟, 孙仁弟, 葛宝铭 申请人:上海绿谷制药有限公司, 上海绿谷生命园医药有限公司, 绿谷（集团）有限公司