专利名称：血芝-香菇柄固态发酵复合物、其制备方法及其用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及血芝珍稀真菌以及香菇菌柄废弃物资源化开发的综合利用技术领域。
背景技术：
血芝(Amauroderma rude (berk))，即皱盖假芝，别名皱盖乌芝，灵芝科假芝属(Amauoderma Murr)真菌。幼嫩子实体白色,被损伤时由伤口处分泌血样液体,故又名血芝，自古以来，就作为玄芝入药，被认为具有延年益寿的功能。在申报人过往研究及专利(血芝的液体发酵方法及获得的产品，ZL200310109602.2)中，血芝已表现出确定的生物活性，血芝在自然界中生长于腐木，其分解固态纤维质的能力较强，在本实验室进行的主要农业废弃物分解对比中，血芝与侧耳类均属于长速最快的大型真菌类群。香菇是我国栽培面积较大、生产栽培技术成熟、经济效益比较好的一种食用菌，也是我国目前栽培面积最大的四种主要食用菌之一。食用菌在人民日常生活及经济生活中均具有重要地位，香菇产业已成为扶贫开发片区中的主要支柱产业。在其加工商品化过程中，须剪去菇柄(占菇体重量近30%)，仅此我国每年就会产生数十万吨的香菇柄，但菇柄纤维化程度高，难以食用，目前基本废弃，这部分资源是巨大。菇柄和子实体同样是由菌丝体分化形成，富含有效的生物活性成分，尤其香菇多糖，有研究发现，香菇多糖有抗氧化及提高免疫力的功效；还可促进胆固醇代谢而降低其在血清中的含量，还具有降血脂、增加冠状动脉血流量的作用，对高血压和心脑血管病具有良好的预防和治疗功能。因此是一种很好的菌类多糖的来源。香菇柄的资源化开发是业内热点问题。目前，香菇柄的利用报道都集中在粉碎和超声波提取方法方面，没有利用药用真菌通过固态发酵技术生物利用香菇柄开发功能制剂的有关报道。
发明内容
`
本发明要解决的技术问题是提供一种血芝-香菇柄固态发酵复合物，具有抗衰老、抗氧化功效，可实现对香菇柄的高效利用；本发明同时提供血芝-香菇柄固态发酵复合物的制备方法及其用途。为解决上述技术问题，本发明所采取的技术方案如下。血芝-香燕柄固态发酵复合物,其以香燕柄为培养基对血芝进行发酵培养,获得培养基与培养物的复合物，其包含经分解的香菇柄及血芝混合物。上述血芝-香菇柄固态发酵复合物的制备方法，其征步骤包括:A、菌种的复壮筛选与扩繁培养:生产季节前，采用含有香菇柄的筛选培养基获取优良血芝菌种，并大量扩繁试管备用；B、发酵培养:取无霉变香菇菌柄烘干、粉碎，按重量比取香菇柄83%,无霉变麸皮15%，蔗糖2%，按料水比1:1.2拌匀，2/3量装入玻璃瓶或聚丙烯塑料袋，白市布扎紧，灭菌；无菌条件下接入步骤A所得菌种，固态发酵，静置培养，温度控制在26-30°C，血芝菌丝发满瓶/袋后，变温至25°C散射光条件下培养7天，观察瓶/袋表面出现血样分泌物后，即得血芝-香菇柄固态发酵复合物；C、后处理:血芝-香菇柄固态发酵复合物经粉碎后，35-40°C烘干3小时，45-50°C烘干3小时，55-60°C烘干I小时，再粉碎并过20-40_筛，装袋备用，避光保存。
作为上述制备方法的一种优选技术方案，步骤A的的具体操作方法为:A-1、菌种的复壮筛选:生产季节前，首先进行血芝生产菌株的复壮筛选，筛选培养基配方采用:按重量比计，香菇柄细粉2%、葡萄糖2%、玉米粉1%、豆饼粉1%、KH2PO40.1%、MgSO4.7H200.1%，水余量，pH自然；筛选培养工艺采用:将菌种标记接种至培养器皿，28°C避光下液体培养5天后，再降温至25 °C散射光条件下静置培养3-7天，挑选首先在气生菌丝表面分泌形成血样分泌物的对应菌株，作为出发菌株，大量扩繁试管备用；A-2、扩繁培养:扩繁用培养基按重量比计组成为:土豆120份，麦麸50份，香菇柄30份，上述三物料经煮沸后过滤，取滤液，加入葡萄糖20份、琼脂20份，最后加蒸馏水定容至1000份，即得。作为上述制备方法的一种优选技术方案，步骤B的的具体操作方法为:B-1、香菇柄的初选:挑选无霉变香菇柄，去除香菇柄中的杂物；B-2、香菇柄的清洗:将香菇柄用流动水清洗干净；13_3、香燕柄的干燥:60°C干燥5小时；B-4、香菇柄的粉碎:用粉碎机粉碎并过筛，筛孔尺寸20_40mm ；B-5、固态发酵培养基的配料:按重量比计香菇菌柄83%，无霉变麸皮15%，2%蔗糖，料水比1:1.2，拌匀，批式操作每次拌料200公斤，堆闷30分钟；B-6、装料及灭菌:2/3量装入玻璃瓶或聚丙烯塑料袋，瓶/袋口用白市布外覆牛皮纸扎紧，0.1MPa灭菌2小时；B-7、菌种接种:上步所得固态发酵培养基在无菌室中冷却至30°C，无菌操作接种步骤A所得菌种；每支试管接4瓶/袋；B-8、发酵培养:静置培养,固态发酵温度控制在26-30 °C,血芝菌丝发满瓶/袋后，变温至25°C散射光条件下培养7天，观察瓶/袋表面出现血样分泌物后，即得血芝-香菇柄固态发酵复合物。作为上述制备方法的一种优选技术方案，步骤C的的具体操作方法为:C-1、血芝-香菇柄固态发酵复合物及时粉碎，装盘后放在烤架上，送入烘干室进行烘烤，摆放8 10层，每层间距15-25cm厘米，烘干室温度升到35_40°C时，入室烘干3小时；烘干时先低温，然后逐渐升高温度；45-50°C烘干3小时，55-60°C烘干I小时；C-2、烘干后立即粉碎并过20_40mm筛，马上装入不透气的包装袋，以防吸潮引起发霉变质，包装后的产品放在干燥环境中贮存。上述血芝-香燕柄固态发酵复合物的一种用途:A、取血芝-香菇柄固态发酵复合物，按重量比配加大枣、茯苓、黄芪、酸枣仁、罗汉果，比例100:1:1:1:0.1:0.1，再按照料液比1:5加入蒸馏水或软化水，得混合液；B、浸提提取:步骤A所得混合液在45_55°C、0.06兆帕条件下浸提20分钟，过滤得第一次浸提液；滤渣加首次提取水量，同条件下浸提20分钟，过滤得第二次浸提液，滤渣弃去，合并两次浸提液，得终提液；C、灌装与保存:无菌灌装，低温避光保存。
上述血芝-香菇柄固态发酵复合物的另一种用途:A、取血芝-香菇柄固态发酵复合物，按重量比配加大枣、茯苓、黄芪、酸枣仁、罗汉果，比例100:1:1:1:0.1:0.1，再按照料液比1:5加入蒸馏水或软化水，得混合液；B、超声提取:步骤A所得混合液在45_55°C、超声波功率300W条件下，提取8min/批次，共两次，过滤得第一次提取液，滤渣加首次提取水量，同条件下提取，过滤得第二次提取液，滤渣弃去，合并两次提取液，得终提液；C、灌装与保存:无菌灌装，低温避光保存。采用上述技术方案所产生的有益效果在于:本发明采用血芝-香菇柄固态发酵技术，利用药用真菌血芝的纤维素分解能力，不仅有助于香菇柄香菇多糖等功能因子的释放，还配合其自身血芝合成次生代谢产物、包括其多糖的生物合成能力，丰富发酵产物体系的功效物质构成；血芝固态发酵法属于生物技术分解利用，分解与合成相辅，产物比单一香菇柄水提更为丰富，所得复合物具有更好的抗衰老、抗氧化功效，是对香菇柄这种废弃物的生物技术深加工开发。以下试验数据显示了本发明的有益效果。试验1、本发明对血芝菌种进行了复壮筛选，采用能够形成血样分泌物的对应菌株，在本发明的培养条件下，经复壮筛选出的菌丝的营养生长速度快于不形成血样分泌物之菌株，可缩短其固体发酵培养周期；并且，形成血样分泌物的对应菌株发酵产物比未形成血样分泌物之菌株丰富。250mL三角瓶、装液量IOOmU 28 V避光下液体培养5天后，再降温至25 °C散射光条件下静置培养，挑选首先在气生菌丝表面分泌形成血样分泌物的对应菌株，作为出发菌株，以未出现血样分泌物的菌株为对照。试验结果见表1、2。
`
表I不同血芝菌株母种培养阶段生长对比
权利要求
1.芝-香燕柄固态发酵复合物，其特征在于:以香燕柄为培养基对血芝进行发酵培养，获得培养基与培养物的复合物，其包含经分解的香菇柄及血芝混合物。
2.权利要求1所述血芝-香菇柄固态发酵复合物的制备方法，其特征步骤包括: A、菌种的复壮筛选与扩繁培养:生产季节前，采用含有香菇柄的筛选培养基获取优良血芝菌种，并大量扩繁试管备用； B、发酵培养:取无霉变香菇菌柄烘干、粉碎，按重量比取香菇柄83%，无霉变麸皮15%，蔗糖2%，按料水比1: 1.2拌匀，2/3量装入玻璃瓶或聚丙烯塑料袋，白市布扎紧，灭菌；无菌条件下接入步骤A所得菌种，固态发酵，静置培养，温度控制在26-30°C，血芝菌丝发满瓶/袋后，变温至25°C散射光条件下培养7天，观察瓶/袋表面出现血样分泌物后，即得血芝-香菇柄固态发酵复合物； C、后处理:血芝-香菇柄固态发酵复合物经粉碎后，35-40°C烘干3小时，45-50°C烘干3小时，55-60°C烘干I小时，再粉碎并过20-40mm筛，装袋备用，避光保存。
3.根据权利要求2所述的血芝-香菇柄固态发酵复合物的制备方法，其特征在于:步骤A的的具体操作方法为: Α-l、菌种的复壮筛选:生产季节前，首先进行血芝生产菌株的复壮筛选，筛选培养基配方采用:按重量比计，香菇柄细粉2%、葡萄糖2%、玉米粉1%、豆饼粉1%、KH2PO40.1%、MgSO4.7H200.1%，水余量，pH自然；筛选培养工艺采用:将菌种标记接种至培养器皿，28°C避光下液体培养5天后，再降温至25 °C散射光条件下静置培养3-7天，挑选首先在气生菌丝表面分泌形成血样分泌物的对应菌株，作为出发菌株，大量扩繁试管备用； A-2、扩繁培养:扩繁用培养基按重量比计组成为:土豆120份，麦麸50份，香菇柄30份，上述三物料经煮沸后过滤，取滤液，加入葡萄糖20份、琼脂20份，最后加蒸馏水定容至1000份，即得。
4.根据权利要求2所述的血芝-香菇柄固态发酵复合物的制备方法，其特征在于:步骤B的的具体操作方法为: B-1、香菇柄的初选:挑选无霉变香菇柄，去除香菇柄中的杂物； B-2、香菇柄的清洗:将香菇柄用流动水清洗干净； B-3、香燕柄的干燥:60°C干燥5小时； B-4、香菇柄的粉碎:用粉碎机粉碎并过筛，筛孔尺寸20-40mm ； B-5、固态发酵培养基的配料:按重量比计香菇菌柄83%，无霉变麸皮15%，2%蔗糖，料水比1: 1.2，拌匀，批式操作每次拌料200公斤，堆闷30分钟； B-6、装料及灭菌:2/3量装入玻璃瓶或聚丙烯塑料袋，瓶/袋口用白市布外覆牛皮纸扎紧，0.1MPa灭菌2小时； B-7、菌种接种:上步所得固态发酵培养基在无菌室中冷却至30°C，无菌操作接种步骤A所得菌种；每支试管接4瓶/袋； B-8、发酵培养:静置培养，固态发酵温度控制在26-30°C，血芝菌丝发满瓶/袋后，变温至25°C散射光条件下培养7天，观察瓶/袋表面出现血样分泌物后，即得血芝-香菇柄固态发酵复合物。
5.根据权利要求2所述的血芝-香菇柄固态发酵复合物的制备方法，其特征在于:步骤C的的具体操作方法为:c-ι、血芝-香菇柄固态发酵复合物及时粉碎，装盘后放在烤架上，送入烘干室进行烘烤，摆放8 10层，每层间距15-25cm厘米，烘干室温度升到35_40°C时，入室烘干3小时；烘干时先低温，然后逐渐升高温度；45-50°C烘干3小时，55-60°C烘干I小时； C-2、烘干后立即粉碎并过20-40mm筛，马上装入不透气的包装袋，以防吸潮引起发霉变质，包装后的产品放在干燥环境中贮存。
6.权利要求1所述的血芝-香菇柄固态发酵复合物的用途，其特征在于:用作食品、饮料、药用辅料的基础原料或添加物。
7.根据权利要求6所述的血芝-香菇柄固态发酵复合物的用途，其特征在于: A、取血芝-香菇柄固态发酵复合物，按重量比配加大枣、茯苓、黄芪、酸枣仁、罗汉果，比例100:1:1:1:0.1:0.1，再按照料液比1:5加入蒸馏水或软化水，得混合液； B、浸提提取:步骤A所得混合液在45-55°C、0.06兆帕条件下浸提20分钟，过滤得第一次浸提液；滤渣加首次提取水量，同条件下浸提20分钟，过滤得第二次浸提液，滤渣弃去，合并两次浸提液，得终提液； C、灌装与保存:无菌灌装，低温避光保存。
8.根据权利要求6所述的血芝-香菇柄固态发酵复合物的用途，其特征在于: A、取血芝-香菇柄固态发酵 复合物，按重量比配加大枣、茯苓、黄芪、酸枣仁、罗汉果，比例100:1:1:1:0.1:0.1，再按照料液比1:5加入蒸馏水或软化水，得混合液； B、超声提取:步骤A所得混合液在45-55°C、超声波功率300W条件下，提取8min/批次，共两次，过滤得第一次提取液，滤渣加首次提取水量，同条件下提取，过滤得第二次提取液，滤渣弃去，合并两次提取液，得终提液； C、灌装与保存:无菌灌装，低温避光保存。
全文摘要
本发明公开了一种血芝-香菇柄固态发酵复合物、其制备方法及其用途。血芝-香菇柄固态发酵复合物是以香菇柄为培养基对血芝进行发酵培养，获得培养基与培养物的复合物，其包含经分解的香菇柄及血芝混合物。血芝-香菇柄固态发酵复合物的基本制备方法包括A-1、菌种的复壮筛选；A-2、扩繁培养；B-1、香菇柄的初选；B-2、香菇柄的清洗；B-3、香菇柄的干燥；B-4、香菇柄的粉碎；B-5、固态发酵培养基的配料；B-6、装料及灭菌；B-7、菌种接种；B-8、发酵培养；C、后处理。本发明所得复合物具有更好的抗衰老、抗氧化功效，是对香菇柄这种废弃物的高效深加工开发技术。
文档编号A61K36/06GK103083366SQ20131003260
公开日2013年5月8日 申请日期2013年1月29日 优先权日2013年1月29日
发明者王谦 申请人:河北大学