树突状杀手细胞群组用于制备药物的用途及其医药组合物的制作方法

树突状杀手细胞群组用于制备药物的用途及其医药组合物的制作方法
【专利摘要】本发明提供一种树突状杀手细胞群组用于制备药物的用途，上述药物用以治疗癌症，其中树突状杀手细胞群组通过细胞激素放大培养而得，且上述细胞激素包含介白素15号。另外，包含上述树突状杀手细胞群组的一种治疗癌症的医药组合物也于本发明中同时揭露。
【专利说明】树突状杀手细胞群组用于制备药物的用途及其医药组合物
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种治疗癌症的医药组合物，该医药组成物包含经细胞激素放大培养后的树突状杀手细胞群组，以及树突状杀手细胞用于制备药物的用途，尤其是一种利用经细胞激素放大培养后的树突状杀手细胞群组来制备该治疗癌症的医药组合物。
【背景技术】
[0002]人体对外来异物具有辨识和启动一连串反应的防御机转，这防御系统就是免疫系统。免疫系统拥有不同作用的白血球及淋巴细胞、不同功能的蛋白质因子，如免疫球蛋白、介白质及细胞激素等，互相协调合作，形成人体的防御力。免疫反应依其特异性及记忆性的有无，分为先天性及后天性。先天性免疫系统包括可溶性化学因子、干扰素、补体系统、嗜中性淋巴球及巨噬细胞的吞噬作用和自然杀手细胞的毒杀作用等。后天性免疫系统包括体液免疫及细胞免疫，前者包括抗体生成系统，后者包括淋巴细胞、淋巴激素及免疫记忆系统。记忆的功能使免疫系统对已对付过的抗原，引发强而快速的次发反应，可将外来危害因子有效去除。
[0003]免疫反应对抗原会有不同反应是由于主要组织兼容复合物(MajorHistocompatibility Complex, MHC)的作用。外来抗原通常需要经过细胞处理与MHC分子结合后，才能被免疫系统所认知。因此MHC的类型与个人对特定因子的免疫力有关，是造成个体对疾病易感性的重要因素。人类的MHC又名人类白血球抗原(Human LeukocyteAntigen, HLA)。HLA可分为class 1、class II,为结构相似的醣蛋白，与抗原呈现功能有关。HLAclass I抗原表现于所有体细胞上，而class II只表现于巨噬细胞、B细胞及树突状细胞(Dendritic Cell, DC)的细胞表面上。
[0004]人体内有一种高 度分化的免疫细胞，叫做抗原呈现细胞(Antigen PresentingCells, APC)。抗原呈现细胞的功能是摄取、加工、处理外源性抗原并将加工后抗原呈现给T淋巴细胞，诱导T淋巴细胞进行增殖进而分化成效应细胞，产生免疫反应，以辨识并抵抗感染甚至癌症细胞。树突细胞(Dendritic cells, DCs)是目前所知的人体内功能最强大的抗原呈现细胞，因其成熟时伸出许多树突样或伪足样突起而得名。DC的最大特点是能够显著刺激初始T细胞进行增殖，而其他的抗原呈现细胞，如巨噬细胞、B细胞仅能刺激已活化的或记忆性T细胞。因此DC是机体免疫反应的始动者,在免疫反应的诱导中具有独特的地位。
[0005]另外，自然杀手细胞(Natural Killer cell, NK cell)也是一种在免疫反应中占有重要地位的细胞，其起源于淋巴前驱细胞，占人类血液中淋巴球的5~10%。NK细胞表面缺乏专一性的抗原受体，负责非专一性防御，可以胞杀肿瘤细胞和被病毒感染细胞。NK细胞表面虽然没有抗原专一性受体，但其表面有许多其他的膜蛋白接受来自目标细胞的刺激，以调节NK细胞的活性，这些膜蛋白大致可分为“抑制性受体”和“活化性受体”。当NK细胞与细胞接触后，获得活化性受体的讯息，若与正常细胞接触，则正常细胞表面的第一型MHC分子与抑制性受体结合，传递了 “抑制” NK细胞活性的讯息，故NK细胞不会被活化，以避免杀死正常细胞。若正常细胞被病毒感染或转为肿瘤细胞后，第一型MHC分子的表现常会发生异常，因此当NK细胞接触不正常细胞时，便无法获得抑制性受体的讯息，于是NK细胞便活化进行胞杀作用。也就是说，只有“活化”讯息存在，且“抑制”的讯息异常或不存在时，NK细胞才会进行胞杀作用。
[0006]近年来，同时具有上述两种DC与NK细胞功能的干扰素分泌型杀手树突细胞逐渐受到关注。干扰素分泌型杀手树突细胞可以从毒杀目标、抗原呈现到活化T细胞都由自己完成，也即干扰素分泌型杀手树突细胞找到目标后会毒杀目标，接着把碎片吞噬后呈现抗原给T细胞，并活化T细胞。然而，正如同前文述及，干扰素分泌型杀手树突细胞虽然在免疫反应中扮演了相当重要的角色，但因为干扰素分泌型杀手树突细胞在体内的量非常稀少，如此低的细胞比率及数目，需要繁琐的步骤来加以纯化，也限制了针对干扰素分泌型杀手树突细胞的进一步研究。不仅如此，目前的技术仅能从老鼠的脾脏、淋巴结或骨髓中分离出干扰素分泌型杀手树突细胞，使得要实际将其应用于研究或临床上都面临了不小的瓶颈。

【发明内容】

[0007]有鉴于此，发明人经过长年的努力以及无数次的试验，已成功筛选出了人类体内同时具有毒杀及抗原呈现功能的细胞，并定义该细胞为树突状杀手细胞(DendriticKiller Cell，DKC)，又称为毒杀型树突细胞(cytoDC)或干扰素分泌型杀手树突细胞(IKDC)。然而，从发明人实验的结果严格说来，树突状杀手细胞在人类周边淋巴细胞中所占的比率低于0.01%。
[0008]因此，发明人设法将人体外围血中微量的树突状杀手细胞扩增至200至400倍，并通过树突状杀手细胞的细胞毒杀的功能，将其进一步运用于毒杀肿瘤细胞及治疗癌症上。据此，本发明提供一种树突状杀手细胞群组用于制备药物的用途，上述药物用以治疗癌症，其中树突状杀手细胞群组系通过细胞激素放大培养而得。
[0009]在本发明的一`实施例中，其中该医药组成物的树突状杀手细胞群组，系通过下列步骤而通过细胞激素放大培养而得。首先，取得人类血液检体的外围血单核细胞群组。再来，加入有效量之细胞激素与外围血单核细胞群组混合。接着，静置一合适时间。最后，分离出树突状杀手细胞群组。上述细胞激素包含介白素15号。较佳地，上述细胞激素可进一步包含介白素12号。
[0010]在本发明的一实施例中，树突状杀手细胞群组用于制备药物的用途，其中该药物系投用于该癌症病患体内以抑制该癌症的肿瘤生长。较佳地，上述树突状杀手细胞群组用于制备药物的用途系可与细胞可接受的缓冲液组合形成一医药组合物。
[0011]本发明的另一目的在于，提供一种治疗癌症的医药组合物，包含医药有效量的经细胞激素放大培养后的一树突状杀手细胞群组及其细胞可接受之缓冲液，其中该药物系投用于该癌症病患体内以抑制该癌症的肿瘤生长。
[0012]在本发明的一实施例中，其中树突状杀手细胞群组包含细胞表面标记为CD 14T1LA-GTD3TD19T1LA-DR+CD56+ 的细胞。
[0013]在本发明的一实施例中，其中该细胞可接受的缓冲液可选择自由磷酸缓冲溶液与生理食盐水所组成的群组。
[0014]在本发明的一实施例中，其中本发明的医药组合物包含的树突状杀手细胞群组，将人体血液检体中的树突状杀手细胞于生物体之外经由细胞激素放大培养而得。较佳地，人类血液检体选择自于一癌症病患的外围血。较佳地，上述细胞激素包含介白素15号。较佳地，上述细胞激素可进一步包含介白素12号。
[0015]在本发明的一实施例中，上述医药组合物可投用于该癌症病患体内以抑制该癌症病患的肿瘤生长，较佳的，上述医药组合物通过注射的方式进行传输。
[0016]由下文的说明，可更进一步了解本发明的特征及其优点，阅读时请参考图1至图8B。
【专利附图】

【附图说明】
[0017]图1显示本发明一实施例的制备医药组成中培养树突状杀手细胞的方法流程图；
[0018]图2A至图2C显示本发明一实施例中藉流式细胞仪测量及分选出经培养的树突状杀手细胞的结果；
[0019]图3A至图3C显示本发明一实施例中藉流式细胞仪测量树突状杀手细胞与肿瘤细胞反应后细胞死亡的情况；
[0020]图4A至图4B显示肿瘤细胞于加入本发明的医药组成物前后的情形；
[0021]图5显示肿瘤细胞加入本发明的医药组成物与对照组的细胞死亡比率；
[0022]图6A至图6B显示卵巢癌细胞于加入本发明之医药组成物前后的情形；
[0023]图7A至图7B显示经培养的树突状杀手细胞藉流式细胞仪测量其抗原呈现功能的结果;及
[0024]图8A至图SB显示经活化的T细胞藉流式细胞仪测量其细胞内Y型干扰素的结果O
[0025]附图编号说明
[0026]SlOO~S103 培养树突状杀手细胞群组的步骤
[0027]10 树突状杀手细胞
[0028]20 经流式细胞仪分选出的树突状杀手细胞
[0029]30 自然杀手细胞
[0030]40 肿瘤细胞
【具体实施方式】
[0031]名词定义
[0032]除非有其他定义，所有在此所用的技术及科学词汇，如同作为本发明所属【技术领域】中具有一般技艺者一般性地了解具有相同意义。在此指称的所有专利、申请案、公开申请案及其他应用，以及基因库登录号都完整以参考文献被整合起来。若本章节提出的定义与其他专利、申请案、公开申请案及其他在此引用的参考文献所提出的定义相反或不一致，以本章节提出的定义为主。
[0033]如本发明所使用，术语“树突状杀手细胞(DKC)”指同时具有细胞毒杀及抗原呈现功能的细胞。
[0034]如本发明所使用，符号“ + ”指细胞表面标记有表现于细胞表面，如利用流式细胞仪测得细胞表面标记量大于阴性控制组的表现量。
[0035]如本发明所使用，符号指细胞表面标记没有表现于细胞表面，如利用流式细胞仪测得细胞表面标记量等于阴性控制组的表现量。
[0036]上述细胞表面标记的表现量，使用的流式细胞仪测量结果，但本发明不以此为限，若他人采相关技艺的替代技术，执行与本发明精神相同的利用，均为本发明的专利范围中。
[0037]如本发明所使用，术语“介白素”指一组细胞因子，可以由多种细胞产生，人体免疫系统的功能在很大程度上依赖于介 白素。
[0038]实施例
[0039]为了更好地理解本发明的特点以及所能达到的效果，现结合附图对本发明的较佳实施例进行详细说明。
[0040]虽然下文详述本发明多个实施例的配方及培养方法，但应了解本发明可提供许多可在多种具体背景下实施的实用发明概念。本文所述的具体实施例仅制备及使用本发明的具体方式的例示性说明且并不界定本发明的范围。下文将定义若干术语以便于理解本发明。本文所定义之术语具有熟习与本发明相关领域之一般技术者通常理解之含义。例如“一(a、an)”及“该(the)”等术语非欲仅指单数实体，而是包括可使用具体实例说明的一般类别。本文术语用以阐述本发明的具体实施例，但除申请专利范围所概述之外，其用法并不界定本发明。
[0041]另外，本发明所揭示的培养方法中的多个分离或筛选步骤均通过一流式细胞检测技术(即流式细胞仪)来完成，并适合使用各一或多种流式细胞仪来利用不同群组的细胞拥有不同的细胞表面标记物区分筛选出目标细胞群组。流式细胞仪能够以远远超过相关技艺任何其他单细胞分析技术的速度实施单细胞分析，相比于使用其他替代技术能够较快速地分析统计学上有意义的数量的细胞，但本发明并不欲以此为限。较佳地，在一个实施例中，使用本领域技术人员常用的任一适宜试样制备自动装置或液体处理器的流式细胞仪。另外，使用单路雷射流式细胞仪或多路雷射流式细胞仪来实施分析步骤均可，本发明并不以此为限。
[0042]首先，事先说明的是，如前文所述发明人经过长年的努力以及无数次的试验，已成功筛选出了人类体内同时具有毒杀及抗原呈现功能的细胞，并定义该细胞为树突状杀手细胞(DKC)，即具有包含有细胞表面标记为HLA-GXD14-CD19-CD3XD56+HLA-DR+的细胞。
[0043]承上述，既然能够鉴定出人体外围血中的树突状杀手细胞，后续请参考图1，图1进一步说明制备本发明的医药组成物的经放大培养的树突状杀手细胞群组，如何将人体外围血中微量的树突状杀手细胞放大以利应用。
[0044]首先，如图1所示，先取得人类血液检体的外围血单核细胞群组S100。接着，加入有效量细胞激素与外围血单核细胞群组混合SIOI。其中，上述细胞激素包含有效量的介白素15号。再来，静置一合适时间S102。最后，便可分离出本发明所需的树突状杀手细胞群组 S103。
[0045]较佳地，上述细胞激素更包含有效量的介白素12号。较佳地，上述所使用的介白素15号的浓度为10ng/mL,介白素12号的浓度为0.5~20ng/mL。
[0046]另外，上述步骤SlOO更包含下述步骤。首先，收集人类血液检体，采集40ml，并分离出人类外围血单核细胞(Peripheral blood mononuclear cell, PBMC),接着,去除外围血单核细胞群组中的T细胞与B细胞。基本上，人类外围血可分为五类细胞，如:单核细胞(Monocytic cells)、小细胞(small cells)、淋巴细胞(Lymphoid cells)、大细胞(largecells)与大颗粒细胞(large and granular cells),可先利用流式细胞仪选取其中一种或多种类型的细胞为基准来进行后续步骤。该细胞较佳地可包含单核细胞群组或淋巴细胞群组或上述两者同时包含在内等，但本发明并不欲以此为限，后续将以单核细胞群组为例来说明。
[0047]另外，上述第一合适时间指将介白素15号与外围血单核细胞群组均置入培养基后放置一段时间使其开始进行细胞扩增。较佳地，一合适时间可为培养后的第七天。
[0048]请参照图2A至图2C所示，图2A为人类外围血单核细胞去除T细胞与B细胞(⑶3_CD19_PBMC)，在培养前以流式细胞仪测量⑶56及HLA-DR的结果。图2B为在细胞培养第7天以流式细胞仪测量CD56及HLA-DR的结果。图2C为利用流式细胞仪分选出树突状杀手细胞群的结果。
[0049]如图2A所示，在培养前同时具有自然杀手细胞表面标记(CD56+)与树突细胞表面标记(HLA-DR+)的细胞数量很少，而图中央如纺锤状的细胞群30，为带有⑶56但不具HLA-DR的自然杀手细胞。再请参考图2B，经培养七天后，细胞会转变成同时具有自然杀手细胞表面标记(⑶56+)与树突细胞表面标记(HLA-DR+)的树突状杀手细胞(DKC) 10，不只原本的树突状杀手细胞会增生更会趋化自然杀手细胞转变成树突状杀手细胞。最后，请参考图2C，利用流式细胞仪分选出一细胞群(sorted cells)，该细胞表面标记为HLA-GXD14XD19TD3XD56+HLA-DR+ 的树突状杀手细胞群 20。
[0050]然而，必须说明的是，上述一合适时间为一较佳实验手段，但本发明并不欲以此为限。也就是说，本发明也可于培养后第四天进行步骤S103，或于培养后第十天进行步骤S103。再者，于步骤S103之后，可再重复进行步骤SlOl~S103，也即再次收集未附着的细胞，重复上述步骤即可将树突状杀手细胞放大至所需数量。
[0051]再者，本发明中所进行的步骤均于生物体之外进行(ex vivo)，且其所收集的人类血液检体均来自于癌症病患，且此癌症患者所罹患的癌症可选择自于鳞状细胞癌、原位性与小叶性乳癌、肝癌、鼻咽 癌、肺癌、骨癌、胰脏癌、皮肤癌、头部或颈部癌症、皮肤或是眼内的恶性黑色素瘤、子宫癌、卵巢癌、直肠癌、肛门区域癌、胃癌、结肠癌、乳癌、睪丸癌、输卵管癌、子宫内膜癌、子宫颈癌、阴道癌、外阴癌、何杰金氏症、非何杰金氏症、食道癌、小肠癌、内分泌系统癌、甲状腺癌、副甲状腺癌、肾上腺癌、软组织癌、尿道癌、阴茎癌、前列腺癌、慢性或急性白血病、孩童硬肿瘤、淋巴癌、膀胱癌、肾脏或输尿管癌、肾脏细胞癌、肾盂癌、中枢神经系统癌、原发性中枢神经系统淋巴瘤、肿瘤血管新生、脊轴肿瘤、脑干神经胶质瘤、脑垂体腺瘤、卡波希氏瘤、表皮样癌和这些癌症的任何组合及其散播或转移形式所组成的群组。
[0052]承上述，经由上述步骤将人体外围血中微量的树突状杀手细胞于体外放大培养，最后被分选出来的树突状杀手细胞群组20内的细胞数量为人类血液检体中之树突状杀手细胞数量的200至400倍，此时树突状杀手细胞群组20便可进一步用以制备治疗癌症的药物，也即树突状杀手细胞群组20系可与细胞可接受之缓冲液组合形成一医药组合物，以有效地应用于癌症治疗领域。较佳的，其中上述的医药组合的树突状杀手细胞群浓度为IO6细胞/毫升。
[0053]因此，本发明的另一目的便在于，提供一种治疗癌症的医药组合物，此种医药组合物包含医药有效量的经细胞激素放大培养后的树突状杀手细胞群组及其细胞可接受的缓冲液。其中，如前文所述，树突状杀手细胞群组为包含细胞表面标记为CD 14T1LA-GTD3TD19T1LA-DR+CD56+ 的细胞。
[0054]而且，上述经放大培养的树突状杀手细胞群组自癌症病患的外围血中于体外培养而得，后续此医药组合物可再投用于上述癌症病患体内。也就是说，将从病患身上取得的树突状杀手细胞，经放大培养制备成医药组成物后，重新投入该病患体内以抑制肿瘤的生长，达到良好癌症治疗效果。至于，培养树突状杀手细胞群组的方法均已说明如前文，在此不再赘述。
[0055]较佳地，医药组合物可通过注射的方式进行传输，但本发明并不欲以任一方式为限。
[0056]为证明树突状杀手细胞群组可用于制备药物的用途，且上述药物可用以治疗癌症，发明人将经放大培养的树突状杀手细胞群组20与标靶肿瘤细胞K562 (Target Cell)40反应，并使用流式细胞仪测量肿瘤细胞死亡的情况，如图3A至图3C所示，图式纵轴为细胞大小，横轴为细胞内Capase6的量，Caspase6是细胞凋亡的重要蛋白质水解酶，若细胞内有Caspase6被染上就代表该细胞死亡或正在死亡，因此可通过测量肿瘤细胞内的Capase6得知与树突状杀手细胞群组反应后死亡的情况。
[0057]请看图3A至图3C，图3A至图3C的结果均会分成4区块:图上半之细胞为肿瘤细胞；图下半之细胞为树突状杀手细胞；图左半之细胞为细胞内没有Caspase6被染上的细胞(活细胞)；图右半之细胞为细胞内有Caspase6被染上的细胞(死细胞)。在本实施例中，上述目标细胞选自K562细胞株。此时，对应图3A的是上述经培养放大后分选出的树突状杀手细胞20。而图3B为尚未与任何其他细胞反应的肿瘤细胞40，因此如图3B所示，所有肿瘤细胞均位于左上角且没被染上caspasee，代表现阶段的肿瘤细胞都是活细胞。
[0058]请参考图3C，对应图3C的是将树突状杀手细胞群与标靶肿瘤细胞共同培养，经40分钟反应后的结果。如图所示，将肿瘤细胞与树突状杀手细胞群组反应后，肿瘤细胞(图上半部之细胞群)明显右移，显示约85%的细胞都染上caspasee，也即绝大多数的肿瘤细胞都死亡。然而，树突状杀手细胞群大多存活(图下半部之细胞群)。显示树突状杀手细胞具有良好的毒杀肿瘤细胞的效果。
[0059]请参考图4A至图4B，图4A至图4B显示原始肿瘤细胞生长情况与加入树突状杀手细胞群共同培养40分钟后的情形。如图4A所示，实际上尚未加入树突状杀手细胞群组的肿瘤细胞在培养基上生长的很好，然而，在加入树突状杀手细胞群共同培养后，便可明显看出肿瘤细胞大量死亡，如图4B所示。
[0060]请参考图5，图5显示肿瘤细胞加入浓度为IO6细胞/毫升之树突状杀手细胞群与对照组的细胞死亡比率。如图所示，加入树突状杀手细胞群组的肿瘤细胞有超过一半都死亡，也即肿瘤细胞有超过半数被树突状杀手细胞群组毒杀而死亡。然而，对照组(仅加培养基)只有约不到10%的细胞死亡。
[0061]接着，请参考图6A至图6B，图6A至图6B显示由癌症病患取出的卵巢癌细胞加入浓度为IO6细胞/毫升的病患自体的树突状杀手细胞群组前后的情形。如图6A所示，图中将癌症病患经手术取出的卵巢癌细胞放置于培养基中，在与树突状杀手细胞反应前，可以看出癌细胞呈现正常生长的状态。接着，加入从该卵巢癌病患外围血培养出的树突状杀手细胞群组，共同培养40分钟，便可明显看出肿瘤细胞与树突状杀手细胞群组反应后大量死亡,如图6B所示。[0062]最后，为证明本案所使用的细胞群确实为树突状杀手细胞，即同时具有细胞毒杀及抗原呈现的功能(也即树突细胞功能)，而上述树突状杀手细胞杀死肿瘤细胞已显示其细胞毒杀的功能，而下述的试验为证实其同时具有抗原呈现的功能。请参考图7A至图7B至图8A至图8B。
[0063]发明人从第一受试者的外围血检体中取出其单核细胞培养放大后分选出树突状杀手细胞，与从第二受试者外围血筛选出的CD8+的T细胞反应，并使用流式细胞仪测量T细胞活化、分裂的情况。如图7A至图7B所示，本试验系利用混合淋巴球反应，将第一受试者外围血单核球细胞培养放大后分选出树突状杀手细胞，与第二受试者标记有CFSE的T细胞反应。第一受试者的树突状杀手细胞会活化第二受试者的T细胞。因此，通过测量第二受试者的T细胞被树突状杀手细胞活化分裂的情况，便可得知利用本案技术所培养放大并分选出的树突状杀手细胞是否具有抗原呈现的功能。上述CFSE是可量化细胞增生程度的染剂，可辨认7-10个连续细胞世代，细胞分裂期间每分裂一次，CFSE的相对荧光强度由一半减少，如此可用来测量细胞分裂的次数及相对应的比例。
[0064]图7A是将第一受试者的经培养放大的树突状杀手细胞与第二受试者标记有CFSE的T细胞反应，并用流式细胞仪所测得的结果；图中纵轴为细胞数量，横轴为细胞内CFSE的荧光强度；如图7A所示，经第一受试者的树突状杀手细胞与第二受试者的T细胞反应后，46.1%的T细胞被树突状杀手细胞活化进行细胞分裂。而第图7B为仅有第二受试者的T细胞，为阴性控制对照组，其结果只有4.08%的T细胞被活化进行分裂。其结果证明了利用本发明的技术所放大培养分选出的树突状杀手细胞确实具有抗原呈现的功能。
[0065]最后，请参照图8A至图8B，图8A至图8B为图7A至图7B的结果，测量其反应后的T细胞其细胞内的Y型干扰素(IFN-Y)的结果。如图8A所示，被树突状杀手细胞群活化而分裂的T细胞其多数T细胞内具有IFN-Y (图左上的框格中)。而仅放置第二受试者的T细胞反应后的结果，如图8B 所示，其T细胞内无测得IFN-Y。
[0066]综上所述，树突状杀手细胞是一种同时拥有自然杀手细胞与树突细胞功能的细胞，在人体内的量非常稀少，但其于免疫反应中扮演重要的角色。经由发明人所研究的放大培养、筛选与鉴定等技术可在体外从人类外围血中将微量的树突状杀手细胞放大200至400倍，其具有用以制备治疗癌症的药物的用途。也就是说，运用有效量的树突状杀手细胞群组及细胞可接受的缓冲液即可提供一治疗癌症的医药组合物，且此药物可再重新投用于同一病患的体内以达到癌症免疫疗法的目的。
[0067]以上所述实施例只用于说明本发明的技术思想及特点，其目的是使本领域技术人员能够了解本发明的内容并据以实施，但不应该以此限定本发明专利的范围，所属领域技术人员在不脱离本发明的精神和范围之内，相对上述实施例进行等同变化和改进，都应该属于本发明所保护的技术范围。
【权利要求】
1.一种治疗癌症的医药组合物，其特征在于，包含医药有效量的经细胞激素放大培养后的一树突状杀手细胞群组及一细胞可接受的缓冲液。
2.根据权利要求1所述的医药组合物，其特征在于，该树突状杀手细胞群组包含细胞表面标记为 HLA-GTD14TD19XD3TD56+HLA-DR+ 的细胞。
3.根据权利要求1所述的医药组合物，其特征在于，该细胞可接受的缓冲液可选择自由磷酸缓冲溶液与生理食盐水所组成的群组。
4.根据权利要求1所述的医药组合物，其特征在于，该细胞激素为一有效量的介白素15号。
5.根据权利要求4所述的医药组合物，其特征在于，该细胞激素更包含有效量的另一细胞激素，且该另一细胞激素为介白素12号。
6.根据权利要求1所述的医药组合物，其特征在于，该树突状杀手细胞群组将人体血液检体中的树突状杀手细胞于生物体之外经由该细胞激素放大培养而得。
7.根据权利要求6所述的医药组合物，其特征在于，该人类血液检体系选择自于一癌症病患的外围血。
8.根据权利要求7所述的医药组合物，其特征在于，其可投用于该癌症病患体内以抑制该癌症病患的肿瘤生长。
9.根据权利要求1所述的医药组合物，其特征在于，透注射方式进行传输。
10.一种树突状杀手细胞群组用于制备药物的用途，其特征在于，该药物用以治疗癌症，其中该树突状杀手细胞群组通过一细胞激素放大培养而得。
11.根据权利要求10所述的用途，其特征在于，该药物投用于该癌症病患体内以抑制该癌症的肿瘤生长。
12.根据权利要求10所述的用途，其特征在于，该细胞激素为一有效量的介白素15号。
13.根据权利要求10所述的用途，其特征在于，该细胞激素更包含有效量的另一细胞激素，且该另一细胞激素为介白素12号。
14.根据权利要求10所述的用途，其特征在于，该经放大培养而得树突状杀手细胞群组可与一细胞可接受的缓冲液组合形成一医药组合物。
【文档编号】A61K35/14GK103520208SQ201310240836
【公开日】2014年1月22日 申请日期:2013年6月18日 优先权日:2012年7月5日
【发明者】李建谋 申请人:富禾生医股份有限公司