子宫颈癌筛查方法
【专利摘要】本发明提供一种子宫颈癌筛查方法，是应用改良巴氏涂片法进行筛查；步骤为：提取宫颈分泌物，然后进行常规染色、阅片、诊断；改良巴氏涂片法细胞学诊断为ASCUS或以上病变者，当即在碘染色检查下进行病理活检。本发明还提供一种子宫颈癌筛查方法，是在用改良巴氏涂片法获取宫颈分泌物后，立即采用醋酸肉眼检查法进行筛查，醋酸肉眼检查法诊断为阳性者，当即取病理活检；诊断为阴性者，在现场等待改良巴氏涂片法诊断结果，改良巴氏涂片法细胞学诊断为ASCUS或以上病变者，当即取病理活检。本发明同时用两种方法对妇女进行筛查，而不是一种。在本发明之前，这是不可能做到的。本发明的方法能提高宫颈癌前病变和早期癌的检出率。
【专利说明】子宫颈癌筛查方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种子宫颈癌筛查方法，特别是针对宫颈癌前病变和早期癌的筛查方 法。
【背景技术】
[0002]宫颈癌是女性的常见恶性肿瘤，位居女性恶性肿瘤第二位，严重威胁着女性的健 康和生命。因此，宫颈癌前病变和早期癌的筛查非常重要，能起到早发现早治疗的目的。目 前，针对宫颈癌前病变和早期癌的筛查方法主要有两种:醋酸染色肉眼检查法(VIA test) 和巴氏涂片筛查法(Pap smear)，由于技术上互相干扰，这两种筛查法不能同日同时使用。 两种方法单独使用时各自的敏感性较低，因而检出的宫颈癌前病变和早期癌较少。
【发明内容】
[0003]本发明提供了子宫颈癌筛查方法，能提高病理活检率和宫颈癌前病变及早期癌的 检出率。
[0004]本发明提供一种子宫颈癌筛查方法，是应用改良巴氏涂片法进行筛查；所述改良 巴氏涂片法的步骤为:提取宫颈分泌物，然后进行常规染色、阅片、诊断；改良巴氏涂片法 细胞学诊断为ASCUS或以上病变者，当即在碘染色检查下进行病理活检；
所述提取宫颈分泌物的方法为:使用一根长杆、能达到宫颈部位的消毒器具，在宫颈鳞 柱交界处及其周围缓慢擦拭，充分获取宫颈黏液及阴道分泌物，并将其均匀涂抹在载玻片 上。
[0005]消毒器具可以使用任何可以达到宫颈部位、不破坏宫颈上皮且能充分获取宫颈黏 液及阴道分泌物的器具。
[0006]优选地，所述消毒器具为消毒干棉签。
[0007]本发明的方法与采用传统巴氏涂片法检查相比，具有以下优点:
1.宫颈粘液中的脱落细胞未受任何化学溶液(如醋酸等)影响，因此细胞形态未发生改 变，显微镜下容易观察和诊断(图2)。
[0008]2.由于棉签擦拭不破坏宫颈上皮(刮板则损伤宫颈上皮)，因此改良巴氏涂片无血 液或很少血液，细胞重叠少，显微镜下容易观察和诊断(图2 )。
[0009]3.鉴于上述原因，改良巴氏涂片阅片较容易，用时短(约需2分半钟)，比传统巴氏 涂片阅片时间(用时约5分钟)缩短一半。
[0010]4.医院筛查和现场筛查实践表明，改良巴氏涂片诊断结果优于或同于传统巴氏涂 片(图2)。
[0011 ] 本发明还提供一种子宫颈癌双法联合同时筛查方法，是在用改良巴氏涂片法获取 宫颈分泌物后，立即采用醋酸肉眼检查法进行筛查，醋酸肉眼检查法诊断为阳性者，当即取 病理活检；醋酸肉眼检查法诊断为阴性者，在现场等待改良巴氏涂片法诊断结果，改良巴氏 涂片法细胞学诊断为ASCUS或以上病变者，当即取病理活检；其中，所述改良巴氏涂片法的步骤为:提取宫颈分泌物，然后进行常规染色、阅片、诊
断；
所述提取宫颈分泌物的方法为:使用一根长杆、能达到宫颈部位的消毒器具，在宫颈鳞 柱交界处及其周围缓慢擦拭，充分获取宫颈黏液及阴道分泌物，并将其均匀涂抹在载玻片 上。
[0012]消毒器具可以使用任何可以达到宫颈部位、不破坏宫颈上皮且能充分获取宫颈黏 液及阴道分泌物的器具。
[0013]优选地，所述消毒器具为消毒干棉签。
[0014]本发明的筛查方法与现有的筛查方法相比，具有下述优点:
本发明能够同时用两种方法对妇女进行筛查，而不是一种。在本发明之前，这是不可能 做到的。实施时，改良巴氏涂片法取样在前，醋酸肉眼筛查法在后，有些妇女可能一种方法 阳性，而有些妇女可能两种方法都是阳性。
[0015]本发明将醋酸染色肉眼检查法(VIA test)和巴氏涂片筛查法(Pap smear)这两个 常用宫颈癌筛查法，通过技术改进，使它们能够在同一天联合使用，并在当天决定对筛查阳 性的个体实施病理活检。两个方法的同时应用大大降低了病理活检的失访率，提高了筛查 敏感性(表1、表2)，提高了宫颈癌前病变和早期癌的检出率。
【专利附图】
【附图说明】
[0016]图1为本发明的子宫颈癌筛查方法的流程示意图；
图2为本发明的改良巴氏涂片与常规巴氏涂片在诊断宫颈癌前病变中的优劣比较。
【具体实施方式】
[0017]以下的实施例便于更好地理解本发明，但并不限定本发明。下述实施例中的实验 方法，如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的试验材料，如无特殊说明，均为自 常规生化试剂商店购买得到的。
[0018]本发明的子宫颈癌筛查方法包括三个部分:一、改良巴氏涂片法(modified Pap smear) ;二、改良巴氏涂片法和醋酸肉眼检查法的同时应用；三、当即筛查当即活检策略(对 单法或双法筛查阳性的个体当日取病理活检，简称“即查即检”)。“单次双法子宫颈癌筛查 法”的流程见图1。以下就这三个部分分别进行叙述。
[0019]一、改良巴氏涂片法
1.载玻片进行编号并登记。
[0020]2.宫颈分泌物提取:使用一根长杆、能达到宫颈部位的消毒干棉签(而不是刮板)， 在宫颈鳞柱交界处及其周围缓慢擦拭5圈，充分获取宫颈黏液及阴道分泌物，并将其均匀 涂抹在载玻片上。
[0021]3.涂片制备:首先用95%乙醇(酒精)固定约3 min，然后流动水冲洗载玻片上的酒 精约3 sec ;接着用苏木精染色5-15 min，流动水冲掉苏木精染液约3 sec ;将载玻片放入 1% (体积百分比)盐酸酒精杯中约3 sec，流动水冲洗载玻片约3 sec ;最后用伊红染色约3 sec，流动水冲掉伊红染液，晾干。
[0022]4.封固:均匀地滴两滴树脂在载玻片上，用盖玻片封住。[0023]5.显微镜下阅片、进行诊断。巴氏细胞学诊断以2001年TBS分级系统为参考标准 (Solomon D, et al.The 2001 Bethesda System - Terminology for Reporting Results of Cervical Cytology.JAMA 287(16): 2114-2119， 2002)。
[0024]6.以上步骤可在1-2小时完成。巴氏细胞学诊断AS⑶S或以上病变者在碘染色检 查(VILI)辅助下进行病理活检(见步骤三)。
[0025]二、改良巴氏涂片法和醋酸肉眼检查法的当天同时应用 上述两个方法的当天同时应用必须按照以下顺序进行(图1):
1.首先实施改良巴氏涂片法，按上述步骤一的操作获取宫颈粘液及阴道分泌物进行涂 片、染色、显微镜下阅片。
[0026]2.然后在子宫颈涂抹5%冰醋酸(体积百分比)，实施常规VIA肉眼检查。使用5% 冰醋酸浸泡的棉球涂抹宫颈时，棉球应足够大，可以覆盖宫颈全部。轻轻用棉球上下左右 按压子宫颈(包括子宫颈外口)，使醋酸充分渗透子宫颈上皮。约一分钟后，在普通光源照明 下，直接观察子宫颈上皮对醋酸的反应。病变区域呈白色时为阳性反应。
[0027]3.醋酸肉眼法检查后，告知受检者在筛查现场或医院等候改良巴氏涂片法诊断结 果(可以在2小时内完成)，以决定受检者是否需要取病理活检。
[0028]三、当即筛查当即活检策略(“即查即检”策略)
1.对于应用醋酸肉眼检查法检查结果为阳性的妇女，可以当即取病理活检。而醋酸肉 眼检查阴性的妇女，可以在现场等待I小时左右获得改良巴氏涂片法诊断结果。
[0029]2.改良巴氏法自获取宫颈粘液开始至发出诊断报告约需I小时左右，因此诊断为 AS⑶S或以上病变者可以在当日2小时内完成病理活检。
[0030]3.病理活检在碘染色检查(VILI)的辅助下进行。有条件时，可以在阴道镜下取病
理活检。
[0031]以下为应用本发明的子宫颈癌筛查方法与传统的筛查方法的对比实验。
[0032]首先，分别应用本发明的改良巴氏涂片法与传统的巴氏涂片法对相同个体进行筛 查，再对上述个体分别做组织学诊断的切片作为对照，结果如表I和图2所示。从图2 可以看出:醋酸肉眼检查和碘液染色前使用宫颈黏液做的改良巴氏涂片与醋酸肉眼检查和 碘液染色后行常规巴氏涂片相比更清晰和更易读。图片A、B、C和D代表4个相同个体的 巴氏涂片和相应的组织显微照片。在每个图片中，a (100X放大倍数)和b (100X放大 倍数)为使用宫颈黏液涂片的改良巴氏切片；c (100X放大倍数)和d (400X放大倍数) 为使用常规巴氏涂片的巴氏切片；e (400X放大倍数)为宫颈病变的相关组织学诊断的HE 切片。细胞组织学诊断如下:图A:a和b，低级别SIL ；c和d，NILM ；e, CINl。图B:a和b， ASC-H ;c和d，NILM ；e, CIN2。图C:a和b，高级别SIL ;c和d，诊断不确定(大量的血液细 胞污染)；e, CIN3。图D:a和b高级别SIL ；c和d高级别上皮内瘤变；e, ICC (浸润性宫颈 癌XASC-H，非典型鳞状细胞不除外上皮内高度病变；CIN，宫颈上皮内瘤样病变；NILM，阴性 上皮内病变或恶性病变；SIL，鳞状上皮内病变。
[0033]这是因为，改良巴氏涂片法具有以下优点:1.宫颈粘液中的脱落细胞未受任何化 学溶液(如醋酸等)影响，因此细胞形态未发生改变，显微镜下容易观察和诊断(图2)。
[0034]2.由于棉签擦拭不破坏宫颈上皮(刮板则损伤宫颈上皮)，因此改良巴氏涂片无血 液或很少血液，细胞重叠少，显微镜下容易观察和诊断(图2 )。[0035]3.鉴于上述原因，改良巴氏涂片阅片较容易，用时短(约需2分半钟)，比传统巴氏涂片阅片时间(用时约5分钟)缩短一半。
[0036]4.医院筛查和现场筛查实践表明，改良巴氏涂片诊断结果优于或同于传统巴氏涂片(图2)。
【权利要求】
1.一种子宫颈癌筛查方法，是应用改良巴氏涂片法进行筛查；所述改良巴氏涂片法的步骤为:提取宫颈分泌物，然后进行常规染色、阅片、诊断；改良巴氏涂片法细胞学诊断为ASCUS或以上病变者，当即在碘染色检查下进行病理活检；所述提取宫颈分泌物的方法为:使用一根长杆、能达到宫颈部位的消毒器具，在宫颈鳞柱交界处及其周围缓慢擦拭，充分获取宫颈黏液及阴道分泌物，并将其均匀涂抹在载玻片上。
2.根据权利要求1所述的筛查方法，其特征在于:所述消毒器具为消毒干棉签。
3.一种子宫颈癌双法联合同时筛查方法，是在用改良巴氏涂片法获取宫颈分泌物后，立即采用醋酸肉眼检查法进行筛查，醋酸肉眼检查法诊断为阳性者，当即取病理活检；醋酸肉眼检查法诊断为阴性者，在现场等待改良巴氏涂片法诊断结果，改良巴氏涂片法细胞学诊断为ASCUS或以上病变者，当即取病理活检；其中，所述改良巴氏涂片法的步骤为:提取宫颈分泌物，然后进行常规染色、阅片、诊断；所述提取宫颈分泌物的方法为:使用一根长杆、能达到宫颈部位的消毒器具，在宫颈鳞柱交界处及其周围缓慢擦拭，充分获取宫颈黏液及阴道分泌物，并将其均匀涂抹在载玻片上。
4.根据权利要求3所述的筛查方法，其特征在于:所述消毒器具为消毒干棉签。
【文档编号】A61B10/02GK103558150SQ201310427128
【公开日】2014年2月5日 申请日期:2013年9月18日 优先权日:2013年9月18日
【发明者】张文杰, 陶林, 阿曼古丽, 李锋, 王英红 申请人:石河子大学