本发明属于保健食品
技术领域：
。更具体地，涉及一种具有抗氧化和辅助降血脂功效的红茶复合物及其制备方法。
背景技术：
：越来越多的医学研究表明，自由基与多种疾病的发生和恶化有关，这些疾病包括心血管、胃肠道消化系统、癌症、糖尿病、神经退行性疾病、风湿性关节炎等，几乎所有的慢性疾病都与人体内累积过多的自由基有密切的联系。在健康的生理状态下，人体内的自由基处在一种产生和清除的平衡状态，然而随着人们生活节奏的加快，生活压力的加大，各种诱导自由基产生的外因和内因不断增多，导致体内积累过量的自由基，危害人体健康。高血脂症是指血液中的总胆固醇，甘油三脂，低密度脂蛋白胆固醇和高密度脂蛋白胆固醇等脂质成分含量异常超出正常值。高血脂症是引起冠心病、高血压、动脉硬化等的直接原因，医学专家称其为导致心脑血管疾病的“导火线”。因此，高血脂症、高血糖症、高血压症并称“三高”，对人体的危害非常大。随着人们生活水平的提高，人们膳食营养成分过盛，高糖、高动物脂肪的大量摄入，加上缺乏运动、抽烟、大量饮酒等不健康的生活方式，高脂血症的发生率不断上升。随着现代人生活水平的提高和保健意识的加强，通过饮食外摄入一定量的保健食品来清除过多自由基和预防高脂血症来维持身体机能的健康成为了现代社会人群的一大诉求。茶叶富含多酚类、多糖类、生物碱类、维生素C类、维生素P类和维生素PP类，以及泛酸、肌醇、叶酸和二硫辛酸等，具有较好的保健作用。但是，效果单一且缓慢不明显。技术实现要素：本发明的目的是以从红茶和从红茶中提取的天然产物为原料，提供一种具有抗氧化和辅助降血脂功效的红茶复合物。本发明上述目的通过以下技术方案实现：一种具有抗氧化和辅助降血脂功效的红茶复合物，包含质量比为5～8：2～4：1的红茶超微粉、红茶水溶性提取物和茶黄素。具体地，上述红茶复合物是以红茶超微粉、红茶水溶性提取物和茶黄素为原料，经烘干、灭菌后装入胶囊获得。优选地，所述红茶超微粉、红茶水溶性提取物和茶黄素的质量比为6：3：1。另外，优选地，所述红茶超微粉是由红茶经过干燥、粉碎、过筛后，再进行超微粉碎获得。优选地，所述干燥是40～60℃干燥。更优选地，所述干燥是40℃干燥。优选地，所述过筛是过30～300目筛。更优选地，所述过筛是过40～200目筛。最优选地，所述过筛是过40目筛。优选地，所述红茶水溶性提取物是通过如下方法制得：按照质量体积比依次为1：8～12、1：4～6、1：4～6的茶水比，将红茶分三次在沸蒸馏水中分别浸提5～15min，趁热抽滤，合并浸提液，进行真空浓缩，浓缩液冷淡干燥。更优选地，所述红茶水溶性提取物是通过如下方法制得：按照质量体积比依次为1：10、1：5、1：5的茶水比，将红茶分三次在沸蒸馏水中分别浸提10min，趁热抽滤，合并浸提液，进行真空浓缩，浓缩液冷淡干燥。优选地，本发明所用红茶为红条茶。更优选地，所述红茶为英红九号红条茶。本发明具有以下有益效果：本发明提供了一种具有抗氧化和辅助降血脂功效的红茶复合物，具体是一种胶囊产品，采用英红九号红条茶超微粉、英红九号红茶水溶性提取物和茶黄素复合物为原料，按照合适的比例进行配伍，经烘干、灭菌后装入胶囊，获得具有抗氧化和降血脂功效的红茶胶囊产品，其中茶黄素含量高达5.39％。本发明的配方和制备工艺制备得到的红茶复合物，显著提高了产品的抗氧化和降血脂功效，具有很好的推广使用前景。附图说明图1为制备具有抗氧化和辅助降血脂功效的红茶复合物的工艺流程图。具体实施方式以下结合说明书附图和具体实施例来进一步说明本发明，但实施例并不对本发明做任何形式的限定。除非特别说明，本发明采用的试剂、方法和设备为本
技术领域：
常规试剂、方法和设备。除非特别说明，本发明所用试剂和材料均为市购。实施例1产品制备工艺1、红茶超微粉取英红九号红条茶，经过40℃干燥、植物粉碎机粉碎、过标准40目筛后，再进行超微粉碎，得到红茶超微粉。2、红茶水溶性提取物按照质量体积比依次为1：10、1：5、1：5的茶水比，将英红九号红条茶分三次在沸蒸馏水中分别浸提10min，趁热抽滤，合并浸提液，进行真空浓缩，浓缩液冷淡干燥，得到红茶水溶性提取物。3、具有抗氧化和辅助降血脂功效的红茶复合物按照附图1所示的工艺流程，按照红茶超微粉、红茶水溶性提取物和茶黄素的质量比为6：3：1的比例，将三者烘干、灭菌后装入胶囊。实施例2产品制备工艺1、红茶超微粉取英红九号红条茶，经过50℃干燥、植物粉碎机粉碎、过标准300目筛后，再进行超微粉碎，得到红茶超微粉。2、红茶水溶性提取物按照质量体积比依次为1：8、1：4、1：4的茶水比，将英红九号红条茶分三次在沸蒸馏水中分别浸提15min，趁热抽滤，合并浸提液，进行真空浓缩，浓缩液冷淡干燥，得到红茶水溶性提取物。3、具有抗氧化和辅助降血脂功效的红茶复合物按照附图1所示的工艺流程，按照红茶超微粉、红茶水溶性提取物和茶黄素的质量比为5：2：1的比例，将三者烘干、灭菌后装入胶囊。实施例3产品制备工艺1、红茶超微粉取英红九号红条茶，经过60℃干燥、植物粉碎机粉碎、过标准30目筛后，再进行超微粉碎，得到红茶超微粉。2、红茶水溶性提取物按照质量体积比依次为1：12、1：6、1：6的茶水比，将英红九号红条茶分三次在沸蒸馏水中分别浸提5min，趁热抽滤，合并浸提液，进行真空浓缩，浓缩液冷淡干燥，得到红茶水溶性提取物。3、具有抗氧化和辅助降血脂功效的红茶复合物按照附图1所示的工艺流程，按照红茶超微粉、红茶水溶性提取物和茶黄素的质量比为8：4：1的比例，将三者烘干、灭菌后装入胶囊。实施例4红茶水溶性提取物和茶黄素的小鼠体内抗氧化作用1材料与方法1.1材料与试剂英红九号红茶水溶性提取物自制(实施例1)。茶黄素复合物(TFs)购自杭州英仕利生物科技有限公司。MDA、SOD、GSH-Px检测试剂盒购自南京建成生物研究所。其他试剂为分析纯。1.2小鼠饲养本部分动物实验在浙江大学动物实验中心完成。购自上海斯莱克实验动物有限责任公司的昆明小鼠(重量18-22g)分成6组，分别标记对照组，A组，B组，C组，D组，E组，每组分成高剂量，中剂量，低剂量各10只，以每只小鼠重20g计算。每组的高剂量组小鼠灌胃的剂量为0.5mL，浓度为2g/kg；中剂量组灌胃剂量为0.5mL，浓度为1g/kg；低剂量组灌胃剂量为0.5mL，浓度为0.5g/kg；对照组不灌胃，灌胃组每天灌胃，连续灌胃一个月。具体算法：高剂量：0.04g/只，共10只，共0.4g，溶解到5mL双蒸水中，0.5mL/只；中剂量：0.02g/只，共10只，共0.2g，溶解到5mL双蒸水中，0.5mL/只；低剂量：0.01g/只，共10只，共0.1g，溶解到5mL双蒸水中，0.5mL/只。1.3处理方法取灌胃到期的小鼠，首先用乙醚麻醉，然后摘眼球取血，每只小鼠平均取得1.5mL血，然后4000转离心5min，取上清，得到小鼠血清。取血后的小鼠断颈处死后取部分肝脏放入10mL离心管中，同时加入9倍肝脏重量的冷生理盐水稀释，然后在组织匀浆仪上匀浆，离心，4000转/10min，取上清，得到10％肝脏匀浆。检测每只小鼠肝脏匀浆的蛋白浓度。上述工作做好后，检测小鼠血清和肝脏中GSH-Px(需要当天取，当天测试)，SOD，MDA的含量。2结果与分析2.1小鼠血清中SOD、GSH-Px活性和MDA含量表1小鼠血清SOD、GSH-Px活性和MDA含量的变化注：*p＜0.05，**p＜0.01，以正常组为对照。表1所示为小鼠灌胃英红九号红茶提取物和TFs后血清中SOD、GSH-Px活性及MDA的含量变化趋势。结果表明，给药组SOD和GSH-Px活性增加与对照组相比都达到了极显著差异水平(p<0.01)，英红九号红茶提取物和TFs处理的MDA含量下降与对照组相比也有所下降，尤其是TFs作用最明显。这也说明，英红九号红茶提取物和TFs能显著提高小鼠血清中的抗氧化物质SOD、GSH-Px的活性，以增强机体的抗氧化能力，减少机体损伤。2.2小鼠肝脏中SOD、GSH-Px活性和MDA含量表2小鼠肝脏SOD、GSH-Px活性和MDA含量的变化注：*p＜0.05，**p＜0.01，以正常组为对照。表2所示为小鼠灌胃英红九号红茶提取物和TFs后肝脏中SOD、GSH-Px活性及MDA的含量变化趋势。结果表明，给药组SOD和GSH-Px活性增加与对照组相比都达到了极显著差异水平(p<0.01)，与给药后血清中MDA结果不同的是，英红九号红茶提取物和TFs处理后小鼠肝脏中的MDA含量下降与对照组相比也都有所下降。这也说明，英红九号红茶提取物和TFs都能显著提高小鼠肝脏中的抗氧化物质SOD、GSH-Px的活性，降低肝脏中脂质过氧化程度，以增强机体的抗氧化能力，减少机体损伤。实施例5红茶水溶性提取物对食蟹猴体内抗氧化与降血脂的作用1材料与方法1.1材料以食蟹猴为试验载体，以英红九号红茶为原料，按照人类饮茶习惯与饮茶量，饲喂食蟹猴四周后，考察食蟹猴体内抗氧化与辅助降血脂的功能。本实验遵守广州宝瑞莱生物技术有限公司的实验动物伦理委员会规定，并得到实验动物伦理委员会的审批(审批代号BRL012-001)。1.2动物实验1.2.1实验猴种属：食蟹猴性别：不限体重范围(驯化开始时)：不低于7kg年龄(驯化开始时)：7-12岁原产地：中国使用动物数量：共39头动物选择的理由：广州宝瑞莱生物技术有限公司具有丰富的食蟹猴资源及生物学特性数据，且食蟹猴生理特性符合本实验的研究需要1.2.2饲养条件猴笼材质：不锈钢猴笼大小：符合USDA标准，71cm(D)×62cm(W)×79cm(H)每笼饲养的猴数量：1头饲料：每日上午的8时到10时30分之间，下午16时到17时30分之间给予颗粒饲料150g，次日上午8时到10时之间回收剩余的饲料饮水：利用自动给水装置，自由饮水清洁方法：每日用水清洗动物室内及猴笼1.3处理方法1.3.1供试品配制剂量组英红九号红茶低剂量1g干茶加入1000C纯净水200mL浸泡10分中剂量2g干茶加入1000C纯净水200mL浸泡10分高剂量4g干茶加入1000C纯净水200mL浸泡10分1.3.2给予方法(1)实验组给予量：100mL/只/次给予频率：6次/日，分别于早、中、晚各两次给予周期：4周(2)对照组给予量：100mL/只/次的量给予纯净水给予频率：6次/日，分别于早、中、晚各两次给予周期：4周1.3.3检测指标取食蟹猴血液，检测血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、丙二醛(MDA)等含量变化，并计算分析获得动脉粥样指数(AI)。2结果与分析2.1食蟹猴体重的变化表3食蟹猴喂食4周后体重下降值(kg)由表3可知，食蟹猴经过饲喂4周后体重都会下降，对照组体重下降最少为0.75kg，喂食茶样处理组体重下降均>0.75kg，所有处理中以喂食高剂量英红九号红茶体重下降最大2.26kg，最低的为英红九号红茶低剂量组，体重下降仅略高于对照组(0.79kg)，随着剂量的增加体重下降增大。2.2食蟹猴血液中SOD、CAT、POD、GSH-PX活性和MDA含量表4食蟹猴血液中SOD和CAT含量的变化注：*p＜0.05，**p＜0.01，以正常组为对照。表5食蟹猴血液中POD和GSH-PX含量的变化注：*p＜0.05，**p＜0.01，以正常组为对照。由表5可知，喂食英红九号红茶后，食蟹猴血液中POD酶活性变化规律不明显，高剂量和低剂量组有下降的趋势；英红九号红茶对血液中GSH-PX活性影响表现为低剂量处理时效果最佳。表6食蟹猴血液中MDA含量的变化注：*p＜0.05，**p＜0.01，以正常组为对照。表6是喂食英红九号红茶后，食蟹猴体内丙二醛MDA含量的变化，在高剂量和低剂量处理时，MDA含量的下降，中剂量时则有所上升。由表6可知，以英红九号红茶喂食食蟹猴4周后，猴体内血液中SOD酶活性没有升高，略有下降，但与对照相比未达显著差异水平，这也说明英红九号红茶对食蟹猴血液中SOD酶活性影响不大；中高剂量茶样却导致了血液中CAT酶活性的升高。2.3食蟹猴血液中TC、TG、HDL-C、LDL-C含量和AI指数的变化表7食蟹猴血液TC、HDL-C、LDL-C、TG和AI指数的变化注：*p＜0.05，**p＜0.01，以正常组为对照。喂食食蟹猴英红九号红茶4周后检测猴血液中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)的含量变化，根据以下公式计算分析获得动脉粥样指数(AI)：动脉硬化指数(AI)＝[总胆固醇(TC)-高密度脂蛋白(HDL-C)]÷高密度脂蛋白(HDL-C)。由表7可知，英红九号红茶处理都降低了食蟹猴血液中的总胆固醇TC和低密度脂蛋白(LDL-C)的含量，其中都以高剂量处理效果最显著；英红九号红茶对食蟹猴血液中甘油三酯TG和高密度脂蛋白HDL-C含量的影响较小；英红九号红茶高剂量组显著降低了食蟹猴血液动脉硬化指数AI。实施例6本发明英红九号红茶复合物体内抗氧化与降血脂作用研究1材料与方法1.1材料与试剂英红九号红茶超微粉，英红九号红茶水溶性提取物，茶黄素复合物(TFs)购自杭州英仕利生物科技有限公司。英红九号红茶复合物(即英红九号红茶复配物：如实施例1所述，由英红九号红条茶超微粉、红茶水溶性提取物和茶黄素复合物为原料，按照6:3:1的重量比例进行配伍所得)。试剂：总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、丙二醛(MDA)检测试剂盒购自南京建成生物研究所，其他试剂为分析纯。1.2小鼠分组与给药本部分动物实验在浙江大学动物实验中心完成。购自上海斯莱克实验动物有限责任公司的昆明小鼠(重量18-22g)分成5组，分别标记为：A组：正常对照组；B组：英红九号红茶超微粉组；C组：英红九号红茶水溶性提取物组；D组：茶黄素复合物组；E组：英红九号红茶复配物组，每组各10只小鼠。给药方式：以每只小鼠重20g，每天进食量为3g来计算，B组的剂量为25g/kg·BW，即饲料中添加16.67％的英红九号红茶超微粉；C组的剂量为10g/kg·BW，即饲料中添加6.67％的英红九号红茶水溶性提取物；D组的剂量为10g/kg·BW，即饲料中添加6.67％的茶黄素复合物；E组的剂量为10g/kg·BW，即饲料中添加6.67％的英红九号红茶复配物，A组的饲料为普通维持饲料。小鼠自由取食，连续进食一个月。1.3处理方法取给药到期的小鼠，首先用乙醚麻醉，然后摘眼球取血，每只小鼠平均取得1.5mL血，然后4000转离心5min，取上清，得到小鼠血清，置于-80℃冰箱保存。血清用于测定小鼠血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)、GSH-Px(需要当天取，当天测试)，SOD，MDA的含量。取血后的小鼠断颈处死后取部分肝脏放入10mL离心管中，同时加入9倍肝脏重量的冷生理盐水稀释，然后在组织匀浆仪上匀浆，离心，4000转/10min，取上清，得到10％肝脏匀浆。检测每只小鼠肝脏匀浆的蛋白浓度。上述工作做好后，检测小鼠肝脏中GSH-Px(需要当天取，当天测试)，SOD，MDA的含量。2结果与分析2.1小鼠血清中SOD、GSH-Px活性和MDA含量表8小鼠血清SOD、GSH-Px活性和MDA含量的变化注：*p＜0.05，**p＜0.01，以正常组为对照。表8所示为小鼠进食含英红九号红茶超微粉、英红九号红茶提取物、茶黄素复合物及英红九号红茶复配物饲料后血清中SOD、GSH-Px活性及MDA的含量变化趋势。结果表明，给药组SOD和GSH-Px活性增加与对照组相比都达到了极显著差异水平(p<0.01)，其中英红九号红茶复配物处理组的SOD和GSH-Px活性最高。英红九号红茶超微粉组和英红九号红茶复配物处理组的MDA含量下降与对照组相比也有所下降，但没达到显著差异。从以上结果来看，英红九号红茶复配物较之单一的红茶成分更能显著提高小鼠血清中的抗氧化物质SOD、GSH-Px的活性，能更好地增强机体的抗氧化能力，减少机体损伤。2.2小鼠肝脏中SOD、GSH-Px活性和MDA含量表9小鼠肝脏SOD、GSH-Px活性和MDA含量的变化注：*p＜0.05，**p＜0.01，以正常组为对照。表9所示为小鼠进食含英红九号红茶超微粉、英红九号红茶提取物、茶黄素复合物及英红九号红茶复配物饲料后小鼠肝脏中SOD、GSH-Px活性及MDA的含量变化趋势。实验结果表明，茶黄素复合物组和英红九号红茶复配物组的SOD活性明显增加，与对照组相比均达到极显著差异水平(p<0.01)；茶黄素复合物组的GSH-Px活性有所增加，达到显著差异(p<0.05)，英红九号红茶复配物组的GSH-Px活性明显地增加，达到了极显著差异水平(p<0.01)。各给药组肝脏中的MDA含量与正常对照组相比没有显著差异。以上结果表明，茶黄素复合物和英红九号红茶复配物都能显著提高小鼠肝脏中的抗氧化物质SOD、GSH-Px的活性，以增强机体的抗氧化能力，减少机体损伤。2.3小鼠血清中TC、TG、HDL-C、LDL-C含量和AI指数的变化表10小鼠血清中TC、HDL-C、LDL-C、TG和AI指数的变化注：*p＜0.05，**p＜0.01，以正常组为对照。小鼠进食含英红九号红茶超微粉、英红九号红茶提取物、茶黄素复合物及英红九号红茶复配物饲料4周后，测定血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)的含量变化，根据公式动脉硬化指数(AI)＝[总胆固醇(TC)-高密度脂蛋白(HDL-C)]÷高密度脂蛋白(HDL-C)计算分析获得动脉粥样指数(AI)。由上表可知，各给药组对小鼠血清TC和TG的含量影响不大，英红九号红茶提取物组和茶黄素复合物组的HDL-C水平明显增加，与对照组相比达到显著差异(p<0.05)，红九号红茶复配物组的HDL-C水平也明显增加，并达到了极显著差异(p<0.01)；各给药组的LDL-C水平均有所下降，但达不到显著差异。从AI指数来看，各给药组的AI指数与对照组相比均有下降，其中红九号红茶复配物组的AI指数最低。可见，红九号红茶复配物可明显地降低小鼠血液动脉硬化指数AI，具有良好的降血脂功效。当前第1页1 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