本发明提出的是从金葵花籽中提取总黄酮的方法。
背景技术：
金葵为一年生草本锦葵科秋葵属植物。且粗状肉质根。茎粗状，基部木质化，叶互生，掌状，与蓖麻叶片相似，，每株开花数十朵，花大如碗，，每朵花重5-6克，花冠金黄，紫芯金蕊，艳丽非凡。主株和侧株均结果，果实似棉花桃铃，其中裹着一粒粒比绿豆略小褐色的种子。
金葵花籽非但无毒、无异味、无副作用，它可直接食用或以金葵花籽泡水代茶，金葵花籽可加工成油脂，除吃外可做化妆品和入药，对治疗烫伤和烧伤有显著效果。有关人士认为如果金葵花能够大量种植，将具有广阔的市场前景和很高的经济价值。专家指出，金葵花籽的奥秘就在于它含有多种生物活性物质，其生物黄酮含量高达6%，比目前在生物黄酮生产中广泛应用的银杏、大豆等含量高近百倍，是目前已知植物资源中含量最高的。其所含全价蛋白质、高聚糖胶、膳食纤维、微量元素硒、锌、多种不皂化物等，具有显著调节人体内分泌、免疫力，增加人体抗力，改善心脑血管及微循环功能，增强机体抗氧化能力，抗心脑缺血、缺氧、抗炎、镇疼，抗疲劳、抗衰老、抗癌、防癌、降血脂等功效。其在市场马上引起国内外花卉、食品、医药、保健品、化工界的广泛关注并一致看好。生物黄酮的开发作为世界前沿创新产业，国外每年以数百亿美元的规模在增长，是当前世界上最具活力的项目。因此开发黄酮市场意义重大。
技术实现要素：
本发明提出的是从金葵花籽中提取总黄酮的方法，它的生产过程是通过以下方法完成的。粉碎工序、加料工序、超声波萃取工序、真空过滤工序、总黄酮含量的分析等工序完成的。
粉碎工序
称取２ｇ金葵花籽，用粉碎机粉碎。
加料工序：
准确称取金葵花籽细粉２ｇ，用ｗ（乙醇）＝95％的乙醇处理，金葵花籽与乙醇溶液的比（以下简称料液比）为１∶１０（ｇ／ｍｌ）。
超声波萃取工序
用超声波提取１ｈ，提取温度为55-65℃。
真空过滤工序
将上述液体在-93.5kp时过滤，滤饼弃去。
总黄酮含量的分析
定容至过滤前体积，取５ｍｌ样品（淡黄）置２５ｍｌ容量瓶中，各加水至６．０ｍｌ，加ｗ（亚硝酸钠）＝５％溶液１ｍｌ，混匀，静止（无颜色变化）；加ｗ（硝酸铝）＝１０％溶液１ｍｌ，摇匀，静止（溶液呈黄色）；加ｗ（氢氧化钠）＝４％溶液１０ｍｌ（溶液呈红色）；再加水至刻线，摇匀，静止放置。
检测波长的选择
准确称取芦丁质量４．９８２ｍｇ，加甲醇１０ｍｌ溶解，加水稀释为２５ｍｌ溶液［ρ（芦丁）≈０．２ｍｇ／ｍｌ］，精密量取对照品溶液５．０ｍｌ置２５ｍｌ量瓶中，加水至６．０ｍｌ，加５％亚硝酸钠溶液１ｍｌ，混匀，静止；加ｗ（硝酸铝）＝１０％溶液１ｍｌ，摇匀，静止；加ｗ（氢氧化钠）＝４％溶液１０ｍｌ，再加水至刻线，摇匀，静止放置。采用紫外分光光度法确定芦丁的最大吸收波长，供试品最大吸收波长按同样的步骤检测。
标准曲线的确定
准确称取芦丁４．９８２ｍｇ，加甲醇１０ｍｌ溶解，加水稀释为２５ｍｌ溶液［ρ（芦丁）≈０．２ｍｇ／ｍｌ］，精密量取对照品溶液０，１．０，２．０，３．０，４．０，５．０，６．０ｍｌ，分别置２５ｍｌ量瓶中，各加水至６．０ｍｌ，加ｗ（亚硝酸钠）＝５％溶液１ｍｌ，混匀，静止；加ｗ（硝酸铝）＝１０％溶液１ｍｌ，摇匀，静止；加ｗ（氢氧化钠）＝４％溶液１０ｍｌ，再加水至刻线，摇匀，静止放置。
用７２２型分光光度计在上述确定的最大吸收波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。标准曲线方程：ｙ＝０．０１０９ｘ－０．０２７８
ｒ２＝０．９９５６ｒ＝０．９９７８。
具体实施方式
粉碎工序
将金葵花籽用粉碎机粉碎，准确称取２ｇ备用。
加料工序：
准确称取金葵花籽粉２ｇ，取95％（质量分数）的乙醇20ml。
超声波萃取工序
用超声波萃取１ｈ，萃取温度为60℃。
真空过滤工序：
将上述液体在-93.5kp时过滤，滤饼弃去。
总黄酮含量的分析
定容至过滤前体积，取５ｍｌ样品（淡黄）置２５ｍｌ量瓶中，各加水至６．０ｍｌ，加ｗ（亚硝酸钠）＝５％溶液１ｍｌ，混匀，静止（无颜色变化）；加ｗ（硝酸铝）＝１０％溶液１ｍｌ，摇匀，静止（溶液呈黄色）；加ｗ（氢氧化钠）＝４％溶液１０ｍｌ（溶液呈红色）；再加水至刻线，摇匀，静止放置。
检测波长的选择
准确称取芦丁质量４．９８２ｍｇ，加甲醇１０ｍｌ溶解，加水稀释为２５ｍｌ溶液［ρ（芦丁）≈０．２ｍｇ／ｍｌ］，精密量取对照品溶液５．０ｍｌ置２５ｍｌ量瓶中，加水至６．０ｍｌ，加５％亚硝酸钠溶液１ｍｌ，混匀，静止；加ｗ（硝酸铝）＝１０％溶液１ｍｌ，摇匀，静止；加ｗ（氢氧化钠）＝４％溶液１０ｍｌ，再加水至刻线，摇匀，静止放置。采用紫外分光光度法确定芦丁的最大吸收波长，供试品最大吸收波长按同样的步骤检测。
标准曲线的确定
准确称取芦丁４．９８２ｍｇ，加甲醇１０ｍｌ溶解，加水稀释为２５ｍｌ溶液［ρ（芦丁）≈０．２ｍｇ／ｍｌ］，精密量取对照品溶液０，１．０，２．０，３．０，４．０，５．０，６．０ｍｌ，分别置２５ｍｌ量瓶中，各加水至６．０ｍｌ，加ｗ（亚硝酸钠）＝５％溶液１ｍｌ，混匀，静止；加ｗ（硝酸铝）＝１０％溶液１ｍｌ，摇匀，静止；加ｗ（氢氧化钠）＝４％溶液１０ｍｌ，再加水至刻线，摇匀，静止放置。
用７２２型分光光度计在上述确定的最大吸收波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。标准曲线方程：ｙ＝０．０１０９ｘ－０．０２７８
ｒ２＝０．９９５６ｒ＝０．９９７８。