本发明属于医药技术领域，具体涉及一种预防犊牛腹泻的中药微生态制剂及其制备方法。
背景技术：
犊牛腹泻(calfdiarrhea)是一种常见疾病，出生2天-2月的犊牛均可发生，死亡率高达70％，是当前犊牛多发病之一，给养牛业带来较大经济损失。该病主要症状为腹泻，粪便呈稀汤或水样，会发生脱水、酸中毒，后期死亡率较高。该病以消化道为主要传播途径，传播迅速且易造成流行。国内外临床上多采用抗生素治疗，但容易产生耐药性及畜产品药物残留超标问题，危害人畜健康及公共卫生安全。
部分中医学者针对犊牛腹泻的问题进行了研究，并研发出不同配方的中药组合物，从而大大降低了犊牛腹泻的几率，避免了耐药性和药物残留超标的问题。但是现有的中药制剂中，有部分中药会对犊牛的胃肠道造成一定的刺激和损伤，如造成菌群紊乱，也会影响犊牛的肌体状况，因此中药组合物的应用受到了一定的限制。研发能够兼具预防腹泻、保护犊牛胃肠道以及促进犊牛生长发育效果的添加剂成为棘手的问题。
技术实现要素：
为了解决上述问题，本发明的目的是提供一种预防犊牛腹泻的中药微生态制剂及其制备方法，能够促进瘤胃发育，调节瘤胃ph值，保护胃肠道，抑制肠道病原微生物，降低腹泻率，提高犊牛成活率和日增重，提前断奶，提高养殖效益。
为了实现上述目的，本发明所采用的技术方案是：
一种预防犊牛腹泻的中药微生态制剂，包括复合微生物和中药组合物，其中，中药组合物包括以下重量比的中药原料：炒麦芽5-15：山楂5-15：神曲5-15：黄芪5-15：鸡内金5-15：陈皮5-15：黄柏5-15：石榴皮5-15：牛至5-15；
复合微生物包括保加利亚乳杆菌、嗜热链球菌、双歧杆菌、枯草芽孢杆菌、蜡样芽胞杆菌和粪肠球菌，它们的活菌数量比为(2-1)：(2-1)：(2-1)：(2-1)：(2-1)：(2-1)；复合微生物的活菌总数≥1×1010cfu/g中药微生态制剂。
优选的，所述的中药组合物包括以下重量比的中药原料：炒麦芽10：山楂10：神曲10：黄芪10：鸡内金10：陈皮10：黄柏10：石榴皮10：牛至10。
一种预防犊牛腹泻的中药微生态制剂的制备方法，包括以下步骤：
(1)将保存的保加利亚乳杆菌、嗜热链球菌、双歧杆菌、枯草芽孢杆菌、蜡样芽胞杆菌和粪肠球菌的菌液分别以1‰的接种量接种于各自的液体培养基中，在38℃条件下摇动培养过夜，转速为200rpm；
(2)按重量比称取各中药原料，并将各中药原料分别进行粉碎后混合均匀，作为固体基料；
(3)按照每100g固体基料添加20ml培养液的比例，将固体基料和步骤(1)各菌种的培养液分别混合，并搅拌均匀；
(4)将步骤(3)各菌种培养液和固体基料的混合物分别在38℃条件下密闭培养24h以上，并测定各菌种培养物的活菌数量，保证各菌种培养物的活菌数量符合中药微生态制剂活菌要求；
(5)将步骤(4)的各菌种培养物分别在45℃条件下干燥48h，粉碎分装，制成各菌种的制剂；
(6)将各菌种的制剂按各菌种的活菌数量比混合，制得中药微生态制剂，并保证活菌总数≥1×1010cfu/g中药微生态制剂。
所述的保加利亚乳杆菌的液体培养基为：蛋白胨10g、牛肉膏10g、酵母膏5g、k2hpo42g、醋酸钠5g、柠檬酸铵2g、葡萄糖20g、吐温801ml、mgso4·7h2o0.25g、mnso4·4h2o0.58g、蒸馏水1000ml。
所述的嗜热链球菌的液体培养基为：乳清500ml、蒸馏水500ml、胰蛋白胨5g、葡萄糖1g、酵母膏2.5g、琼脂20g，ph6.5。
所述的双歧杆菌的液体培养基为：胰蛋白胨5g、大豆蛋白胨5g、酵母粉10g、葡萄糖10g、吐温801ml、琼脂15-20g、l-半胱氨酸盐酸盐0.05g、盐溶液4ml、蒸馏水1000ml；所述的盐溶液为：cacl20.2g、k2hpo41.0g、kh2po41.0g、mgso4·7h2o0.48g、na2co310g、nacl2g、蒸馏水1000ml。
所述的枯草芽孢杆菌和蜡样芽胞杆菌的液体培养基为：胰蛋白胨10g、牛肉膏3g、氯化钠5g、蒸馏水1000ml，ph7.4。
所述的粪肠球菌的液体培养基为：胰蛋白胨10g、牛肉膏10g、酵母粉5g、k2hpo42g、柠檬酸二铵2g、乙酸钠5g、葡萄糖20g、吐温801ml、mgso4·7h2o0.58g、mnso4·4h2o0.25g、蒸馏水1000ml。
炒麦芽，主治食积不消，脘腹胀痛，脾虚食少，乳汗郁积，乳房胀痛，妇女断乳。
山楂，味酸甘，性微温，入脾、胃、肝经。功能主治：消食积，散瘀血，驱绦虫。治肉积，症瘕，痰饮，痞满，吞酸，泻痢，肠风，腰痛，疝气产后儿枕痛，恶露不尽，小儿乳食停滞。消食健胃，行气散瘀。用于肉食积滞、胃烷胀满、泻痢腹痛、瘀血经闭、产后瘀阻、心腹刺痛、疝气疼痛、高血脂症。
神曲，味甘、辛，性温。归脾、胃经。功能主治：消食和胃。主治饮食积滞，脘腹胀满，食少纳呆。
黄芪，味甘，性微温。归肺、脾、肝、肾经。功能主治：表虚自汗、阴虚盗汗、急慢性肾炎水肿、阳气虚弱、疮疡溃破、肺气虚证、气虚衰弱。
鸡内金，味甘，性平。归脾、胃、小肠、膀胱经。功能主治：健胃消食，涩精止遗，通淋化石。
陈皮，味苦、辛，性温。归肺、脾经。功能主治：理气健脾，燥湿化痰。用于脘腹胀满，食少吐泻，咳嗽痰多。
黄柏，味苦，性寒。归肾、膀胱经。功能主治：清热燥湿，泻火除蒸，解毒疗疮。用于湿热泻痢，黄疸尿赤，带下阴痒，热淋涩痛，脚气痿蹙，骨蒸劳热，盗汗，遗精，疮疡肿毒，湿疹湿疮。盐黄柏滋阴降火。用于阴虚火旺，盗汗骨蒸。
石榴皮，味酸、涩，性温。归大肠经。功能主治：涩肠止泻，止血，驱虫。用于久泻，久痢，便血，脱肛，崩漏，带下，虫积腹痛。
牛至，味辛，性凉。功能主治：发汗解表，消暑化湿。用于中暑，感冒，急性胃肠炎，腹痛。
本发明的有益效果：
1、本发明利用中药不易产生耐药性及畜产品药物残留的特点，选择对犊牛的胃肠道基本无刺激和损伤的中药原料炒麦芽、山楂、神曲、黄芪、鸡内金、陈皮、黄柏、石榴皮、牛至等进行科学配伍，利用其相互之间的协同作用，能够有效抑制肠道病原微生物，降低犊牛腹泻率，促进瘤胃发育，调节瘤胃ph值，提高犊牛成活率和日增重，提前断奶，提高养殖效益。
2、本发明的复合微生物是本发明的另一个创新点，本发明将不同的微生物进行合理配比，能够进一步抑制肠道病原微生物的生长，提高肠道中有益微生物的数量，降低犊牛腹泻率，同时复合微生物的加入，能够调节胃肠道内的微环境，调节瘤胃ph值，促进瘤胃发育，保护胃肠道健康，促进胃肠道对营养成分、维生素和矿物质的吸收，促进犊牛的生长发育。
3、本发明将中药原料破碎混合后，在保加利亚乳杆菌、嗜热链球菌、双歧杆菌、枯草芽孢杆菌、蜡样芽胞杆菌和粪肠球菌的共同作用下，发酵得到中药微生态制剂，其中的中药原料有效成分、活性物质被最大程度的提取和利用，有利于犊牛的吸收，且发酵后产生的新的活性物质，能够进一步提高犊牛的抗病能力，促进犊牛的生长发育。本发明的产品融合了中草药活性成分、有益微生物等物质，并在该基础上进行了发酵优化，实现了中药和微生物利用的最大化，具有良好的社会和经济效益。
具体实施方式
以下结合实施例对本发明的具体实施方式作进一步详细说明。
本发明培养菌种所用的液体培养基可以为常规的液体培养基，也可以自行配制，具体的，本发明所用的液体培养基如下：
保加利亚乳杆菌的液体培养基为：蛋白胨10g、牛肉膏10g、酵母膏5g、k2hpo42g、醋酸钠5g、柠檬酸铵2g、葡萄糖20g、吐温801ml、mgso4·7h2o0.25g、mnso4·4h2o0.58g、蒸馏水1000ml。
嗜热链球菌的液体培养基为：乳清500ml、蒸馏水500ml、胰蛋白胨5g、葡萄糖1g、酵母膏2.5g、琼脂20g，ph6.5。
双歧杆菌的液体培养基为：胰蛋白胨5g、大豆蛋白胨5g、酵母粉10g、葡萄糖10g、吐温801ml、琼脂15-20g、l-半胱氨酸盐酸盐0.05g、盐溶液4ml、蒸馏水1000ml；所述的盐溶液为：cacl20.2g、k2hpo41.0g、kh2po41.0g、mgso4·7h2o0.48g、na2co310g、nacl2g、蒸馏水1000ml。
枯草芽孢杆菌和蜡样芽胞杆菌的液体培养基为：胰蛋白胨10g、牛肉膏3g、氯化钠5g、蒸馏水1000ml，ph7.4。
粪肠球菌的液体培养基为：胰蛋白胨10g、牛肉膏10g、酵母粉5g、k2hpo42g、柠檬酸二铵2g、乙酸钠5g、葡萄糖20g、吐温801ml、mgso4·7h2o0.58g、mnso4·4h2o0.25g、蒸馏水1000ml。
实施例1
一种预防犊牛腹泻的中药微生态制剂，包括复合微生物和中药组合物，其中，中药组合物包括以下重量比的中药原料：炒麦芽10：山楂10：神曲10：黄芪10：鸡内金10：陈皮10：黄柏10：石榴皮10：牛至10。
复合微生物包括保加利亚乳杆菌、嗜热链球菌、双歧杆菌、枯草芽孢杆菌、蜡样芽胞杆菌和粪肠球菌，它们的活菌数量比为1：1：1：1：1：1；复合微生物的活菌总数≥1×1010cfu/g中药微生态制剂。
所述的预防犊牛腹泻的中药微生态制剂的制备方法，包括以下步骤：
(1)将保存的保加利亚乳杆菌、嗜热链球菌、双歧杆菌、枯草芽孢杆菌、蜡样芽胞杆菌和粪肠球菌的菌液分别以1‰的接种量接种于各自的液体培养基中，在38℃条件下摇动培养过夜，转速为200rpm；
(2)按重量比称取各中药原料，并将各中药原料分别进行粉碎后混合均匀，作为固体基料；
(3)按照每100g固体基料添加20ml培养液的比例，将固体基料和步骤(1)各菌种的培养液分别混合，并搅拌均匀；
(4)将步骤(3)各菌种培养液和固体基料的混合物分别在38℃条件下密闭培养24h以上，并测定各菌种培养物的活菌数量，保证各菌种培养物的活菌数量符合中药微生态制剂活菌要求；
(5)将步骤(4)的各菌种培养物分别在45℃条件下干燥48h，粉碎分装，制成各菌种的制剂；
(6)将各菌种的制剂按各菌种的活菌数量比混合，制得中药微生态制剂，并保证活菌总数≥1×1010cfu/g中药微生态制剂。
实施例2
一种预防犊牛腹泻的中药微生态制剂，包括复合微生物和中药组合物，其中，中药组合物包括以下重量比的中药原料：炒麦芽15：山楂5：神曲15：黄芪5：鸡内金5：陈皮5：黄柏15：石榴皮5：牛至5。
复合微生物包括保加利亚乳杆菌、嗜热链球菌、双歧杆菌、枯草芽孢杆菌、蜡样芽胞杆菌和粪肠球菌，它们的活菌数量比为2：2：1：1：1：2；复合微生物的活菌总数≥1×1010cfu/g中药微生态制剂。
所述的中药微生态制剂的制备方法同实施例1。
实施例3
一种预防犊牛腹泻的中药微生态制剂，包括复合微生物和中药组合物，其中，中药组合物包括以下重量比的中药原料：炒麦芽5：山楂15：神曲5：黄芪15：鸡内金15：陈皮15：黄柏5：石榴皮15：牛至15。
复合微生物包括保加利亚乳杆菌、嗜热链球菌、双歧杆菌、枯草芽孢杆菌、蜡样芽胞杆菌和粪肠球菌，它们的活菌数量比为1：1：1：2：2：2；复合微生物的活菌总数≥1×1010cfu/g中药微生态制剂。
所述的中药微生态制剂的制备方法同实施例1。
应用试验
1、试验材料
动物试验在某牧场进行，选用体重相近、出生10日龄犊牛180头，随机分成6组，试验组1-3、对照组1-2和空白对照组，每组3个重复，每个重复10头犊牛。试验组1-3分别在牛奶中添加2％的实施例1-3的中药微生态制剂及补饲颗粒料，对照组1在牛奶中添加同实施例1的复合微生物及补饲颗粒料，对照组2在牛奶中添加2％同实施例1的的中药组合物及补饲颗粒料，空白对照组仅饲喂牛奶和补饲颗粒料。补饲颗粒料的添加量为常规饲喂量，让犊牛自由采食，少喂勤添。
2、饲养管理
试验期共50d，期间犊牛自由采食，自由饮水。实验过程按牧场要求进行卫生清理、预防免疫、圈舍消毒等日常管理。
3、测定项目及方法
(1)日增重。第1天早晨饲前逐头称试验犊牛空腹体重作为初始体重，试验结束时空腹体重作为终体重，记录以计算平均日增重，日增重＝(终重-始重)/天数。
(2)腹泻发病率。计算试验期内，不同组别的试验犊牛的腹泻发病情况。
4、结果与分析
表1：不同添加剂对犊牛日增重、腹泻率的影响
从表1中可以看出：试验组和对照组均具有预防犊牛腹泻的作用，但试验组的效果明显优于对照组，且试验组的添加剂最大限度促进了动物肠道对营养物质的吸收，显著提高了犊牛的日增重。
以上所述仅为本发明最佳的实施例，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。