一种大鼠视网膜振荡电位检测及结果测量的方法与流程

本发明属于神经生物检测领域，具体涉及大鼠视网膜振荡电位检测及结果测量方法。

背景技术：

视网膜电图（erg）是常用的评估视网膜功能的客观手段之一。国际临床视觉电生理协会（iscev）规定的常规erg检查项目包括暗适应视杆细胞反应、暗适应最大混合反应、暗适应振荡电位反应（ops）、明适应视锥细胞反应和明适应闪烁反应，通常称为“国标五项”。在临床实际工作中，对视杆、视锥及最大混合反应的研究和应用比较多，有时为完成对某些特定疾病的研究，也需要对ops进行关注。目前商品化的视网膜电图检测仪的检测对象主要是人类，而在研究工作中有时存在对大鼠等实验动物进行视网膜电图检测的需求，但由于一方面并没有专门针对大鼠的商品化的电生理仪可以直接对大鼠进行检测，需要对检测电极等硬件设施进行改造，对检测参数进行重新设置，方能得到比较清晰的ops波形，另一方面由于目前国内外对大鼠ops的研究相较而言较少，对检测参数设置及检测结果图形的客观的测量方法仍不够成熟，故对大鼠振荡电位的研究方法仍存在很大局限性，给大鼠视网膜功能的研究造成了一定的困扰。基于上述背景，本发明在研究大鼠甲醇中毒后视网膜振荡电位的研究过程中，摸索出一套较为完整和可靠的大鼠振荡电位的检测和测量方法，具有一定的先进性和创新性。

技术实现要素：

本发明的目的是提供一种准确有效的大鼠视网膜振荡电位检测和测量方法。

本发明的技术方案如下：

一种大鼠视网膜振荡电位检测及结果测量方法，其特征在于，所述方法包括：

（1）采用10%水合氯醛按照3.5ml/kg剂量行腹腔注射麻醉sd大鼠；

（2）将大鼠头部和四肢固定在平板上，于眼部滴加复方托吡卡胺进行散瞳；20分钟后，在瞳孔充分散大的情况下，角膜滴加盐酸丁卡因进行表面麻醉；所述大鼠事先进行足够时间的暗适应，以保证它们眼球达到足够暗适应整个记录过程中在微弱红光下进行；

（3）采用德国roland视觉电生理系统检测大鼠视网膜振荡电位，其中刺激器为ganzfelzq450，ops反应的闪光强度为0db，刺激频率为0.07hz，循环时间为14s，累积时间为150ms，放大器带宽设置为1-300hz，电压为+/-1mv；记录电极采用自制环状角膜接触电极，参考电极和地电极为自制针状电极，保证电阻<2欧姆；

（4）采用单眼分别记录的方法，大鼠角膜表面滴加氧氟沙星透明眼膏，记录电极置于检测眼的角膜上，参考电极刺入大鼠前额正中皮下，地电极刺入颊囊处皮下，整个记录过程在微弱红光下进行；

（5）获得大鼠ops波形。

其中优选的，所述的足够时间的暗适应，是指将大鼠置于绝对的黑暗环境达4小时。

优选的，所述的自制环状角膜接触电极直径为3.0mm的镀银铜电极，所述的自制针状电极为镀银铜电极。

进一步优选的，整个记录过程在电生理屏蔽室内进行。

本发明的有益效果是：

本发明通过采用德国roland视觉电生理系统检测大鼠视网膜振荡电位，特异性优化了大鼠视网膜振荡电位检测时的各项参数，并获得了可用的ops波。本发明为动物视网膜振荡电位检测和测量提供了很好的借鉴。

附图说明

图1：采用德国roland视觉电生理系统检测获得的大鼠ops波形。

图2：大鼠视网膜振荡电位ops波测量。

具体实施方式

实施例1大鼠视网膜振荡电位检测

采用德国roland视觉电生理系统，刺激器为ganzfelzq450。ops反应的闪光强度为0db，刺激频率为0.07hz，循环时间为14s，累积时间为150ms。放大器带宽设置为1-300hz，电压为+/-1mv。记录电极采用自制环状角膜接触电极（直径为3.0mm，镀银铜电极）。参考电极和地电极为自制针状电极（镀银铜电极）。在行ops检测前，对所有实验动物进行足够时间的暗适应，将实验动物置于绝对的黑暗环境达4小时，以保证他们眼球达到足够暗适应。在检测前，采用10%水合氯醛按照3.5ml/kg剂量行腹腔注射麻醉sd大鼠。将实验动物头部和四肢固定在平板上，与眼部滴加复方托吡卡胺进行散瞳。20分钟后，在瞳孔充分散大的情况下，角膜滴加盐酸丁卡因进行表面麻醉。采用单眼分别记录的方法，大鼠角膜表面滴加氧氟沙星透明眼膏，记录电极置于检测眼的角膜上，参考电极刺入大鼠前额正中皮下，地电极刺入颊囊处皮下。整个记录过程中在微弱红光下进行，保证电阻<2欧姆。整个记录过程在电生理屏蔽室内进行。基于上述检测方法，可以得到较为清晰可辨的大鼠ops波形（如图1所示）

实施例2视网膜振荡电位测量

对图1的ops波进行测量。ops波是由一系列的小波组成。由于个体差异等原因，每只实验大鼠引出ops小波的数量并不完全一致。我们推荐选取能够稳定引出的前5个小波进行结果数据计算。关于ops反应的计算方法：前5个小波的振幅（os1-5）及这5个小波振幅相加求和作为ops波的总振幅(summedamplitudeofpreviousfivewavelets,saop)，将从第1个小波开始出现到第5个小波结束的时间作为整个ops波经历的总时程（elapsedtime,et），并将相邻波峰之间的时间间隔记为峰间隔（interpeakinterval,ipi)。测量方法如图2所示；将上述os1-5，saop，ipi1-4，et作为ops反应的测量指标。

技术特征：

技术总结
本发明属于神经生物检测领域，涉及大鼠视网膜振荡电位检测及结果测量方法。该方法包括，采用采用德国Roland视觉电生理系统，通过参数调整优化，实现对大鼠视网膜振荡电位的检测，并通过对Ops波计算测量电位。经检测结果显示，本发明通过采用德国Roland视觉电生理系统检测大鼠视网膜振荡电位，特异性优化了大鼠视网膜振荡电位检测时的各项参数，并获得了可用的Ops波。本发明为动物视网膜振荡电位检测和测量提供了很好的借鉴。

技术研发人员：陈捷敏;夏文涛
受保护的技术使用者：司法部司法鉴定科学技术研究所
技术研发日：2017.06.22
技术公布日：2019.01.01