本发明涉及一种水葫芦叶总黄酮的制备方法，属于中药有效成分提取领域。
背景技术：
水葫芦又名凤眼莲、洋水仙、水生风信子等，是雨久花科凤眼莲属的多年生漂浮水生草本植物。水葫芦繁殖速度快，生命力旺盛，而且往往缺乏天敌，所以在水域中常形成单一的优势群体，污染水体、破坏水中生态平衡，影响水产品的产量和质量，为蚊蝇孳生提供场所，阻碍水上交通。多年来，水葫芦的防治问题一直是令很多国家的专家都头疼的问题，被公认为“世界十大害草”之一。中国也深受水葫芦的危害，因此，许多科学家一直致力于研究水葫芦的物理、化学和生物防治方法。另外，如何将这一害草变废为宝，以提高其资源利用率，也是近年来的研究热点。
黄酮类化合物是广泛存在于植物界的一大类天然产物，具有抗氧化、抗衰老、抗辐射、抗肿瘤、抑菌抗病毒、抗心脑血管疾病、降血糖、调节免疫、治疗骨质疏松等作用。近年来黄酮类化合物的研究倾向于其药用价值的开发，更多地涉及提取工艺的应用研究、黄酮类化合物的含量测定及制剂制备。
目前对水葫芦叶总黄酮的提取多采用溶剂萃取法和微波协同提取法。溶剂萃取法中以乙醇提取法效率最高，但产品成分复杂、耗时；微波法节能、时间大为缩短，但泄露的微波更可能造成环境污染。
匀浆提取是指组织通过加入萃取溶剂进行组织匀浆或磨浆，以提取组织中有效成分的一种提取方法。应用匀浆法提取植物有效成分，可以直接将物料置于匀浆机内，与提取溶剂在匀浆装置中混合匀浆，通过机械及液力剪切作用将物料撕裂和粉碎，使物料破碎和有效成分的提取同步进行，达到对植物有效成分快速、强化提取的目的。
再结合超声波的空化效应以及机械效应，从而使细胞中的有效成分得以释放直接与溶剂接触并溶解在其中，从而提高有效成分的提取率。
技术实现要素：
本发明是针对现有技术的不足，旨在提供一种高效性和选择性、操作简便、产率高、副产物少、可工业化实现的制备水葫芦叶总黄酮的方法。
本发明的技术方案按照下列步骤进行：
a.将水葫芦叶阴干，粉碎，加入原料1~2倍的50~60%的乙醇，置于匀浆机中混合匀浆15min；
b.匀浆后，将物料置于超声波装置中，加入原料3~5倍的50~60%的乙醇溶液，进行超声萃取90~120min，减压浓缩，回收乙醇，得浓缩液；
c.将所得浓缩液上80~100目的聚酰胺树脂柱，经4~6倍树脂体积的60~70%的洗脱，收集洗脱液，浓缩、干燥，获得水葫芦叶总黄酮。
步骤a中所述的匀浆机功率为200w，匀浆转速为10000~20000r/min。
步骤b中所述的超声萃取的条件为：频率40khz，超声温度50~70℃。
步骤c中所述的树脂用量与原料的质量比为1:1。
本发明的优点在于：
1.本发明采用植物匀浆提取法处理原料，实现了粉碎、提取一步完成，同时由于免去了加热，从而可有效的避免总黄酮成分的破坏；
2.本发明采用匀浆-超声波萃取水葫芦叶总黄酮，具有生产成本低、快速、高效、提取率高的优点。
下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。
具体实施方式：
实施例1：
将水葫芦叶阴干，粉碎，加入原料1倍的50%的乙醇，置于匀浆机中，于200w、10000r/min的条件下混合匀浆15min；匀浆后，将物料置于频率40khz的超声波装置中，加入原料3倍的50%的乙醇溶液，于50℃的条件下进行超声萃取90min，减压浓缩，回收乙醇，得浓缩液；将所得浓缩液加入与原料等质量的80目的聚酰胺树脂柱中，经4倍树脂体积的70%的洗脱，收集洗脱液，浓缩、干燥，获得水葫芦叶总黄酮，经uv检测，总黄酮的含量为78.9%。
实施例2：
将水葫芦叶阴干，粉碎，加入原料2倍的60%的乙醇，置于匀浆机中，于200w、15000r/min的条件下混合匀浆15min；匀浆后，将物料置于频率40khz的超声波装置中，加入原料5倍的60%的乙醇溶液，于60℃的条件下进行超声萃取100min，减压浓缩，回收乙醇，得浓缩液；将所得浓缩液加入与原料等质量的100目的聚酰胺树脂柱中，经5倍树脂体积的60%的洗脱，收集洗脱液，浓缩、干燥，获得水葫芦叶总黄酮，经uv检测，总黄酮的含量为80.5%。
实施例3：
将水葫芦叶阴干，粉碎，加入原料2倍的55%的乙醇，置于匀浆机中，于200w、20000r/min的条件下混合匀浆15min；匀浆后，将物料置于频率40khz的超声波装置中，加入原料4倍的55%的乙醇溶液，于70℃的条件下进行超声萃取120min，减压浓缩，回收乙醇，得浓缩液；将所得浓缩液加入与原料等质量的100目的聚酰胺树脂柱中，经6倍树脂体积的65%的洗脱，收集洗脱液，浓缩、干燥，获得水葫芦叶总黄酮，经uv检测，总黄酮的含量为82.2%。
1.一种水葫芦叶总黄酮的制备方法，其特征在于：
a.将水葫芦叶阴干，粉碎，加入原料1~2倍的50~60%的乙醇，置于匀浆机中混合匀浆15min；
b.匀浆后，将物料置于超声波装置中，加入原料3~5倍的50~60%的乙醇溶液，进行超声萃取90~120min，减压浓缩，回收乙醇，得浓缩液；
c.将所得浓缩液上80~100目的聚酰胺树脂柱，经4~6倍树脂体积的60~70%的洗脱，收集洗脱液，浓缩、干燥，获得水葫芦叶总黄酮。
2.根据权利要求1所述的一种水葫芦叶总黄酮的制备方法，其特征在于，步骤a中所述的匀浆机功率为200w，匀浆转速为10000~20000r/min。
3.根据权利要求1所述的一种水葫芦叶总黄酮的制备方法，其特征在于，步骤b中所述的超声萃取的条件为：频率40khz，超声温度50~70℃。
4.根据权利要求1所述的一种水葫芦叶总黄酮的制备方法，其特征在于，步骤c中所述的树脂用量与原料的质量比为1:1。