慢性前列腺炎/慢性盆腔疼痛综合征的预防和/或治疗剂的制作方法

1.本发明涉及含有mpges-1抑制剂作为有效成分的慢性前列腺炎/慢性盆腔疼痛综合征的预防和/或治疗剂。


背景技术：

2.前列腺炎由美国nih分类为4个类别(急性细菌性前列腺炎、慢性细菌性前列腺炎、慢性前列腺炎/慢性盆腔疼痛综合征、无症状性炎症性前列腺炎)(非专利文献1)。类别i是因细菌感染而伴有排尿症状、疼痛、发热等全身症状的急性细菌性前列腺炎。类别ii是慢性细菌性前列腺炎，是类别i的慢性化的形式，被确认有复发性细菌感染的症状。类别iii是慢性前列腺炎/慢性盆腔疼痛综合征，被分类为以会阴部、睾丸部、阴茎部、小腹部等盆腔部的疼痛/不适感和残尿感、尿频等排尿症状作为主要症状的疾病。需要说明的是，类别iv的无症状性炎症性前列腺炎虽然无症状，但在前列腺活检组织标本、前列腺挤出液/精液中可确认到炎症表现。另外，还报道了在慢性前列腺炎患者的精浆中il-1β的表达显著升高，在慢性前列腺炎患者的前列腺挤出液中mip-1α及mcp-1的表达显著升高(非专利文献2及3)。
3.然而、类别iii的慢性前列腺炎/慢性盆腔疼痛综合征与类别i的急性细菌性前列腺炎及类别ii的慢性细菌性前列腺炎不同，由于病因不明，因此没有发现有效的治疗方法。
4.pge2合成酶(pges)中已知有膜结合型前列腺素e合成酶-1(mpges-1)、mpges-2及细胞质型pges(cpges)这3种亚型的存在(非专利文献4～6)。mpges-1与cox-2同样，主要在炎症时被诱导，参与炎症病变的pge2产生。另外，已知mpges-1与恶性肿瘤(例如，结肠癌、乳腺癌、肺癌、前列腺癌等)相关(参照非专利文献7、非专利文献8、非专利文献9)。
5.专利文献1中记载了以通式[1]表示的杂环衍生物、或者其互变异构体或其医药上允许的盐具有mpges-1抑制活性。另外，专利文献2及3中记载了具有mpges-1抑制活性的低分子化合物。非专利文献10中记载了canephron(注册商标)n含有植物来源成分，具有mpges-1抑制活性。
[0006]
然而，目前为止，尚未报告慢性前列腺炎与mpges-1通路的关系。
[0007]
现有技术文献
[0008]
专利文献
[0009]
专利文献1：wo2013/024898
[0010]
专利文献2：wo2011/023812
[0011]
专利文献3：wo2017/073709
[0012]
非专利文献
[0013]
非专利文献1：jama.1999 jul.21；282(3):236-7.
[0014]
非专利文献2：int.j.urol.2001 sep；8(9):495-499
[0015]
非专利文献3：j.urol.2008 may；179(5):1857-1862.
[0016]
非专利文献4：jakobsson等，proc.natl.acad.sci.usa,1999,96,7220-7225
[0017]
非专利文献5：biochem.biophys.res.commun.,2002,291,884-889
[0018]
非专利文献6：j.biol.chem.,2000,275,32775-32782
[0019]
非专利文献7：j.biol.chem.,2003,278(21),19396-19405
[0020]
非专利文献8：oncogene,2012,31(24),2943-2952
[0021]
非专利文献9：cancer res.,2008,68(9),3251-3259
[0022]
非专利文献10：j.phymed.2019,60,152987


技术实现要素：

[0023]
发明要解决的课题
[0024]
本发明要解决的课题在于提供慢性前列腺炎/慢性盆腔疼痛综合征的预防和/或治疗剂。
[0025]
解决课题的方法
[0026]
本发明人等着手阐明慢性前列腺炎/慢性盆腔疼痛综合征的病情，发现了mpges-1通路与慢性前列腺炎/慢性盆腔疼痛综合征相关。另外，本发明人等发现，通过使用mpges-1抑制剂能够减轻慢性前列腺炎在动物模型中的疼痛和炎症，从而完成了本发明。
[0027]
本发明涉及以下方式。
[0028]
(1)
[0029]
一种慢性前列腺炎/慢性盆腔疼痛综合征的预防和/或治疗剂，其含有mpges-1抑制剂作为有效成分。
[0030]
(2)
[0031]
根据上述(1)所述的慢性前列腺炎/慢性盆腔疼痛综合征的预防和/或治疗剂，
[0032]
mpges-1抑制剂为式[1]的化合物(以下也称为本化合物)、或者其互变异构体或其医药上允许的盐，其中，
[0033]
式[1]的化合物如以下式[1]所示，
[0034]
[化学式1]
[0035][0036]
[式[1]中，
[0037]
环a为式[2]、[3]或[4]表示的基团，
[0038]
[化学式2]
[0039][0040]
(式中，
[0041]
x1为nh、n-烷基、或o，
[0042]
a1为氢、或烷基，
[0043]
a2为：
[0044]
i)氢；
[0045]
ii)卤素；
[0046]
iii)任选被选自卤素、氨基、单烷基氨基、二烷基氨基、氨基甲酰基、单烷基氨基羰基、二烷基氨基羰基、饱和环状氨基羰基、烷氧基、烷氧基烷氧基、及烷基羰基氧基的1～3个基团取代的烷基；
[0047]
iv)任选被烷基取代的环烷基，该烷基任选被1～3个卤素取代；
[0048]
v)烷氧基；
[0049]
vi)任选被烷基、烷基氧羰基、烷基羰基、或氧取代的饱和杂环基；
[0050]
vii)烷硫基；
[0051]
viii)烷基磺酰基；
[0052]
ix)烷基亚磺酰基；
[0053]
x)式[5]表示的基团，
[0054]
[化学式3]
[0055][0056]
(式中，r3、r4相同或不同，为：
[0057]
a)氢；
[0058]
b)任选被选自以下的基团取代的烷基：单烷基氨基、二烷基氨基、任选被烷基取代的饱和环状氨基、任选被烷基取代的饱和杂环基、烷氧基、羟基羰基、羟基、烷基氧羰基、及烷硫基；或者
[0059]
c)环烷基)；或者
[0060]
xi)任选被烷基、氨基、单烷基氨基、二烷基氨基、烷氧基、或羟基取代的饱和环状氨基)，
[0061]
r1为苯基、苄基、萘基、环烷基、环烷基甲基、杂芳基、杂芳基甲基、1,2,3,4-四氢萘-5-基、1,2,3,4-四氢萘-6-基、2,3-二氢-1h-茚-4-基、2,3-二氢-1h-茚-5-基、1,2-二氢环丁苯-3-基、1,2-二氢环丁苯-4-基、或烷基，该苯基、苄基、环烷基、环烷基甲基、杂芳基、及杂芳基甲基任选被选自
[0062]
i)卤素、
[0063]
ii)任选被选自卤素、羟基、及苯基的1～3个基团取代的烷基、
[0064]
iii)烷氧基、
[0065]
iv)羟基、以及
[0066]
v)氰基
[0067]
的1～3个基团取代，
[0068]
r2为苯基、或吡啶基，该苯基、吡啶基任选被选自
[0069]
i)卤素、
[0070]
ii)烷基磺酰基、
[0071]
iii)任选被1～3个卤素或烷氧基取代的烷氧基、
[0072]
iv)任选被烷氧基烷基或环烷基取代的炔基、以及、
[0073]
v)任选被选自烷氧基、烷氧基烷氧基、环烷基、苯基、及卤素的1～3个基团取代的烷基
[0074]
的1～3个基团取代]。
[0075]
(3)
[0076]
根据上述(2)所述的慢性前列腺炎/慢性盆腔疼痛综合征的预防和/或治疗剂，其中，
[0077]
环a为式[4]表示的基团，x1为nh。
[0078]
(4)
[0079]
根据上述(2)或(3)所述的慢性前列腺炎/慢性盆腔疼痛综合征的预防和/或治疗剂，其中，
[0080]
r1为苯基、1,2,3,4-四氢萘-5-基、1,2,3,4-四氢萘-6-基、2,3-二氢-1h-茚-4-基、2,3-二氢-1h-茚-5-基、1,2-二氢环丁苯-3-基、或1,2-二氢环丁苯-4-基，该苯基任选被选自
[0081]
i)卤素、
[0082]
ii)任选被1～3个卤素取代的烷基、
[0083]
iii)烷氧基、以及
[0084]
iv)氰基
[0085]
的1～3个基团取代。
[0086]
(5)
[0087]
根据上述(2)～(4)中任一项所述的慢性前列腺炎/慢性盆腔疼痛综合征的预防和/或治疗剂，其中，
[0088]
r2为苯基，
[0089]
该苯基任选被选自
[0090]
i)卤素、
[0091]
ii)烷基磺酰基、
[0092]
iii)任选被烷氧基取代的烷氧基、
[0093]
iv)任选被烷氧基烷基或环烷基取代的炔基、以及
[0094]
v)任选被选自卤素、烷氧基、烷氧基烷氧基、环烷基、及苯基的1～3个基团取代的烷基
[0095]
的1～3个基团取代。
[0096]
(6)
[0097]
根据上述(2)～(5)中任一项所述的慢性前列腺炎/慢性盆腔疼痛综合征的预防和/或治疗剂，其中，
[0098]
环a为通式[4]表示的基团，x1为nh，
[0099]
a2为：
[0100]
i)氢；
[0101]
ii)任选被选自卤素、单烷基氨基、二烷基氨基、单烷基氨基羰基、二烷基氨基羰基、饱和环状氨基羰基、烷氧基、烷氧基烷氧基、及烷基羰基氧基的基团取代的烷基；
[0102]
iii)任选被烷基取代的环烷基，该烷基任选被1～3个卤素取代；
[0103]
iv)烷氧基；
[0104]
v)任选被烷基或者烷基氧羰基取代的饱和杂环基；
[0105]
vi)烷硫基；
[0106]
vii)烷基磺酰基；
[0107]
viii)烷基亚磺酰基；
[0108]
ix)任选被烷基取代的氨基，该烷基任选被选自单烷基氨基、二烷基氨基、任选被烷基取代的饱和环状氨基、四氢呋喃基、吗啉基、烷氧基、羟基羰基、羟基、及烷硫基的基团取代；
[0109]
x)任选被环烷基取代的氨基；或者
[0110]
xi)任选被烷基、二烷基氨基、烷氧基、或羟基取代的饱和环状氨基，r1为：
[0111]
i)任选被选自卤素、任选被1～3个卤素取代的烷基、烷氧基、及氰基的1～3个基团取代的苯基；
[0112]
ii)1,2,3,4-四氢萘-5-基；
[0113]
iii)2,3-二氢-1h-茚-5-基；
[0114]
iv)任选被卤素或烷基取代的苄基，该烷基任选被1～3个卤素取代；
[0115]
v)环烷基；
[0116]
vi)环烷基甲基；
[0117]
vii)萘基；
[0118]
viii)任选被烷基取代的吡啶基甲基，该烷基任选被1～3个卤素取代；
[0119]
ix)噻吩基；
[0120]
x)噻吩基甲基；
[0121]
xi)苯并噻唑基；
[0122]
xii)苯并噻二唑基；
[0123]
xiii)吲哚基；或者
[0124]
xiv)烷基，
[0125]
r2表示苯基或吡啶基，
[0126]
该苯基任选被选自
[0127]
i)卤素、
[0128]
ii)烷基磺酰基、
[0129]
iii)任选被烷氧基取代的烷氧基、
[0130]
iv)任选被烷氧基烷基或环烷基取代的炔基、以及
[0131]
v)任选被选自卤素、烷氧基、烷氧基烷氧基、环烷基、及苯基的1～3个基团取代的烷基
[0132]
的1～3个基团取代，
[0133]
该吡啶基任选被卤素取代。
[0134]
(7)
[0135]
根据上述(2)～(6)中任一项所述的慢性前列腺炎/慢性盆腔疼痛综合征的预防和/或治疗剂，其中，
[0136]
环a为通式[4]表示的基团，x1为nh，
[0137]
a2为被烷氧基取代的烷基、二烷基氨基、四氢呋喃基、四氢呋喃基甲基、烷氧基烷基氨基、或者无取代或任选被1～3个卤素取代烷基所取代的环烷基，
[0138]
r1为被1个卤素及1个甲基取代的苯基，
[0139]
r2为任选被1个三氟甲基或2个卤素取代的苯基。
[0140]
(8)
[0141]
根据上述(2)～(7)中任一项所述的慢性前列腺炎/慢性盆腔疼痛综合征的预防和/或治疗剂，其中，
[0142]
mpges-1抑制剂为选自以下的化合物、或者其互变异构体或其医药上允许的盐，
[0143]
(1)n-[2-(三氟甲基)苄基]-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0144]
(2)n-环己基-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0145]
(3)n-(3-氯-2-甲基苯基)-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0146]
(4)n-[(1-羟基环己基)甲基]-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0147]
(5)n-[2-(三氟甲基)苄基]-5-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基}-2,3-二氢-1-苯并呋喃-7-甲酰胺
[0148]
(6)n-环己基-5-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-2,3-二氢-1-苯并呋喃-7-甲酰胺
[0149]
(7)n-(3-氯-2-甲基苯基)-5-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-2,3-二氢-1-苯并呋喃-7-甲酰胺
[0150]
(8)n-环己基-5-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-吲唑-7-甲酰胺
[0151]
(9)n-[2-(三氟甲基)苄基]-5-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-吲唑-7-甲酰胺
[0152]
(10)n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-(甲氧基甲基)-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0153]
(11)2-甲基-n-[2-(三氟甲基)苄基]-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0154]
(12)n-环己基-2-甲基-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0155]
(13)n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-甲基-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0156]
(14)n-环戊基-2-甲基-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0157]
(15)n-环丁基-2-甲基-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲
酰胺
[0158]
(16)n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-乙基-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0159]
(17)n-环己基-2-乙基-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0160]
(18)2-乙基-n-[2-(三氟甲基)苄基]-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0161]
(19)n-环己基-2-(甲氧基甲基)-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0162]
(20)2-(甲氧基甲基)-n-[2-(三氟甲基)苄基]-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0163]
(21)2-(甲氧基甲基)-n-(2-甲基苯基)-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0164]
(22)2-(甲氧基甲基)-n-(4-甲基苯基)-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0165]
(23)n-(2-氯苄基)-2-(甲氧基甲基)-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0166]
(24)2-(甲氧基甲基)-n-(4-甲基苄基)-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0167]
(25)n-(4,4-二氟环己基)-2-(甲氧基甲基)-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0168]
(26)n-(4-叔丁基苯基)-2-(甲氧基甲基)-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0169]
(27)2-(甲氧基甲基)-n-[4-(三氟甲基)苯基]-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0170]
(28)n-(2,4-二甲基苯基)-2-(甲氧基甲基)-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0171]
(29)n-(2-氯-4-甲基苯基)-2-(甲氧基甲基)-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0172]
(30)n-(3,4-二甲基苯基)-2-(甲氧基甲基)-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0173]
(31)n-(3-氯-4-甲基苯基)-2-(甲氧基甲基)-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0174]
(32)n-(2,3-二氢-1h-茚-5-基)-2-(甲氧基甲基)-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0175]
(33)2-(甲氧基甲基)-n-(5,6,7,8-四氢萘-1-基)-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0176]
(34)n-(2-氟苯基)-2-(甲氧基甲基)-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
苯并咪唑-4-甲酰胺
[0197]
(55)2-乙氧基-n-[2-(三氟甲基)苄基]-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0198]
(56)n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-(1-氯-2-甲基丙烷-2-基)-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0199]
(57)n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-[(二甲基氨基)甲基]-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0200]
(58)n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-(2-甲基丙基)-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0201]
(59)2-(2-甲基丙基)-n-[2-(三氟甲基)苄基]-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0202]
(60)3-{4-[(3-氯-2-甲基苯基)氨基甲酰基]-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-2-基}氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯
[0203]
(61)n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-[(甲基氨基)甲基]-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0204]
(62){4-[(3-氯-2-甲基苯基)氨基甲酰基]-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-2-基}甲基乙酸酯
[0205]
(63)n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-[(2r)-四氢呋喃-2-基]-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0206]
(64)2-[(2r)-四氢呋喃-2-基]-n-[2-(三氟甲基)苄基]-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0207]
(65)n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-[(2s)-四氢呋喃-2-基]-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0208]
(66)2-[(2s)-四氢呋喃-2-基]-n-[2-(三氟甲基)苄基]-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0209]
(67)2-(1-乙酰基氮杂环丁烷-3-基)-n-(3-氯-2-甲基苯基)-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0210]
(68)(2s)-2-{4-[(3-氯-2-甲基苯基)氨基甲酰基]-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-2-基}吡咯烷-1-羧酸叔丁酯
[0211]
(69)(2r)-2-{4-[(3-氯-2-甲基苯基)氨基甲酰基]-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-2-基}吡咯烷-1-羧酸叔丁酯
[0212]
(70)n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-[(2s)-吡咯烷-2-基]-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0213]
(71)n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-[(2s)-1-甲基吡咯烷-2-基]-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0214]
(72)2-[(2s)-1-乙酰基吡咯烷-2-基]-n-(3-氯-2-甲基苯基)-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0215]
(73)n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-[(2-甲氧基乙氧基)甲基]-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0236]
(94)n-(3-氯-2-甲基苯基)-6-{[(2-氯苯基)羰基]氨基}-2-(甲氧基甲基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0237]
(95)n-(3-氯-2-甲基苯基)-6-{[(2-氯吡啶-3-基)羰基]氨基}-2-(甲氧基甲基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0238]
(96)6-{[(2-溴苯基)羰基]氨基}-n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-(甲氧基甲基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0239]
(97)n-(3-氯-2-甲基苯基)-6-{[(2,6-二氯苯基)羰基]氨基}-2-(甲氧基甲基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0240]
(98)n-(3-氯-2-甲基苯基)-6-{[(2,5-二氯苯基)羰基]氨基}-2-(甲氧基甲基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0241]
(99)6-{[(2-氯-3-氟苯基)羰基]氨基}-n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-(甲氧基甲基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0242]
(100)6-{[(2-氯-3,6-二氟苯基)羰基]氨基}-n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-(甲氧基甲基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0243]
(101)6-{[(2-溴-6-氯苯基)羰基]氨基}-n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-(甲氧基甲基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0244]
(102)6-{[(2-溴-6-氟苯基)羰基]氨基}-n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-(甲氧基甲基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0245]
(103)n-(3-氯-2-甲基苯基)-6-{[(2-氯-6-甲基苯基)羰基]氨基}-2-(甲氧基甲基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0246]
(104)n-(3-氯-2-甲基苯基)-6-{[(2-氯-4-甲基苯基)羰基]氨基}-2-(甲氧基甲基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0247]
(105)6-{[(5-溴-2-氯苯基)羰基]氨基}-n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-(甲氧基甲基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0248]
(106)6-{[(2-溴-5-氯苯基)羰基]氨基}-n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-(甲氧基甲基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0249]
(107)n-(3-氯-2-甲基苯基)-6-{[(2-氯-5-甲基苯基)羰基]氨基}-2-(甲氧基甲基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0250]
(108)n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-(甲氧基甲基)-6-({[5-甲基-2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0251]
(109)6-({[2,5-双(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-(甲氧基甲基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0252]
(110)6-({[2,4-双(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-(甲氧基甲基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0253]
(111)n-(3-氯-2-甲基苯基)-6-({[5-氟-2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-2-(甲氧基甲基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0254]
(112)n-(3-氯-2-甲基苯基)-6-({[2-氯-6-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-2-(甲氧基甲基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0255]
(113)n-(3-氯-2-甲基苯基)-6-[({2-氯-5-[2-(丙烷-2-基氧基)乙氧基]苯基}羰基)氨基]-2-(甲氧基甲基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0256]
(114)6-({[2-氯-5-(2-乙氧基乙氧基)苯基]羰基}氨基)-n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-(甲氧基甲基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0257]
(115)6-({[2-氯-5-(3-甲氧基丙基)苯基]羰基}氨基)-n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-(甲氧基甲基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0258]
(116)6-({[5-(3-叔丁氧基丙-1-炔-1-基)-2-氯苯基]羰基}氨基)-n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-(甲氧基甲基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0259]
(117)6-({[5-(3-叔丁氧基丙基)-2-氯苯基]羰基}氨基)-n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-(甲氧基甲基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0260]
(118)6-({[2-氯-5-(3-羟基-3-甲基丁基)苯基]羰基}氨基)-n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-(甲氧基甲基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0261]
(119)6-({[2-氯-5-(乙氧基甲基)苯基]羰基}氨基)-n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-(甲氧基甲基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0262]
(120)6-[({2-氯-5-[(2-乙氧基乙氧基)甲基]苯基}羰基)氨基]-n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-(甲氧基甲基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0263]
(121)6-({[2-氯-5-(2-环丙基乙基)苯基]羰基}氨基)-n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-(甲氧基甲基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0264]
(122)n-(3-氯-2-甲基苯基)-6-({[2-氯-5-(2-苯基乙基)苯基]羰基}氨基)-2-(甲氧基甲基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0265]
(123)n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-环戊基-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0266]
(124)n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-环戊基-6-{[(2,5-二氯苯基)羰基]氨基}-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0267]
(125)6-{[(2-氯-6-氟苯基)羰基]氨基}-n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-环戊基-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0268]
(126)6-{[(2-氯-6-氟苯基)羰基]氨基}-n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-[(2r)-四氢呋喃-2-基]-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0269]
(127)n-(3-氯-2-甲基苯基)-6-{[(2,6-二氯苯基)羰基]氨基}-2-[(2r)-四氢呋喃-2-基]-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0270]
(128)n-(3-氯-2-甲基苯基)-6-{[(2,5-二氯苯基)羰基]氨基}-2-[(2r)-四氢呋喃-2-基]-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0271]
(129)n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-[(2s)-5-氧代吡咯烷-2-基]-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0272]
(130)n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-[(2r)-5-氧代吡咯烷-2-基]-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0273]
(131)n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-[2-氧代-2-(吡咯烷-1-基)乙基]-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0274]
(132)n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-[2-(二甲基氨基)-2-氧代乙基]-6-({[2-(三氟甲
基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0275]
(133)n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-[2-(甲基氨基)-2-氧代乙基]-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0276]
(134)2-氯-n-(3-氯-2-甲基苯基)-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0277]
(135)n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-[(2-甲氧基乙基)氨基]-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0278]
(136)n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-[(2-羟基乙基)氨基]-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0279]
(137)n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-(甲基氨基)-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0280]
(138)n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-(乙基氨基)-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0281]
(139)n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-[(2,2-二甲基丙基)氨基]-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0282]
(140)n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-(环戊基氨基)-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0283]
(141)n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-(哌啶-1-基)-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0284]
(142)n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-(4-甲基哌嗪-1-基)-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0285]
(143)2-[双(2-羟基乙基)氨基]-n-(3-氯-2-甲基苯基)-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0286]
(144)n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-(二甲基氨基)-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0287]
(145)n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-{[2-(吗啉-4-基)乙基]氨基}-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0288]
(146)n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-{[2-(二甲基氨基)乙基]氨基}-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0289]
(147)n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-(3-羟基氮杂环丁烷-1-基)-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0290]
(148)n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-[(3s)-3-(二甲基氨基)吡咯烷-1-基]-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0291]
(149)n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-[(3s)-3-羟基吡咯烷-1-基]-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0292]
(150)n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-{[2-(二乙基氨基)乙基]氨基}-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0293]
(151)n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-{[2-(吡咯烷-1-基)乙基]氨基}-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0314]
(172)n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-[(3-甲氧基-2,2-二甲基丙基)(甲基)氨基]-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0315]
(173)n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-[(3-甲氧基丙基)氨基]-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0316]
(174)n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-{[2-(丙烷-2-基氧基)乙基]氨基}-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0317]
(175)2-[(2-叔丁氧基乙基)氨基]-n-(3-氯-2-甲基苯基)-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0318]
(176)n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-[(2-甲氧基-2-甲基丙基)氨基]-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0319]
(177)n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-{[2-(甲硫基)乙基]氨基}-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0320]
(178)n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-(甲硫基)-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0321]
(179)n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-(甲基磺酰基)-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0322]
(180)n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-(甲基亚磺酰基)-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0323]
(181)6-{[(2-氯-6-氟苯基)羰基]氨基}-n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-(二甲基氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0324]
(182)n-(3-氯-2-甲基苯基)-6-{[(2,6-二氯苯基)羰基]氨基}-2-(二甲基氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0325]
(183)n-(3-氯-2-甲基苯基)-6-{[(2,4-二氯苯基)羰基]氨基}-2-(二甲基氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0326]
(184)n-(3-氯-2-甲基苯基)-6-{[(2,5-二氯苯基)羰基]氨基}-2-(二甲基氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0327]
(185)6-{[(2-溴-6-氟苯基)羰基]氨基}-n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-(二甲基氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0328]
(186)6-{[(2-溴-6-氯苯基)羰基]氨基}-n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-(二甲基氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0329]
(187)6-({[2-氯-5-(环丙基乙炔基)苯基]羰基}氨基)-n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-(二甲基氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0330]
(188)n-(3-氯-2-甲基苯基)-6-{[(2,5-二氯苯基)羰基]氨基}-2-[(3-羟基-2,2-二甲基丙基)氨基]-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0331]
(189)n-(3-氯-2-甲基苯基)-6-{[(2,5-二氯苯基)羰基]氨基}-2-[(3-甲氧基-2,2-二甲基丙基)氨基]-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0332]
(190)n-(3-氯-2-甲基苯基)-6-{[(2,5-二氯苯基)羰基]氨基}-2-[(2-羟基-2-甲基丙基)氨基]-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0333]
(191)n-(3-氯-2-甲基苯基)-6-{[(2,5-二氯苯基)羰基]氨基}-2-[(2-甲氧基-2-甲基丙基)氨基]-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0334]
(192)n-(3-氯-2-甲基苯基)-6-{[(2,5-二氯苯基)羰基]氨基}-2-{[2-(丙烷-2-基氧基)乙基]氨基}-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0335]
(193)6-{[(2-氯-6-氟苯基)羰基]氨基}-n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-{[2-(丙烷-2-基氧基)乙基]氨基}-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0336]
(194)2-[(2-叔丁氧基乙基)氨基]-6-{[(2-氯-6-氟苯基)羰基]氨基}-n-(3-氯-2-甲基苯基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0337]
(195)6-{[(2-氯-6-氟苯基)羰基]氨基}-n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-[(3-甲氧基-2,2-二甲基丙基)氨基]-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0338]
(196)6-{[(2-氯-6-氟苯基)羰基]氨基}-n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-[(2-甲氧基-2-甲基丙基)氨基]-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0339]
(197)6-{[(2-氯-6-氟苯基)羰基]氨基}-n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-{[(2s)-四氢呋喃-2-基甲基]氨基}-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0340]
(198)6-{[(2-氯-6-氟苯基)羰基]氨基}-n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-{[(2r)-四氢呋喃-2-基甲基]氨基}-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0341]
(199)6-{[(2-氯-6-氟苯基)羰基]氨基}-n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-[(3-羟基-2,2-二甲基丙基)氨基]-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0342]
(200)6-{[(2-氯-6-氟苯基)羰基]氨基}-n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-{[(2s)-1-羟基-3-甲基丁烷-2-基]氨基}-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0343]
(201)n-(3-氯-4-甲基苯基)-2-(二甲基氨基)-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0344]
(202)n-(4-叔丁基苯基)-2-(二甲基氨基)-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0345]
(203)n-(2,3-二氢-1h-茚-5-基)-2-(二甲基氨基)-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0346]
(204)6-{[(2-氯-6-氟苯基)羰基]氨基}-n-(3-氯-4-甲基苯基)-2-(二甲基氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0347]
(205)n-(3-氯-4-甲基苯基)-6-{[(2,6-二氯苯基)羰基]氨基}-2-(二甲基氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0348]
(206)n-(3-氯-4-甲基苯基)-6-{[(2,5-二氯苯基)羰基]氨基}-2-(二甲基氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0349]
(207)n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-环丙基-6-{[(2,5-二氯苯基)羰基]氨基}-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0350]
(208)n-(3-氯-4-甲基苯基)-2-环丙基-6-{[(2,5-二氯苯基)羰基]氨基}-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0351]
(209)n-(3-氯-2-甲基苯基)-6-{[(2,5-二氯苯基)羰基]氨基}-2-(1-甲基环丙基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0352]
(210)n-(3-氯-4-甲基苯基)-6-{[(2,5-二氯苯基)羰基]氨基}-2-(1-甲基环丙
基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0353]
(211)n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-(甲氧基甲基)-6-({[2-(甲基磺酰基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0354]
(212)n-(3-氯-4-甲基苯基)-6-{[(2,5-二氯苯基)羰基]氨基}-2-(2-甲氧基乙基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0355]
(213)2-(甲氧基甲基)-n-苯基-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0356]
(214)2-(甲氧基甲基)-正丙基-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0357]
(215)2-(甲氧基甲基)-n-(吡啶-3-基)-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0358]
(216)n-苄基-2-(甲氧基甲基)-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0359]
(217)n-(环己基甲基)-2-(甲氧基甲基)-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0360]
(218)2-(甲氧基甲基)-n-(萘-1-基)-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0361]
(219)2-(甲氧基甲基)-n-(噻吩-3-基)-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0362]
(220)n-(2,1,3-苯并噻二唑-4-基)-2-(甲氧基甲基)-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0363]
(221)n-(1,1-二氧化物-1-苯并噻吩-6-基)-2-(甲氧基甲基)-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0364]
(222)2-(甲氧基甲基)-n-(噻吩-2-基甲基)-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0365]
(223)n-(1h-吲哚-5-基)-2-(甲氧基甲基)-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0366]
(224)n-(1,3-苯并噻唑-2-基)-2-(甲氧基甲基)-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0367]
(225)n-(2,2-二甲基丙基)-2-(甲氧基甲基)-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0368]
(226)2-(甲氧基甲基)-n-(噻吩-2-基)-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0369]
(227)n-(5-氯-1,3-苯并唑-2-基)-2-(甲氧基甲基)-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0370]
(228)n-(2-苄基苯基)-2-(甲氧基甲基)-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0371]
(229)2-(甲氧基甲基)-n-(喹啉-8-基)-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0372]
(230)n-(环庚基甲基)-2-(甲氧基甲基)-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0373]
(231)n-(1,3-苯并唑-2-基)-2-(甲氧基甲基)-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0374]
(232)n-(6-氯-1,3-苯并唑-2-基)-2-(甲氧基甲基)-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0375]
(233)n-[3-氯-2-(羟基甲基)苯基]-2-(甲氧基甲基)-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0376]
(234)n-(3-氯-2-甲基苯基)-6-{[(3-氟吡啶-2-基)羰基]氨基}-2-(甲氧基甲基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0377]
(235)n-(3-氯-2-甲基苯基)-6-{[(3-氯吡啶-4-基)羰基]氨基}-2-(甲氧基甲基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0378]
(236)n-(3-氯-2-甲基苯基)-6-{[(3,5-二氯吡啶-4-基)羰基]氨基}-2-(甲氧基甲基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0379]
(237)6-{[(5-丁氧基-2-氯苯基)羰基]氨基}-n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-(甲氧基甲基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺
[0380]
(238)6-({[2-氯-5-(2,2-二氟乙氧基)苯基]羰基}氨基)-n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-(甲氧基甲基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺、及
[0381]
(239)n-(3-氯-2-甲基苯基)-6-({[2-氯-5-(4,4,4-三氟丁氧基)苯基]羰基}氨基)-2-(甲氧基甲基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺。
[0382]
(9)
[0383]
根据上述(2)～(8)中任一项所述的慢性前列腺炎/慢性盆腔疼痛综合征的预防和/或治疗剂，其中，
[0384]
mpges-1抑制剂为选自以下的化合物、或者其互变异构体或其医药上允许的盐：
[0385]
n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-(甲氧基甲基)-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺、
[0386]
n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-(甲氧基甲基)-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺盐酸盐、
[0387]
n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-(甲氧基甲基)-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺甲磺酸盐、
[0388]
n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-(甲氧基甲基)-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺4-甲基苯磺酸盐、
[0389]
n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-(甲氧基甲基)-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺硫酸盐、
[0390]
n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-(1-甲基环丙基)-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺、
[0391]
n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-(1-甲基环丙基)-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺盐酸盐、
[0392]
n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-(1-甲基环丙基)-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨
基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺甲磺酸盐、
[0393]
n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-(1-甲基环丙基)-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺4-甲基苯磺酸盐、
[0394]
n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-(1-甲基环丙基)-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺硫酸盐、
[0395]
n-(3-氯-4-甲基苯基)-6-{[(2,5-二氯苯基)羰基]氨基}-2-(二甲基氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺、
[0396]
n-(3-氯-4-甲基苯基)-6-{[(2,5-二氯苯基)羰基]氨基}-2-(二甲基氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺盐酸盐、
[0397]
n-(3-氯-4-甲基苯基)-6-{[(2,5-二氯苯基)羰基]氨基}-2-(二甲基氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺甲磺酸盐、
[0398]
n-(3-氯-4-甲基苯基)-6-{[(2,5-二氯苯基)羰基]氨基}-2-(二甲基氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺4-甲基苯磺酸盐、以及
[0399]
n-(3-氯-4-甲基苯基)-6-{[(2,5-二氯苯基)羰基]氨基}-2-(二甲基氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺硫酸盐。
[0400]
(10)一种用于慢性前列腺炎/慢性盆腔疼痛综合征的预防和/或治疗的医药组合物，其含有mpges-1抑制剂及医药上允许的载体。
[0401]
(11)一种mpges-1抑制剂，其用于慢性前列腺炎/慢性盆腔疼痛综合征的预防和/或治疗。
[0402]
(12)mpges-1抑制剂在制造用于预防和/或治疗慢性前列腺炎/慢性盆腔疼痛综合征的医药品中的用途。
[0403]
(13)一种慢性前列腺炎/慢性盆腔疼痛综合征的预防和/或治疗方法，该方法包括：
[0404]
向需要的对象给药mpges-1抑制剂。
[0405]
上述的各构成可以任意选择组合。
[0406]
发明的效果
[0407]
本发明的治疗和/或治疗剂对慢性前列腺炎/慢性盆腔疼痛综合征显示出治疗和/或预防的效果，因此对慢性前列腺炎/慢性盆腔疼痛综合征的治疗和/或预防是有用的。
附图说明
[0408]
图1示出了对于试验化合物1～5进行在自身免疫性慢性前列腺炎模型中的镇痛作用的评价的结果。
具体实施方式
[0409]
对本发明的实施方式进行说明。
[0410]
在本发明的一个方式中，提供一种含有mpges-1抑制剂作为有效成分的慢性前列腺炎/慢性盆腔疼痛综合征的预防和/或治疗剂。
[0411]
在本发明的一个方式中，mpges-1抑制剂可以使用市售的抑制剂和/或可按照有机合成化学领域的通常方法制造的抑制剂。
[0412]
在本发明的一个方式中，mpges-1抑制剂可以直接用作医药品，也可以通过公知的方法制成医药上允许的盐的形式使用。作为这样的盐，可以列举：盐酸、氢溴酸、硫酸、磷酸等无机酸的盐、乙酸、柠檬酸、酒石酸、马来酸、丁二酸、富马酸、对甲苯磺酸、苯磺酸、甲磺酸等有机酸的盐。
[0413]
例如，mpges-1抑制剂的盐酸盐可以通过将mpges-1抑制剂溶解于氯化氢的醇溶液、乙酸乙酯溶液或二乙基醚溶液而得到。
[0414]
在本发明的一个方式中，mpges-1抑制剂可以具有手性碳，各光学异构体及它们的混合物均可以用于本发明的预防和/或治疗剂。对于光学异构体而言，例如，可以利用其碱性，使用光学活性的酸(酒石酸、二苯甲酰基酒石酸、扁桃酸、10-樟脑磺酸等)通过公知的方法从如后述的实施例那样得到的外消旋体中进行光学拆分，或者也可以在原料中使用预先制备的光学活性的化合物进行制造。此外，还可以通过使用了手性柱的光学拆分、不对称合成来制造。
[0415]
另外，在mpges-1抑制剂中，对于可形成互变异构体的抑制剂而言，各互变异构体及它们的混合物均能够用于本发明的预防和/或治疗剂。
[0416]
在本发明的一个方式中，mpges-1抑制剂例如为上述式[i]的化合物(本化合物)或其医药上允许的盐。本化合物可以从公知化合物和/或可容易合成的中间体基于wo2013/024898中记载的方法和/或公知的方法来制造。
[0417]
在上述式[i]的化合物(本化合物)中，各取代基示例如下。
[0418]
作为“卤素”，可以举出例如：氟、氯、溴、碘。
[0419]
作为“烷基”，例如为直链状或支链状的碳原子数1～8的烷基，具体可以举出例如：甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、异戊基、正己基、异己基、正庚基、异庚基、正辛基。其中，优选为碳原子数1～6的烷基，更优选为碳原子数1～3的烷基。
[0420]
作为“单烷基氨基”、“二烷基氨基”、“单烷基氨基羰基”、“二烷基氨基羰基”、“烷基羰基氧基”、“烷基氧羰基”、“烷基羰基”、“烷硫基”、“烷基磺酰基”、“烷基亚磺酰基”、“烷氧基烷基”、“烷氧基烷基氨基”的烷基部分，可以举出与上述的“烷基”相同的基团。
[0421]
作为“烷氧基”的烷氧基部分，例如为直链状或支链状的碳原子数1～8的烷氧基，具体可以举出例如：甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基、正戊氧基、正己氧基、正庚氧基、正辛氧基。
[0422]
作为“烷氧基烷氧基”、“烷氧基烷基”、“烷氧基烷基氨基”的烷氧基部分，可以举出与上述的“烷氧基”相同的基团。
[0423]
作为“杂芳基”，可以举出1～2环的、且具有选自氮原子、氧原子、硫原子中的1～3个杂原子作为构成原子的芳香环。具体可以举出例如：呋喃基(例如，2-呋喃基、3-呋喃基)、噻吩基(例如，2-噻吩基、3-噻吩基)、吡咯基(例如，1-吡咯基、2-吡咯基、3-吡咯基)、咪唑基(例如，1-咪唑基、2-咪唑基、4-咪唑基)、吡唑基(例如，1-吡唑基、3-吡唑基、4-吡唑基)、三唑基(例如，1,2,4-三唑-1-基、1,2,4-三唑-3-基、1,2,4-三唑-4-基)、四唑基(例如，1-四唑基、2-四唑基、5-四唑基)、唑基(例如，2-唑基、4-唑基、5-唑基)、异唑基(例如，3-异唑基、4-异唑基、5-异唑基)、二唑基(例如，1,3,4-二唑-2-基)、噻唑基(例如，2-噻唑基、4-噻唑基、5-噻唑基)、噻二唑基(例如，1,3,4-噻二唑基、1,2,4-噻二唑
基、1,2,3-噻二唑基)、异噻唑基(例如，3-异噻唑基、4-异噻唑基、5-异噻唑基)、吡啶基(例如，2-吡啶基、3-吡啶基、4-吡啶基)、哒嗪基(例如，3-哒嗪基、4-哒嗪基)、嘧啶基(例如，2-嘧啶基、4-嘧啶基、5-嘧啶基)、吡嗪基(例如，2-吡嗪基)、苯并噻二唑基(例如，1,2,3-苯并噻二唑-4-基、1,2,3-苯并噻二唑-5-基、2,1,3-苯并噻二唑-4-基、2,1,3-苯并噻二唑-5-基)、苯并噻唑基(例如，苯并噻唑-2-基、苯并噻唑-4-基、苯并噻唑-5-基、苯并噻唑-6-基、苯并噻唑-7-基)、吲哚基(例如，吲哚-3-基、吲哚-4-基、吲哚-5-基、吲哚-6-基、吲哚-7-基)、苯并噻吩基(例如，1-苯并噻吩-2-基、1-苯并噻吩-3-基、1-苯并噻吩-4-基、1-苯并噻吩-5-基、1-苯并噻吩-6-基、1-苯并噻吩-7-基)、1,1-二氧代-1-苯并噻吩基(例如，1,1-二氧代-1-苯并噻吩-2-基、1,1-二氧代-1-苯并噻吩-3-基、1,1-二氧代-1-苯并噻吩-4-基、1,1-二氧代-1-苯并噻吩-5-基、1,1-二氧代-1-苯并噻吩-6-基、1,1-二氧代-1-苯并噻吩-7-基)、喹啉基(喹啉-2-基、喹啉-3-基、喹啉-4-基、喹啉-5-基、喹啉-6-基、喹啉-7-基、喹啉-8-基)、1,3-苯并唑-2-基。
[0424]
作为“杂芳基甲基”的杂芳基部分，可以举出与上述的“杂芳基”相同的基团。
[0425]
作为“饱和环状氨基”，例如为任选具有1个o或s作为成环原子、任选被氧取代的具有1个或2个n的4元～7元的饱和环状氨基，具体可以列举：1-氮杂环丁烷基、1-吡咯烷基、1-咪唑烷基、哌啶子基、1-哌嗪基、1-四氢嘧啶基、4-吗啉基、4-硫代吗啉基、1-高哌嗪基、2-氧代唑烷-3-基。
[0426]
作为“饱和环状氨基羰基”的饱和环状氨基部分，可以举出与上述的“饱和环状氨基”相同的基团。
[0427]
作为“饱和杂环基”，例如为具有1个n或o作为成环原子的4元～6元的饱和杂环基，具体可以举出例如：2-吡咯烷基、3-吡咯烷基、2-哌啶基、3-哌啶基、4-哌啶基、2-氧杂环丁烷基、3-氧杂环丁烷基、2-四氢呋喃基、3-四氢呋喃基。
[0428]
作为“环烷基”，例如为碳原子数3～8的基团，具体可以举出例如：环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环辛基。
[0429]
作为“环烷基甲基”的环烷基部分，可以举出与上述的“环烷基”相同的基团。
[0430]
作为“萘基”，可以举出例如：1-萘基、2-萘基。
[0431]
作为“吡啶基”，可以举出例如：2-吡啶基、3-吡啶基、4-吡啶基。
[0432]
作为“炔基”，可以举出例如直链状或支链状的碳原子数2～6的炔基。具体可以举出例如：乙炔基、1-丙炔基、1-丁炔基、1-戊炔基、2-丙炔基、2-丁炔基、3-丁炔基、1-甲基-2-丙炔基、2-戊炔基、3-戊炔基、4-戊炔基。
[0433]
在本发明的一个方式中，mpges-1抑制剂例如为上述的化合物(1)～(239)、或者其互变异构体或其医药上允许的盐，优选为
[0434]
n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-(甲氧基甲基)-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺、
[0435]
n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-(1-甲基环丙基)-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺、或者
[0436]
n-(3-氯-4-甲基苯基)-6-{[(2,5-二氯苯基)羰基]氨基}-2-(二甲基氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺或其医药上允许的盐，
[0437]
进一步优选为
[0438]
n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-(甲氧基甲基)-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺、
[0439]
n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-(甲氧基甲基)-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺盐酸盐、
[0440]
n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-(甲氧基甲基)-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺4-甲基苯磺酸盐、
[0441]
n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-(1-甲基环丙基)-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺盐酸盐、或
[0442]
n-(3-氯-4-甲基苯基)-6-{[(2,5-二氯苯基)羰基]氨基}-2-(二甲基氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺盐酸盐。
[0443]
在将本化合物或其医药上允许的盐以医药品的形式给药的情况下，可将本化合物或其医药上允许的盐直接、或制成在医药上允许的无毒性且非活性的载体中含有例如0.001％～99.5％、优选0.1％～90％的医药组合物而对包含人在内的哺乳动物给药。
[0444]
作为载体，可使用固体、半固体、或液态的稀释剂、填充剂、以及其它的处方用的助剂中的一种以上。本发明的医药组合物优选以给药单位的形态进行给药。医药组合物可以通过组织内给药、口服给药、静脉内给药、局部给药(透皮给药、滴眼、腹腔内、胸腔内等)或经直肠进行给药。当然也可以通过适合这些给药方法的剂型进行给药。
[0445]
作为医药品的用量，优选在考虑了年龄、体重、疾病的种类、程度等患者的状态、给药途径、本发明化合物的种类、是否为盐、盐的种类等的基础上进行调整，通常，作为对于成人的本发明化合物或其医药上允许的盐的有效成分量，在口服给药的情况下，平均每1天为0.01mg～5g/成人的范围内、优选为1mg～500mg/成人的范围内是适当的。根据情况，有时在上述范围以下就足够，另外，有时需要上述范围以上的用量。通常，可以1天1次或分为数次进行给药，或者在静脉内给药的情况下，可以进行快速给药、或在24小时以内持续给药。
[0446]
实施例
[0447]
以下，列举参考例、实施例、试验例及制剂例对本发明更详细地进行说明，但本发明并不仅限定于此。
[0448]
试验例1及2所使用的试验化合物如下所述。
[0449]
根据wo2013/024898的实施例1～249的记载制备并使用了试验例1及2所使用的化合物。试验例1及2所使用的化合物的活性数据如wo2013/024898的表1～17的记载所示。
[0450]
试验例1mpges-1抑制活性试验
[0451]
从瞬时转染了编码人mpges-1cdna的质粒的cho-k1细胞制备了mpges-1微粒体标本。将mpges-1微粒体标本在包含还原型谷胱甘肽的磷酸钾缓冲液ph7.4中稀释，加入试验化合物的dmso溶液、或dmso(dmso最终浓度均为1％)，在4℃下孵育20分钟。接着，通过添加将pgh2底物调整为最终浓度1μm的溶液，使酶反应开始，在4℃下孵育60秒钟。通过加入氯化铁及柠檬酸盐溶液(以最终浓度计分别为1mg/ml及50mm)，使反应结束。使用htrf试剂盒(cisbio international产品目录#62p2apec)对形成的pge2进行了定量。使用没有试验化合物的溶液作为阳性的对照，使用没有试验化合物及微粒体标本的溶液作为阴性的对照。将100％活性定义为减去了阴性对照中产生的pge2后的阳性对照中产生的pge2。接着，使用标准的方法测定了ic50值。
[0452]
试验例2使用了a549细胞的pge2及pgf2α产生抑制试验
[0453]
以100μl/孔(96孔板)接种人a549细胞2
×
104个，孵育过夜。接着，去除培养基，用磷酸缓冲生理盐水溶液清洗后，置换为包含试验化合物的dmso溶液、或dmso(dmso最终浓度均为0.1％)的含3％fbs的rpmi培养基。在孵育60分钟后，加入il-1β(5ng/孔)，在37℃下孵育24小时。然后，使用htrf试剂盒(cisbio international产品目录#62p2apec)对培养基中的pge2进行定量，使用eia试剂盒(cayman chemical company产品目录#516011)对pgf2α进行定量。使用没有试验化合物的溶液作为阳性的对照，使用没有试验化合物及il-1β的溶液作为阴性的对照。将100％活性定义为减去了阴性对照中的pge2及pgf2α产生量后的阳性对照中的pge2及pgf2α产生量。接着，使用标准的方法测定了ic50值。
[0454]
试验例3～8中使用的试验化合物如下所述。
[0455]
试验化合物1及试验化合物2：
[0456]
根据wo2013/024898的实施例239及实施例89的记载制备并使用了试验化合物1：n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-(甲氧基甲基)-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺4-甲基苯磺酸盐、试验化合物2：n-(3-氯-2-甲基苯基)-2-[1-(三氟甲基)环丙基]-6-({[2-(三氟甲基)苯基]羰基}氨基)-1h-苯并咪唑-4-甲酰胺的化合物(以下也称为试验化合物1及试验化合物2)。
[0457]
试验化合物3：
[0458]
根据wo2011/023812的实施例9的记载制备并使用了试验化合物3：n-环戊基-1-(1-异丙基-5,6-二甲基-1h-苯并[d]咪唑-2-基)哌啶-4-甲酰胺。
[0459]
试验化合物4：
[0460]
根据wo2017/073709的实施例2的记载制备并使用了试验化合物4：n-[4-氯-3-(5-氰基-6-氧代-4-噻吩-3-基-1,6-二氢嘧啶-2-基)苄基]-2,2-二甲基丙酰胺。
[0461]
对于canephron(注册商标)n，购入市售品使用。
[0462]
《试验例3：自身免疫性慢性前列腺炎模型中的镇痛作用的评价》
[0463]
作为慢性前列腺炎模型，使用了通常使用的模型、即自身免疫性慢性前列腺炎(experimental autoimmune prostatitis；eap)模型，按照以下的方法评价了试验化合物1～4的镇痛作用。
[0464]
1.前列腺特异性抗原(prostate antigen；pag)的制备方法
[0465]
摘取雄性wistar大鼠14周龄(japan slc公司制)的前列腺，加入complete(商标)mini、edta-free(cat.no.11836170001、roche diagnostics gmbh公司制)，使用手持式微量匀浆器(ns-310e、microtec公司制)在冰冷的pbs(cat.no.045-29795、fujifilm wako chemicals公司制)中进行匀浆后，使用离心机(allegra x-30r、beckman coulter公司制)以10000
×
g、4℃离心30分钟，回收了上清。使用dc(商标)protein assay kit(cat.no.500-0112、bio-rad laboratories公司制)及酶标仪spectramax(注册商标)m5(molecular devices公司制)对蛋白质浓度进行了定量，然后在-20℃下保管。
[0466]
2.eap模型制备方法
[0467]
将pag与完全弗氏佐剂(complete freund’s adjuvant、cat.no.263810、becton dickinson公司制)等量混合，制作了pag的蛋白质浓度为5mg/250μl的乳液。在异氟烷麻醉下，在9周龄雄性wistar大鼠(japan slc公司制)的双后肢足底及尾根部，每1只大鼠皮内给
药250μl上述所制备的乳液，进行了初次免疫。自初次免疫起28天后，进行同样的处置，作为加强免疫。对sham处置组给药将生理盐水溶液(cat.no.35081517、大塚制药工厂式会社制)与完全弗氏佐剂等量混合而成的乳液(参考：prostate.2018 nov；78(15):1157-1165.)。
[0468]
3.分组方法
[0469]
自初次免疫起37天后，使用下述的疼痛评价的方法测定pre值，以各刺激强度下的疼痛反应率及auc均没有显著差异的方式进行了分组。分组使用sas version 9.3及exsus version 8.1通过分层随机分配来实施。
[0470]
4.疼痛评价方法
[0471]
自初次免疫起42天后，以0.5％甲基纤维素水溶液作为介质将受试物质制备成以游离体换算为100mg/kg，以10ml/kg进行口服给药，在给药4小时后进行了疼痛评价。在评价前，将大鼠在金属丝网上放置30分钟，使其适应。从金属丝网的下方将刺激强度不同的0.4、1、4g这3种von frey纤维丝(touch test(注册商标)、cat.no.nc12775-06、nc12775-08、nc12775-11、north coast medical公司制)按压至大鼠的小腹部1～2秒钟，观察有无逃避反应(逃逸、舔舐刺激部位等)。从刺激强度弱的纤维丝起，依次在各刺激强度下分别进行5次刺激，计算出显示逃避反应的比例，作为逃避反应率(％)，根据由刺激强度和逃避反应率制成的折线图计算出曲线下面积(auc)。
[0472]
5.统计分析
[0473]
汇总统计计算及统计分析使用microsoft office excel 2016(注册商标)、sas version 9.3及exsus version 8.1进行。求出各组的auc的平均值及标准误差，在sham组与eap模型-介质给药组之间、以及eap模型-介质给药组与eap模型-药物给药组之间实施了student’s t检验。
[0474]
6.试验结果
[0475]
将eap模型中的试验化合物1～5的镇痛作用示于图1。
[0476]
《试验例4：正常人前列腺间质细胞的抗炎症作用评价》
[0477]
1.细胞培养
[0478]
在37℃、5％co2的条件下，使用增殖培养基对由atcc(注册商标)购入的正常人前列腺间质细胞(wpmy-1细胞、cat.no.crl-2854(商标))进行传代培养。作为增殖培养基，使用了包含最终浓度5％的灭活胎牛血清(cat.no.sh30910、ge healthcare公司制)、最终浓度20u/ml的青霉素及20μg/ml的链霉素(青霉素-链霉素混合溶液、cat.no.26253-84、nacalai tesque公司制)的dmem(cat.no.08458-45、nacalai tesque公司制)。
[0479]
2.细胞接种及药物处置
[0480]
在各受试化合物处置的前一天，将wpmy-1细胞悬浮于增殖培养基，以达到57,000个/孔的方式接种于falcon(注册商标)细胞培养12孔多孔板(cat.no.353043、corning公司制)。将接种于12孔板的wpmy-1细胞在37℃、5％co2的条件下培养过夜。
[0481]
在接种次日，进行了各受试物质的处置。首先，使用dmso(cat.no13445-74、nacalai tesque公司制)制备10mm的dmso溶液，使用分析培养基稀释至10μm。其中，canephron制备1000mg/ml的dmso溶液并用分析培养基稀释至1000μg/ml。作为分析培养基，使用了包含最终浓度2％的灭活胎牛血清(cat.no.sh30910、ge healthcare公司制)、最终浓度20u/ml的青霉素及20μg/ml的链霉素(青霉素-链霉素混合溶液、cat.no.26253-84、
nacalai tesque公司制)的dmem(cat.no.08458-45、nacalai tesque公司制)。去除增殖培养基，更换为包含各受试物质的分析培养基之后，在37℃、5％co2的条件下培养了24小时。
[0482]
3.细胞因子刺激
[0483]
在各受试物质处置24小时后，进行了细胞因子刺激。制备包含il-17(cat.no.200-17、pepro tech公司制)、tnf-α(cat.no.300-01a、pepro tech公司制)、ifn-γ(cat.no.300-02、pepro tech公司制)各1ng/ml的分析培养基，作为细胞因子刺激用培养基。使用细胞因子刺激用培养基，通过与前一天相同的方法稀释各受试物质，对细胞进行了各受试物质和细胞因子的处置。在37℃、5％co2的条件下培养5小时，回收了细胞。
[0484]
4.基因表达分析
[0485]
使用rneasy(注册商标)mini kit(cat.no.74106、qiagen公司制)，按照制造商的方案从细胞中提取总rna，利用nanodrop(商标)one(cat.no.nd-one-w、thermo scientific公司制)测定了rna浓度。使用revertra ace(注册商标)qpcr rt master mix(cat.no.fsq-201、东洋纺株式会社制)及biometra tadvanced 96sg(bm equipment公司制)逆转录了rna 500ng。使用由逆转录得到的cdna及tb green(注册商标)premix ex taq ii(cat.no.rr820、takara bio公司制)、lightcycler(注册商标)480实时pcr系统(roche diagnostics gmbh公司制)评价了ccl2的基因表达水平。ccl2的引物使用了fw：agcagcaagtgtcccaaaga、rv：ggtggtccatggaatcctga。
[0486]
通过使用δthreshold cycle(ct)法(2-δδct)计算各处置组的mrna水平相对于nt(无处置)组的值的比率，计算出变化率。全部数据通过gapdh进行了校正。pcr条件为在95℃下保持10分钟后，将95℃下15秒钟和60℃下1分钟重复45个循环。
[0487]
5.试验结果
[0488]
试验化合物在正常人前列腺间质细胞(wpmy-1细胞)中抑制炎性细胞因子/趋化因子(ccl2)的表达，显示出抗炎症作用(表1)。
[0489]
[表1]
[0490][0491]
《试验例5：自身免疫性慢性前列腺炎模型中的抗炎症作用的评价》
[0492]
1.蛋白质溶液制备
[0493]
通过与试验例1相同的方法制作eap模型大鼠，自初次免疫起给药受试物质42天。自初次免疫起42天后，采集前列腺腹叶，放入2ml管中，用液氮冷冻后，在-80℃下保存。
[0494]
向放入了前列腺的2ml管中相对于前列腺组织重量100mg加入包含complete(商标)mini、edta-free的t-per(cat.no.78510、thermo scientific公司制)，使用手持式微量匀浆器(ns-310e、microtec公司制)进行匀浆，使用himac(注册商标)ct15re(koki holdings公司制)在14000
×
g、4℃下离心30分钟，回收上清，由此制备了蛋白质溶液。
[0495]
2.细胞因子/趋化因子量测定
[0496]
使用细胞因子检测试剂盒(rat 23-plex panel)及bio-plex system(bio-rad公司制)，按照制造商的方案测定了23种细胞因子/趋化因子量。另外，使用dc(商标)protein assay kit(cat.no.500-0112、bio-rad laboratories公司制)及酶标仪spectramax(注册商标)m5(bio-rad laboratoriesmolecular devices公司制)对总蛋白质量进行了定量，然后，计算出每1mg总蛋白的细胞因子/趋化因子浓度。
[0497]
2.试验结果
[0498]
试验化合物在eap模型中抑制炎性细胞因子/趋化因子(il-1β、ccl2、ccl3、ccl5)的表达，显示出抗炎症作用。
[0499]
《试验例6：激素诱发性慢性前列腺炎(hormone/castration-induced prostatitis；hcp)模型中的镇痛作用的评价》
[0500]
1.hcp模型制备方法
[0501]
在异氟烷麻醉下对退役雄性wistar大鼠(charles river laboratories japan公司制)进行去势手术，从手术当天起，以芝麻油(cat.no.s3547、sigma-aldrich公司制)作为介质，以2ml/kg皮下给药17β-雌二醇(cat.no.14541-61、nacalai tesque公司制)0.25mg/kg，1天1次持续30天。sham处置组进行假手术，同样地给药介质芝麻油(参考：prostate.2019apr；79(5):446-453.)。
[0502]
2.药物处置
[0503]
从手术当天起给药受试物质30天。
[0504]
3.疼痛评价方法
[0505]
通过与试验例3相同的方法进行了评价。
[0506]
4.统计分析
[0507]
通过与试验例3相同的方法进行了评价。
[0508]
5.试验结果
[0509]
试验化合物在hcp模型中显示出镇痛作用。
[0510]
《试验例7：福尔马林诱发性前列腺炎模型中的镇痛作用的评价》
[0511]
1.福尔马林诱发性前列腺炎模型制备方法
[0512]
在异氟烷麻醉下将7周龄雄性sd大鼠(japan slc公司制)的小腹部进行正中切开，使前列腺露出，对左右的前列腺腹叶分别注入了25μl的将10％中性缓冲福尔马林溶液(cat.no.062-01661、fujifilm wako chemicals公司制)和生理盐水溶液(cat.no.35081517、大塚制药工厂式会社制)等量混合而制成的5％福尔马林溶液，然后进行缝合，皮下给药15mg/kg的抗生素头孢氨苄(cat.no.034-11052、fujifilm wako chemicals公司制)。在sham处置组中，对左右的前列腺腹叶分别注入了25μl的生理盐水溶液(参考：int neurourol j.2018 jun；22(2):90-98.)。
[0513]
2.药物处置
[0514]
从模型制备当天起1天2次给药受试物质7天。
[0515]
3.疼痛评价方法
[0516]
在模型制备7天后通过与试验例1相同的方法进行了评价。
[0517]
4.统计分析
[0518]
通过与试验例3相同的方法进行了评价。
[0519]
5.试验结果
[0520]
试验化合物在福尔马林诱发性前列腺炎模型中显示出镇痛作用。
[0521]
《试验例8：前列腺肥大症患者来源的前列腺上皮细胞中pge2产生的评价》
[0522]
1.细胞培养
[0523]
在37℃、5％co2的条件下，使用增殖培养基对由dsmz购入的前列腺肥大症患者来源的前列腺上皮细胞(bph-1细胞、cat.no.acc143)进行传代培养。作为增殖培养基，使用了包含最终浓度20％的灭活胎牛血清(cat.no.sh30910、ge healthcare公司制)、最终浓度20ng/ml的睾酮(cat.no.32811-61、nacalai tesque公司制)、最终浓度4.2μg/ml的重组人胰岛素及最终浓度3.8μg/ml的人转铁蛋白及最终浓度5ng/ml的亚硒酸钠(胰岛素-转铁蛋白-亚硒酸钠培养基补充剂、cat.no.l1884、sigma-aldrich公司制)的rpmi-1640(cat.no.189-02025、fujifilm wako chemicals公司制)。
[0524]
2.细胞接种及药物处置
[0525]
各受试化合物处置的前一天，将bph-1细胞悬浮于增殖培养基，以达到9,600个/孔的方式接种于falcon(注册商标)细胞培养96孔多孔板(cat.no.353072、corning公司制)。其中，对照用的孔使用对照培养基接种了细胞。作为对照培养基，使用了包含最终浓度2％的灭活胎牛血清(cat.no.sh30910、ge healthcare公司制)、最终浓度20ng/ml的睾酮(cat.no.32811-61、nacalai tesque公司制)、最终浓度4.2μg/ml的重组人胰岛素及最终浓度3.8μg/ml的人转铁蛋白及最终浓度5ng/ml的亚硒酸钠(胰岛素-转铁蛋白-亚硒酸钠培养基补充剂、cat.no.l1884、sigma-aldrich公司制)的rpmi-1640(cat.no.189-02025、fujifilm wako chemicals公司制)。将接种于96孔板的bph-1细胞在37℃、5％co2的条件下培养过夜。
[0526]
在接种次日，进行了各受试物质的处置。首先，使用dmso(cat.no13445-74、nacalai tesque公司制)制备10mm的dmso溶液，使用增殖培养基稀释至10、1、0.1μm。去除增殖培养基或对照培养基，将包含各受试物质的增殖培养基或对照用的孔更换为不包含受试物质的对照培养基后，在37℃、5％co2的条件下培养48小时，回收了上清。
[0527]
3.pge2量测定
[0528]
使用prostaglandin e2 kits(cat.no.62p2apeg、cisbio公司制)及酶标仪spectramax(注册商标)m5(molecular devices公司制)按照制造商的方案测定了细胞培养上清中的pge2量。
[0529]
4.试验结果
[0530]
试验化合物抑制了bph-1细胞中pge2的产生。
[0531]
制剂例1
[0532]
片剂(内服片)
[0533]
在处方1片80mg中
[0534][0535]
利用通常的方法将该比例的混合粉末压片成型，制成内服片。
[0536]
工业实用性
[0537]
本发明涉及含有mpges-1抑制剂作为有效成分的慢性前列腺炎/慢性盆腔疼痛综合征的预防和/或治疗剂，具有工业实用性。