2-羟基二十四烷酸在制备治疗肝癌药物中的应用

1.本发明涉及2-羟基二十四烷酸在制备治疗肝癌药物中的应用，属于药学技术领域。


背景技术：

2.肝癌是我国肿瘤中发病率第四位，致死率第三位的恶性肿瘤。由于肝癌起病隐匿、侵袭性强、发病时多已属晚期，临床治疗肝癌的手段以手术治疗为主，还包括经肝动脉化疗栓塞术、射频消融及放化疗等方法。然而，以它们为靶点的预防或治疗方式大多数是失败的。通过免疫系统治疗肝癌很有潜力，但离精准治疗还有相当的距离。目前可用的靶向药物仍十分有限，为治疗带来了巨大的挑战。因此，十分有必要去探究新的治疗方法，包括药物化学治疗，研制和开发新型高效低毒的抗癌药物是治疗肝癌的重要手段。
3.2-羟基二十四烷酸(2-hydroxytetracosanoic acid)(cas no.544-57-0)是一种α-羟基极长链脂肪酸(vlcfa)，是脑苷脂和硫苷脂的组成部分。2-羟基二十四烷酸经α-氧化分解为co2和三羧酸，其氧化依赖于nad+。目前，2-羟基二十四烷酸对治疗肝癌的作用尚无明确报道。


技术实现要素：

4.本发明提供了2-羟基二十四烷酸在制备治疗肝癌药物中的应用。
5.2-羟基二十四烷酸处理以剂量依赖性方式抑制hep3b、huh7细胞的增殖、克隆形成，提示2-羟基二十四烷酸可以用于治疗肝癌。
附图说明
6.图1为实时细胞分析(rtca)检测hep3b对照组及hep3b药物处理组(0μm、5μm、25μm、50μm)细胞增殖情况。
7.图2为实时细胞分析(rtca)检测huh7对照组及huh7药物处理组(0μm、5μm、25μm、50μm)细胞增殖情况。
8.图3为细胞克隆实验检测hep3b对照组及hep3b药物处理组(0μm、25μm、50μm)克隆形成的情况。
9.图4为细胞克隆实验检测huh7对照组及huh7药物处理组(0μm、25μm、50μm)克隆形成的情况。
具体实施方式
10.实施例1细胞培养和药物配制
11.人肝癌细胞系(hep3b、huh7)购自美国atcc细胞库，维持在添加10％胎牛血清(thermo fisher,grand island,ny,usa)、100μg/ml链霉素和100u/ml青霉素(sigma,st.louis,usa)的完全培养基dmem(thermo fisher,grand island,ny,usa)中。将细胞保持
在37℃和5％co2、饱和湿度，每2-3天传代一次。2-羟基二十四烷酸购自(laroban,solna,sweden)，溶解在dmso中的终浓度为10mm，使用完全培养基稀释，用于后续实验。
12.实施例2 2-羟基二十四烷酸对细胞增殖能力的影响
13.rtca(real-time cell analysis assay)实验：将hep3b、huh7细胞接种到细胞培养e-plates16板(1
×
104个细胞/孔)中，使用x-celligence系统(acea biosciences，san diego，usa)进行增殖测定，系统自动记录加药组和对照组的细胞生长指数，该值每15分钟被自动监测一次，数据输出表示如图1-2。
14.细胞克隆实验：将hep3b、huh7细胞接种到500-800个细胞/孔的12孔板中。当细胞长成肉眼可见的克隆时，用不同浓度的2-羟基二十四烷酸(0μm、25μm、50μm)处理。2-羟基二十四烷酸处理24h后，用甲醛固定细胞，结晶紫染色，计数细胞克隆数。细胞固定及染色结果如图3-4。
15.结果分析
16.所有数据均使用spss11.0软件进行统计分析，多重比较采用单因素方差分析(anova)评估，组间差异采用双尾学生t检验分析，并且p值小于0.05被认为具有统计学意义的差异，数据以平均值
±
标准差表示，所有实验均重复3次。
17.结论:
18.(1)2-羟基二十四烷酸(0、25、50μm)处理后，如图1-2所示：与对照组相比，药物处理的hep3b、huh7细胞的增殖显著降低，并且呈现浓度依赖性。表明2-羟基二十四烷酸可以显著抑制huh7、hep3b细胞的增殖。
19.(2)2-羟基二十四烷酸(0、25、50μm)处理后，如图3-4所示：与对照组相比，药物处理的hep3b、huh7细胞的克隆数明显减少，表明2-羟基二十四烷酸可以显著抑制hep3b、huh7细胞的克隆形成。
20.这些结果表明，2-羟基二十四烷酸处理以剂量依赖性方式抑制hep3b、huh7细胞的增殖、克隆形成，可以用于治疗肝癌。
21.上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。


技术特征：
1.2-羟基二十四烷酸在制备治疗肝癌药物中的应用。

技术总结
本发明公开了2-羟基二十四烷酸在制备治疗肝癌药物中的应用。本发明通过试验证实2-羟基二十四烷酸处理以剂量依赖性方式抑制肝癌细胞的增殖、克隆形成，显示2-羟基二十四烷酸在制备治疗肝癌药物方面具有良好的前景。在制备治疗肝癌药物方面具有良好的前景。在制备治疗肝癌药物方面具有良好的前景。


技术研发人员：郑亦胡 茅叶繁 张启瑜
受保护的技术使用者：温州医科大学附属第一医院
技术研发日：2022.04.06
技术公布日：2022/6/24