一种枸杞叶中亚精胺类成分的富集制备方法与流程

1.本发明涉及植物提取技术领域，尤其涉及一种枸杞叶中亚精胺类成分的富集制备方法。


背景技术：

2.枸杞为茄科枸杞属的一种多年生落叶灌木，其果实枸杞子为药食同源中药材，始载于《神农本草经》。枸杞叶也在地方中药材标准中收录。
3.亚精胺类是植物多胺中一类参与植物dna及激素调控的物质。近年来有研究表明，亚精胺类成分可能具有抗氧化，延缓衰老和缓解记忆障碍等活性。由于亚精胺类成分在植物中含量差异极大，稳定性较低，经过各类研究筛选后，发现枸杞子和枸杞叶均可作为亚精胺类成分的植物原料来源，其中从枸杞叶中富集亚精胺类成分的工艺鲜有报道。因此，有必要开发高效的，相对稳定的从枸杞叶中富集亚精胺类的方法。


技术实现要素：

4.本发明的目的在于提供一种枸杞叶中亚精胺类成分的富集制备方法，以解决上述背景技术中所提出的问题。
5.为达到上述目的，本发明采用的技术方案是：一种枸杞叶中亚精胺类成分的富集制备方法，包括以下步骤：s1)将干燥的枸杞叶在常温常压下经乙醇水溶剂渗漉，渗漉液回收溶剂，加入硅胶搅拌，干燥后粉碎，得到提取物粉末；s2)将提取物粉末倒入乙酸乙酯-正己烷混合溶液中，常温搅拌，提取后过滤，得到不溶物粉末；s3)将不溶物粉末重复s2一次后，干燥，粉碎，以聚乙二醇-水体系为溶剂，调节ph，减压蒸馏，收集馏分；s4)将馏分经大孔树脂柱，以乙醇-水系统洗脱，制得到富含亚精胺类的组分。
6.作为进一步的优化，s1中所述乙醇水溶剂质量比为4:(1-2)；所述枸杞叶与乙醇水溶剂的料液比为1:(6-10)；所述硅胶与枸杞叶的质量比为1:(20-30)。通过加入硅胶可降低提取物的粘度，提高流动性，易于粉碎。
7.作为进一步的优化，s1中的干燥温度为60-80℃。
8.作为进一步的优化，s2中所述提取物粉末与乙酸乙酯-正己烷混合溶液的料液比为1:(4-8)；乙酸乙酯与正己烷的质量比为1:(2-5)，合适比例的乙酸乙酯-正己烷溶液可在不影响亚精胺类成分的前提下，脱去色素及脂溶性成分。
9.作为进一步的优化，s3中的干燥温度为40-45℃，ph值为8.0-12.0；收集馏分的条件为：蒸馏温度为120-160℃，压力为-0.08-0.1mpa。
10.作为进一步的优化，s4中馏分以60-80%乙醇溶解，上样体积与树脂柱体积为1:(4-12)，收集30-50%乙醇洗脱部分，减压干燥，得最终产物富含亚精胺类的组分。
11.经上述步骤得到的亚精胺类成分含量根据hplc定量方法，范围在8-12%。
12.与已有技术相比，本发明的有益效果体现在：1.本发明的富集工艺，通过温度的控制与溶剂的选择，在提取过程中最大保留了枸杞叶的亚精胺类成分；2.本发明的富集工艺，通过溶剂提取，树脂纯化与蒸馏手段结合，得到亚精胺类组分含量纯度相比与枸杞叶原料提升数百倍。
附图说明
13.图1为本发明实施例1的富含亚精胺类成分的枸杞叶组分的hplc图谱。
具体实施方式
14.以下是本发明的具体实施例，结合附图对本发明的技术方案作进一步的描述，但本发明并不限于这些实施例。
15.实施例1：如图1所示，将5kg干燥的枸杞叶粉碎经渗漉筒渗漉，渗漉溶剂为40l 80%乙醇，渗漉液浓缩，加入200g硅胶搅拌，70℃减压干燥4小时，粉碎，倒入8l乙酸乙酯-正己烷1:4溶液，搅拌1小时，过滤，不溶物倒入4l乙酸乙酯-正己烷1:4溶液，搅拌1小时，过滤，不溶物40℃鼓风干燥2小时，倒入蒸馏瓶，加入聚乙二醇-水 10:1溶剂5l，ph调节为9.0，蒸馏温度150℃，压力-0.1mpa，收集蒸馏物，蒸馏物加入30ml 80%乙醇搅拌溶解，倒入200ml d101大孔树脂吸附，以20%乙醇溶液洗脱除杂，再以50%乙醇溶液洗脱，回收溶剂，减压干燥，至恒重。最终产物干重41.2g，亚精胺类成分含量根据hplc测定结果为8.3%。
16.实施例2：将2kg干燥的枸杞叶粉碎经渗漉筒渗漉，渗漉溶剂为15l 65%乙醇，渗漉液浓缩，加入80g硅胶搅拌，80℃鼓风干燥6小时，粉碎，倒入2.1l乙酸乙酯-正己烷1:3溶液，搅拌1小时，过滤，不溶物倒入1.2l乙酸乙酯-正己烷1:3溶液，搅拌1小时，过滤，不溶物40℃鼓风干燥3小时，倒入蒸馏瓶，加入聚乙二醇-水 20:1溶剂3l，ph调节为10.0，蒸馏温度155℃，压力-0.08mpa，收集蒸馏物，蒸馏物加入10ml 80%乙醇搅拌溶解，倒入120ml d101大孔树脂吸附，以10%乙醇溶液洗脱除杂，再以30%乙醇溶液洗脱，回收溶剂，减压干燥，至恒重。最终产物干重14.6g，亚精胺类成分含量根据hplc测定结果为9.6%。
17.对比例将2kg干燥的枸杞叶粉碎经20l 80%乙醇回流提取，提取液浓缩，至粘稠状，加入20%乙醇2l搅拌，静置，沉淀，过滤，不溶物经80℃鼓风干燥4小时后，粉碎，得最终产物。最终产物干重257.9g，亚精胺类成分含量根据hplc测定结果为0.28%。
18.本文中所描述的具体实施例仅仅是对本发明精神作举例说明。本发明所属技术领域的技术人员可以对所描述的具体实施例做各种各样的修改或补充或采用类似的方式替代，但并不会偏离本发明的精神或者超越所附权利要求书所定义的范围。


技术特征：
1.一种枸杞叶中亚精胺类成分的富集制备方法，其特征在于，包括以下步骤：s1)将干燥的枸杞叶经乙醇水溶剂渗漉，渗漉液回收溶剂，加入硅胶搅拌，干燥后粉碎，得到提取物粉末；s2)将提取物粉末倒入乙酸乙酯-正己烷混合溶液中，常温搅拌，提取后过滤，得到不溶物粉末；s3)将不溶物粉末重复s2，干燥，粉碎，以聚乙二醇-水体系为溶剂，调节ph，减压蒸馏，收集馏分；s4)将馏分经大孔树脂柱，以乙醇-水系统洗脱，制得到富含亚精胺类的组分。2.根据权利要求1所述的枸杞叶中亚精胺类成分的富集制备方法，其特征在于，s1中的渗漉条件为温度为25
±
2℃，大气压为标准大气压。3.根据权利要求1所述的枸杞叶中亚精胺类成分的富集制备方法，其特征在于，s1中所述乙醇水溶剂质量比为4:(1-2)；所述枸杞叶与乙醇水溶剂的料液比为1:(6-10)；所述硅胶与枸杞叶的质量比为1:(20-30)。4.根据权利要求1所述的枸杞叶中亚精胺类成分的富集制备方法，其特征在于，s1中的干燥温度为60-80℃。5.根据权利要求1所述的枸杞叶中亚精胺类成分的富集制备方法，其特征在于，s2中所述提取物粉末与乙酸乙酯-正己烷混合溶液的料液比为1:(4-8)；乙酸乙酯与正己烷的质量比为1:(2-5)。6.根据权利要求1所述的枸杞叶中亚精胺类成分的富集制备方法，其特征在于，s3中重复s2一次。7.根据权利要求1所述的枸杞叶中亚精胺类成分的富集制备方法，其特征在于，s3中的干燥温度为40-45℃，ph值为8.0-12.0；收集馏分的条件为：蒸馏温度为120-160℃，压力为-0.08-0.1mpa。8.根据权利要求1所述的枸杞叶中亚精胺类成分的富集制备方法，其特征在于，s4中馏分以60-80%乙醇溶解，上样体积与树脂柱体积为1:(4-12)，收集30-50%乙醇洗脱部分，减压干燥，得最终产物富含亚精胺类的组分。

技术总结
本发明公开了一种枸杞叶中亚精胺类成分的富集制备方法，包括步骤：将干燥的枸杞叶经乙醇水溶剂渗漉，渗漉液回收溶剂，加入硅胶搅拌，干燥后粉碎，得到提取物粉末；将提取物粉末倒入乙酸乙酯-正己烷混合溶液中，常温搅拌，提取后过滤，得到不溶物粉末；将不溶物粉末重复S2，干燥，粉碎，以聚乙二醇-水体系为溶剂，调节pH，减压蒸馏，收集馏分；将馏分经大孔树脂柱，以乙醇-水系统洗脱，制得到富含亚精胺类的组分。本发明通过溶剂提取，树脂纯化与蒸馏手段结合，得到亚精胺类组分含量纯度相比与枸杞叶原料提升数百倍，可达8-12%。12%。12%。


技术研发人员：赵森淼 宋丰奎 周世瑕
受保护的技术使用者：苏州永健生物医药有限公司
技术研发日：2022.07.06
技术公布日：2022/9/20