一种载异甘草素的脑靶向脂质体的制备方法

本发明涉及一种载异甘草素的脑靶向脂质体缓释剂型的制备方法，以及这种脂质体在提高药物进入脑组织中的应用。属于材料和生物医药科学领域。

背景技术：

1、异甘草素是从甘草中提取的黄酮类化合物之一，具有多种药理学作用，例如抗炎、抗氧化和抗肿瘤等。研究表明，异甘草素可通过提高超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶的活性来清除自由基，减少了丙二醛含量，抑制脂质过氧化，对脑缺血再灌注损伤有良好的保护作用；另外，近年来的研究发现，异甘草素还具有多途径、多节点及选择性多靶点的抗胶质瘤特性。然而药动学研究显示，异甘草素具有口服吸收差、体内半衰期短、生物利用度低以及脑内分布较差等弱点，这在很大程度上限制了异甘草素的在脑内药效的发挥。因此研发一种能够高效靶向脑部组织，延长体循环时间，降低对正常组织毒性的新剂型是异甘草素临床应用研发的新策略。

2、脂质体主要是由磷脂和胆固醇构成的含有水性空腔的磷脂双分子层，因其与细胞膜结构相似，故具有很好的生物相容性，可以将药物分子送入细胞内，是几近理想的药物载体系统。此外，聚乙二醇表面修饰的纳米粒或脂质纳米粒可以增加血液中的循环时间，降低网状内皮系统的清除率，延长载药纳米粒的循环时间。

3、然而，血脑屏障的存在阻止了药物进入大脑发挥作用。为了克服这个问题，我们将特异性的脑靶向配体修饰在脂质体表面，使其可以与bbb上表达的内源性受体结合，介导药物更容易通过bbb。angiopep-2是一种由19个氨基酸分子组成的新型多肽，它可以与bbb上表达的低密度脂蛋白相关受体蛋白1的受体结合，并通过受体介导的内吞作用进入脑组织。因此经angiopep-2修饰的纳米载药递送系统可以显著改善药物在大脑中的累积。

技术实现思路

1、本发明的目的是制备一种脑靶向的载异甘草素的脂质体。

2、本发明实验证明，用dspe-peg2000-ang修饰的载异甘草素的脂质体可以延长药物在血液中的循环时间，降低网状内皮系统的清除率，并且具有明确的脑靶向性，显著改善药物在脑部组织的积累。

3、本发明采用薄膜水化法制备了这种脑靶向，以包封率为评价指标，通过正交设计对卵磷脂、胆固醇和异甘草素的投料量和比例进行筛选，选出最优的脂质体制备条件。

4、为实现上述目的，首先利用dspe-peg2000-mal中马来酰亚胺基团的双键与多肽angiopep-2末端的半胱氨酸上的巯基进行的加成反应，来来合成dspe-peg2000-ang，然后将异甘草素甲醇溶液、dspe-peg2000-ang氯仿溶液、胆固醇和卵磷脂二氯甲烷溶液于蒸馏烧瓶中，采用薄膜水化法制备，随后用滤膜纯化样品，得到最终产物。所制得的异甘草素脂质体粒径小，zeta电位较大，体系稳定，包封率高。体外模拟释放及体内药动学结果表明该体系具有良好的缓释能力，维持体内的最佳药物浓度，延长药物作用时间，降低药物突释带来的副作用。组织分布结果显示该体系显著增强了脑部组织对异甘草素的摄取能力，体现了脑靶向性，是一种关于异甘草素治疗脑部疾病的潜在的纳米载体。

技术特征：

1.二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000-angiopep-2（dspe-peg2000-ang）的合成方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，实施例1所述的透析袋的截留分子量（mwco）为3500。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，实施例1所述的室温透析时间为24小时，并且前8小时每隔2 h换次蒸馏水，中间8 h每隔4 h换次蒸馏水。

4.脑靶向异甘草素脂质体的制备方法：

5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，实例2中所述的

6.用dspe-peg2000-ang修饰的脂质体作为药物和/或保健品的载体以提高脑组织中药物和/或保健品浓度的应用。

技术总结
本发明以脂质体作为药物载体，用二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺‑聚乙二醇2000（DSPE‑PEG2000‑Mal）和脑组织靶向多肽Angiopep‑2进行修饰，采用薄膜水化法制备了一种缓释的脑靶向异甘草素脂质体。本申请方法反应简单快速，无需苛刻的反应条件，原材料结构简单。本发明制备所得载异甘草素的脑靶向脂质体，在保证异甘草素的药物稳定性的同时又具有理想的载药量和包封率，可以达到缓慢释放的效果，维持体内的最佳药物浓度，延长药物作用时间，降低药物突释带来的副作用，并且具有显著的脑组织靶向性。本发明的脂质体可运用于治疗脑部疾病的生物医药科学领域，具有重要的理论价值和实际应用前景。

技术研发人员：薛明,宋维通,白露,徐平湘,周雪林,李晓蓉
受保护的技术使用者：首都医科大学
技术研发日：
技术公布日：2024/3/27