一种新型抗肿瘤天然产物的筛选平台及其应用的制作方法

本发明涉及生物，具体涉及一种新型天然产物抗肿瘤活性的筛选平台。

背景技术：

1、目前肿瘤的治疗方式主要包括手术治疗、化疗药物治疗、靶向药物治疗以及免疫治疗。有些恶性肿瘤的治疗还是以化疗方式为主，但长期化疗会引起头晕呕吐、腹泻、免疫抑制等多种严重不良反应，同时也会产生继发耐药的问题，影响治疗效果。近些年研究发现，具有抗肿瘤活性的天然产物有望解决这一难题。

2、天然产物是指动物、植物提取物(简称植提)或昆虫、海洋生物和微生物体内的组成成分或其代谢产物以及人和动物体内许许多多内源性的化学成分统称作天然产物，其中主要包括蛋白质、多肽、氨基酸、各种酶类、糖蛋白、树脂、胶体物、生物碱、黄酮、糖苷类、萜类、苯丙素类、有机酸、酚类、醌类、内酯、抗生素类等天然存在的化学成分。其药用的优势主要包括取材便捷、毒性低、可提高机体免疫力等。目前已有很多天然产物的筛选方法，主要包括：动物水平筛选、细胞水平筛选、酶水平筛选。多数集中于细胞系层面，但都存在一定局限性。例如筛选周期长，临床疗效一致性差等。目前已有很多天然产物被证实具有抗肿瘤活性，并且可应用于临床治疗肿瘤的辅助用药，可增效减毒，提高人体免疫力。

3、基于微肿瘤ptc的筛选模型，是有肿瘤来源的上皮细胞、间质细胞、成纤维细胞、免疫细胞自组装和增殖的结果，可以在最大程度上模拟肿瘤微环境。可在7天以内培养成功患者来源的微量肿瘤样本，样本类型丰富，包括：手术组织、穿刺活检组织以及恶性积液，并且针对不同的癌症类型也有对应的培养基，可保证培养成功率达到90％以上。微肿瘤ptc体外模型检测周期短，14天以内可以出具检测结果。同时，ptc在临床疗效一致性上可以达到90％以上。本发明以ptc技术为基础，利用ptc体外模型作为具有抗肿瘤活性天然产物的筛选平台，可缩短筛选周期，提高准确性，降低筛选成本。

技术实现思路

1、本发明所要解决的技术问题在于针对现有技术的不足，提供了一种利用微肿瘤ptc体外模型进行天然产物抗肿瘤活性的筛选方法，该方法能缩短筛选周期，提高准确性，降低成本。

2、为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案是：一种新型天然产物抗肿瘤活性的筛选平台，所述新型筛选平台是源于患者的肿瘤样细胞簇，微肿瘤ptc体外模型；所述天然产物包括所有天然产物；所述肿瘤包含所有实体肿瘤。

3、上述微肿瘤ptc体外模型，在肿瘤微环境模拟方面具有优势。

4、上述源于患者的肿瘤样细胞簇，包括肿瘤来源的上皮细胞、间质细胞、免疫细胞，具有组织特异性以及干细胞特性。

5、上述微肿瘤ptc体外模型与原始肿瘤组织在表观层面以及遗传特征方面具有一致性，其临床一致性和培养成功率均可以达到90％以上。

6、上述天然产物可为华蟾素。所述华蟾素为华蟾素片提取物。

7、上述肿瘤包含除血液肿瘤的所有实体肿瘤。所述实体肿瘤可为肺癌。

8、上述抗肿瘤活性可表现为ptc微球细胞活力测定。

9、上述抗肿瘤活性可表现为肿瘤样细胞簇的退缩程度。

10、上述观察肿瘤样细胞簇退缩程度可通过显微镜以及ai智能软件计数统计。

11、本发明与现有技术相比较优势在于：

12、本发明首次利用微肿瘤ptc体外模型作为筛选平台，该平台最终结果可通过ai智能软件统计分析，可缩短筛选周期，降低成本，提高准确性；该平台可在短时间内进行高通量筛选，同时可以探索具有抗肿瘤活性的天然产物与其他化疗、靶向、免疫等药物的协同作用，研究其治疗疗效。

技术特征：

1.一种新型抗肿瘤天然产物的筛选平台及其应用，其中，所述新型抗肿瘤天然产物的筛选平台仅包括利用微肿瘤ptc平台进行筛选，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述恶性肿瘤包括但不限于胃肠肿瘤、乳腺癌、肺癌、肝胆肿瘤、妇科肿瘤、泌尿肿瘤、肉瘤，除血液肿瘤外的所有实体肿瘤。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在所述步骤1中的可供实验标本，包括但不限于手术组织、穿刺组织、活检组织或者胸腹水。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤2中的天然产物，包括但不限于大蒜素、华蟾素，所有具有抗肿瘤活性的天然产物。

5.根据权利要求1所述的ptc构建方法，其特征在于，包括以下步骤：

6.根据权利要求1所述的筛选方法，其特征在于，利用微肿瘤ptc体外膜型进行药敏实验，通过ai智能软件计算杀伤效率百分数，对具有抗肿瘤活性的天然产物进行筛选。

技术总结
本发明提供了一种利用源于患者的肿瘤样细胞簇(patient‑derived tumor‑like cell cluster，PTC)药物筛选平台。PTC具有原发性上皮来源的肿瘤细胞、间质细胞、成纤维细胞和免疫细胞，且细胞组分丰富，在肿瘤微环境模拟方面具有优势。同时，PTC可以再现肿瘤异质性，培养成功率和临床一致性可以达到90％以上，检测周期2周以内。检测结果可通过AI智能软件读取，可进一步提高准确性。利用PTC平台进行天然产物抗肿瘤活性的筛选，可以缩短筛选周期，提高准确性，同时也可以进行联合药物方案的检测。

技术研发人员：路威,潘雨琪,孙志学
受保护的技术使用者：浙江基石精准医学有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/1/15