用于治疗神经性起立性低血压的化合物的制作方法

用于治疗神经性起立性低血压的化合物
1.本技术是申请日为2017年8月24日、申请号为“201780051586.6”、名称为“用于治疗神经性起立性低血压的化合物”的发明专利申请的分案申请。
技术领域
2.本发明涉及一种以4-[2-(2,4,6-三氟苯氧基甲基)-苯基]哌啶或其药学上可接受的盐于治疗神经性起立性低血压及其症状的用途。


背景技术：

[0003]
起立性低血压(oh)(也称为姿势性低血压)为当人站起来时发生的低血压形式。在医学术语中，oh被定义为在从仰卧到直立位置的姿势变化的三分钟内的至少20mm hg的收缩压或至少10mm hg的舒张压的落差(神经病学1996(neurology 1996)；46:1470)。oh可产生多种症状，包括晕眩、头晕和晕厥(昏厥)。由于这些症状的缘故，故oh通常减少或甚至妨碍需要站立或行走的日常活动。另外，oh与致病率和死亡率的增加相关联。参见，例如，琼斯(jones)等人，心血管治疗专家综述(expert review of cardiovascular therapy)，2015；13:11，1263-1276；克兹(kuritzky)等人，医学研究生(postgrad.med.)2015；127(7):702-715；和洛(low)等人，临床神经病学杂志(j.clin.neurol.)，2015；11(3):220-226。
[0004]
oh的根本原因可广义地分为神经性和非神经性类别。神经性起立性低血压(noh)为oh的与神经系统有关的形式，例如，由周边或中枢神经病症如原发性自主神经衰竭(包括单纯性自主神经衰竭、多发性系统萎缩症和帕金森氏症(parkinson’s disease))及自主神经性病变(自主神经机能障碍)(包括糖尿病性和非糖尿病性自主神经性病变)(比克(arbique)等人，jamda 15(2014)234-239)引起的oh。这类病症可引起去甲肾上腺素(其为响应于姿势改变而调节血压的主要神经传递质)的缺乏或失调(洛布克(loavenbruck)等人，当代医学研究观点(curr.med.res.opin.)，2015；31:2095-2104)。因此，自主神经系统在姿势改变期间无法适当地调节血压且患者经历显著血压差而导致例如晕眩、头晕或晕厥。
[0005]
因此，noh治疗的一个目标是增加患者中去甲肾上腺素的浓度。增加去甲肾上腺素浓度的一种方法是投与产生去甲肾上腺素的药剂。例如，屈西多巴(droxidopa)(l-苏式-3-4-二羟基苯基丝氨酸)为一种氨基酸，其是在中枢及周边神经系统中通过脱羧作用转化为去甲肾上腺素，由此增加去甲肾上腺素浓度(考夫曼(kaufmann)等人，循环(circulation)，2003；108:724-728；考夫曼，临床自主研究(clin.auton.res.)(2008)18[suppl1]:19-24)；和艾萨克森(isaacson)等人，血管健康风险管理(vascular health and risk management)，2014，10:169-176)。在美国，屈西多巴已核准用于治疗罹患因原发性自主神经衰竭(帕金森氏症、多发性系统萎缩症和单纯性自主神经衰竭)、多巴胺β-羟化酶缺少症和非糖尿病性自主神经病变引起的症状性noh的成年患者起立性晕眩、头晕或“感觉快要漆黑的感觉”。屈西多巴的主要副作用是仰卧高血压且在处方信息中因为所述严重副作用而对所述药物有一黑框警语。
[0006]
或者，患者的去甲肾上腺素浓度可通过抑制造成去甲肾上腺素再吸收结果的去甲肾上腺素转运体来增加。例如，阿托西汀(atomoxetine)为在美国已核准用于治、注意力缺陷过动症(adhd)的选择性去甲肾上腺素再吸收抑制剂。已证实阿托西汀会增加罹患中枢性自主神经衰竭的患者的血压(拉米瑞兹(ramirez)等人，高血压(hypertension)，2014；64:1235-40；和石宝(shibao)等人，高血压(hypertension)，2007；50:47-53)。然而，阿托西汀主要通过cyp2d6酶通道代谢且因此其药代动力学性质可根据个体是否具有减少的cyp2d6活性(不良代谢型)或正常cyp2d6活性(广泛性代谢型)改变(林(ring)等人，药物代谢与分布(drug metabolism and distribution)，2002，30:319-323)。阿托西汀的处方信息还包括关于可能药物-药物相互作用的许多警语。此外，当用于治疗adhd时，阿托西汀与多种胃肠道不良作用(包括口干和恶心)相关联。阿托西汀尚未被批准用于noh的治疗。
[0007]
用于治疗noh的其它药剂包括α1-肾上腺素受体激动剂米多君(midodrine)(和其活性代谢产物去糖米多君(desglymidodrine))；合成性盐皮质激素(mineralocortioid)氟氢可的松；和胆碱酯酶抑制吡斯的明(pyridostigmine)。所述药剂的副作用可包括就米多君来说的仰卧高血压、感觉异常(包括头皮麻刺痛)、毛发直立(鸡皮疙瘩(goose bumps))和尿急或闭尿；就氟氢可的松来说的低钾血症、头痛、周边水肿、心力衰竭和仰卧高血压；及就吡斯的明来说的腹部不适和尿急。
[0008]
因此，希望具有可用于治疗noh的其它选项。特定来说，希望提供一种具有可预测药代动力学性质的用于noh治疗的安全且具良好耐受性的去甲肾上腺素转运体抑制剂。此外，由于仰卧高血压常见于noh患者中且现有药物中许多可引起或加剧仰卧高血压，故极度希望提供用于治疗noh的不引起或加剧仰卧高血压的化合物。
[0009]
美国专利第8,304,432b2号和第8,604,058b2号公开4-[2-(2-氟苯氧基甲基)苯基]哌啶化合物，其为血清素和去甲肾上腺素再吸收抑制剂。公开于这些专利中的一种具体化合物为4-[2-(2,4,6-三氟苯氧基甲基)苯基]哌啶，其具有下式：
[0010][0011]
此化合物也称为td-9855。此外，美国专利第8,304,433b2号和第9,073,859b2号公开4-[2-(2,4,6-三氟苯氧基甲基)苯基]哌啶的结晶盐酸盐。这些专利公开4-[2-(2,4,6-三氟苯氧基甲基)苯基]哌啶的各种用途，包括治疗疼痛病症、忧郁病症、认知病症、压力性尿失禁、慢性疲劳综合征、肥胖、与停经相关联的血管舒缩性症状、慢性下腰痛、骨关节炎和其它病症。这些专利未公开4-[2-(2,4,6-三氟苯氧基甲基)苯基]哌啶于治疗noh的用途；然而，与td-9855在noh中的2期试验有关的信息在2016年3月9日公开于临床试验数据库(clinicaltrials.gov)上。


技术实现要素：

[0012]
本发明涉及一种以4-[2-(2,4,6-三氟苯氧基甲基)-苯基]哌啶或其药学上可接受的盐于治疗神经性起立性低血压及其症状的用途。
[0013]
因此，在一个方面中，本发明涉及一种式i化合物：
[0014][0015]
或其药学上可接受的盐，其是用于治疗人类患者的神经性起立性低血压及其症状；其中所述化合物是以在约1mg/天到约20mg/天范围内的量投与所述患者，且其中所述用途的特征是(a)增加所述患者的坐式收缩压；(b)增加所述患者的站立时间；或(c)减少所述患者所经历的晕眩或头晕。在一个实施例中，所述用途的特征是增加所述患者的坐式收缩压。在另一实施例中，所述用途的特征是增加所述患者的站立时间。在另一实施例中，所述用途的特征是减少所述患者所经历的晕眩或头晕。
[0016]
在另一方面中，本发明涉及一种式i化合物或其药学上可接受的盐，其是用于增加罹患症状性神经性起立性低血压的人类患者的坐式收缩压。
[0017]
在另一方面中，本发明涉及一种式i化合物或其药学上可接受的盐，其是用于增加罹患症状性神经性起立性低血压的人类患者的站立时间。
[0018]
在另一方面中，本发明涉及一种式i化合物或其药学上可接受的盐，其是用于治疗人类患者的由症状性神经性起立性低血压引起的起立性晕眩或头晕。
[0019]
在另一方面中，本发明涉及一种药学组合物，其包含药学上可接受的载剂和式i化合物或其药学上可接受的盐，其是用于治疗人类患者的神经性起立性低血压及其症状；其中所述组合物投与所述患者以提供在约1mg/天到约20mg/天范围内的量的化合物，且其中所述用途的特征是(a)增加所述患者的坐式收缩压；(b)增加所述患者的站立时间；或(c)减少所述患者所经历的晕眩或头晕。
[0020]
在另一方面中，本发明涉及一种以式i化合物或其药学上可接受的盐于制造用于治疗人类患者的神经性起立性低血压及其症状的药物中的用途；其中所述化合物是以在约1mg/天到约20mg/天范围内的量投与所述患者，且其中所述用途的特征是(a)增加所述患者的坐式收缩压；(b)增加所述患者的站立时间；或(c)减少所述患者所经历的晕眩或头晕。
[0021]
在另一方面中，本发明涉及一种用于治疗人类患者的神经性起立性低血压及其症状的方法，所述方法包括对所述患者投与式i化合物或其药学上可接受的盐。
[0022]
在另一方面中，本发明涉及一种用于治疗人类患者的神经性起立性低血压及其症状的方法，所述方法包括对所述患者投与式i化合物或其药学上可接受的盐；其中所述化合物是以约1mg/天到约20mg/天的量投与所述患者，且其中所述方法的特征是(a)增加所述患者的坐式收缩压；(b)增加所述患者的站立时间；或(c)减少所述患者所经历的晕眩或头晕。
[0023]
除非另有说明，否则以下单独且相异的实施例可应用于本发明的述于本文中的每一方面。
[0024]
在一个实施例中，所述化合物为4-[2-(2,4,6-三氟苯氧基-甲基)苯基]哌啶盐酸盐。
[0025]
在一个实施例中，所述化合物为4-[2-(2,4,6-三氟苯氧基甲基)苯基]哌啶的结晶盐酸盐，其特征是包括在4.44
±
0.20、10.22
±
0.20、17.16
±
0.20和21.78
±
0.20的2θ值处的衍射峰的粉末x射线衍射图案。在另一实施例中，所述4-[2-(2,4,6-三氟苯氧基甲基)苯基]哌啶的结晶盐酸盐的另一特征是在选自8.11
±
0.20、13.18
±
0.20、16.06
±
0.20、18.38
±
0.20、23.76
±
0.20、26.32
±
0.20、27.24
±
0.20、29.60
±
0.20和31.94
±
0.20的2θ值处具有一或多个其它衍射峰。
[0026]
在一个实施例中，所述化合物为4-[2-(2,4,6-三氟苯氧基甲基)苯基]哌啶的结晶盐酸盐，其特征是具有约197
±
2℃的熔点的差示扫描量热法迹线。
[0027]
在一个实施例中，所述患者罹患选自原发性自主神经衰竭(包括单纯性自主神经衰竭、多发性系统萎缩症和帕金森氏症)、自主神经病变(包括糖尿病性和非糖尿病性自主神经病变)的神经疾病。在一个实施例中，所述患者罹患原发性自主神经衰竭。在另一实施例中，所述患者罹患自主神经病变。在另一实施例中，所述患者罹患帕金森氏症。在一个特定实施例中，所述患者罹患多发性系统萎缩症。
[0028]
在一个实施例中，所述化合物是以在约0.5mg/天到约20mg/天范围内的量投与。在另一实施例中，所述化合物是以在约1mg/天到约20mg/天范围内的量投与。在另一实施例中，所述化合物是以在约1mg/天到约10mg/天范围内的量投与。在另一实施例中，所述化合物是以选自约1、2、3、4、5、6、7、8、9和10mg/天的量投与。
[0029]
在一个实施例中，所述化合物是每天一次投与。
[0030]
在一个实施例中，所述化合物是呈包含药学上可接受的载剂和式i化合物或其药学上可接受的盐的药学组合物形式投与。
[0031]
在一个实施例中，所述化合物是与选自α1-肾上腺素受体激动剂、α2-肾上腺素受体拮抗剂、皮质类固醇、去甲肾上腺素前体和胆碱酯酶抑制剂或其组合的药剂一起投与。在一个特定实施例中，所述化合物是与米多君、乙酸氟氢可的松、屈西多巴或吡斯的明或在各情况下其药学上可接受的盐；如米多君盐酸盐或溴吡斯的明一起投与。
[0032]
本文公开本发明的其它方面及实施例。
具体实施方式
[0033]
在本发明的各种方面及实施例中，本发明涉及一种以4-[2-(2,4,6-三氟苯氧基甲基)苯基]哌啶或其药学上可接受的盐于治疗神经性起立性低血压及其症状的用途。
[0034]
定义
[0035]
当描述本发明时，除非另有指示，否则以下术语具有以下定义。
[0036]
除非使用语境中另有明确指示，否则单数术语“一”、“一个”和“所述”包括相应复数术语。
[0037]
术语“约”意指指定值的
±
5％。
[0038]
术语“熔点”意指通过差示扫描量热法观测到对应于固相-到-液相变化的热转化
的最大吸热热流时的温度。
[0039]
术语“药学上可接受”意指就投与患者来说是可接受的(例如，就指定用途来说具有可接受的安全性)。
[0040]
术语“药学上可接受的盐”意指由酸和碱(包括两性离子)制备的就投与患者(例如，就所给给药方案来说具有可接受的安全性的盐)来说可接受的盐。
[0041]
术语“治疗有效量”意指当投与需要治疗的患者时足以实现治疗的量，例如，实现所期治疗效果所需要的量。
[0042]
术语“治疗”意指改善或抑制所治疗的医学病症或失调症；或缓解医学病症或异常的症状。
[0043]
术语“单位剂型”或“单位剂量”意指适合投与患者的物理上离散单元，即，各单元仅包含经计算以产生治疗效应的预定量的治疗剂或其与一或多个其它单元的组合。实例包括胶囊、锭剂等。
[0044]
用于本文中的所有其它术语打算具有其为具有熟习其等所属一般技术者所了解的一般含义。
[0045]
式i化合物
[0046]
本发明使用4-[2-(2,4,6-三氟苯氧基甲基)苯基]-哌啶，其具有式i：
[0047][0048]
或其药学上可接受的盐。
[0049]
可依本文实例中所述或通过公开于美国专利第8,304,432b2号、第8,304,433b2号和第8,247,433b2号及相关专利中的方法和程序来制备4-[2-(2,4,6-三氟苯氧基甲基)苯基]哌啶。
[0050]
在一个实施例中，4-[2-(2,4,6-三氟苯氧基甲基)苯基]哌啶是以药学上可接受的盐的形式使用。代表性药学上可接受的盐包括以下酸(与圆括号中所示的对应阴离子)的盐：乙酸(乙酸根)、抗坏血酸(抗坏血酸根)、苯磺酸(苯磺酸根)、苯甲酸(苯甲酸根)、樟脑磺酸(樟脑磺酸根)、氯茶碱(氯茶碱离子)、柠檬酸(柠檬酸根)、乙磺酸(乙磺酸根)、乙二磺酸(乙二磺酸根)、富马酸(富马酸根)、龙胆酸(龙胆酸根)、葡萄糖酸(葡萄糖酸根)、葡糖醛酸(葡糖醛酸根)、葡庚糖酸(葡庚糖酸根)、谷氨酸(谷氨酸根)、马尿酸(马尿酸根)、氢溴酸(溴离子)、盐酸(氯离子)、氢碘酸(碘离子)、羟乙磺酸(羟乙磺酸根)、乳酸(乳酸根)、乳糖酸(乳糖酸根)、月桂基磺酸(月桂基磺酸根)、马来酸(马来酸根)、苹果酸(苹果酸根)、杏仁酸(杏仁酸根)、甲磺酸(甲磺酸根)、甲基磺酸(甲基磺酸根)、粘酸(粘酸根)、萘磺酸(萘磺酸根)、萘-1,5-二磺酸(萘-1,5-二磺酸根)、萘-2,6-二磺酸(萘-2,6-二磺酸根)、萘甲酸(萘甲酸根)、烟碱酸(烟碱酸根)、硝酸(硝酸根)、十八酸(十八酸根)、油酸(油酸根)、乳清酸(乳清酸根)、草酸(草酸根)、扑酸(扑酸根)、泛酸(泛酸根)、磷酸(磷酸根)、多聚半乳糖醛酸(多聚半
乳糖醛酸根)、琥珀酸(琥珀酸根)、磺基水杨酸(磺基水杨酸根)、硫酸(硫酸根)、酒石酸(酒石酸根)、对甲苯磺酸(对甲苯磺酸根)和羟萘甲酸(羟萘甲酸根)等。所述盐有时称为酸加成盐。
[0051]
所述盐可通过使1摩尔当量的4-[2-(2,4,6-三氟苯氧基甲基)苯基]哌啶与药学上可接受的酸中的约0.95到约1.05摩尔当量的酸性质子接触来制备。例如，可使1摩尔当量的4-[2-(2,4,6-三氟苯氧基甲基)苯基]哌啶与约1摩尔当量的盐酸接触以形成4-[2-(2,4,6-三氟苯氧基甲基)苯基]哌啶盐酸盐；或可使1摩尔当量的4-[2-(2,4,6-三氟苯氧基甲基)苯基]哌啶与约0.5摩尔当量的硫酸接触以形成4-[2-(2,4,6-三氟苯氧基甲基)苯基]-哌啶硫酸盐。
[0052]
此类反应通常是在稀释剂(如二氯甲烷、乙醇、乙酸乙酯、乙酸异丙酯等)中，在约-20℃到约50℃范围内的温度下进行约0.5到约12小时或直到反应大致完成。在反应完成时，通常，使用常规程序，如过滤、层析、再结晶等单离产物。所述反应的产物可为结晶或可不为结晶。
[0053]
在一个实施例中，用于本发明中的化合物为4-[2-(2,4,6-三氟苯氧基甲基)苯基]哌啶盐酸盐。在另一实施例中，所述化合物为结晶4-[2-(2,4,6-三氟苯氧基甲基)苯基]哌啶盐酸盐，其特征是经表征为包括在4.44
±
0.20、10.22
±
0.20、17.16
±
0.20和21.78
±
0.20的2θ值处的衍射峰的粉末x射线。在另一实施例中，所述结晶盐酸盐的另一特征是在选自8.11
±
0.20、13.18
±
0.20、16.06
±
0.20、18.38
±
0.20、23.76
±
0.20、26.32
±
0.20、27.24
±
0.20、29.60
±
0.20和31.94
±
0.20的2θ值处具有一或多个其它衍射峰。在另一实施例中，所述化合物为结晶4-[2-(2,4,6-三氟苯氧基甲基)苯基]哌啶盐酸盐，其特征是具有约197
±
2℃的熔点的差示扫描量热法迹线。
[0054]
可如本文实例中所述或通过公开于美国专利第8,304,432b2号、第8,304,433b2号；和第8,247,433b2号及相关专利中的方法和程序来制备用于本发明中的4-[2-(2,4,6-三氟苯氧基甲基)-苯基]哌啶的结晶盐酸盐。
[0055]
药学组合物、制剂和剂型
[0056]
在用于本发明中时，4-[2-(2,4,6-三氟苯氧基甲基)苯基]-哌啶或其药学上可接受的盐通常是呈药学组合物或制剂形式投与患者。在论述本文组合物或制剂时，4-[2-(2,4,6-三氟苯氧基甲基)苯基]-哌啶或其药学上可接受的盐可称为“活性剂”以区分其与制剂的其它组分(如载体或赋形剂)。因此，术语“活性剂”包括4-[2-(2,4,6-三氟苯氧基甲基)-苯基]哌啶和其药学上可接受的盐。此外，除非另有指示，否则术语“载体”和“赋形剂”在本文中可互换使用且具有相同含义。
[0057]
本发明的药学组合物通常包含治疗有效量的活性剂。然而，所属领域的技术人员将知晓，药学组合物可包含超过一种治疗有效量(即，散装组合物)或少于一种治疗有效量(即，设计用于多次投与以实现治疗有效量的个别单位剂量)。
[0058]
通常，药学组合物将包含约0.01到约95重量％的活性剂，包括约0.01到约30重量％，如约0.01到约10重量％，实际量是取决于制剂、投药途径、给药频率等。例如，适用为口服剂型的药学组合物可包含约0.1到约10重量％(包括约约0.5到约5重量％)的活性剂。
[0059]
在一个代表性实施例中，药学组合物包含约0.5到约20mg活性剂/单位剂量，包括约1到约10mg活性剂/单位剂量。例如，所述活性剂可配制成1、2、3、4、5、6、7、8、9或10mg单位
剂量，如1mg、3mg、5mg和10mg单位剂量。
[0060]
任何常规或适合的药学上可接受的载剂可用于本发明的药学组合物中。特定载体或载体的组合的选择将取决于各种因素，如投药模式、剂量、给药频率、活性剂释放定时和类似。就此来说，用于特定投药模式的适合药学组合物的制备完全在熟习药学技术者知识范围内，及用于所述组合物中的载体可于市面购得。以进一步说明的方式，常规制剂和配制技术述于例如雷明顿：制药的科学与实践(remington:the science and practice of pharmacy)，第20版，利平科特威廉姆斯怀特出版社(lippincott williams&white)，巴尔的摩(baltimore)，马里兰(maryland)(2000)；和h.c.安塞尔(h.c.ansel)等人，药学剂型和药物传递系统(pharmaceutical dosage forms and drug delivery systems)，第7版，利平科特威廉姆斯怀特出版社，巴尔的摩，马里兰(1999)中。
[0061]
药学上可接受的载剂的代表性实例包括(但不限于)：糖，如乳糖、葡萄糖和蔗糖；淀粉，如玉米淀粉和马铃薯淀粉；纤维素，如微晶纤维素、和其衍生物，如羧甲基纤维素钠、乙基纤维素和乙酸纤维素；粉状黄蓍胶；麦芽；明胶；滑石；赋形剂，如可可脂和栓剂蜡；油，如花生油、棉籽油、红花子油、麻油、橄榄油、玉米油和大豆油；二醇，如丙二醇；多元醇，如甘油、山梨糖醇、甘露醇和聚乙二醇；酯，如油酸乙酯和月桂酸乙酯；琼脂；缓冲剂，如氢氧化镁和氢氧化铝；海藻酸；无热原水；等渗盐水；林格氏溶液(ringer's solution)；乙醇；磷酸盐缓冲液；推进剂压缩气体，如氟氯碳化物和氢氟碳化物；和用于药学组合物中的其它非毒性兼容性物质。
[0062]
药学组合物通常是通过将活性剂与药学上可接受的载剂和任何可选的成分彻底且均匀地混合或掺合来制备。所得的经均匀掺合的混合物可接着使用常规程序和设备成型或加载成锭剂、胶囊、丸剂、筒罐、卡管、小瓶、瓶、分配器等。
[0063]
在一个实施例中，所述药学组合物是适合口服。用于口服的药学组合物可呈例如胶囊、锭剂、丸剂、含片、扁囊剂、糖衣药丸、粉末、颗粒、溶液、悬浮液、乳液、酏剂、糖浆等的形式；各包含预定量的活性剂。
[0064]
当计划以固体剂型(如胶囊、锭剂等)用于口服时，所述药学组合物将通常包含活性剂和一种或多种药学上可接受的固体载体，如柠檬酸钠或磷酸二钙。固体剂型还可包括：填料或增积剂，如淀粉、微晶纤维素、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露糖和/或硅酸；粘合剂，如羧甲基纤维素、藻酸盐、明胶、聚乙烯吡咯啶酮、蔗糖和/或阿拉伯胶；保湿剂，如甘油；崩解剂，如交联羧甲纤维素钠、琼脂、碳酸钙、马铃薯或树薯淀粉、海藻酸、特定硅酸盐和/或碳酸钠；溶解阻滞剂，如石蜡；吸收加速剂，如四级铵化合物；润湿剂，如十六烷醇和/或单硬脂酸甘油酯；吸附剂，如高岭土和/或膨润土；润滑剂，如滑石、硬脂酸钙、硬脂酸镁、固体聚乙二醇、月桂基硫酸钠和/或其混合物；着色剂；缓冲剂；释放剂；包衣剂；甜味剂、矫味剂和芳香剂；及防腐剂和抗氧化剂。
[0065]
用于锭剂、胶囊、丸剂等的代表性包衣剂包括那些用于肠溶性包衣者，如乙酸邻苯二甲酸纤维素、乙酸邻苯二甲酸聚乙烯酯、邻苯二甲酸羟丙基甲基纤维素、甲基丙烯酸-甲基丙烯酸酯共聚物、乙酸偏苯三酸纤维素、羧甲基乙基纤维素、乙酸琥珀酸羟丙基甲基纤维素、聚乙烯醇等。
[0066]
代表性抗氧化剂包括：水溶性抗氧化剂，如抗坏血酸、半胱氨酸盐酸盐、硫酸氢钠、偏亚硫酸氢钠、亚硫酸钠等；油溶性抗氧化剂，如坏血酸棕榈酸酯、丁基化羟基苯甲醚、丁基
化羟基甲苯、卵磷脂、没食子酸丙酯、α-生育酚等；和金属螯合剂，如柠檬酸、乙二氨四乙酸、山梨糖醇、酒石酸、磷酸等。
[0067]
药学组合物还可使用例如不同比例的羟丙基甲基纤维素或其它聚合物基质、脂质体和/或微球体配制以缓慢或控制释放活性剂。此外，所述药学组合物可包含乳浊剂且可经配制使得那些仅释放活性剂，或优先地，在胃肠道的某一部分中，视需要，以延迟方式释放。可使用的包埋组合物的实例包括聚合物质和蜡。活性剂还可在适合的情况下与上述赋形剂中的一者或多者一起呈微型封装形式。
[0068]
用于口服的适合液体剂型包括例如药学上可接受的乳液、微乳液、乳液、悬浮液、糖浆和酏剂。液体剂型通常包含活性剂和惰性稀释剂，如，例如，水、汁或其它溶剂、增溶剂和乳化剂，如乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苄醇、苯甲酸苄酯、丙二醇、1,3-丁二醇、油(例如，棉籽油、花生油、玉米油、胚芽油、橄榄油、蓖麻油和麻油)、甘油、四氢呋喃醇、聚乙二醇和山梨糖醇的脂肪酸酯，及其混合物。悬浮液可包含悬浮剂，如，例如乙氧基化异硬脂醇、聚氧乙烯山梨糖醇和山梨糖醇酐酯、微晶纤维素、偏氢氧化铝、膨润土、琼脂-琼脂和黄蓍胶，及其混合物。
[0069]
在另一实施例中，所述药学组合物是适于局部投与，如经皮投与。就所述投与来说，可使用已知的经皮传递系统和赋形剂。例如，可将活性剂与渗透增进剂，如丙二醇、聚乙二醇单月桂酸酯、氮杂环烷-2-酮等混合，且并入到贴片或类似传递系统中。必要时，则其它赋形剂，包括胶凝剂、乳化剂和缓冲剂可用于所述经皮组合物中。
[0070]
在另一实施例中，所述药学组合物是适合非经肠投与(例如，通过皮下、静脉内、肌肉内或腹膜内注射)。就所述投与来说，活性剂是呈无菌溶液、悬浮液或乳液形式提供。用于制备此类制剂的示例性载体包括水、盐水、低分子量醇，如丙二醇、聚乙二醇、油、明胶、脂肪酸酯(如油酸乙酯)等。非经肠制剂还可包含一种或多种增溶剂、稳定剂、防腐剂、润湿剂、乳化剂和分散剂。这些制剂可通过使用无菌可注射介质、杀菌剂、过滤、照射或热变成无菌。
[0071]
一种典型静脉内制剂为包含活性剂和生理上可接受的水性载体的无菌ph 4-7水溶液。代表性生理上可接受的水性载体包括例如无菌注射用水，usp；葡萄糖注射液，usp(例如，2.5、5.0、10、20％葡萄糖，包括5％葡萄糖注射液(d5/w))；葡萄糖和氯化钠注射液，usp(例如，从2.5％到10％变化的葡萄糖和从0.12％(19meq钠)到0.9％(154meq钠)变化的氯化钠)；甘露醇注射液，usp(例如，5、10、15、20和25％甘露醇)；林格氏注射液，usp(例如，147meq钠、4meq钾、4.5meq钙和156meq氯离子/升)；乳酸林格氏(lactated ringer's)注射液，usp(例如，2.7meq钙、4meq钾、130meq钠和28meq乳酸盐/升)；氯化钠注射液，usp(例如，0.9％氯化钠)等。当投与患者时，活性剂将通常是以约0.1ml到约10ml水性载体/mg活性剂，如约0.5到约5ml/mg活性剂进行稀释。接着，所述给药溶液通常是通过静脉内输注投与患者。
[0072]
作为说明，可依以下实例中所述制备代表性药学组合物。
[0073]
a.硬明胶胶囊
[0074]
将活性剂(5g)、经喷雾干燥的乳糖(485g)和硬脂酸镁(10g)彻底掺合。然后，将所得组合物加载到硬明胶胶囊(每个胶囊500mg组合物)中。各胶囊的每一适合口服的单位剂量提供5mg活性剂。
[0075]
b.硬明胶胶囊
[0076]
将活性剂(2g)与淀粉(98g)、微晶纤维素(98g)和硬脂酸镁(2g)彻底混合。然后，使所述混合物通过美国45号网目筛且加载到硬明胶胶囊中(200mg组合物/胶囊)。每一胶囊中每一适于口服的单位剂量提供2mg活性剂。
[0077]
c.软明胶胶囊
[0078]
将活性剂(5g)与聚氧乙烯山梨糖醇单油酸酯(65g)和淀粉粉末(335g)彻底掺合。然后，将所述混合物加载到软明胶胶囊中(400mg组合物/胶囊)。每一胶囊中每一适于口服的单位剂量提供5mg活性剂。
[0079]
d.软明胶胶囊
[0080]
将活性剂(1g)与微晶纤维素(290g)和硬脂酸镁(9g)彻底掺合。然后，将此混合物加载到软明胶胶囊中(300mg组合物/胶囊)。每一胶囊中每一适于口服的单位剂量提供1mg活性剂。
[0081]
e.锭剂
[0082]
使活性剂(10g)、淀粉(45g)和微晶纤维素(35g)通过美国20号网目筛且彻底混合。在50-60℃下干燥所得颗粒且使其通过美国16号网目筛。分别地，将聚乙烯吡咯啶酮溶液(4g，呈含在无菌水中的10％溶液形式)与羧甲基淀粉钠(4.5g)、硬脂酸镁(0.5g)和滑石(1g)混合，且使所述混合物通过美国16号网目筛。然后，将所得混合物添加到所述颗粒。在彻底混合之后，在压锭机中将所述混合物压缩以形成分别重100mg的锭剂。每一锭剂中每一适于口服的单位剂量提供10mg活性剂。
[0083]
f.锭剂
[0084]
将活性剂(40g)与微晶纤维素(445g)、发烟二氧化硅(10g)和硬脂酸(5g)彻底混合。然后，在压锭机中将所述混合物压缩以形成分别重100mg的锭剂。每一锭剂中每一适于口服的单位剂量提供8mg活性剂。
[0085]
g.锭剂
[0086]
将活性剂(10g)与玉米淀粉(50g)、交联羧甲纤维素钠(25g)、乳糖(110mg)和硬脂酸镁(5mg)彻底掺合。然后，在压锭机中将所述混合物压缩以形成分别重200mg的锭剂。每一锭剂中每一适于口服的单位剂量提供10mg活性剂。
[0087]
h.锭剂
[0088]
将活性剂(10g)与玉米淀粉(230g)和明胶(50g)水溶液彻底掺合。干燥所述混合物且研磨至细粉。然后，将微晶纤维素(100g)和硬脂酸镁(10g)与明胶制剂混合，研磨且在压锭机中将所得混合物压缩以形成分别重200mg的锭剂。每一锭剂中每一适于口服的单位剂量提供5mg活性剂。
[0089]
i.糖浆
[0090]
将以下成分彻底混合直到所有固体成分溶解：
[0091][0092]
所得糖浆每10ml的适合口服的糖浆包含5mg活性剂。
[0093]
j.无菌静脉内注射溶液
[0094]
将活性剂(5mg)与0.4m乙酸钠缓冲液(2.0ml)掺合。视需要使用0.5n盐酸水溶液或0.5n氢氧化钠水溶液将所得溶液的ph调整到ph 4，且然后，添加足量注射用水以提供20ml的总体积。然后，使混合物通过无菌过滤器(0.22微米)过滤以提供适于静脉内输注投与的无菌溶液。
[0095]
共同投与及组合
[0096]
若需要，4-[2-(2,4,6-三氟苯氧基甲基)苯基]哌啶或其药学上可接受的盐可与一种或多种其它治疗剂(“第二药剂”)组合投与以治疗noh及其症状。
[0097]
可与4-[2-(2,4,6-三氟苯氧基甲基)苯基]哌啶或其药学上可接受的盐组合投与的代表性类别的治疗剂包括例如α
1-肾上腺素能受体(α
1-肾上腺素受体)激动剂、α
2-肾上腺素能受体(α
2-肾上腺素受体)拮抗剂、肾上腺皮质类固醇、去甲肾上腺素前体、胆碱酯酶抑制剂或其组合。所属领域的技术人员将明了术语“α
1-肾上腺素能受体激动剂”、“α
2-肾上腺素能受体拮抗剂”、“肾上腺皮质类固醇”、“去甲肾上腺素前体”和“胆碱酯酶抑制剂”包括化合物在投与患者之后具有特定活性的所有形式，如药学上可接受的盐、溶剂合物、结晶形式、多形体、前药等。同样地，术语“第二药剂”包括第二药剂的所有形式，如药学上可接受的盐、溶剂合物、结晶形式、多形体、前药等。
[0098]
α
1-肾上腺素能受体激动剂的代表性实例包括脱甘氨酸米多君、依替福林(etilefrine)、间羟胺、米多君等或在各情况下其药学上可接受的盐。米多君为脱甘氨酸米多君的前药，其为α
1-肾上腺素能受体激动剂。在一个实施例中，第二药剂为米多君或其药学上可接受的盐，如盐酸米多君盐。
[0099]
α
2-肾上腺素能受体拮抗剂的代表性实例包括育亨宾(yohimbine)等、或其药学上可接受的盐。
[0100]
肾上腺皮质类固醇的代表性实例包括氟氢可的松、乙酸氟氢可的松等或在各情况下其药学上可接受的盐。乙酸氟氢可的松为氟氢可的松的前药。在一个实施例中，第二药剂为乙酸氟氢可的松。
[0101]
去甲肾上腺素前体的代表性实例包括屈西多巴或其药学上可接受的盐。在一个实施例中，所述第二药剂为屈西多巴。
[0102]
胆碱酯酶抑制剂的代表性实例包括吡斯的明或其药学上可接受的盐。在一个实施例中，所述第二药剂为吡斯的明或其药学上可接受的盐，如溴吡斯的明。
[0103]
4-[2-(2,4,6-三氟苯氧基甲基)苯基]哌啶或其药学上可接受的盐和第二药剂可
经物理混合以形成包含两种药剂的组合物；或各药剂可分开地投与患者，同时地或连续地。例如，将4-[2-(2,4,6-三氟苯氧基甲基)苯基]哌啶或其药学上可接受的盐可使用常规程序和设备与第二药剂组合以形成包含4-[2-(2,4,6-三氟苯氧基甲基)苯基]哌啶或其药学上可接受的盐的药剂与第二药剂的组合。此外，所述药剂可与药学上可接受的载剂组合以形成包含4-[2-(2,4,6-三氟苯氧基甲基)苯基]-哌啶或其药学上可接受的盐、第二药剂和药学上可接受的载剂的药学组合物。在此实施例中，通常，将组合物的所述组分混合或掺合以得到物理混合物。所述物理混合物然后可通过任何适合投药途径，如口服、局部或非经肠投药模式投与给患者。
[0104]
或者，所述药剂可在投与患者之前仍旧单独且相异。在所述实施例中，所述药剂在投与之前并非物理混合在一起，而是同时地或在不同时间呈独立组合物形式投与。此类组合物可进行独立包装或可以套组形式包装在一起。当在不同时间投与时，所述第二药剂通常将在投与4-[2-(2,4,6-三氟苯氧基甲基)苯基]哌啶或其药学上可接受的盐后小于24小时(例如，在从开始投与给给药后约24小时的任何时间范围内)投与。此也称为连续投与。因此，例如，4-[2-(2,4,6-三氟苯氧基甲基)苯基]哌啶或其药学上可接受的盐可与第二药剂使用两种锭剂(例如，一种锭剂用于各活性剂)同时或连续地经口投与，其中连续包括在投与4-[2-(2,4,6-三氟苯氧基甲基)苯基]哌啶或其药学上可接受的盐之前或之后或在某些其它时间(例如，之前或之后一小时；或之前或之后三小时等)立刻投与。或者，所述组合可通过不同投药途径投与，例如，一者经口及另一者经局部或非经肠式。
[0105]
当用于本发明中时，所述第二药剂是以治疗有效量(即，以当与4-[2-(2,4,6-三氟苯氧基甲基)苯基]-哌啶或其药学上可接受的盐共投与时产生治疗有利效果的量)使用。例如，所述药剂通常是以其已核准的剂量使用。例如，米多君盐酸盐通常是多达每天三次以在约2.5mg到约10mg范围内的量经口投与；及屈西多巴通常是多达每天三次以在约100mg到约600mg范围内的量经口投与。
[0106]
效用
[0107]
期望4-[2-(2,4,6-三氟苯氧基甲基)苯基]哌啶可用于治疗神经性起立性低血压(noh)且与noh相关的症状，如晕眩、头晕或患者感觉快要漆黑。
[0108]
4-[2-(2,4,6-三氟苯氧基甲基)苯基]哌啶具有可使其特别适用于治疗noh的各种性质。例如，不同于阿托西汀，4-[2-(2,4,6-三氟苯氧基甲基)苯基]哌啶的代谢是通过多种cyp450酵素催化，且因此，不希望罹患cyp2d6不良代谢型(pm)表型的个体中暴露显著增加(鲍尔温(baldwin)等人，“td-9855(一种新颖的去甲肾上腺素和血清素再吸收抑制剂(nsri))证实针对阿托西汀对cyp2d6代谢显著降低的依赖性(td-9855,a novel norepinephrine and serotonin reuptake inhibitor(nsri),demonstrates significantly reduced dependence on cyp2d6 metabolism relative to atomoxetine)”海报在美国药学科学家学会年会暨博览会(american association of pharmaceutical scientists annual meeting and exposition)上呈现，海报第w4278号，圣安东尼奥市(san antonio)，德克萨斯州(tx)(2013)；摘要编号aaps2013-000666)。更具体来说，4-[2-(2,4,6-三氟苯氧基甲基)苯基]哌啶的代谢主要受cyp2d6化学抑制(减少7％)影响且主要通过cyp3a4和cyp1a2介导(分别减少34％和25％)。相比之下，阿托西汀代谢主要受cyp2d6的化学抑制影响(减少94％)而未显著受其它cyp450酵素的抑制影响。因
此，针对阿托西汀来说，预期4-[2-(2,4,6-三氟苯氧基甲基)苯基]哌啶具有显著减小的药物-药物相互作用的可能性及减小的对与cyp2d6多态性相关联的倾向的易感性。
[0109]
在一个实施例中，4-[2-(2,4,6-三氟苯氧基甲基)苯基]哌啶或其药学上可接受的盐是用以治疗由原发自主神经衰竭(包括单纯性自主神经衰竭、多发性系统萎缩症和帕金森氏症)或自主神经萎缩症(包括糖尿病性和非糖尿病性自主神经萎缩症)引起的症状性noh。
[0110]
在一个特定实施例中，4-[2-(2,4,6-三氟苯氧基甲基)苯基]哌啶或其药学上可接受的盐是用以治疗由原发自主神经衰竭引起的症状性noh。在此实施例中，所述患者可诊断患有单纯性自主神经衰竭、多发性系统萎缩症和/或帕金森氏症。在一个实施例中，所述患者具有单纯性自主神经衰竭。在另一实施例中，所述患者具有多发性系统萎缩症。此外，在另一实施例中，所述患者具有帕金森氏症。
[0111]
原发自主神经衰竭(也称为原发自主神经机能障碍)是一类自主神经机能障碍，即，自主神经系统未正确发挥作用的病症。在原发自主神经衰竭中，所述自主神经功能障碍以与由另一疾病(如糖尿病)引起的第二病症相反的原发病症形式发生。例如，通常，当自主神经由特征是自主神经系统退化的慢性病症引起时或在自主神经衰竭是主要症状且其病因未知情况下，自主神经衰竭被归类为“原发”。归类为原发自主神经衰竭的病症包括单纯性自主神经衰竭、多发性系统萎缩症和帕金森氏症。
[0112]
单纯性自主神经衰竭(paf)(也称为布-埃(bradbury-eggleston)综合征或特发性起立性低血压)是自主神经系统的退化性疾病。paf的主要症状为起立性低血压。其它症状可包括减少的出汗、怕热、闭尿、膀胱痉挛(可能引起尿失禁)、勃起功能障碍、大便失禁或便秘和瞳孔异常。paf的病因尚未完全了解，但在罹患paf的患者中已证实脊髓中外侧柱中细胞的损失。此外，paf可能与α-突触核蛋白的异常积聚有关。
[0113]
帕金森氏症(pd)为慢性进行性运动障碍。病因未知，但pd涉及中脑的称为黑质的区域中神经元的功能障碍及死亡。这些神经元产生多巴胺，其在运动和协调上扮演关键角色。随着pd发展，脑中的多巴胺产量减少，从而导致运动控制和协调问题。症状包括震颤、僵硬、运动减慢和姿势不稳定性。然而，一些pd患者还经历非运动症状，包括因自主神经系统改变所致的起立性低血压，即pd加上noh的症状。此外，一些具有pd症状的患者具有称为帕金森叠加综合征(或病症或多发性是统萎缩症)的病症。帕金森叠加综合征为一群产生pd的典型症状(震颤、僵硬、失动症/运动迟缓和姿势不稳)且另外出现可与单纯性特发性pd区分的其它特征的神经退化性疾病。区分帕金森叠加综合征与特发性pd的临床特征包括症状性发作、静止性震颤无规律或缺乏，及对多巴胺性药物(包括左多巴)反应的减小。其它特征包括运动迟缓、早发性姿势不稳、中轴肌僵硬的增加、自主神经异常、外星人肢综合征、核上凝视麻痹、失用症、小脑(包括椎体细胞)的侵犯及在一些情况下的显著认知受损。
[0114]
多发性系统萎缩症(msa)(也称为夏-德(shy
–
drager)综合征)为特征是同时影响自主神经系统与运动的症状组合的进行性神经退化性疾病。msa的初始症状通常很难与帕金森氏症的初始症状区分，且包括动作减慢、震颤或僵化(僵硬)；笨拙或不协调；语言能力受损、低沉沙哑、声音颤抖；由于起立性低血压引起的昏厥或头晕；膀胱控制问题，如猝发撒尿或排空膀胱困难。msa分成两大类，取决于评估个体时的大多数显著症状：帕金森氏病类型(msa-p)，具有类似于帕金森氏症的主要特征(如运动迟缓、僵硬和震颤)及平衡、协调问
题和自主神经系统功能障碍；及小脑类型(msa-c)，具有特征是共济失调的主要症状(平衡和协调问题)、吞咽困难、言语异常或声音颤抖和眼球运动异常。msa的病因未知。msa的显著特征是蛋白质α-突触核蛋白积聚于神经胶质中，所述神经胶质细胞支持脑神经细胞。α-突触核蛋白的这些沉积尤其发生在寡树突神经胶质瘤中，寡树突神经胶质瘤是一种制造髓磷脂的细胞(涂布在神经细胞上而使得那些快速进行电信号传递)。最新研究指出α-突触核蛋白的朊病毒形式可为所述疾病的病因(普鲁西纳(prusiner)等人，pnas，(2015)112:e5308-17)。
[0115]
由于msa的药理学的缘故，4-[2-(2,4,6-三氟苯氧基甲基)苯基]哌啶或其药学上可接受的盐尤其适用于治疗msa。更具体来说，msa的特征是中枢自主神经路径变性；然而，在msa患者中，周边神经节后去甲肾上腺素能纤维和儿茶酚氨再吸收机制看起来完整，因此维持交感紧张(拜吉(biaggioni)，药理学评论(pharmacolgical reviews)(2017)69(1):53-62)。通常，通过去甲肾上腺素活化中枢α2-肾上腺素受体介导的cns抗交感神经活性阻碍站立后周边去甲肾上腺素浓度的增加，因此缓解周边加压效应且维持姿势性正常血压。然而，在msa中，完整周边交感神经节后肾上腺素能受体纤维基本上“中断”cns调节，从而使得去甲肾上腺素压力效应完全无遮蔽。虽然这些患者中的残余交感紧张因所述“中断”而无法通过压力反射路径或cns输入调节，但其可在药理学上进行标靶。采用所述独特病理生理学，使用4-[2-(2,4,6-三氟苯氧基甲基)苯基]哌啶或其药学上可接受的盐增加周边交感神经突触去甲肾上腺素，将引起罹患noh的msa患者中压力效应。因此，在一个特定实施例中，使用4-[2-(2,4,6-三氟苯氧基甲基)苯基]哌啶或其药学上可接受的盐以治疗由msa引起的症状性noh。
[0116]
在另一特定实施例中，4-[2-(2,4,6-三氟苯氧基甲基)苯基]-哌啶或其药学上可接受的盐是用以治疗由自主神经病变引起的症状性noh。自主神经病变(或自主神经机能障碍)是指自主神经系统(ans)未正确地工作的各种病症。自主神经病变是一种影响神经的从脑和脊髓携带信息到心脏、膀胱、肠、汗腺、瞳孔和血压的神经病变。个体间可不同的自主神经病变的主要症状包括：起立性低血压；口干；快速心率；隧道视力；吞咽困难；大便失禁；视力模糊；尿失禁；便秘；无汗症；和性功能障碍。自主神经病变可归因于承袭或退化性神经疾病(原发性自主神经机能障碍)或其可由于自主神经系统因得到性疾病(继发性自主神经机能障碍)损伤而发生。
[0117]
当用于治疗noh或noh的症状时，4-[2-(2,4,6-三氟苯氧基甲基)苯基]哌啶或其药学上可接受的盐通常是以在约0.5mg到约20mg/天范围内的量；或视需要投与患者。在一个实施例中，投与患者的量在约1mg到约10mg/天范围内。在另一实施例中，投与患者的量在约3mg到约10mg/天范围内。在单独且相异的实施例中，投与患者的量为1、2、3、4、5、6、7、8、9或10mg/天，包括1mg、3mg、5mg或10mg/天。投与患者的量、投药途径和投药频率通常由治疗患者的医师确定。
[0118]
可通过任何可接受的投药途径，包括例如口腔、局部(包括经皮)和非经肠(包括静脉内)投药模式，投与4-[2-(2,4,6-三氟苯氧基甲基)苯基]哌啶或其药学上可接受的盐给患者。
[0119]
在一个实施例中，4-[2-(2,4,6-三氟苯氧基甲基)苯基]哌啶或其药学上可接受的盐是呈固体或液体剂型形式经口投与患者。在一个特定实施例中，投与患者的形式为固体
剂型，包括锭剂或胶囊。在另一特定实施例中，投与患者的形式为液体剂型，包括溶液、糖浆、悬浮液或乳液。
[0120]
在另一实施例中，投药途径是局部的。在一个特定实施例中，投药途径是经皮的，使用经皮贴片。
[0121]
在另一实施例中，投与途径是非经肠式。在一个特定实施例中，投药途径是静脉内投与。
[0122]
4-[2-(2,4,6-三氟苯氧基甲基)苯基]哌啶或其药学上可接受的盐可单次日剂量(例如，每天一次)；每天多个剂量(例如，每天两次、三次或四次)；或每周多个剂量(例如，每周两次、三次或四次、五次或六次)投与患者。或者，可使用例如经皮贴片连续投与药学组合物。在一个特定实施例中，每天一次投与4-[2-(2,4,6-三氟苯氧基甲基)苯基]哌啶或其药学上可接受的盐给患者。
[0123]
实例
[0124]
提供以下实例以说明本发明的各种代表性实施例及方面而无意限制本发明的范围，除非明确指明。
[0125]
用于以下实例中的试剂、起始材料和溶剂是购自商业供货商(如西格玛-奥德里奇(sigma-aldrich)、圣路易斯(st.louis)，密苏里州(mo)及其附属公司)且无需进一步纯化即可使用，除非另外指明。
[0126]
除非另外指明，否则以下缩写具有以下含义：
[0127]
acoh
ꢀꢀꢀꢀꢀ
乙酸
[0128]
bp
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
血压
[0129]
bsa
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
牛血清白蛋白
[0130]
cho
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
中国仓鼠卵巢
[0131]
da
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
多巴胺
[0132]
dat
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
多巴胺转运体
[0133]
dcm
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
二氯甲烷
[0134]
dipea
ꢀꢀꢀꢀ
n,n-二异丙基乙氨
[0135]
dmem
ꢀꢀꢀꢀꢀ
杜贝卡氏改良的依格培养基(dulbecco's modified eagle's medium)
[0136]
dmf
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
n,n-二甲基甲酰胺
[0137]
dmso
ꢀꢀꢀꢀꢀ
二甲亚砜
[0138]
edta
ꢀꢀꢀꢀꢀ
乙二氨四乙酸
[0139]
etoac
ꢀꢀꢀꢀ
乙酸乙酯
[0140]
etoh
ꢀꢀꢀꢀꢀ
乙醇
[0141]
fbs
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
胎牛血清
[0142]
hdat
ꢀꢀꢀꢀꢀ
人类多巴胺转运体
[0143]
hepes
ꢀꢀꢀꢀ
4-(2-羟乙基)-1-哌嗪乙磺酸
[0144]
hnet
ꢀꢀꢀꢀꢀ
人类去甲肾上腺素转运体
[0145]
hsert
ꢀꢀꢀꢀ
人类血清素转运体
[0146]
5-ht
ꢀꢀꢀꢀꢀ
5-羟基色胺
[0147]
ipa
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
异丙醇
[0148]
ipac
ꢀꢀꢀꢀꢀ
乙酸异丙酯
[0149]
mecn
ꢀꢀꢀꢀꢀ
乙腈
[0150]
meoh
ꢀꢀꢀꢀꢀ
甲醇
[0151]
msa
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
多发性系统萎缩症
[0152]
na
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
去甲肾上腺素
[0153]
ne
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
去甲肾上腺素
[0154]
net
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
去甲肾上腺素转运体
[0155]
nf
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
国家处方书(national formulary)级别
[0156]
paf
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
原发性自主神经衰竭
[0157]
pbs
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
磷酸盐缓冲盐水
[0158]
pd+
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
帕金森氏症加上noh的症状
[0159]
sbp
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
收缩压
[0160]
sert
ꢀꢀꢀꢀꢀ
血清素转运体
[0161]
tfa
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
三氟乙酸
[0162]
thf
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
四氢呋喃
[0163]
tris
ꢀꢀꢀꢀꢀ
三(羟甲基)氨基甲烷
[0164]
用于本文中但未进行定义的其它缩写具有其为具有其等所属一般技术者所了解的一般含义。
[0165]
除非另有说明，否则于400mhz瓦里安(varian)as400光谱分析仪上记录1h nmr光谱。化学位移表示为针对作为内标物的四甲基硅烷(tms)的δ值，单位为ppm。耦合常数(j值)以赫兹(hz)表示及多重性用以下缩写表示：s＝单重峰，d＝双重峰，t＝三重峰，q＝四重峰，m＝多重峰，br＝宽，nd＝未测定。
[0166]
实例1
[0167]
4-(2-羟甲基苯基)哌啶-1-羧酸叔丁酯的制备
[0168]
在室温下，于氮气下，将4-(2-羧基苯基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(5.0g，16mmol，1.0当量)和thf(130ml，1.7mol)组合。滴加硼烷二甲亚砜复合物(2.9ml，33mmol，2.0当量)且搅拌所述混合物5分钟，然后，在回流下加热1小时。使混合物冷却到室温且通过滴加meoh(40ml)淬灭反应。然后，通过旋转蒸发浓缩所述混合物且使所得材料与meoh(2x 40ml)共沸。然后，用etoac(100ml)稀释所述混合物，且用盐酸水溶液(1m；2x 50ml)洗涤，然后，用饱和碳酸氢钠水溶液(2x 50ml)洗涤，接着用饱和氯化钠水溶液(1x 50ml)洗涤。在无水硫酸钠上干燥有机层，过滤，然后在真空中浓缩以得到呈透明浅黄色油的在静置后固化的4-(2-羟甲基苯基)-哌啶-1-羧酸叔丁酯(4.8g)。
[0169]1h nmr(cdcl3)δ(ppm)7.34-7.22(m,3h)；7.19(dt,j＝1.6hz,7.2,1h)；4.73(s,2h)；4.32-4.14(m,2h)；3.00(tt,j＝4.0hz,12.0,1h)；2.80(t,j＝11.6hz,2h)；1.78-1.56(m,4h)；1.47(m,9h)。
[0170]
实例2
[0171]
4-[2-(甲苯-4-磺酰氧基甲基)苯基]哌啶-1-羧酸叔丁酯的制备
[0172]
将4-(2-羟甲基苯基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(0.4g，1.0mmol，1.0当量)和三乙二氨(220mg，2.0mmol，1.4当量)溶解于dcm(11ml，170mmol)中。在0℃下，于氮气下，使混合物冷
却，且添加对甲苯磺酰氯(290mg，1.5mmol，1.1当量)。在0℃下，搅拌所得混合物60分钟。用etoac(50ml)稀释所述混合物且用水(2x 25ml)洗涤。在无水硫酸钠上干燥有机层，过滤且通过旋转蒸发浓缩，以产生标题化合物(500mg)，其无需进一步纯化即可使用。
[0173]1h nmr(cdcl3)δ(ppm)7.81(t,j＝2.0hz,1h)；7.79(t,j＝2.0hz,1h)；7.37-7.32(m,4h)；7.25-7.21(m,1h)；7.21-7.13(m,1h),5.12(s,2h)；4.34-4.12(m,2h)；2.81-2.61(m,3h)；2.45(s,3h)；1.70-1.52(m,4h)；1.48(s,9h)。
[0174]
实例3
[0175]
4-[2-(2,4,6-三氟苯氧基甲基)苯基]哌啶三氟乙酸盐的制备
[0176]
将4-[2-(甲苯-4-磺酰氧基甲基)苯基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(2.1g，4.7mmol，1.0当量)溶解于mecn(46ml，890mmol)中，且添加到碳酸钾(1.9g，14mmol，3.0当量)和2,4,6-三氟苯酚(1.0g，7.0mmol，1.5当量)。在50℃下振荡混合物过夜，然后，冷却到室温。将上清液与碳酸钾及其它固体分离。将tfa(7ml，90mmol，20.0当量)添加到上清液且在室温下振荡所述混合物过夜。然后，浓缩所述溶液且将残余物溶解于1:1乙酸/水(5.0ml)中。添加另一份乙酸(2.0ml)且过滤所述混合物且通过制备性hplc纯化以得到标题化合物(1.3g，97.5％纯度)。ms m/z:c
18h18
f3no的[m+h]
+
计算值，322.13；实测值322.2。
[0177]1h nmr(cdcl3)δ(ppm)9.83(br.s,1h)；9.32(br.s,1h)；7.46-7.39(m,2h)；7.32(d,j＝6.8hz,1h)；7.26-7.21(m,1h)；6.76-6.66(m,2h)；5.07(s,2h)；3.69-3.50(m,2h)；3.38(t,j＝11.6hz,1h)；3.20-3.02(m,2h)；2.19(q,j＝12.8hz,2h)；2.12-2.01(m,2h)。
[0178]
实例4
[0179]
4-(2-羟甲基苯基)哌啶-1-羧酸叔丁酯的制备
[0180]
在室温下，于氮气下，将4-(2-羧基苯基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(5.0g，160mmol，1.0当量)和thf(100ml，1.0mol)组合。历时10分钟滴加含在thf(1.0m，32.7ml，32.7mmol，2.0当量)中的硼烷-thf络合物(5℃温升，放出气体)。在室温下搅拌反应混合物5分钟，然后在50℃下加热1小时。使所述反应混合物冷却到室温且通过慢慢地添加meoh(30ml)(温和温升，放出大量气体)淬灭所述反应。然后，通过旋转蒸发浓缩所述混合物。使所得材料与meoh(2x 50ml)共沸。将粗产物溶解于etoac(100ml)中且用饱和碳酸氢钠水溶液(50ml)洗涤且然后用饱和氯化钠溶液(50ml)洗涤。在无水硫酸钠上干燥有机层，过滤，且在真空中浓缩以得到呈透明浅黄色油的在静置后固体的4-(2-羟甲基苯基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(4.4g)。
[0181]
实例5
[0182]
4-(2-甲烷磺酰氧基甲基苯基)哌啶-1-羧酸叔丁酯的制备
[0183]
将4-(2-羟甲基苯基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(50.0g，172mmol，1.0当量)溶解于dcm(500ml，8000mmol)中。在0℃下，于氮气下，使混合物冷却，且一次性添加甲磺酸酐(44.8g，257mmol，1.5当量)。历时5分钟滴加二异丙基乙氨(47.8ml，274mmol，1.6当量)且在0℃下搅拌所述混合物90分钟。添加水(400ml，20mol)并搅拌所述混合物5分钟。分离各相，且用水(300ml)洗涤有机层，于无水硫酸钠上干燥，且移除溶剂以得到呈粘稠油的标题化合物(70g)，其无需进一步纯化即可使用。
[0184]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ(ppm)7.37-7.43(m,3h),7.31(d,1h),7.22(m,2h),5.38(s,2h),4.28(m,2h),2.92-3.10(m,1h),2.92(s,3h),2.80-2.92(m,2h),1.63-1.81(m,4h),1.51(s,9h)。
[0185]
实例6
[0186]
4-[2-(2,4,6-三氟苯氧基甲基)苯基]哌啶-1-羧酸叔丁酯的制备
[0187]
将4-(2-甲烷磺酰氧基甲基苯基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(27.0g，60.6mmol，1.0当量)溶解于mecn(540ml)中且添加到碳酸钾(25g，180mmol，3.0当量)和2,4,6-三氟苯酚(13.5g，90.9mmol，1.5当量)。在50℃下强力搅拌所述混合物6小时，移除热量，且搅拌过夜。使所述混合物在室温下冷却且用etoac(700ml)和水(700ml)稀释。分离各相且用氢氧化钠水溶液(1.0m；2x 400ml)和饱和氯化钠水溶液(1x 400ml)洗涤有机层，且然后，在无水硫酸钠上干燥。然后，移除溶剂以得到粗4-[2-(2,4,6-三氟苯氧基甲基)苯基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(25.0g)。将所述粗产物与小规模实验组合总共得到30g且通过层析(0-10％ etoac/己烷)纯化以得到4-[2-(2,4,6-三氟苯氧基甲基)苯基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(22.0g)。
[0188]
实例7
[0189]
4-[2-(2,4,6-三氟苯氧基甲基)苯基]哌啶盐酸盐的制备
[0190]
将4-[2-(2,4,6-三氟苯氧基甲基)苯基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(22.0g，31.3mmol，1.0当量)与含在etoh(250ml，310mmol，10.0当量)中的1.25m hcl组合。在室温下搅拌混合物8小时，然后，在-10℃下存储约48小时。通过旋转蒸发移除大多数溶剂。将etoac(80ml)添加到所得粘稠浆液，接着，在室温下搅拌2小时。通过过滤单离第一批晶体，且用etoac(20ml)洗涤滤饼并干燥以得到呈白色固体的标题化合物(8.5g，》99％纯度)。滤液的hplc显示～25％面积的产物。就第二批来说，通过旋转蒸发移除溶剂且在etoac(40ml)中，先在室温下，接着在60℃，继而再在室温下浆化所得固体(～10g)以得到呈盐酸盐形式的标题化合物(1.7g，》99％纯度)。
[0191]
将两批盐酸盐(18.5g，51.7mmol)与etoac(75ml，770mmol)组合。在65℃下加热所得的粘稠但自由流动的浆液30分钟，冷却到室温，然后，过滤。用etoac(20ml)洗涤烧瓶和滤饼，且在室温下，于高真空下干燥固体过夜，以得到结晶盐酸盐(18.2g，99.3％纯度)。
[0192]
实例8
[0193]
4-[2-(2,4,6-三氟苯氧基甲基)苯基]哌啶盐酸盐的制备
[0194]
将乙酰氯(83.5ml，1170mmol)慢慢地添加到etoh(140ml，2.4mol)。添加已溶于etoh(100ml，2.0mol)中的4-[2-(2,4,6-三氟苯氧基甲基)苯基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(55.0g，117mmol)且在室温下搅拌所得混合物6小时。通过旋转蒸发移除大多数溶剂。将etoac(300ml)添加到所得粘稠浆液，接着，移除部分溶剂到～100ml。添加etoac(200ml)且搅拌所得浆液1小时，过滤并干燥以得到标题化合物(28.0g，～99％纯度)。浓缩滤液到粘稠糊剂且添加ipac(100ml)，搅拌1小时，过滤并干燥以进一步得到5.0g盐酸盐(～99％纯度)。
[0195]
将两批盐酸盐(83.0g，230mmol，～99％纯度)与etoac(250ml，2.6mol)组合。在70℃下加热所得浆液且然后慢慢地冷却到室温，接着，搅拌过夜。过滤所得自由流动浆液且用etoac(50ml)洗涤滤饼，然后在高真空下干燥约48小时以得到结晶盐酸盐(81.0g，》99％纯度)。
[0196]
将结晶盐酸盐(50.0g，1.40mol，》99％纯度)溶解于ipa(250ml，3.3mol)中，且加热所得浆液到75℃。添加水(25ml，1.4mol)。在5分钟内观察到完全溶解，且溶液内部温度为65℃。使所述溶液慢慢地冷却到室温且然后在室温下搅拌过夜。过滤所得固体且在空气下干燥2小时以得到半干产物。然后，在高真空下，于室温下，干燥固体约48小时以得到标题结晶
盐酸盐(44.1g，99.5％纯度)。将所述物质用于实例9和10中所述的pxrd和dsc分析法中。
[0197]
实例9
[0198]
粉末x射线衍射
[0199]
使用里卡库米尼弗兰克斯(rigaku miniflex)pxrd衍射仪，使用cu kα(30.0kv，15.0ma)辐射，得到粉末x射线衍射图案。使用测角器运行，依连续扫描模式每分钟2
°
(2θ)，步长0.03
°
，在2
°
到40
°
的2-θ角范围内，进行分析。在石英样品固定架上制备呈粉状材料薄层的样品。用硅金属标准物，于
±
0.02
°
2-θ角内校准仪器。在测试之前手工研磨所述样品，以减小粒径对针对强度的干扰。实例8的结晶盐酸盐的代表性pxrd图案显示于美国专利第8,304,433b2号的图1中。pxrd峰按照针对强度递减的顺序显示于表1中。通过每个峰减去对应背景强度来收集所有pxrd峰强度。
[0200]
表1
[0201]
粉末x射线衍射数据
[0202][0203]
在一个实施例中，用于本发明中的结晶盐酸盐的特征是经表征为包括在4.44
±
0.20、10.22
±
0.20、17.16
±
0.20和21.78
±
0.20的2θ值处的衍射峰的粉末x射线。在另一实施例中，结晶盐酸盐的另一特征是在选自8.11
±
0.20、13.18
±
0.20、16.06
±
0.20、18.38
±
0.20、23.76
±
0.20、26.32
±
0.20、27.24
±
0.20、29.60
±
0.20和31.94
±
0.20的2θ值处具有一或多个其它衍射峰。
[0204]
实例10
[0205]
差示扫描量热法
[0206]
使用具有热分析控制器的ta仪器型号q-100模块进行差示扫描量热法(dsc)。收集数据并使用ta仪器热溶液(ta instruments thermal solutions)软件分析。准确地称取实例8的结晶盐酸盐的2.8mg样品到加盖铝盘中。在22℃的5分钟等温平衡期之后，采用10℃/min的线性加热斜升率，将样品从22℃加热到250℃。代表性dsc热谱图显示于美国专利第8,304,433b2号的图2中。dsc热谱图证实结晶盐酸盐具有极佳热稳定性，其中熔点为约196.9℃。
[0207]
在一个实施例中，用于本发明中的结晶盐酸盐的特征在于具有约197
±
2℃熔点的差示扫描量热法迹线。
[0208]
实例11
[0209]
放射性配体结合及神经传递质吸收检定
[0210]
4-[2-(2,4,6-三氟苯氧基甲基)苯基]-哌啶在人类重组和大鼠自然单胺转运体下
的活体外药理学是如史密斯(smith)等人，国际神经精神药理学杂志(inter.j.neuropsychopharmcol.)(2015)1-11；和鹤田(tsuruda)等人，药理学毒理学方法杂志(j.pharmacol.toxicol.meth.)(2010)61:192-204中表征。还可参见，例如，美国专利第8,304,432b2号和第8,304,433b2号。放射性配体是从商业上购得(珀金埃尔默生命科学(perkin elmer lifesciences)或ge医疗生命科学(ge healthcare life sciences))。
[0211]
简要来说，在22℃下，在不存在或存在含在50mm tris-hcl、120mm nacl、5mm kcl、0.025％ bsa、100μm抗坏血酸(ph 7.4)中的4-[2-(2,4,6-三氟苯氧基甲基)苯基]哌啶且就sert来说[3h]-西酞普兰(citalopram)(1.0nm)、就net来说[3h]-尼索西汀(nisoxetine)(2.0nm)且就dat来说[3h]-win35428(3.0nm)下，培养从经人类重组sert(hek293-hsert)、net(hek293-hnet)或dat(cho-k1-hdat)稳定转染的hek293(人类胚胎肾脏293)或cho-k1(中国仓鼠卵巢-k1)细胞制备的膜1小时。在22℃下，用就sert来说[3h]-西酞普兰(2.0nm)或就net来说[3h]-尼索西汀(4.0nm)将大鼠皮质膜制剂培养1小时。在神经传递质吸收检定中，在37℃下，在不存在或存在含在7.5mm hepes、12.5mm tris
–
hcl、2.2mm na-磷酸盐、120mm nacl、5mm kcl、0.4mm mgcl2、7.5mm葡萄糖、1.7mm cacl2、250μm抗坏血酸、150μm帕吉林(pargyline)、0.025％ bsa(ph 7.4)中的4-[2-(2,4,6-三氟苯氧基甲基)苯基]-哌啶下，分别预培养hek293-hsert、hnet或hdat细胞30分钟，接着用[3h]-5-ht(20nm)、[3h]-ne(40nm)或[3h]-da(100nm)培养10分钟。将大鼠皮质突触体与[3h]-5-ht或[3h]-ne培养6分钟且将纹状体突触体与[3h]-da培养6分钟。通过快速过滤终止结合及吸收检定且通过液体闪烁光谱测定放射活性。最终[3h]-神经传递质浓度明显低于相应的km，因此pic
50
约为功能性pki。如下确定net的选择性(四舍五入到一位有效数字)：
[0212]
选择性＝10
(在net下的pki或pic50减去在sert或dat下的pki或pic50)
。
[0213]
4-[2-(2,4,6-三氟苯氧基甲基)苯基]哌啶在人类和啮齿动物单胺转运体下的活体外药理学性质相似，如表2中所显示。
[0214]
表2
[0215]
在人类重组和大鼠天然sert、net和dat转运体下的活体外药理学
[0216][0217]
数据表示为平均pic
50
(负以十为底的对数ic
50
)和pki(负以十为底的对数ki)值。数据表示3到9个个别实验的平均值(圆括号内为95％置信区间)。n.d.＝未测定。
[0218]
表2中的数据证实4-[2-(2,4,6-三氟苯氧基甲基)苯基]-哌啶为net和sert的有效抑制剂，但非dat的有效抑制剂，对net的抑制效力是4倍高于sert。类似地，4-[2-(2,4,6-三氟苯氧基甲基)苯基]哌啶为[3h]-ne和[3h]-5-ht的吸收到大鼠皮质突触体中的有效抑制
k10(hr-1
)0.319(81) v/f(l/kg)54.8(66) [0234]
最终参数估值以变异系数(cv％)列于提供于圆括号中的各参数估值。
[0235]
如表3中所显示，就net来说，估计的占用ec
50
为11.7ng/ml及就sert来说，在大鼠脊髓中，为50.8ng/ml。由于物种血浆蛋白结合差异(在大鼠和人类中，分别为90.2％和79.1％)，工程化人类血浆ec
50
值就net来说为5.5ng/ml及就sert来说，为23.9ng/ml。
[0236]
实例13
[0237]
在经麻醉大鼠中的心血管模型
[0238]
进行所述研究以评估单一投与4-[2-(2,4,6-三氟苯氧基甲基)苯基]哌啶于经麻醉大鼠的心率(hr)和平均动脉血压(map)的效果。使用所述心血管模型，对hr的内在影响和酪胺压力反应的抑制评估为反映4-[2-(2,4,6-三氟苯氧基甲基)苯基]哌啶抑制周边去甲肾上腺素转运体能力的替代物指标测量。
[0239]
a.实验设计
[0240]
通过腹膜内注射(ip)硫仲丁比妥钠(inactin)来麻醉体重在250
–
350g之间的正常血压雄性斯泼累格-多雷大鼠。使所有动物保持在完全麻醉(即，对捏脚趾测试无反应)下以进行手术且持续进行实验。单离右颈总动脉和颈静脉并导管检查。插进气管以保持气道在研究期间开放。在完成手术之后，将动脉导管连接到压力传感器且使用脊索(notocord)-hem数据撷取系统记录基线血压[收缩压(sbp)、平均动脉压(map)和舒张压(dbp)]和心率(hr)。在至少60分钟的基线(即，最后10分钟是稳定的)之后，投与媒剂(10％吐温(tween)20，2ml/kg，ip)且监测任何可能的效应至少10分钟。此后，对大鼠注射媒剂或4-[2-(2,4,6-三氟苯氧基甲基)苯基]哌啶(0.01
–
30mg/ml，2ml/kg，ip)且监测map和hr的变化25分钟。然后，通过颈静脉插管静脉内攻击大鼠，以5分钟时间间隔提供非积累单次剂量的酪胺(0.03、0.1、0.3和1mg/kg、1ml/kg，iv)。在最后一次给予酪胺之后，在实验结束之前再继续获取数据10分钟。在一个独立组动物中，在给药后15分钟和60分钟，采集血液以评估血浆中4-[2-(2,4,6-三氟苯氧基甲基)苯基]哌啶的浓度。从15分钟时所得到的游离血浆浓度用于构成map和hr的浓度反应曲线(crc)，而从60分钟时的浓度用于酪胺crc。通过二氧化碳窒息将动物安乐死，接着开胸。
[0241]
b.数据分析
[0242]
内在血液动力学效应表示为在酪胺攻毒之前由4-[2-(2,4,6-三氟苯氧基甲基)苯基]哌啶引起的map或hr的最大变化。在媒剂对照组中，将酪胺效应的抑制与反应标准化到1mg/kg剂量酪胺。使用prism 5.00tm(格拉帕得公司(graphpad,inc.))通过迭代曲线拟合到逻辑方程式来分析map、hr的变化和酪胺反应的抑制的浓度反应曲线(crc)。使用的方程式如下：
[0243]
y＝(底部+顶部-底部)/(1+10^((logec50-x)*希尔斜率(hillslope)))
[0244]
其中x为剂量的对数，y为反应，y始于底部(均受限于0)且以乙状结肠形状到达顶部。当map或hr的变化在高剂量下减小时，通过在较低剂量下发生的最大效应递延到所有随后的较高剂量来实现顶部(即，最大效力)的更准确的估计。就酪胺crc来说，top受限于100。压力效应的效力表示为map pc
10
，其为产生10mm hg的map变化的游离血浆浓度和hr效应的效力表示为hr pc
25
，其为产生25bpm的hr变化的游离血浆浓度。最后，抑制酪胺效应的效力
表示为tyr ec
50
，其为对酪胺引起(1mg/kg，iv)的sbp的增加产生50％抑制的浓度。
[0245]
使用下式，将通过测定大鼠皮质突触体中大鼠血清素转运体(rsert)对经标记5-ht吸收的抑制得到的抑制效力(pic
50
值)转化为ic
50
值：
[0246]
y＝(10^(-x))x(10^9)
[0247]
c.结果
[0248]
4-[2-(2,4,6-三氟苯氧基甲基)苯基]哌啶(0.01
–
30mg/kg，ip)剂量独立地增加经麻醉大鼠中的map和hr。当每种剂量针对于对应游离血浆浓度作图时，估计的map和hr效力为101.4nm(map ec
10
)和8.6nm(hr ec
25
)。map和hr的最大变化分别为13.2(4.4
–
22.1)mm hg和28.1(22.4-33.7)bpm。4-[2-(2,4,6-三氟苯氧基甲基)苯基]哌啶还抑制酪胺引起的sbp的增加。当表示为对1mg/kg经静脉内投与的酪胺反应的抑制％时，4-[2-(2,4,6-三氟苯氧基甲基)苯基]哌啶的效力估算值为0.86nm。
[0249]
d.结论
[0250]
在经麻醉大鼠的心血管模型中，4-[2-(2,4,6-三氟苯氧基甲基)-苯基]哌啶展现对酪胺压力反应的有效抑制和心率过速与周边net的抑制一致。
[0251]
实例14
[0252]
口服溶液的制备
[0253]
以两个步骤制备口服4-[2-(2,4,6-三氟苯氧基甲基)苯基]哌啶盐酸盐溶液。首先，制备3mg/ml水性原液，且然后，在给药前制备含在经过滤苹果汁中的具有不同剂量强度的口服溶液。
[0254]
a.原液的制备
[0255]
将4-[2-(2,4,6-三氟苯氧基甲基)苯基]哌啶盐酸盐(500mg，89.9％纯度)添加到250ml透明玻璃瓶。添加无菌注射用水(150ml)且将所述瓶加盖。以圆周运动轻轻地漩涡所述瓶，直到观察不到固体物质(约20分钟)。必要时，还可音波处理所述瓶。标记所述瓶且在2小时内使用原液(3mg/ml)或于2-8℃下将其存储于冰箱中直到使用。丢弃从开始制备算6天内未使用的任何原液。
[0256]
b.口服溶液的制备
[0257]
制备具有七种不同剂量强度的口服溶液以用于临床研究的部分a或部分b中。所制备的剂量强度和用于制备各剂量强度的量显示于表4和5中：
[0258]
表4
[0259]
口服溶液(部分a)
[0260][0261]
表5
[0262]
口服溶液(部分b)
[0263][0264]
为制备口服溶液，从冰箱拿出原液(3mg/ml)且目测检查任何沉淀。若存在沉淀，则重新制备原液。
[0265]
将苹果汁(至少40ml，莫氏(mott’s)100％初始苹果汁)抽到50ml针筒中且将针筒过滤器(25mm pvdf针筒过滤器，0.2μm，颇尔生命科学(pall life sciences))附接到针筒。通过针筒过滤器过滤苹果汁，丢弃前3ml且将其余苹果汁收集于125ml琥珀色瓶中。
[0266]
然后，将显示于表4或5中的原液(3mg/ml)的量(原液体剂)添加到新的125ml琥珀色瓶且将显示于表4或5中的对应量的经过滤的苹果汁(苹果汁体积)添加到所述瓶。盖住所述瓶且通过以圆周运动回旋超过2分钟将内含物混合。在投与患者之前，将所得溶液存储在环境室温下多达18小时。在投与患者之前，将10ml等分试样的口服溶液转移到新的125ml琥珀色瓶中。
[0267]
实例15
[0268]
口服锭剂的制备
[0269]
将微晶纤维素(4.476kg；avicel微晶纤维素，nf，欧洲药典类型(ph.eur type)ph-112)和无水乳糖(2.450kg；无水60m nf，ep)加载到掺合箱(blending bin)中且在20rpm下掺合5分钟。将所得混合物转移到双重pe衬底容器(“预混物1”)中且分离成两部分，一部分重约1kg(“预混物1a”)及另一部分包含其余物质(“预混物1b”)。将约一半的预混物1a添加到所述箱，接着添加4-[2-(2,4,6-三氟苯氧基甲基)苯基]哌啶盐酸盐(38.93g；经研磨)，且然后，添加另一半预混物1a。在20rpm下掺合所得混合物10分钟且然后转移到双重pe衬底容器(“预混物2”)中。在1000rpm(800-1200rpm)下，使约一半的预混物1b通过配备1.0mm筛的研磨机，向前冲击，接着是活性预混物2且然后是另一半预混物1b。将经研磨物质收集到双重pe衬底容器(“经研磨的预混物3”)中。使经研磨预混物3通过40-网目手工筛，且将过筛材料转移到掺合箱中并在20rpm下掺合10分钟(“活性掺合”)。移除一满勺活性掺合物且人工将其与硬脂酸镁(35.0g,nf)在聚乙烯袋中混合。然后，使所述混合物通过40网目手工筛。然后，将过筛混合物加回到掺合箱中且在20rpm下掺合全部混合物5分钟(“最终掺合物”)。使用压锭机将最终掺合物压缩成200mg锭剂且使所述锭剂通过除尘器和金属检测器。将可接受的锭剂收集到双重pe衬垫容器中。
[0270]
将纯水(1.587kg，usp)添加到清洁不锈钢溶液制剂小瓶中且调整混合器速度以形成涡流。将以聚乙烯醇为主的涂膜剂(280.0g；欧巴代(opadry)ii粉色(pink)85g64744，卡乐康公司(colorcon,inc.)，西点军校(west point)，pa)添加到混合槽中的涡流中且减小混合速度以致不再出现涡流且继续混合至少45分钟或直到目测观察到颜色均匀分散。在涂布工艺之前及期间维持温和的混合。将上文制备的锭剂加载到涂布盘中且将盘速度设为10rpm。将涂布溶液抽汲到涂布盘中。将其抽汲到涂布盘中时监测涂布溶液重量变化且当根据涂布悬浮液用途再次实现4％锭剂干重时，停止涂布溶液的添加。所得粉色锭剂包含约
1mg 4-[2-(2,4,6-三氟苯氧基甲基)-苯基]哌啶(游离碱当量)。
[0271]
还使用类似程序和以下量的材料：微晶纤维素(4.320kg)；无水乳糖(2.450kg)；4-[2-(2,4,6-三氟苯氧基甲基)苯基]哌啶盐酸盐(194.7g)；硬脂酸镁(35.0g)；纯水(1.587kg)；以聚乙烯醇为主的涂膜剂(280.0g；欧巴代ii黄色85g620027)，制备包含约5mg4-[2-(2,4,6-三氟苯氧基甲基)-苯基]哌啶(游离碱当量)的黄色锭剂。
[0272]
实例16
[0273]
在具有noh的个体中的临床研究
[0274]
用4-[2-(2,4,6-三氟苯氧基甲基)苯基]哌啶盐酸盐(“研究化合物”)进行2期临床试验研究。所述研究为罹患noh的个体中研究化合物对安慰剂的多中心、随机化、两部分、单盲(部分a)和双盲(部分b)研究。还将进行研究化合物的开放标示、延伸研究以评估效力、安全性和耐受性(部分c)。部分a遵循在第1天以安慰剂开始的每日、单一、递增剂量设计，接着在第2天投与1mg剂量的研究化合物，且每天继续进行以递增更高剂量的研究化合物直到10mg的最大剂量，于安全性、耐受性和加压效应的测定基础上判定。部分b遵循评估确定部分a中指定个体一般具良好耐受性且具有加压效应的剂量的随机化、安慰剂对照、平行设计。部分c为评估历时多达20周每天一次投与的研究化合物在证实是部分a中的反应者的个体中的效力(慢性加压反应、noh的症状)、安全性和耐受性的开放标示、延伸研究。
[0275]
包含于研究中的个体为已诊断因单纯性自主神经衰竭、多发性系统萎缩症或帕金森氏症(例如，pd加上症状)罹患症状性起立性低血压的40岁到80岁(含)之间的男性或女性。在筛选下，进行自主神经功能测试以证实自主神经功能障碍(包括窦性心律不齐和瓦氏动作(valsalva maneuver))的诊断。个体必需：(1)在站立5分钟内证实sbp≥30mm hg下降；(2)证实在瓦氏动作阶段iv期间受损的自主神经反射，如通过无bp过度确定；(3)站立时经历晕眩、头晕或晕厥；和(4)无其它可识别的自主神经病变病因。
[0276]
a.剂量递增研究(部分a)
[0277]
在部分a中，依单盲方式(即，个体仍旧盲目)，使用口服溶液，投与所有剂量(研究化合物和安慰剂)。多达30位个体入选部分a。在开始部分a前两天，允许个体到临床研究中心(crc)，其中那些在整个剂量递增期间留于此。第1天，个体接受单一剂量的安慰剂。第2天，个体接受1mg单剂量的研究化合物。在之后的每一天，如下，个体接受单一递增剂量的研究化合物：第3天，2.5mg；第4天，5mg；第5天，10mg，除非出现以下预设停止标准：
[0278]
(a)由研究者(与委托者合作)确定投与随后的下一个剂量可能具有安全问题；
[0279]
(b)在一小时内再重复2次坐姿状态下，sbp≥180mm或dbp≥110mm；
[0280]
(c)无法忍受的副作用，由研究者确定；或
[0281]
(d)个体接受最大剂量的方案所指定研究药物。
[0282]
一旦个体满足任何上述标准，就不再进行剂量递增。于诊所给药后观察时间，从crc放出个体。
[0283]
未证实以研究者确定(与委托者合作)为基础的sbp的临床上有意义增加的个体或在达到停止标准之前停止研究药物的个体不继续进行研究部分b。个体无需完成所有四个研究化合物剂量以继续进入研究部分b。接受至少一种使得坐式bp有效增加的研究化合物剂量且被视为大体上具良好耐受性的所有个体入选参与研究部分b和/或部分c。
[0284]
b.清除期
[0285]
于完成部分a之后，个体经历清除期(最短8天，不超过36天)。每日前72小时排空，且接着在清除期其余时间至少每周排空，研究者或设计人员经电话与个体联是以观察个体健康状态。通过电话记录任何不良事件且依医学上合适的情况，由研究者确定进行。在研究者的指示下，个体在清除期间，使用所开立的其它药物管理其noh症状。
[0286]
c.随机化、双盲、平行设计研究(部分b)
[0287]
在清除期之后，个体可在开始部分b前两天返回到crc且被随机化以接受单一剂量的安慰剂或研究化合物。部分b中的治疗分配是双盲的，通过指定非盲药剂师在crc处制备呈口服溶液的研究化合物。在部分b中，在研究者与委托者之间的协作下，个体接受实现针对在部分a期间确定的剂量的可比拟峰暴露以产生坐式bp的有效增加且被视为大体上具良好耐受性的研究化合物剂量。使用药代动力学建模来确定选择用于部分b的个别化剂量以实现对应于部分a中如表6中所显示投与的最终剂量的研究化合物的可比拟暴露。
[0288]
表6
[0289]
用于部分b的剂量确定
[0290]
在部分a中的最终剂量用于部分b的剂量1mg1mg2.5mg3mg5mg7mg10mg15mg
[0291]
d.开放标示、延伸研究(部分c)
[0292]
就部分c来说，研究化合物是呈包装成开放标记40计数高密度聚乙烯瓶的1mg或5mg锭剂提供。在第1天，患者接受等于在部分a期间具耐受性的最高剂量的剂量。在第2天及此后，患者接受等于在部分c第1天投与的50％剂量(四舍五入到最小1mg)的剂量。例如，若部分a中的最高剂量为10mg/天，则在第1天，患者接受10mg且在第2天及此后，患者接受5mg/天。同样地，若部分a中的最高剂量为5mg/天，则在部分c的第1天，患者接受5mg且在第2天及此后，患者接受3mg/天。若患者发展成出现先前观察到的仰卧高血压(sbp≥180mm hg或dbp≥110mm hg)或表明难受的其它不良事件出现或恶化，则所述剂量保留3天且先前剂量浓度的剂量浓度50％(四舍五入到最小1mg)再开始。若仰卧高血压或其它不良事件在已减小剂量之后持续，停止对所述患者的给药且对患者提供适合的替代疗法及照护，由主要研究者确定。或者，若剂量减小发生但患者在家，则在剂量减少的2周内将患者带去门诊。
[0293]
e.研究评估
[0294]
1.效力评估
[0295]
坐式和站立收缩压及起立性低血压症状评估(ohsa)问卷的完成是用于评估效力。就部分c来说，若可用，则使用步行血压监测以在血压第1天给药之前，历时24小时每2小时；且在第15天、第29天、第85天和第169天临床随访之前第72小时到第48小时进行测定。另外，每天清晨，饮食前20-30分钟，约仰卧(抬高30
°
)至少10分钟，测量血压。
[0296]
2.安全性评估
[0297]
使用不良事件、临床实验室测试(包括血液学、血清化学和尿分析)、生命特征、12-铅ecg、合并用药的使用和身体检查以评估安全性。
[0298]
3.药代动力学(pk)评估
[0299]
在部分a中，在给药前(在给药前30分钟内且在评估站立bp和起立性评估后立刻)且再次在给药第3天(2.5mg)和第4天(5mg)评估站立bp和起立性评估后立即给药后6到8小时之间，采集用于评估研究化合物血浆浓度的血样。个体已达到停止标准后或在剂量递增顺序结束时，在最后一次投药24小时后采集一个其它pk样品。
[0300]
在部分b中，在给药前(给药前30分钟内)，在给药后6到8小时间(单一时间点)和给药后24小时，采集用于pk的血样。适当地，在评估bp和起立性评估之后采集所有pk样品。记录每次血液收集的实际收集时间。
[0301]
在部分c中，在第1天和第2天给药前30分钟收集血样且在第1天给药后6到9小时间再次采集。还可在患者来诊所时采集血样。
[0302]
4.药效动力学(pd)评估
[0303]
在部分a中，在给药第1天(安慰剂)、第3天(2.5mg)和第4天(5mg)，在包括给药前两次(在给药前30分钟内且在每次评估仰卧和站立bp和起立性评估后不久)的时间点且再次于给药后6到8小时间(在评估站立bp和起立性评估后不久)采集用于分析ne和二羟基苯基二醇(dhpg)的血样。在给药后24小时(仰卧和站立)，在最后一次给药后，在个体已达到停止标准或在剂量递增顺序结束时，采集两个其它pd样品。
[0304]
在部分b中，在给药第1天，在包括给药前两次(在给药前30分钟内且在每次评估仰卧和站立bp和起立性评估后立刻)的时间点且再次于给药后6到8小时间(在评估站立bp和起立性评估后不久)采集用于分析ne和dhpg的血样。
[0305]
在部分c中，在第1天和第2天给药前30分钟且再次于第1天给药后6到9小时间采集血样。还可在患者来诊所时采集血样。
[0306]
f.研究终点
[0307]
就部分a和b来说，主要研究终点为与药物投与后6到8小时时坐式收缩压的安慰剂的差异。就部分a来说，安慰剂是指第1天随访，及与安慰剂的差异是指每一研究化合物给药日(第2天到第5天)针对安慰剂给药(第1天)的时间匹配差异。就部分c来说，主要研究终点为李克特量表(likert scale)中第4周时“晕眩、头晕、晕厥或感觉快要漆黑”(ohsa问题1)的改善。
[0308]
次要终点包括：站立sbp中在给药后6到8小时时安慰剂改变；李克特量表中第4周时“晕眩、头晕、晕厥或感觉快要漆黑”(询问前患者的周平均症状排名)的改善；其它问卷得分；站立sbp(站立1分钟时、3分钟时、5分钟时和10分钟时的曲线测量下方面积)的增加；坐式sbp(药物投与后10小时的曲线下面积)的增加；和起立式站立测试期间的站立的持续时间。
[0309]
部分a的初步结果显示于表7中。在表7中，检验标记(√)指示观察到当患者投与4-[2-(2,4,6-三氟苯氧基甲基)苯基]哌啶盐酸盐时针对安慰剂的剂量相关改善。表7中的所有患者接受部分a中的10mg/天的最大剂量，但部分a中接受5mg/天的最大剂量的患者编号5除外。
[0310]
表7
[0311]
研究的初步结果
–
部分a
[0312]
[0313][0314]1msa＝多发性系统萎缩症
[0315]
paf＝单纯性自主神经衰竭
[0316]
pd+＝帕金森氏症加上noh的症状
[0317]2√＝针对安慰剂所观测到的与剂量相关的改善。
[0318]
表7中的数据证实，在完成部分a的患者中，12位患者中有10位(83％)显示针对安慰剂的以下至少一者的改善：(a)坐式收缩压；(b)站立时间；或(c)晕眩或头晕。四位患者(未显示于表7中)停止部分a或未完全做评估，因为预先存在的仰卧高血压(3位患者)或心房震颤(1位患者)。在完成部分a的msa患者中，6位患者中有6位(100％)显示针对安慰剂的表7中至少一个类别的改善。