本发明属于生物支架材料，具体涉及一种自体成纤维细胞再生胶原蛋白支架及其制备方法。
背景技术：
1、随着年龄的增长，皮肤开始出现衰老的迹象。衰老是正常的生理现象，是伴随着生命发生、发展过程中的活动。一般过了25岁后，皮肤便开始出现衰老的现象，胶原蛋白流失的速度大于增长的速度，而爱美之心人皆有之，所以护理皮肤、延缓衰老，在美容行业发展比较迅速。
2、市场上的美容化妆品种类繁多，大部分化妆品是通过精细化工进行生产制备的，在使用此类化妆品时会对部分人群的皮肤造成伤害，比如容易产生过敏反应、副作用比较明显，容易出现色斑、红血丝等问题。
3、成纤维细胞是功能活动旺盛的细胞，细胞和细胞核较大，轮廓清楚，具有明显的蛋白质合成和分泌活动。成纤维细胞在一般创伤修复中表现各种创伤均会造成不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损，必须通过细胞增生和细胞间基质的形成来进行组织修复。在修复过程中，成纤维细胞起着十分重要的作用。成纤维细胞通过有丝分裂大量增殖，填补伤口组织缺损，为表皮细胞的覆盖创造条件。
4、体外培养自体成纤维细胞用于整形美容，可以充填真皮皮下缺损，可对光化性、老化性瘢痕造成的缺损进行充填，即具有延缓衰老的功效。
技术实现思路
1、本发明的目的为提供一种可用于面部美容的、见效快、副作用小的自体成纤维细胞再生胶原蛋白支架及其制备方法。
2、为实现本发明的上述目的，本发明采用以下技术方案：
3、一种自体成纤维细胞再生胶原蛋白支架，包括成纤维细胞、脂肪干细胞、透明质酸、亚硫酸钠、生理盐水；
4、所述透明质酸的质量分数为3％-8％；
5、所述亚硫酸钠的质量分数为5％-10％；
6、所述成纤维细胞的密度为1×107个/ml-5×107个/ml；
7、所述脂肪干细胞的密度为3×107个/ml-4×107个/ml；
8、余量为生理盐水。
9、成纤维细胞是组成皮肤的主要细胞成分，它合成分泌的物质对维持皮肤的弹性和柔韧性起很大的作用，皮肤产生皱纹也与皮肤中成纤维细胞的减少有很大的联系。在人体自身层内取自身成纤维细胞，进行体外繁殖增加数量在注射回皱纹皮肤层内，以达到改善皱纹的效果。
10、脂肪干细胞可替代、修复衰老的组织细胞，并分泌细胞因子营养组织器官，可以显著提高机体免疫力，迅速恢复体能，维持机体“年轻态”。脂肪干细胞是维系脂肪细胞生长的关键，对延缓面部衰老、减少眼部皱纹具有很好的作用。
11、透明质酸是皮肤的保湿因子，具有吸收500-1000倍体积的能力，具有保湿、保持皮肤弹性的作用，还能锁住水分子，对组织具有保湿润滑的作用。
12、亚硫酸钠是无机化合物，对植物性产品内的氧化酶具有强烈的抑制作用，在化妆品、护肤品作为防腐剂使用，比较安全、可放心使用，对孕妇一般无影响。
13、上述一种自体成纤维细胞再生胶原蛋白支架，作为一种优选的实施方案，包括成纤维细胞、脂肪干细胞、透明质酸、亚硫酸钠、生理盐水；
14、所述透明质酸的质量分数为5％；
15、所述亚硫酸钠的质量分数为8％；
16、所述成纤维细胞的密度为3×107个/ml；
17、所述脂肪干细胞的密度为4×107个/ml；
18、余量为生理盐水。
19、上述一种自体成纤维细胞再生胶原蛋白支架，作为一种优选的实施方案，所述生理盐水为浓度为0.1mo l/l-0.3mo l/l的磷酸盐缓冲生理盐水。
20、本申请的第二方面，提供一种自体成纤维细胞再生胶原蛋白支架的制备方法，包括以下步骤：
21、(1)制备成纤维细胞：在无菌条件下，切取皮肤标本，向皮肤标本中加入胰蛋白酶和edta，在加热的条件下进行消化，然后再加入胶原蛋白酶消化，将上述消化液过筛，吹打过滤得成纤维细胞；
22、(2)制备脂肪干细胞：在无菌条件下，洗涤含脂肪干细胞的脂肪细胞组织材料，并用胶原酶进行消化、过滤，得含脂肪干细胞的滤液；将所得滤液经离心、沉淀过滤处理得脂肪干细胞；
23、(3)将透明质酸和亚硫酸钠加入生理盐水中，混合搅拌均匀，过滤杀菌，得混合液；
24、(4)将成纤维细胞和脂肪干细胞加入步骤(3)所得混合液中，混合均匀，得所述自体成纤维细胞再生胶原蛋白支架。
25、上述一种自体成纤维细胞再生胶原蛋白支架的制备方法，作为一种优选的实施方案，步骤(1)中，所述胰蛋白酶的加入量为皮肤标本重量的0.5％-0.8％，所述edta的加入量为皮肤标本重量的0.1％-0.3％；
26、步骤(1)中，所述消化的消化温度为37℃，消化时间为1-3h。
27、上述一种自体成纤维细胞再生胶原蛋白支架的制备方法，作为一种优选的实施方案，所述胶原蛋白酶为v型胶原蛋白酶，所述过筛为过200目筛网处理。
28、上述一种自体成纤维细胞再生胶原蛋白支架的制备方法，作为一种优选的实施方案，步骤(2)中，所用胶原酶与脂肪细胞组织材料的重量比为0.5：1；所述消化的温度为37℃；所述过滤为采用200目筛网进行过滤处理。
29、上述一种自体成纤维细胞再生胶原蛋白支架的制备方法，作为一种优选的实施方案，步骤(3)中，所述杀菌为微波杀菌，所述微波杀菌的温度为115-120℃，杀菌时间为3-5min。
30、本发明的有益效果为：本发明所述一种自体成纤维细胞再生胶原蛋白支架注入肌肤内，可修复老化和受损细胞的修复。注入后，可减少皮肤皱纹、改善皮肤弹力、缩小毛孔、提亮肤色，使肌肤重新呈现水嫩光泽。
1.一种自体成纤维细胞再生胶原蛋白支架，其特征在于，包括成纤维细胞、脂肪干细胞、透明质酸、亚硫酸钠、生理盐水；
2.根据权利要求1所述一种自体成纤维细胞再生胶原蛋白支架，其特征在于，包括成纤维细胞、脂肪干细胞、透明质酸、亚硫酸钠、生理盐水；
3.根据权利要求1所述一种自体成纤维细胞再生胶原蛋白支架，其特征在于，所述生理盐水为浓度为0.1mol/l-0.3mol/l的磷酸盐缓冲生理盐水。
4.权利要求1-3任一项所述一种自体成纤维细胞再生胶原蛋白支架的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
5.根据权利要求4所述一种自体成纤维细胞再生胶原蛋白支架的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，所述胰蛋白酶的加入量为皮肤标本重量的0.5％-0.8％，所述edta的加入量为皮肤标本重量的0.1％-0.3％；
6.根据权利要求5所述一种自体成纤维细胞再生胶原蛋白支架的制备方法，其特征在于，所述胶原蛋白酶为v型胶原蛋白酶，所述过筛为过200目筛网处理。
7.根据权利要求4所述一种自体成纤维细胞再生胶原蛋白支架的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，所用胶原酶与脂肪细胞组织材料的重量比为0.5：1；所述消化的温度为37℃；所述过滤为采用200目筛网进行过滤处理。
8.根据权利要求4所述一种自体成纤维细胞再生胶原蛋白支架的制备方法，其特征在于，步骤(3)中，所述杀菌为微波杀菌，所述微波杀菌的温度为115-120℃，杀菌时间为3-5min。