本发明属于药物制造领域,具体涉及一种阿霉素-土荆皮乙酸复合肿瘤靶向胶束及其制备方法。
背景技术:
1、阿霉素(dox)属于蒽环类抗肿瘤抗生素,为增加水溶性,临床常用盐酸盐,其抗肿瘤谱广,在临床上常用于治疗乳腺癌、肺癌、卵巢癌等。但其组织选择性较差,毒副作用较大,限制了临床的使用。目前主要是通过载药传递系统来改变阿霉素的生物分布,从而减少阿霉素的毒副作用。其中,聚合物胶束在癌症治疗和药物传输方面具有广阔的应用前景。
2、肿瘤新生血管的形成是肿瘤生长和转移的基础,它主要为肿瘤的生长提供营养和氧气,并为其异处的转移提供路径。抑制肿瘤血管新生,阻断营养物质和氧气供应,是对肿瘤治疗的重要有效的方案之一。土荆皮乙酸(pseudolaric acid b,pab)是从土荆皮根皮中分离出的二萜酸,传统中医中用于治疗皮肤真菌感染。研究报道pab具有较好的抗真菌、抗病毒、抗血管生成和抗生育活性。此外,pab对多种肿瘤细胞具有抗癌活性,如胃肠癌细胞、呼吸道肿瘤细胞和妇科肿瘤细胞。值得一提的是研究发现pab具有显著抑制血管生成的作用,并可以抑制癌细胞转移和逆转癌细胞的多药耐药性。
3、聚乙二醇维生素e琥珀酸酯(d-alpha-tocopheryl polyethylene glycolsuccinate,tpgs)是由维生素e琥珀酸酯(vitamin e succinate,ves)与聚乙二醇(polyethylene glycol,peg)酯化而成,它是一种新型的非离子表面活性剂,在水介质中能形成稳定的胶束。同时,它作为p-gp抑制剂,能有效克服肿瘤细胞的多药耐药性,提高抗癌药物的口服生物利用度。tpgs已被fda批准为安全的药物辅料,并广泛应用于药物递送系统中。
4、目前,研究者发现了一类肿瘤归巢肽,它能与肿瘤细胞上的受体结合,从而能够增加载药系统从血管中将药物释放以及加强穿透实体瘤的能力。tlyp-1是其中一种肿瘤归巢肽,其氨基酸序列为cgnkrtr,能与乳腺癌、胶质瘤等肿瘤细胞上高表达的神经纤维蛋白-1(neuroplin-1,nrp-1)受体结合,从而进入实体肿瘤中并穿透肿瘤血管。
5、阿霉素制剂作为临床常用的抗肿瘤药,其较大的毒副作用以及多药耐药性问题亟待解决。
技术实现思路
1、本发明的目的在于解决现有技术问题的不足,提供一种阿霉素-土荆皮乙酸复合肿瘤靶向胶束及其制备方法,有效提高阿霉素的抗肿瘤作用,并降低耐药性及毒副作用。本发明合成了tlyp-1-tpgs,联合tpgs制备聚合物胶束,负载dox和新生血管抑制剂pab,用于癌症的靶向治疗。通过dox和pab联合用药、tlyp-1对肿瘤细胞的主动识别能力,并利用tpgs抗多药耐药,起到三位一体增强阿霉素的疗效、减低毒副作用。
2、为了实现上述发明目的,本发明提供以下技术方案:
3、一种阿霉素-土荆皮乙酸复合肿瘤靶向胶束,所述胶束是由阿霉素dox和土荆皮乙酸pab联用、以及载体自组装形成,所述载体包括有多肽修饰的双亲性聚合物,以及一种或多种双亲性材料。胶束形成示意图见图1。
4、优选的,所述多肽为tlyp-1,所述多肽修饰的双亲性聚合物为tlyp-1修饰的维生素e聚乙二醇琥珀酸酯tpgs(tlyp-1-tpgs);更优选的,所述多肽修饰的双亲性聚合物为tlyp-1修饰的tpgs2000或tpgs1000。
5、优选的,所述双亲性材料为维生素e聚乙二醇琥珀酸酯tpgs及磷脂类化合物;更优选的,所述双亲性材料为tpgs2000或tpgs1000和卵磷脂(pc)的混合。
6、本发明还提供了一种前述任意一种dox-pab复合肿瘤靶向胶束的制备方法,所述方法包括如下步骤:
7、将一定量的dox和pab分别溶于有机溶剂中,将两种溶液混合均匀,再向混合溶液中加入一定量的载体,除去溶剂得到干燥的含药薄膜,最后加入与水化温度一致的纯化水适量,置于水化温度下搅拌一定时间进行水化,得到的胶束溶液离心后取其上清液过膜,即得所述阿霉素-土荆皮乙酸复合肿瘤靶向胶束(tlyp-1-dp-m)。
8、优选的,所述有机溶剂为甲醇,甲醇用量为将药物溶解即可。
9、优选的,所述dox和pab的重量比为1:0.8。
10、优选的,所述胶束中,各组分的投料量比例以重量份记为dox 1份和pab 0.8份、tlyp-1-tpgs 3份、tpgs 7~9份和磷脂类化合物1~3份。
11、优选的,所述的纯化水的用量以tpgs、磷脂类化合物的的重量之和计为每10mg加(8~12)ml水,水化温度为40~50℃,水化时间为1~2h;更优选的,所述的纯化水的用量以tpgs、磷脂类化合物的的重量之和计为每10mg加10ml水,水化温度为40℃,水化时间为2h。
12、优选的,所述离心速率为10000r/min,离心时间为15min。
13、优选的,所述过膜为过0.22μm微孔滤膜。
14、优选的,所述上清液过膜后经冷冻干燥,得到tlyp-1-dp-m冻干粉。
15、优选的,所述冷冻干燥方法为将制备好的胶束放入-80℃低温冰箱中预冻12h后将样品取出,置于冷冻干燥器内干燥24h。
16、本发明与现有技术相比,其有益效果主要体现在:
17、本发明提供了一种阿霉素-土荆皮乙酸复合肿瘤靶向胶束及其制备方法,所述靶向胶束同时负载两种药物,充分发挥了化疗药物与抑制血管新生药物的协同抗癌作用;tlyp-1对聚合物胶束表面靶向修饰,同时载体材料tpgs能抗多药耐药性,进一步提高了治疗效果。
1.一种阿霉素-土荆皮乙酸复合肿瘤靶向胶束,其特征在于,所述胶束是由阿霉素和土荆皮乙酸联用、以及载体自组装形成,所述载体包括有多肽修饰的双亲性聚合物。
2.根据权利要求1所述一种阿霉素-土荆皮乙酸复合肿瘤靶向胶束,其特征在于,所述载体还包括一种或多种双亲性材料。
3.根据权利要求1所述一种阿霉素-土荆皮乙酸复合肿瘤靶向胶束,其特征在于,所述多肽修饰的双亲性聚合物为tlyp-1修饰的维生素e聚乙二醇琥珀酸酯tpgs(tlyp-1-tpgs),所述双亲性材料为tpgs及一种磷脂类化合物。
4.根据权利要求3所述一种阿霉素-土荆皮乙酸复合肿瘤靶向胶束,其特征在于,所述tpgs为tpgs1000或tpgs2000。
5.一种权利要求1-4所述任意一种阿霉素-土荆皮乙酸复合肿瘤靶向胶束的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
6.根据权利要求5所述一种阿霉素-土荆皮乙酸复合肿瘤靶向胶束的制备方法,其特征在于,所述阿霉素和土荆皮乙酸的重量比为1:0.8。
7.根据权利要求5-6所述任意一种阿霉素-土荆皮乙酸复合肿瘤靶向胶束的制备方法,其特征在于,所述胶束中,各组分的投料量以重量份记为dox 1份和pab 0.8份、tlyp-1-tpgs 3份、tpgs 7~9份和磷脂类化合物1~3份。
8.根据权利要求5所述一种阿霉素-土荆皮乙酸复合肿瘤靶向胶束的制备方法,其特征在于,所述纯化水的用量以tpgs、磷脂类化合物的重量之和计为每10mg加(8~12)ml水,水化温度为40~50℃,水化时间为1~2h。
9.根据权利要求5所述一种阿霉素-土荆皮乙酸复合肿瘤靶向胶束的制备方法,其特征在于,所述有机溶剂为甲醇。
10.根据权利要求5所述一种阿霉素-土荆皮乙酸复合肿瘤靶向胶束的