包括核仁素结合肽的抗病毒组合物的制作方法

本发明涉及与核仁素特异性结合的新型肽的抗病毒用途，并且更具体地，涉及一种包括由特定氨基酸序列表示的肽的抗病毒组合物，一种包括其中所述肽与细胞穿透肽融合的融合肽的抗病毒组合物，一种包括所述组合物的用于预防或治疗病毒感染的组合物，以及一种用于预防或改善病毒感染的健康功能性食品组合物。

背景技术：

1、作为传统诊断和治疗方法的替代，癌症特异性肽可用于提高治疗效率并减少与纳米粒子和抗体癌症疗法相关的副作用(mori t.curr pharm des.2004；10:2335-43)。肽配体具有许多优点，包括易于大规模合成、低免疫原性、无毒代谢物的生成以及高体内生物相容性(mcgregor dp.curr opin pharmacol.2008；8:616-9)。在许多开发肽的方法中，一珠一化合物(oboc)组合方法是筛选肽配体的有力方法(lam ks,et al.chem rev.1997；97:411-48)。基于oboc组合库的肽筛选方法促进了癌症和其他疾病中用于细胞靶向的新型肽配体的发现(mikawa m,et al.mol cancer ther.2004；3:1329-34)。虽然已经使用体外oboc组合筛选或其他方法分离了许多癌症特异性肽，但是仍然存在一些挑战。特别是，使用肽的药物的主要缺点是半衰期非常短，因为被肽酶非常快速地切割(borchardt tr,etal.adv drug deliv rev.1997；27:235-56)。本发明人试图通过开发一种专门的方法来合成树枝状形式的多抗原肽(map)的形式的生物活性肽，从而克服这些问题。由于获得了对蛋白酶和肽酶活性的抗性，树枝状形式的单体肽的合成增加了稳定性(mcguire mj,etal.sci rep.2014；4:4480)。

2、因此，本发明人构思了一系列被称为“agm”或“agm肽”的肽配体，其通过将oboc组合筛选与map合成相结合而与人乳腺癌和结肠直肠癌细胞特异性结合。此外，本发明人通过下拉(pull-down)分析和lc-ms/ms鉴定了核仁素(ncl)是agm的靶蛋白。ncl是核仁中最丰富的蛋白质。在本发明中，发现使用抗ncl抗体等通过病毒感染增加了ncl的表达，并且发现当将受到包括冠状病毒和流感病毒在内的各种病毒感染的细胞用agm肽处理时，病毒的增殖和复制被抑制并且获得了抗病毒功效。基于此，完成了本发明。

3、在该背景技术部分中公开的信息仅仅是为了增强对本发明的背景的理解而提供的，因此它可能不包括形成对本领域技术人员来说已经显而易见的现有技术的信息。

技术实现思路

1、本发明的一个目的是提供一种抗病毒组合物，其包括与核仁素(ncl)特异性结合的肽。

2、本发明的另一个目的是提供一种包括其中与核仁素(ncl)特异性结合的肽与细胞穿透肽(cpp)融合的融合肽的抗病毒组合物。

3、本发明的另一个目的是提供一种包括抗病毒组合物的用于预防或治疗病毒感染的组合物。

4、本发明的另一个目的是提供一种预防或治疗病毒感染的方法，该方法包括向受试者给药抗病毒组合物。

5、本发明的另一个目的是提供抗病毒组合物用于预防或治疗病毒感染的用途。

6、本发明的另一个目的是提供抗病毒组合物在制备用于预防或治疗病毒感染的药物中的用途。

7、根据本发明的一个方面，上述和其他目的可以通过提供以下来实现：

8、一种抗病毒组合物，包括与核仁素(ncl)特异性结合的agm肽，其中，所述agm肽包括选自由以下组成的组的氨基酸序列：

9、(a)由seq id nos:1至8中任一项表示的氨基酸序列；以及

10、(b)包括在由seq id no:1表示的氨基酸序列中的选自以下组的至少一个氨基酸突变的氨基酸序列：

11、(i)自n-末端的第五个甲硫氨酸残基的置换；

12、(ii)自n-末端的第七个酪氨酸残基的置换；以及

13、(iii)在c-末端处亮氨酸或赖氨酸残基的插入。

14、根据本发明的另一方面，提供了一种包括agm肽-cpp融合肽的抗病毒组合物，其中与核仁素(ncl)特异性结合的agm肽与细胞穿透肽(cpp)融合。

15、根据本发明的另一方面，提供了一种包括肽、融合肽或抗病毒组合物的用于预防或治疗病毒感染的组合物。

16、根据本发明的另一方面，提供了一种预防或治疗病毒感染的方法，所述方法包括向受试者给药肽、融合肽或抗病毒组合物。

17、根据本发明的另一方面，提供了肽、融合肽或抗病毒组合物用于预防或治疗病毒感染的用途。

18、根据本发明的另一方面，提供了肽、融合肽或抗病毒组合物在制备用于预防或治疗病毒感染的药物中的用途。

技术特征：

1.一种抗病毒组合物，包括与核仁素(ncl)特异性结合的agm肽，

2.根据权利要求1所述的抗病毒组合物，其中，包括(b)中的所述氨基酸突变的所述氨基酸序列选自由seq id no:9至seq id no:15以及seq id no:20组成的组。

3.根据权利要求1所述的抗病毒组合物，其中，所述抗病毒组合物包括与聚乙二醇(peg)链缀合的agm肽-peg缀合物。

4.根据权利要求3所述的抗病毒组合物，其中，所述聚乙二醇链包括2至24个乙二醇基团。

5.根据权利要求3所述的抗病毒组合物，其中，所述聚乙二醇链通过接头与所述agm肽相连。

6.根据权利要求3所述的抗病毒组合物，其中，所述组合物包括多聚体，所述多聚体包括两个或更多个agm肽-peg缀合物，所述缀合物包括所述agm肽-peg缀合物。

7.根据权利要求6所述的抗病毒组合物，其中，所述多聚体包括2至8个agm肽-peg缀合物。

8.根据权利要求7所述的抗病毒组合物，其中，所述2至8个agm肽-peg缀合物通过接头相互连接。

9.根据权利要求1至8中任一项所述的抗病毒组合物，其中，所述组合物对选自由以下组成的组的至少一种具有抗病毒活性：冠状病毒、流感病毒、猪流行性腹泻病毒、牛轮状病毒、猪札如病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、阿尔弗伊病毒、班齐病毒、基孔肯亚病毒、登革热病毒、乙型肝炎病毒(hbv)、丙型肝炎病毒(hcv)、人巨细胞病毒、人免疫缺陷病毒(hiv)、日本脑炎病毒、科科贝拉病毒、昆津病毒、基萨那森林病病毒、羊跳跃病病毒、麻疹病毒、偏肺病毒、花叶病毒、默里谷病毒、副流感病毒、脊髓灰质炎病毒、波瓦桑病毒、呼吸道合胞病毒(rsv)、罗西奥病毒、圣路易斯脑炎病毒、蜱传脑炎病毒、西尼罗病毒和黄热病病毒。

10.一种包括agm肽-cpp融合肽的抗病毒组合物，其中与核仁素(ncl)特异性结合的agm肽与细胞穿透肽(cpp)融合，

11.根据权利要求10所述的抗病毒组合物，其中，包括(b)中的所述氨基酸突变的所述氨基酸序列选自由seq id no:9至seq id no:15以及seq id no:20组成的组。

12.根据权利要求10所述的抗病毒组合物，其中，所述抗病毒组合物包括与聚乙二醇(peg)链缀合的agm肽-peg缀合物。

13.根据权利要求12所述的抗病毒组合物，其中，所述组合物包括多聚体，所述多聚体包括两个或更多个agm肽-peg缀合物，所述缀合物包括所述agm肽-peg缀合物。

14.根据权利要求10所述的抗病毒组合物，其中，所述细胞穿透肽选自由seq id no:21至seq id no:70组成的组的氨基酸序列。

15.根据权利要求10至14中任一项所述的抗病毒组合物，其中，所述组合物对选自由以下组成的组的至少一种具有抗病毒活性：冠状病毒、流感病毒、猪流行性腹泻病毒、牛轮状病毒、猪札如病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、阿尔弗伊病毒、班齐病毒、基孔肯亚病毒、登革热病毒、乙型肝炎病毒(hbv)、丙型肝炎病毒(hcv)、人巨细胞病毒、人免疫缺陷病毒(hiv)、日本脑炎病毒、科科贝拉病毒、昆津病毒、基萨那森林病病毒、羊跳跃病病毒、麻疹病毒、偏肺病毒、花叶病毒、默里谷病毒、副流感病毒、脊髓灰质炎病毒、波瓦桑病毒、呼吸道合胞病毒(rsv)、罗西奥病毒、圣路易斯脑炎病毒、蜱传脑炎病毒、西尼罗病毒和黄热病病毒。

16.一种用于预防或治疗病毒感染的组合物，包括根据权利要求1或10所述的抗病毒组合物。

17.一种用于预防或改善病毒感染的健康功能性食品组合物，包括根据权利要求1或10所述的抗病毒组合物。

技术总结
本发明涉及与核仁素特异性结合的新型肽的抗病毒用途，更具体地，涉及：一种包括由特定氨基酸序列代表的肽的抗病毒组合物；一种抗病毒组合物，包括融合肽，其中所述肽和细胞穿透肽相互偶联；一种用于预防或治疗病毒感染的包括前述组合物的组合物；以及一种用于预防或减轻病毒感染的健康功能性食品组合物。在本发明中，通过MAP合成方法和OBOC组合方法筛选，发现AGM肽配体及其突变体抑制病毒增殖和复制(体外和体内)。因此，NCL靶向的AGM可以在抗病毒用途中找到有利的应用。

技术研发人员：金载一,柳载霞,赵庚五
受保护的技术使用者：安尼根有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/1/16