包含MSH2或MSH6抑制剂作为有效成分的用于预防或治疗癌症的组合物的制作方法

本发明涉及包含msh2或msh6抑制剂作为有效成分的用于预防或治疗癌症的组合物。

背景技术：

1、众所周知，muts同源物2(msh2，muts homolog2)为脱氧核糖核酸错配修复(dnamismatch repair)蛋白。在遗传性非息肉病性结直肠癌(hnpcc，hereditary nonpolyposiscolorectal cancer，林奇综合征(lynch syndrome))中，确认到40％以上的msh2的突变，与mlh1突变一同已知为遗传性非息肉病性结直肠癌(hnpcc)的主要病因。若引起这样的突变，则在多种基因中无法纠正错配(mismatch)而以突变的状态存在并积聚，在癌化过程中起到重要作用。

2、众所周知，muts同源物6(msh6，muts homolog6，gtbp)为脱氧核糖核酸错配修复蛋白。msh6与msh2形成异源二聚体(hetero dimer)，这在脱氧核糖核酸(dna)的复制过程中起到识别错配部分并开始纠正的因子的作用。

3、msh2与msh6形成异源二聚体，这在脱氧核糖核酸(dna)的复制过程中起到识别错配部分并开始纠正的因子的作用。

4、组蛋白去乙酰化酶(hdacs，histone deacetylases)可以通过多种辅助抑制因子(corepressors)或多蛋白转录复合体(multi-protein transcriptional complexes)来附着于基因启动子，在那里，不直接与脱氧核糖核酸(dna)结合，而使通过染色质(chromatin)修饰来调节转录。编码的人组蛋白去乙酰化酶(hdacs)有18个，它们分类为i类(hdac 1、2、3及8)、ii类(hdac 4、5、6、7、9及10)、iii类(sirt 1-7)以及iv类(hdac 11)等酶。已知乙酰转移酶(acetyltransferases)及组蛋白去乙酰化酶都与细胞增殖、分化及细胞周期调节相关。并且，据报告，组蛋白去乙酰化酶的病理活性及调节减少(deregulation)会引起癌症、免疫疾病及肌营养不良症(muscular dystrophy)等多种疾病。hdac6为组蛋白去乙酰化酶的iib类家族的成员，以与微管(mts)相关的细胞质去乙酰化酶(cytoplasmicdeacetylase)来起作用，使α-微管蛋白(α-tubulin)去乙酰化。

5、dna(胞嘧啶-5)甲基转移酶(dnmt1，dna(cytosine-5)-methyltransferase 1)为向对dna具有特异性的cpg结构转移甲基(methyl)的酶。在癌症基因组图谱(cancer genomeatlas)项目中，dnmt家族(dnmt family)为在癌症中确认的127个突变的基因之一。dnmt1在多种癌症中过表达，据研究，这可以成为治疗的靶向。

6、kruppel样因子4(klf4，kruppel-like factor 4)为可以在与细胞增殖、分化、凋亡相关的基因的转录激活或抑制两个方向都起作用的锌指(zinc finger)蛋白。kruppel样因子4(klf4)在黏膜上皮细胞的细胞分裂后与细胞的生长抑制和分化相关，主要在生长被抑制的细胞的细胞核中过表达，通过p53依赖性激活作为细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂(cyclin-dependent kinase inhibitor)的p21waf1/cip1来在g1/s中抑制细胞周期。

技术实现思路

1、技术问题

2、本发明的目的在于，提供一种用于预防或治疗癌症的药物组合物，包含msh2的基因或蛋白质的抑制剂或者msh6的基因或蛋白质的抑制剂作为有效成分。

3、并且，本发明的再一目的在于，提供一种治疗肝癌的方法，包括向个体给药上述药物组合物的步骤。

4、并且，本发明的另一目的在于，提供一种癌症诊断用组合物，包含测定msh2或msh6的基因、其蛋白质或构成上述蛋白质的肽的水平的制剂。

5、并且，本发明的还一目的在于，提供一种用于预防或治疗癌症的物质的筛选方法。

6、技术方案

7、为了实现上述目的，本发明提供一种用于预防或治疗癌症的药物组合物，包含msh2的基因或蛋白质的抑制剂或者msh6的基因或蛋白质的抑制剂作为有效成分。

8、进而，本发明提供一种治疗肝癌的方法，包括向个体给药上述药物组合物的步骤。

9、接着，本发明提供一种癌症诊断用组合物，包含测定msh2或msh6的基因、其蛋白质或构成上述蛋白质的肽的水平的制剂。

10、最后，本发明提供一种用于预防或治疗癌症的物质的筛选方法，包括：步骤(a)，使包含msh2基因或其蛋白质或msh6基因或其蛋白质的细胞与所要分析的试样接触；步骤(b)，测定上述msh2或msh6基因的表达量、蛋白质的表达量或蛋白质的活性；以及步骤(c)，若上述步骤(b)的测定结果为减少msh2或msh6基因的表达量、蛋白质的表达量或蛋白质的活性，则判断上述试样为用于预防或治疗癌症的物质。

11、发明的效果

12、本发明的msh2或msh6抑制剂在包括肝细胞癌在内的多种癌症细胞中抑制肿瘤细胞生长、增殖，尤其在肝细胞癌中抑制迁移、浸润及肿瘤形成活性，确认到增加msh2或msh6的表达时增加dnmt1的表达，减少klf4的表达，从而可以将其用作预防及治疗癌症的药物组合物。

技术特征：

1.一种用于预防或治疗癌症的药物组合物，其特征在于，包含muts同源物2的基因或蛋白质的抑制剂或者muts同源物6的基因或蛋白质的抑制剂作为有效成分。

2.根据权利要求1所述的用于预防或治疗癌症的药物组合物，其特征在于，上述抑制剂选自由对muts同源物2或muts同源物6具有特异性的小干扰核糖核酸、短发夹核糖核酸、微小核糖核酸、反义寡核苷酸、核酸适配体、抗体及它们的组合组成的组中。

3.根据权利要求2所述的用于预防或治疗癌症的药物组合物，其特征在于，上述对muts同源物2具有特异性的小干扰核糖核酸由序列1的碱基序列表示。

4.根据权利要求2所述的用于预防或治疗癌症的药物组合物，其特征在于，上述对muts同源物6具有特异性的小干扰核糖核酸由序列2的碱基序列表示。

5.根据权利要求1所述的用于预防或治疗癌症的药物组合物，其特征在于，上述癌症选自由肝癌、肺癌、头颈部癌、结肠癌、肉瘤、胃癌及胆囊癌组成的组中。

6.根据权利要求1所述的用于预防或治疗癌症的药物组合物，其特征在于，上述癌症为kruppel样因子6、组蛋白去乙酰化酶6或kruppel样因子4的表达被抑制，或者组蛋白去乙酰化酶2、muts同源物2或dna(胞嘧啶-5)甲基转移酶的表达增加的患者的癌症。

7.根据权利要求1所述的用于预防或治疗癌症的药物组合物，其特征在于，上述组合物抑制dna(胞嘧啶-5)甲基转移酶的表达或增加kruppel样因子4的表达。

8.根据权利要求1所述的用于预防或治疗癌症的药物组合物，其特征在于，上述组合物抑制肿瘤细胞的生长、增殖、迁移及浸润。

9.一种癌症诊断用组合物，其特征在于，

10.根据权利要求9所述的癌症诊断用组合物，其特征在于，上述测定基因水平的制剂包含与基因特异性结合的引物或探针。

11.根据权利要求9所述的癌症诊断用组合物，其特征在于，上述测定蛋白质水平的制剂包含选自由对上述蛋白质或肽片段具有特异性的抗体、反义核糖核酸、核酸适配体及化合物组成的组中的一种。

12.一种用于预防或治疗癌症的物质的筛选方法，其特征在于，

13.一种治疗肝癌的方法，其特征在于，包括向个体给药权利要求1所述的用于预防或治疗癌症的药物组合物的步骤。

技术总结
本发明涉及包含MSH2或MSH6抑制剂作为有效成分的用于预防或治疗癌症的组合物，本发明的MSH2或MSH6抑制剂在包括肝细胞癌在内的多种癌症细胞中抑制肿瘤细胞生长、增殖，尤其在肝细胞癌中抑制迁移、浸润及肿瘤形成活性，确认到增加MSH2或MSH6的表达时增加DNMT1的表达，减少KLF4的表达，从而可以将其用作预防及治疗癌症的药物组合物。

技术研发人员：南硕祐,罗玟庭
受保护的技术使用者：株式会社尼欧纳特
技术研发日：
技术公布日：2024/3/31