一种脑出血动物模型的构建方法与流程

本发明涉及疾病模型构建，具体涉及一种脑出血动物模型的构建方法。

背景技术：

1、脑出血是一个严重危害人类健康的公共卫生问题，占所有收入院脑卒中患者的10％～30％，可导致严重的残疾和高病死率。近两年来，有数据显示脑出血发病年龄有向年轻人靠近的趋势。因此对脑出血的预防以及治疗越来越受到重视，大规模临床试验和观察性研究表明规范治疗和专科护理能显著降低脑出血死亡率，超早期止血、控制颅内高压、合理降低血压、脑室内tpa溶栓和微创手术等技术有望改善目前脑出血患者的临床治疗策略，降低死亡率，改善患者长期生存质量。

2、目前可用于药物测试的动物模型构建方法有许多，例如：1.自体血注入法，是指抽取自体血注射到相应脑区形成脑出血，该方法形成的脑内出血并非脑内血管破裂引起，不适合做机制研究；2.微球囊充胀法，属于机械性模型，只能模拟脑出血后脑内血肿的占位效应，不能模拟血液成分对脑组织的损伤作用，与临床差距大，适用范围有限；3.胶原酶注入法，是指将胶原酶注入脑内区域，溶解小血管造成脑内出血，但该方法出血特点是弥漫性渗血，血肿形成时间长，不能模拟血管迅速破裂的特点。

3、上述构建方法中，使用最多的最为接近临床的动物模型是用胶原酶诱导，通常是注射至脑内皮层区域，不过由于动物个体差异性，胶原酶用量选择难度较大，模型成功率不高。

技术实现思路

1、本发明的目的在于提供一种脑出血动物模型的构建方法，以解决上述背景技术中提到的技术问题。

2、为了实现上述目的，本发明公开了一种脑出血动物模型的构建方法，该构建方法包括：将胶原酶溶液从动物的注射用手术通路注射至目标核团，其中，目标核团为动物头颅中的纹状体壳核区；注射完成后通过脑部影像计算动物的脑血肿体积，并记录动物的行为学变化。

3、优选地，胶原酶溶液为iv型胶原酶溶液，胶原酶溶液的配置方法包括将胶原酶溶于溶剂中，溶剂包括平衡盐溶液。

4、可选地，胶原酶溶液的注射剂量为1-200u/10μl。

5、优选地，胶原酶溶液的注射剂量为2.4-2.8u/10μl。

6、优选地，胶原酶溶液的注射剂量为2.5u/10μl

7、优选地，胶原酶溶液的注射速度为0.5-1μl/min。

8、进一步地，注射用手术通路的确定方法包括：对动物的头颅及目标核团进行三维重建后得到目标核团的空间坐标，根据目标核团的空间坐标，以动物前颅为空间零点确认注射用手术通路及头颅中的纹状体壳核区坐标。

9、优选地，在注射胶原酶溶液之前还包括：对动物进行麻醉，麻醉过程中，首先采用氯胺酮和赛拉嗪诱导麻醉，然后采用异氟烷持续麻醉。

10、可选地，氯胺酮剂量为5-15mg/kg，赛拉嗪剂量为0.2-2mg/kg。

11、优选地，氯胺酮剂量为8.75mg/kg，赛拉嗪剂量为0.75mg/kg。

12、优选地，氯胺酮和赛拉嗪通过肌肉注射。

13、可选地，通过插管采用1.5-3％的异氟烷气体持续麻醉。

14、优选地，采用2％的异氟烷气体持续麻醉。

15、可选地，动物包括比格犬。

16、可选地，比格犬的体重为7-15kg。

17、可选地，比格犬的年龄为1.5-2岁。

18、可选地，行为学包括：自主运动、意识和感觉中的任意一种或组合。

19、可选地，自主运动包括站立、行走方向性、前后肢瘫痪状态、跑步能力和尾部姿态中的任意一种或组合，意识包括神志意识和行为意识中的任意一种或组合，感觉包括视力。

20、与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：

21、本发明通过将胶原酶溶液从动物的注射用手术通路注射至动物头颅中的纹状体壳核区可构建出脑出血动物模型，注射完成后通过脑部影像计算动物的脑血肿体积，并记录动物的行为学变化，该模型构建成功率高，且构建成功的模型的比格犬血肿形成时间快、持续时间久，既与临床脑出血发病区接近，还能通过设计不同的剂量得到不同的模型，从而通过不同存活时间的动物、及不同时期的动物的脑出血和行为学表现情况，模拟临床上急性或慢性的脑出血情况，为后期药物治疗窗口提供选择的余地。

技术特征：

1.一种脑出血动物模型的构建方法，其特征在于，所述构建方法包括：

2.如权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述胶原酶溶液为iv型胶原酶溶液，所述胶原酶溶液的配置方法包括将胶原酶溶于溶剂中，所述溶剂包括平衡盐溶液。

3.如权利要求2所述的构建方法，其特征在于，所述胶原酶溶液的注射剂量为1-200u/10μl。

4.如权利要求3所述的构建方法，其特征在于，所述胶原酶溶液的注射速度为0.5-1μl/min。

5.如权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述注射用手术通路的确定方法包括：

6.如权利要求1所述的构建方法，其特征在于，在注射所述胶原酶溶液之前还包括：对动物进行麻醉，所述麻醉过程中，首先采用氯胺酮和赛拉嗪诱导麻醉，然后采用异氟烷持续麻醉。

7.如权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述动物包括比格犬。

8.如权利要求7所述的构建方法，其特征在于，所述比格犬的体重为7-15kg。

9.如权利要求8所述的构建方法，其特征在于，所述比格犬的年龄为1.5-2岁。

10.如权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述行为学包括：自主运动、意识和感觉中的任意一种或组合。

技术总结
本发明涉及疾病模型构建技术领域，具体涉及一种脑出血动物模型的构建方法，该方法通过将胶原酶溶液从动物的注射用手术通路注射至动物头颅中的纹状体壳核区可构建出脑出血动物模型，注射完成后通过脑部影像计算动物的脑血肿体积，并记录动物的行为学变化，该模型构建成功率高，且构建成功的模型的比格犬血肿形成时间快、持续时间久，既与临床脑出血发病区接近，还能通过设计不同的剂量得到不同的模型，从而通过不同存活时间的动物、及不同时期的动物的脑出血和行为学表现情况，模拟临床上急性或慢性的脑出血情况，为后期药物治疗窗口提供选择的余地。

技术研发人员：庄永杰,邓志豪,陈继巧,刘宇,贾同亮
受保护的技术使用者：江苏珂玛麒生物科技有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/1/12