枸杞多糖在制备预防高血糖和高血脂保健品中的应用

本发明涉及天然植物多糖，具体涉及枸杞多糖在制备预防高血糖和高血脂保健品中的应用。

背景技术：

1、在过去几十年中，全球糖尿病的发病人数正在急速增加，目前已经达到5.37亿，预估在2030年人数将达到6.43亿，在2045年人数达到7.83亿。鉴于糖尿病带来的巨大社会经济负担，人们非常关注提前预防，这可能会降低未来发展为糖尿病的可能性。饮食尤其是会导致肥胖的高脂肪饮食，是导致糖尿病发展的主要危险因素。长期摄入高脂食物不仅会导致机体体重增加和血脂失调，也会引发血糖异常(血糖水平高于正常水平，但低于糖尿病的诊断标准)、葡萄糖耐受不良和胰岛素抵抗等的出现。糖尿病的治疗方法已有广泛报道，多以化学药物干预为主，如胰岛素促分泌剂类、胰岛素增敏剂类、二甲双胍类、α-糖苷酶抑制剂类、glp-1受体激动剂类、dpp-4抑制剂类和sglt-1/sglt-2抑制剂类等。然而，通过调控高脂饮食引起的糖代谢和脂代谢紊乱，进而预防糖尿病的研究相对缓慢，更是缺乏有效的防治制剂。

2、多糖是是由10个及以上的单糖通过糖苷键连接而成的聚合高分子碳水化合物，无显著的毒副作用，可通过多条途径、多个层面发挥多种生物活性，如降血糖、降血脂、抗氧化、抗肿瘤、免疫调节神经保护等，在保健食品和生物医药领域表现出广阔的应用前景。枸杞是中国传统药食同源物质中常见的一味药材，具有上佳的营养价值，受到历代养生家和医学家的喜爱与推崇。现代研究表明，枸杞提取物可通过降低氧化应激、通过维持线粒体正常功能、抑制炎症信号通路转导和调控异常自噬的发生等发挥降血糖和降血脂等作用功效。枸杞多糖是枸杞中重要的组成部分，可占到枸杞干果的5％～8％，是枸杞发挥众多生物功效的物质基础。因此，明确枸杞多糖对高脂饮食诱导血糖和血脂的调控，对于预防糖尿病制剂的开发具有重要意义。

技术实现思路

1、本发明将枸杞多糖应用于高脂饮食诱导血糖和血脂失调的调控上，旨在将枸杞多糖用于制备预防高血糖和高血脂的保健品中。

2、本发明通过以下技术方案实现：

3、枸杞多糖的制备，步骤如下：

4、(1)将枸杞干果粉碎，投入到80％乙醇(v/v)中并在90℃条件下水浴2h，纱布过滤弃去上清，收集枸杞残渣，共处理处理2次

5、(2)将步骤(1)中枸杞残渣干燥至恒重后，按料液比1∶30(w/v)、提取温度90℃、提取时间2h条件下提取3次，合并提取液并浓缩至合适的体积；

6、(3)将步骤(2)中浓缩液与与4倍体积无水乙醇混合，4℃条件下放置过夜。离心(4000rpm，15min)取沉淀并复溶于纯水中，利用sevage法反复萃取5次去除蛋白，保留水相萃取液。

7、(4)将步骤(3)中所得溶液于50℃条件下减压浓缩至合适体积，并用8000-14000da透析袋透析2天，而后将透析袋内液浓缩至合适体积，真空冷冻干燥2天，得到枸杞粗多糖lbps。

8、(5)将步骤(4)中所得枸杞粗多糖经deae-sepharose fast flow柱层析分级，依次用去离子水、0.05m nacl溶液、0.1m nacl溶液和0.3m nacl溶液洗脱，每个洗脱等级洗脱3个柱体积。

9、(6)将步骤(5)中用0.3m nacl溶液洗脱的组分收集与合并，浓缩至合适的体积，去离子透析2天，真空冷冻干燥2天，最终得到枸杞多糖酸性糖组分lbps-4。

10、(7)将步骤(6)所得lbps-4用分子排阻色谱检测其纯度，得到单一对称峰型，表明得到的枸杞多糖为纯品。

11、本发明根据上述技术方案制备得到的lbps-4，中性糖含量为43.65％，糖醛酸含量为29.03％，主要由摩尔比为8.71∶50.29∶3.13∶17.92∶19.96的鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖组成的分子量为4.4×104da的杂多糖。

12、本发明采用高脂饮食诱导小鼠模型，应用本发明制备的枸杞多糖lbps-4灌胃给药，结果表明lbps-4显著降低了小鼠空腹血浆血糖、胰岛素抵抗指数homa-ir，逆转了胰岛β细胞异常增生，提高了口服葡萄糖耐量和血浆glp-1水平，同时显著抑制了小鼠体重增加，并降低了血浆中tc、tg、ldl-c和neaa的含量，提示lbps-4具有降血糖和降血脂作用，可在制备预防高血糖和高血脂的保健品中应用。

13、具体的，本发明还说明了枸杞多糖lbps-4对高脂饮食诱导小鼠肠道微生物具有调节作用，特别是显著增加了肠道菌群中allobaculum和romboutsia的相对丰度，降低了clostridium_xivb、clostridium_iv和eisenbergiella的相对丰度，并增加了肠道中有益代谢产物乙酸和正丁酸的含量。

技术特征：

1.枸杞多糖作为唯一活性成分在制备预防高血糖和高血脂保健品中的应用。

2.如权利要求1所述的枸杞多糖在制备预防高血糖和高血脂保健品中的应用，其特征是，所述的枸杞多糖是由下述方法制备：

3.根据权利要求1或2所述枸杞多糖的应用，其特征在于，所述枸杞多糖的中性糖含量为43.65％，糖醛酸含量为29.03％，主要由摩尔比为8.71∶50.29∶3.13∶17.92∶19.96的鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖组成的分子量为4.4×104da的杂多糖。

4.根据权利要求1或2所述枸杞多糖的应用，其特征在于，所述枸杞多糖可增加肠道菌群中allobaculum和romboutsia的相对丰度，降低clostridium_xivb、clostridium_iv和eisenbergiella的相对丰度，并提高肠道中乙酸和正丁酸的含量。

5.根据权利要求1或2所述枸杞多糖的应用，其特征在于：枸杞多糖，加入或不加其他辅料，按照常规方法制备成保健品制剂。

技术总结
本发明公开了枸杞多糖在制备预防高血糖和高血脂保健品中的应用。该枸杞多糖的中性糖含量为43.65％，糖醛酸含量为29.03％，主要由摩尔比为8.71∶50.29∶3.13∶17.92∶19.96的鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖组成的分子量为4.4×104Da的杂多糖。通过实施例中的实验结果表明本发明提供的枸杞多糖对高脂饮食诱导小鼠空腹血浆血糖、胰高血糖素样肽(GLP‑1)、口服葡萄糖耐量、胰岛素抵抗和胰岛β细胞异常增生具有明显改善作用，同时可显著降低小鼠体重增加以及血浆中总胆固醇(TC)、总甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL‑C)和游离脂肪酸(NEAA)的含量。此外，枸杞多糖主要通过增加肠道菌群中Allobaculum和Romboutsia的相对丰度，降低Clostridium_XIVb、Clostridium_IV和Eisenbergiella的相对丰度，促进有益代谢产物乙酸和正丁酸的生成，从而起到高血糖和高血脂调控作用。本发明所提供的枸杞多糖可用于制备具有高血糖和高血脂预防作用的各种制剂之中。

技术研发人员：曾晓雄,周望庭
受保护的技术使用者：南京农业大学
技术研发日：
技术公布日：2024/1/13