一种共包封脂质体的制备方法

本发明涉及药物制备，更具体的公开了一种共包封脂质体的制备方法。

背景技术：

1、多形性胶质母细胞瘤(gbm)以广泛浸润周围脑组织为特征，是最常见、最致命的原发性恶性脑肿瘤，5年生存率仅为5％。目前的标准治疗包括手术后化疗和放疗，但无法治愈，几乎所有患者都有复发，并且复发后肿瘤更具侵袭性。替莫唑胺为临床上治疗多形性胶质母细胞瘤的一线药物，由于替莫唑胺的半衰期短，需加大用量才能达到治疗效果，用量增大导致不良反应加剧以及耐药性从而限制了替莫唑胺的临床使用。

2、光动力治疗作为一种替代的癌症治疗方法受到广泛关注，光动力治疗的分子机制是光敏剂、合适波长的光源和分子氧同时相互作用。在光动力治疗过程中，光敏剂吸收可见光并将能量转化给周围的分子氧，产生一系列高活性氧。与传统治疗方法相比，光动力治疗具有非侵入性治疗、无光激活的非细胞毒性分子和减少副作用的部位特异性光治疗等优点。光敏剂卟啉是一类杂环有机化合物，含有四个吡咯环，通过天然存在的甲基桥连接在一起。卟啉具有特殊的性质和多功能用途，其对癌细胞的特殊亲和力使它们成为抗癌药物的最佳配体。

3、脂质体作为一种新型载药系统，通过对脂质体进行修饰，使其具有多种功能。用peg链修饰的长循环脂质体具有高效性、低毒性和药物的时效性高等优点，成为攻克肿瘤治疗的关键研究对象。

4、因此，本发明提供了一种共包封替莫唑胺和5，10，15，20-四(4-羧基苯基)卟啉脂质体的制备方法，通过该方法制备的共包封替莫唑胺和5，10，15，20-四(4-羧基苯基)卟啉长循环脂质体，可产生化疗和光动力治疗双重治疗效果，更好发挥抗癌作用。

技术实现思路

1、本发明主要解决的技术问题是提供一种共包封脂质体的制备方法，能够解决由于替莫唑胺的半衰期短，需加大用量才能达到治疗效果，用量增大导致不良反应加剧以及耐药性从而限制了替莫唑胺的临床使用的问题。

2、为解决上述技术问题，根据本发明的一个方面，更具体的说是一种共包封脂质体的制备方法，包括以下步骤：

3、s1、将大豆卵磷脂、胆固醇、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000共同加入至茄形瓶中，用氯仿溶解后，加入甲醇溶解的替莫唑胺；

4、s2、缓和溶液混匀完全后，采用减压旋转蒸发的方式和使溶液形成均匀的透明薄膜；

5、s3、减压旋转蒸发结束后，将透明薄膜置于真空干燥箱中干燥过夜；

6、s4、干燥结束后，加入5，10，15，20-四(4-羧基苯基)卟啉pbs水溶液，于水浴摇床中孵育处理；

7、s5、孵育结束后，使用细胞超声破碎仪对脂质体混悬液进行超声；

8、s6、将超声得到的脂质体混悬液置于超滤离心管内进行离心，以除去脂质体混悬液中游离的替莫唑胺和5，10，15，20-四(4-羧基苯基)卟啉，即得共包封替莫唑胺和5，10，15，20-四(4-羧基苯基)卟啉的长循环脂质体(peg-tmz/tcpp-lp)。

9、更进一步的，所述s5中，在水浴环境下，使用细胞超声破碎仪对脂质体混悬液进行超声处理。

10、更进一步的，所述s5中，超声时间为2min30s，超声条件为：100w，5s×5s。

11、更进一步的，所述s6中，将超声得到的脂质体混悬液置于超滤离心管内后，在3000转速下，离心20分钟。

12、更进一步的，所述s6中，超滤离心管的截留分子量为10k。

13、本发明一种共包封脂质体的制备方法的有益效果为：本发明以大豆卵磷脂、胆固醇、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000为原料制备脂质体，采用薄膜水化法分别将替莫唑胺和5，10，15，20-四(4-羧基苯基)卟啉包封于脂质体内，再通过超滤离心法过滤除去脂质体混悬液中游离的替莫唑胺和5，10，15，20-四(4-羧基苯基)卟啉，最后得到共包封替莫唑胺和5，10，15，20-四(4-羧基苯基)卟啉长循环脂质体。创造性的将替莫唑胺和5，10，15，20-四(4-羧基苯基)卟啉共包封于脂质体内，更好的发挥药物的抗癌作用。

技术特征：

1.一种共包封脂质体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的一种共包封脂质体的制备方法，其特征在于：所述s5中，在水浴环境下，使用细胞超声破碎仪对脂质体混悬液进行超声处理。

3.根据权利要求1所述的一种共包封脂质体的制备方法，其特征在于：所述s5中，超声时间为2min30s，超声条件为：100w，5s×5s。

4.根据权利要求1所述的一种共包封脂质体的制备方法，其特征在于：所述s6中，将超声得到的脂质体混悬液置于超滤离心管内后，在3000转速下，离心20分钟。

5.根据权利要求1所述的一种共包封脂质体的制备方法，其特征在于：所述s6中，超滤离心管的截留分子量为10k。

技术总结
本发明涉及药物制备技术领域，且公开了一种共包封脂质体的制备方法，包括以下步骤：S1、将大豆卵磷脂、胆固醇、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺‑聚乙二醇2000共同加入至茄形瓶中，用氯仿溶解后，加入甲醇溶解的替莫唑胺；S2、缓和溶液混匀完全后，采用减压旋转蒸发的方式和使溶液形成均匀的透明薄膜；S3、减压旋转蒸发结束后，将透明薄膜置于真空干燥箱中干燥过夜；S4、干燥结束后，加入5，10，15，20‑四(4‑羧基苯基)卟啉PBS水溶液，于水浴摇床中孵育处理；S5、孵育结束后，使用细胞超声破碎仪对脂质体混悬液进行超声。本发明创造性的将替莫唑胺和5，10，15，20‑四(4‑羧基苯基)卟啉共包封于脂质体内，更好的发挥药物的抗癌作用。

技术研发人员：袁明清,李莉莉,杜靖国
受保护的技术使用者：广西大学
技术研发日：
技术公布日：2024/1/14