一种含有抗菌肽的快速成膜的消毒液及其制备方法与流程

本发明属于消毒液，更具体地涉及抗菌肽及用于制备快速成膜的消毒液的方法。

背景技术：

1、抗菌肽(antimicrobial peptides，amps)是由生物体特定基因编码并经外界诱导产生的一类由5-100个氨基酸残基组成的具有抗菌活性的小分子多肽，主要来源于植物、昆虫、两栖类动物、哺乳动物、海洋生物、细菌、病毒等，是自然界生物体内重要的防御体系，抗菌肽的抗菌活性具有选择性高、杀菌快速、作用广谱和难以形成抗性的特点，这使其成为研究和开发新型抗生素的理想候选。

2、鲎，又称马蹄蟹(horseshoe crab)，是一种生活在海洋中的大型节肢动物，是动物界具有独特进化地位的“活化石”之一，鲎素抗菌肽tachyplesin是存在于鲎血淋巴颗粒细胞中的一族小分子多肽，具有广谱抗菌活性，对细菌、真菌、肿瘤及病毒均有抑制作用，是一种可开发成替代抗生素类的新型药源物质。

3、目前鲎素抗菌肽已经发现的类型有五种，分别是tachyplesinⅰ、tachyplesinⅱ、tachyplesinⅲ、polyphemusini和polyphemusinⅱ，其中研究和使用最为广泛的是tachyplesinⅰ，谢海伟等模拟人胃及肠道环境，测试基因工程抗菌肽的生物活性，发现tachyplesinⅰ在低于100℃、ph小于10.3的情况下具有稳定性，阳离子浓度和溶液极性对tachyplesinⅰ的抗菌活性具有一定的影响；在tachyplesinⅰ浓度大于80mg/l，作用时间大于30min时，表现出一定的溶血活性；tachyplesinⅰ在模拟胃液、胃黏膜匀浆和血浆系统中表现出很高的稳定性，色谱峰型基本未改变，几乎无降解作用，因此，tachyplesinⅰ具有较强的高温耐受性，在酸性条件下稳定，同时具有一定的耐受体内蛋白酶降解的能力。

4、消毒液主要用于伤口的处理，一般情况外表皮肤小创口、擦伤、切割伤、非慢性创面通常在1周左右内会愈合，如果伤口部位受到感染就会延长愈合以及治疗时间，尤其是感染了缺乏有效治疗手段的多药耐药菌，为了防止伤口感染，促进伤口愈合，使用液体消毒液在伤口上形成一层保护膜，防止外部细菌侵入，且抗菌活性物质鲎素抗菌肽对细菌、真菌起到抑制作用，有利于伤口愈合。

5、含有鲎素抗菌肽tachyplesinⅰ的液体消毒液，在低温条件下作用时间大于5min时具有一定的杀菌效果，但是效果不佳，且不能实现快速杀菌的目的。

技术实现思路

1、为解决上述问题，克服现有技术的不足，本发明提供了一种含有抗菌肽的消毒液及其制备方法，能够有效的解决含有鲎素抗菌肽tachyplesinⅰ的液体消毒液，不能实现快速杀菌的目的的问题。

2、本发明解决上述技术问题的具体技术方案为：

3、含有抗菌肽的消毒液，包括抗菌活性物质、成膜剂、保湿剂、反应助剂、反应激活剂、ph稳定剂和注射用水；

4、所述抗菌活性物质为改性后的鲎素抗菌肽，所述改性后的鲎素抗菌肽的氨基酸序列为：nh2-r-w-c-f-r-v-c-y-r-g-i-c-y-r-r-c-r-conh2；

5、所述改性后的鲎素抗菌肽的制备方法，为按照氨基酸序列为：nh2-r-w-c-f-r-v-c-y-r-g-i-c-y-r-r-c-r-conh2；用全自动多肽合成仪合成抗菌肽全序列，并通过hplc反相柱层析脱盐纯化获得；

6、所述成膜剂为乙酸纤维素或cmc；

7、所述保湿剂为甘油或聚乙二醇；

8、所述反应助剂为：聚丙烯酸钠；

9、所述反应激活剂为：双氧水；

10、所述ph稳定剂为醋酸-醋酸钠或磷酸二氢钠-磷酸氢二钠；

11、所述抗菌肽的低温消毒液中的抗菌活性物质浓度为1-5000 mg/l，优选10-100mg/l。

12、所述成膜剂质量占总质量的0.01-10%，优选0.1-5%；

13、所述保湿剂质量占总质量的0.1-20%，优选0.5-5%；

14、所述ph稳定剂占总质量的0.01-5%，优选0.05%-2%；

15、所述反应助剂占总质量的0.01-2%，优选0.05%-1%。

16、含有抗菌肽的快速成膜的消毒液的制备方法，包括以下步骤：

17、（1）用适量的注射用水将改性后的鲎素抗菌肽溶解，搅拌均匀得到溶液①；

18、（2）用适量的注射用水将反应助剂-聚丙烯酸钠溶解完全，搅拌均匀得到溶液②；

19、（3）在保湿剂中滴加过量的反应激活剂进行活化，用适量的注射用水将成膜剂溶解完全，滴加过量的反应激活剂进行活化，将活化的保湿剂溶液和活化的成膜剂溶液混合，升温至60-80℃，充分搅拌均匀，得到溶液③；

20、（4）在溶液③加入适量的二氧化锰，充分搅拌均匀，将过量的反应激活剂热分解后，补水热过滤二氧化锰，再补水降温至常温，并加入ph稳定剂调ph，再加入溶液①；再加注射用水补足至总质量100%，混匀后得到含有抗菌肽的消毒液。

21、含有抗菌肽的消毒液能够在小创口、擦伤、切割伤及非慢性创面通过涂抹或喷洒的方式，快速形成一层抗菌膜，具有稳定性好、成膜均匀、凝固时间短、杀菌时效长等特点，膜的附着力较好，表面光滑，抑菌效果持久，能够实现5min快速杀菌，能够应用于由金黄色葡萄球菌或大肠杆菌一种或两种所致的创面。

22、本发明的有益效果是：

23、本发明通过对tachyplesinⅰ的改性，并将改性后的鲎素抗菌肽加入到液体消毒液中，能够实现在低温条件下的5min快速杀菌；

24、本发明消毒液具有稳定性好、成膜均匀、凝固时间短、杀菌时效长、耐磨性强等特点，膜的附着力较好，表面光滑，附着持久，抑菌效果持久，能够实现5min快速杀菌；

25、本发明制备的消毒液，高温条件下双氧水对成膜剂和保湿剂进行氧化作用后，获得了丰富的活化的羟基，能够与富含羧基的聚丙烯酸钠，在搅拌反应的作用下三种物质之间形成强的氢键，提高了膜的整体性，实现了优越的静态成膜效果；

26、尤其是在提高膜的整体性的同时，聚丙烯酸钠与甘油的氢键结合提高了膜的韧性，实现了膜的静态成膜效果和动态成膜效果的双优的效果，解决了作为创面的快速成膜的消毒液为了提高保湿效果加入甘油后导致成膜效果变差的问题。

技术特征：

1.一种含有抗菌肽的快速成膜的消毒液，其特征在于包括抗菌活性物质、成膜剂、保湿剂、反应助剂、反应激活剂、ph稳定剂和注射用水；

2.根据权利要求1所述的含有抗菌肽的快速成膜的消毒液，其特征在于所述的改性后的鲎素抗菌肽的制备方法，为按照氨基酸序列nh2-r-w-c-f-r-v-c-y-r-g-i-c-y-r-r-c-r-conh2；用全自动多肽合成仪合成改性后的鲎素抗菌肽，并通过hplc反相柱层析脱盐纯化获得。

3. 根据权利要求1所述的含有抗菌肽的快速成膜的消毒液，其特征在于所述抗菌肽的低温消毒液中的抗菌活性物质浓度为1-5000 mg/l。

4. 根据权利要求3所述的含有抗菌肽的快速成膜的消毒液，其特征在于所述抗菌肽的低温消毒液中的抗菌活性物质浓度为10-100 mg/l。

5.根据权利要求1所述的含有抗菌肽的快速成膜的消毒液，其特征在于所述成膜剂质量占总质量的0.01-10%。

6.根据权利要求1所述的含有抗菌肽的快速成膜的消毒液，其特征在于所述保湿剂质量占总质量的0.1-20%。

7.根据权利要求1所述的含有抗菌肽的快速成膜的消毒液，其特征在于所述ph稳定剂占总质量的0.01-5%。

8.根据权利要求1所述的含有抗菌肽的快速成膜的消毒液，其特征在于所述反应助剂为占总质量的0.01-2%。

9.根据权利要求1所述的含有抗菌肽的快速成膜的消毒液，其特征在于所述含有抗菌肽的消毒液能够在小创口、擦伤、切割伤及非慢性感染创面上通过涂抹或喷洒的方式快速形成一层抗菌膜，感染由金黄色葡萄球菌、大肠杆菌一种或两种所致。

技术总结
本发明为一种含有抗菌肽的快速成膜的消毒液及其制备方法，属于消毒液技术领域，包括抗菌活性物质、成膜剂、保湿剂、反应助剂、反应激活剂、pH稳定剂和注射用水；本发明的有益效果是：通过对tachyplesinⅠ的改性，并将改性后的鲎素抗菌肽加入到液体消毒液中，能够实现在低温条件下的5min快速杀菌；具有稳定性好、成膜均匀、凝固时间短、杀菌时效长、耐磨性强等特点，膜的附着力较好，表面光滑，附着持久，抑菌效果持久，能够实现5min快速杀菌，实现了膜的静态成膜效果和动态成膜效果的双优的效果，解决了作为创面的快速成膜的消毒液为了提高保湿效果加入甘油后导致成膜效果变差的问题。

技术研发人员：吴玉洁,朱汉泉,张亮亮,刘功益,王金燕
受保护的技术使用者：山东利尔康医疗科技股份有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/1/13