柔弱斑种草提取物在制备抗肿瘤药物中的应用的制作方法

本发明涉及抗肿瘤药物制备，更具体地说是涉及柔弱斑种草提取物在制备抗肿瘤药物中的应用。

背景技术：

1、肿瘤的治疗方法主要有手术治疗、药物化疗、放疗、免疫治疗、中医治疗等，而化疗是目前针对恶性肿瘤治疗的主要方法。化疗药物的主要类型包括细胞凋亡诱导剂、肿瘤细胞毒制剂、细胞衰老诱导剂、肿瘤耐药逆转剂、细胞分化诱导剂、肿瘤化学预防剂以及肿瘤转移抑制剂等。抗肿瘤治疗之所以困难是由于化疗的疗效不确定，且不良反应显著，因此寻找新的治疗靶点、抗癌活性药物及研究方法显得尤为重要。

2、抗肿瘤新药筛选的主要来源包括天然产物有效成分、新化学物质的合成、生物治疗药物以及老药新用。中医药在肿瘤防治中的突出疗效使其越来越受患者欢迎，中医药正在用其特色理论努力改变肿瘤防治的现状。中药作为中医发挥疗效的主要物质基础，是目前抗肿瘤新药筛选天然产物的主要来源之一。

3、柔弱斑种草，又名细叠子草，雀灵草，小马耳朵，为紫草科植物柔弱斑种草的全草，以全草入药，味微苦、涩，性平，有小毒，归肺经，具有止咳、止血的功效。民间应用历史悠久，疗效确切。走访收集资料期间发现有许多民老中医在临床治疗中给予应用，且疗效显著，还有一些有经验的老人也会经常自己采摘用作不时之需。另外，江苏省扬州市以及关中等多地区进行麦田杂草危害调查，结果显示均具有柔弱斑种草，其本身并无大害且具有一定的药用价值，却被视为杂草危害农田，严重颠覆了柔弱斑种草的药用价值。柔弱斑种草作为《民间常用草药汇编》及《中华本草》收录药材，如今却沦落为杂草行列，有失其用途。

4、因此，如何将柔弱斑种草的药用价值发挥出来，并制备提取物将其应用于肿瘤治疗中是本领域技术人员亟需解决的技术问题。

技术实现思路

1、有鉴于此，本发明提供了一种柔弱斑种草提取物的制备方法，并将提取到的提取物应用于制备抗肿瘤的药物中，开发了柔弱斑种草的药用价值，同时为肿瘤的治疗和新药的研发提供了理论基础。

2、为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

3、柔弱斑种草提取物在制备抗肿瘤药物中的应用。

4、优选地，所述肿瘤包括白血病细胞hl-60、肺癌细胞a549、肝癌细胞smmc-7721、乳腺癌细胞mcf-7和结肠癌细胞sw480。

5、作为与上述技术方案相同的发明构思，本发明还请求保护一种柔弱斑种草提取物的制备方法，过程包括：

6、(1)提取：取柔弱斑种草的干燥全草，水洗、干燥后剪成小段，5-10倍量溶剂恒温回流提取2-4次，每次1-2.5h，合并提取液，减压浓缩，得总提物；

7、(2)萃取：向步骤(1)所得总提物中加入1-3倍质量的蒸馏水混悬，超声振荡器助悬，得混悬液，然后加入混悬液2-5倍体积的石油醚萃取2-4次，合并石油醚萃取液；所得水层用2-5倍体积的乙酸乙酯萃取2-4次，合并乙酸乙酯萃取液，减压回收溶剂，得到柔弱斑种草提取物。

8、优选地，步骤(1)中，所述小段的长度为0-3cm。

9、优选地，步骤1)中，所述干燥为50℃恒温干燥箱干燥。

10、优选地，步骤(1)中，所述溶剂为95％乙醇、75％乙醇、甲醇中的一种。

11、优选地，步骤(1)中，1kg柔弱斑种草全草药材加入提取溶剂10l，恒温回流提取3次，每次回流2h。

12、优选地，步骤1)中，恒温回流的温度为80℃。

13、经由上述的技术方案可知，与现有技术相比，本发明的柔弱斑种草提取物是以单味干燥的柔弱斑种草全草为原料(江苏省宿迁市宿豫区曹集乡田间，经广西中医药研究黄云峰副研究员鉴定为为紫草科植物柔弱斑种草)，通过回流、提取、浓缩等步骤制备得到，其提取工艺简单，成本低廉。抗肿瘤活性筛选实验结果显示，本发明的柔弱斑种草提取物对5种筛选肿瘤细胞毒株均具有明显的抑制作用，其中对肺癌a459及肝癌smmc-7721肿瘤细胞菌株的抑制作用较强，具备较大开发潜力。不但可以解决“杂草问题”，利于环境保护，还能带动地方经济发展，为临床提供大量更加廉价且作用效果显著的中药材。

技术特征：

1.柔弱斑种草提取物在制备抗肿瘤药物中的应用。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述肿瘤包括白血病细胞hl-60、肺癌细胞a549、肝癌细胞smmc-7721、乳腺癌细胞mcf-7和结肠癌细胞sw480。

3.一种柔弱斑种草提取物的制备方法，其特征在于，过程包括：

4.根据权利要求3所述的一种柔弱斑种草提取物的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，所述小段的长度为0-3cm。

5.根据权利要求4所述的一种柔弱斑种草提取物的制备方法，其特征在于，步骤1)中，所述干燥为50℃恒温干燥箱干燥。

6.根据权利要求5所述的一种柔弱斑种草提取物的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，所述溶剂为95％乙醇、75％乙醇、甲醇中的一种。

7.根据权利要求6所述的一种柔弱斑种草提取物的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，1kg柔弱斑种草全草药材加入提取溶剂10l，恒温回流提取3次，每次回流2h。

8.根据权利要求7所述的一种柔弱斑种草提取物的制备方法，其特征在于，步骤1)中，恒温回流的温度为80℃。

技术总结
本发明公开了一种柔弱斑种草提取物在制备抗肿瘤药物中的应用，制备方法为取柔弱斑种草的干燥全草，水洗、干燥后剪成小段，5‑10倍量溶剂恒温回流提取2‑4次，每次1‑2.5h，合并提取液，减压浓缩，得总提物；向所得总提物中加入1‑3倍质量的蒸馏水混悬，超声振荡器助悬，得混悬液，然后加入混悬液2‑5倍体积的石油醚萃取2‑4次，合并石油醚萃取液；所得水层用2‑5倍体积的乙酸乙酯萃取2‑4次，合并乙酸乙酯萃取液，减压回收溶剂，得到柔弱斑种草提取物。本发明提供了一种柔弱斑种草提取物的制备方法，并将提取到的提取物应用于制备抗肿瘤的药物中，开发了柔弱斑种草的药用价值，同时为肿瘤的治疗和新药的研发提供了理论基础。

技术研发人员：赵小超,纪利,廖承谱,周燕萍,商勋,万广闻
受保护的技术使用者：宿迁市中医院
技术研发日：
技术公布日：2024/1/15