一种多替拉韦钠制备抗顺铂耳毒性药物的新型应用

本发明属于医药，尤其涉及一种多替拉韦钠制备抗顺铂耳毒性药物的新型应用。

背景技术：

1、多替拉韦(dolutegravir，商品名：tivicay)是葛兰素史克公司研发的一款人类免疫缺陷病毒(hiv)整合酶抑制剂，可以通过阻止病毒dna整合至人体免疫细胞的遗传物质来阻断hiv的复制，与其它抗逆转录病毒药物联用，用于治疗hiv感染的成人和年满12岁的儿童患者。

2、顺铂(cddp)是一种含铂的小分子抗癌药物，在20世纪70年代被批准进入临床，因其具有抗瘤普广且肿瘤杀伤作用高效的优点，被作为一线化疗药物广泛应用于各种实体肿瘤的治疗，如骨肉瘤、睾丸癌、卵巢癌、膀胱癌及头颈部肿瘤等，极大地提高肿瘤患者的生存率。然而顺铂在体内除了发挥对肿瘤的杀伤作用外，对正常组织细胞同样具有毒性损伤作用。在肿瘤治疗过程中，反复静脉注射顺铂导致其在身体特定区域如肾脏、肝脏、神经元和内耳积聚。顺铂的耳毒性是长期的、进行性的，由于哺乳动物内耳缺乏增殖和再生能力，顺铂引起的感音神经性听力损失是不可逆的，主要损害内耳，影响患者的听力。在所有的副作用中，耳毒性因其不可逆性而受到最大的关注。

3、中国专利一种偶联物及其在治疗内耳疾病上的应用(cn114848836b)，公开了一种偶联物及其在内耳疾病上的应用，结合内耳靶向多肽和诊断、预防或治疗内耳疾病的主药形成偶联物，从而借助内耳靶向多肽以协助主药靶向内耳或内耳中具体结构、细胞，实现主药的富集，具有精准，高效率，提高药物的内耳生物利用度。中国专利(cn106551930b)公开了延胡索乙素在制备抗顺铂毒性药物中的应用。两者的药物与本发明的药物在结构及临床应用上属于不同类型的药物。

4、目前在记载的关于顺铂诱发耳毒性的相关机制研究中，仍没有发现fda批准的小分子可用于临床治疗，顺铂耳毒性的预防与治疗是临床亟待解决的问题。

技术实现思路

1、为了克服以上不足，本发明通过在hei-oc1细胞系中高通量筛选出多替拉韦钠具有预防顺铂耳毒性潜力，其具有极好的抑制顺铂诱导细胞死亡的效果，并且通过进一步在斑马鱼和小鼠模型中进行验证，多替拉韦钠的确表现出对顺铂诱导耳毒性的保护作用。

2、为实现上述目的，本申请提供的技术方案如下：

3、一种多替拉韦钠制备抗顺铂耳毒性药物的新型应用，所述抗顺铂诱导耳毒性药物的主要活性成分为多替拉韦钠。

4、进一步地，耳毒性是顺铂引起耳蜗毛细胞丢失增加。

5、进一步地，药物在抗顺铂类毛细胞hei-oc1细胞耳毒性有效性的验证：

6、(1)使用梯度浓度的顺铂处理类毛细胞hei-oc1细胞；

7、(2)采用cck-8检测方法检测顺铂处理后的细胞活力，得到顺铂的半抑制浓度；

8、(3)使用多替拉韦钠处理hei-oc1细胞，将多替拉韦钠置换成步骤(2)所得浓度的顺铂处理细胞，cck-8检测方法测定细胞活力。

9、进一步地，步骤(1)中顺铂浓度梯度设置为100μm、50μm、25μm、12.5μm、6.25μm、3.125μm及0μm。

10、进一步地，所述药物在斑马鱼内有效性的验证：

11、(1)对神经丘毛细胞有绿色荧光蛋白的斑马鱼用多替拉韦钠处理；

12、(2)将步骤(1)处理后的斑马鱼用顺铂处理孵育并恢复；

13、(3)将斑马鱼麻醉，并按“侧躺”的方式将之包埋于琼脂糖凝胶中；(4)检查斑马鱼幼体中的2个神经丘，对神经丘中毛细胞数量进行评估。

14、进一步地，用含有药物的海水培养斑马鱼1h，药物浓度为0μm、1μm、2.5μm、5μm及10μm，1h后换成600μm顺铂的海水培养6h。

15、进一步地，药物在小鼠模型中有效性的验证：

16、(1)对小鼠腹腔注射，上午对小鼠给药多替拉韦钠，下午给药顺铂；(2)在连续四天顺铂治疗后，小鼠休息三天，重复一次治疗疗程；(3)对小鼠进行听性脑干反应，测定小鼠的听觉功能。

17、进一步地，对小鼠听力检测在声室中记录abr波形评估听力阈值，在每个频率上，刺激强度20db-90db，听力阈值分别为4、8、16、24、32khz及click。

18、进一步地，多替拉韦钠的口服给药、局部给药、注射给药。

19、进一步地，多替拉韦钠剂型包括软胶囊、滴丸、乳剂、片剂、洗剂、搽剂、软膏剂、粉针剂、注射液或栓剂。

20、借由以上的技术方案，本申请的有益效果在于：

21、1.本发明首次发现多替拉韦钠有抑制顺铂耳毒性的潜力，并在细胞水平、斑马鱼及小鼠模型中证实多替拉韦钠处理后应用顺铂可有效降低顺铂诱导的耳毒性；

22、2.多替拉维纳与顺铂联合用药方案简单，有效性好；

23、3.多替拉维纳是已批准的上市药物，可以大大缩短药品研发及审批的时间，加快临床转化。

技术特征：

1.一种多替拉韦钠制备抗顺铂耳毒性药物的新型应用，其特征在于，所述抗顺铂诱导耳毒性药物的主要活性成分为多替拉韦钠。

2.根据权利要求1所述的一种多替拉韦钠制备抗顺铂耳毒性药物的新型应用，其特征在于，所述耳毒性是顺铂诱导耳蜗毛细胞丢失增加。

3.根据权利要求1所述的一种多替拉韦钠制备抗顺铂耳毒性药物的新型应用，其特征在于，所述药物在抗顺铂类毛细胞hei-oc1细胞耳毒性有效性的验证：

4.根据权利要求1所述的一种多替拉韦钠制备抗顺铂耳毒性药物的新型应用，其特征在于，所述药物在斑马鱼内有效性的验证：

5.根据权利要求1所述的一种多替拉韦钠制备抗顺铂耳毒性药物的新型应用，其特征在于，所述药物在小鼠模型中有效性的验证：

6.根据权利要求3所述的一种多替拉韦钠制备抗顺铂耳毒性药物的新型应用，其特征在于，步骤(1)中顺铂浓度梯度设置为100μm、50μm、25μm、12.5μm、6.25μm、3.125μm及0μm。

7.根据权利要求4所述的一种多替拉韦钠制备抗顺铂耳毒性药物的新型应用，其特征在于，用含有药物的海水培养斑马鱼1h，药物浓度为0μm-10μm，1h后换成600μm顺铂的海水培养6h。

8.根据权利要求5所述的一种多替拉韦钠制备抗顺铂耳毒性药物的新型应用，其特征在于，对小鼠听力检测在声室中记录abr波形评估听力阈值，在每个频率上，刺激强度20db-90db，听力阈值分别为4、8、16、24、32khz及click。

9.根据权利要求1所述的一种多替拉韦钠制备抗顺铂耳毒性药物的新型应用，其特征在于，所述多替拉韦钠的给药方式包括口服给药、局部给药、注射给药。

10.根据权利要求1所述的一种多替拉韦钠制备抗顺铂耳毒性药物的新型应用，其特征在于，所述多替拉韦钠剂型包括胶囊、滴丸、乳剂、片剂、洗剂、搽剂、软膏剂、粉针剂、注射液或栓剂。

技术总结
本发明公开了一种多替拉韦钠制备抗顺铂耳毒性药物的新型应用，属于医药技术领域。多替拉韦钠是一种抗艾滋病病毒的药物，本发明首次发现其在抗顺铂耳毒性方面具有巨大潜力，并在类毛细胞HEI‑OC1细胞系、斑马鱼及小鼠模型中证实多替拉韦钠处理后应用顺铂可有效降低顺铂诱导的耳毒性，为临床治疗顺铂化疗过程中产生的耳毒性提供新思路及方案。多替拉维钠与顺铂联合用药方案简单，有效性好，具有较高的安全性，且多替拉维纳是已批准的上市药物，可以大大缩短药品研发及审批的时间，加快临床转化进程。

技术研发人员：付小龙,刘颖,常苗,张潇涵,章天成
受保护的技术使用者：山东第一医科大学（山东省医学科学院）
技术研发日：
技术公布日：2024/3/24