一种α-生育酚微乳凝胶及其制备方法

本发明涉及生物医药领域，具体涉及一种α-生育酚微乳凝胶及其制备方法。

背景技术：

1、α-生育酚是维生素e中的一种，是一种只溶于脂类溶剂如醇类和丙酮等，不溶于水的浅黄色粘稠液体，对热、酸和碱都稳定，但对紫外线和氧敏感，可与自由基作用并且去除自由基，因此具有较强的抗氧化作用。用α-生育酚进行皮肤给药，可以保护皮肤避免受到紫外线的伤害，可以杀死朗格汉斯细胞，减少皮肤癌的发生几率和避免红斑的出现。α-生育酚还具有多种生理功能，例如预防动脉硬化和心脑血管疾病、提高机体免疫力、延缓衰老、抗肿瘤等。如今大部分的微乳凝胶是以卡波姆胶、明胶等做为凝胶基质，多存在透皮率透过量不高的问题，且保湿型和细胞亲和性较差。

2、胶原蛋白(collagen)，也称胶原，是动物体内普遍存在的一种大分子蛋白，也是细胞外基质的主要组分之一，其特有的氨基酸是羟脯氨酸。而胶原蛋白肽(collagenpeptides)是胶原蛋白经水解作用发生分子链解体、断裂形成的介于蛋白质和氨基酸之间的混合物。胶原蛋白肽的分子量相对较小，一般在几百到几千之间，小分子量的胶原蛋白肽更容易透过皮肤从而发挥作用。胶原蛋白肽还具有抗皮肤衰老、预防骨质疏松、促进伤口愈合、增强免疫等多种生理功能。

3、透明质酸又被叫作玻璃酸、玻尿酸，是一种酸性粘多糖，由d-葡糖醛酸和n-乙酰氨基葡糖为双糖单位重复连接而成的。透明质酸钠(sodium hyaluronate，sh)是透明质酸的钠盐形式，其具有特殊的保水作用以及抗衰老、抗炎性。

4、基于胶原蛋白肽和透明质酸优良的生物性能，其有望被用作凝胶基质以提高凝胶的保湿型和细胞亲和性。

技术实现思路

1、针对上述问题，本发明提供一种以透明质酸钠-胶原蛋白肽为凝胶基质的α-生育酚微乳凝胶及其制备方法。

2、本发明的目的采用以下技术方案来实现：

3、一种α-生育酚微乳凝胶的制备方法，包括以下步骤：

4、(1)在透明质酸钠溶液中加入过量三乙胺、甲基丙烯酸缩水甘油酯和四丁基溴化铵，搅拌反应过夜，依次经透析、冻干后制得改性透明质酸钠；将所述改性透明质酸钠溶解在磷酸盐缓冲液中，加入光引发剂和n-乙烯基吡咯烷酮，得到改性透明质酸钠溶液；

5、(2)在胶原蛋白溶液中加入木瓜蛋白酶进行酶解处理，灭酶后冻干，制得胶原蛋白肽，将所述胶原蛋白肽溶解在乙酸溶液中，得到胶原蛋白肽溶液；

6、(3)将所述改性透明质酸钠溶液与所述胶原蛋白肽溶液混合，加入dmem高糖培养基和hepes缓冲液，恒温预交联后制得透明质酸钠-胶原蛋白肽混合溶液；

7、(4)称取α-生育酚并溶解在肉豆蔻酸异丙酯中，加入表面活性剂和助表面活性剂，得到α-生育酚溶液；

8、(5)在搅拌条件下，将所述透明质酸钠-胶原蛋白肽混合溶液逐滴加入所述α-生育酚溶液中，随后在紫外光下交联成胶制得。

9、在一些优选的实施方式中，步骤(1)所述透明质酸钠溶液的浓度为1wt％；所述三乙胺、所述甲基丙烯酸缩水甘油酯和所述四丁基溴化铵所添加量均为透明质酸钠的20倍摩尔量；所述磷酸盐缓冲液的ph为7.4。

10、在一些优选的实施方式中，步骤(2)所述胶原蛋白肽溶液的的浓度为1wt％，ph为6.5。

11、在一些优选的实施方式中，步骤(3)所述改性透明质酸钠溶液与所述胶原蛋白肽溶液的混合体积比为1:1；所述hepes缓冲液为每100ml 0.5mol/lnaoh溶液中加入2.2gnahco3和4.77g hepes；混合后的溶液与所述dmem高糖培养基、所述hepes缓冲液的体积比为8:1:1。

12、在一些优选的实施方式中，步骤(3)所述恒温预交联的处理温度为37℃，处理时间2h。

13、在一些优选的实施方式中，步骤(4)所述α-生育酚的溶解浓度为0.1-1wt％；所述α-生育酚与所述表面活性剂、所述助表面活性剂的体积比例为1:7.2:1.8。

14、在一些优选的实施方式中，步骤(4)所述表面活性剂为吐温-80与蓖麻油聚氧乙烯醚；所述助表面活性剂为无水乙醇与丙三醇；所述吐温-80与所述蓖麻油聚氧乙烯醚的比例为4：1；所述无水乙醇与所述丙三醇的比例为1：1。

15、在一些优选的实施方式中，步骤(5)所述透明质酸钠-胶原蛋白肽混合溶液与所述α-生育酚溶液的混合体积比为7:3。

16、在一些优选的实施方式中，步骤(5)所述紫外光波长为365nm，交联时间10-15min。

17、本发明的另一方面在于提供一种α-生育酚微乳凝胶，所述α-生育酚微乳凝胶由前述制备方法制备得到。

18、本发明的有益效果为：

19、本发明以透明质酸钠与胶原蛋白肽为凝胶基质制备的微乳凝胶具有较好的保湿性能，通过凝胶基质粘附在皮肤上，可防止皮肤表面水分的流失，通过水化作用改变角质层的紧密连接，增强α-生育酚的透皮率，本发明所述以透明质酸钠-胶原蛋白肽为凝胶基质的α-生育酚微乳凝胶的透皮率达30％-47％，也增加了细胞亲和性；并且凝胶基质的网络结构可延缓其中α-生育酚的释放速率，使其持续释放，长时间发挥作用；本发明制备的以透明质酸钠-胶原蛋白肽为凝胶基质的α-生育酚微乳凝胶可应用于药物和化妆品领域，较高的α-生育酚透皮率可促进伤口快速愈合、减轻创伤后留下的暗斑或瘢痕、延缓皮肤衰老。

技术特征：

1.一种α-生育酚微乳凝胶的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的一种α-生育酚微乳凝胶的制备方法，其特征在于，步骤(1)所述透明质酸钠溶液的浓度为1wt％；所述三乙胺、所述甲基丙烯酸缩水甘油酯和所述四丁基溴化铵所添加量均为透明质酸钠的20倍摩尔量；所述磷酸盐缓冲液的ph为7.4。

3.根据权利要求1所述的一种α-生育酚微乳凝胶的制备方法，其特征在于，步骤(2)所述胶原蛋白溶液的浓度为1wt％，ph为6.5。

4.根据权利要求1所述的一种α-生育酚微乳凝胶的制备方法，其特征在于，步骤(3)所述改性透明质酸钠溶液与所述胶原蛋白肽溶液的混合体积比为1:1；所述hepes缓冲液为每100ml 0.5mol/lnaoh溶液中加入2.2gnahco3和4.77g hepes；混合后的溶液与所述dmem高糖培养基、所述hepes缓冲液的体积比为8:1:1。

5.根据权利要求1所述的一种α-生育酚微乳凝胶的制备方法，其特征在于，步骤(3)所述恒温预交联的处理温度为37℃，处理时间2h。

6.根据权利要求1所述的一种α-生育酚微乳凝胶的制备方法，其特征在于，步骤(4)所述α-生育酚的溶解体积百分比为0.1-1％；所述α-生育酚与所述表面活性剂、所述助表面活性剂的体积比例为1:7.2:1.8。

7.根据权利要求1所述的一种α-生育酚微乳凝胶的制备方法，其特征在于，步骤(4)所述表面活性剂为吐温-80与蓖麻油聚氧乙烯醚；所述助表面活性剂为无水乙醇与丙三醇；所述吐温-80与所述蓖麻油聚氧乙烯醚的体积比例为4：1；所述无水乙醇与所述丙三醇的体积比例为1：1。

8.根据权利要求1所述的一种α-生育酚微乳凝胶的制备方法，其特征在于，步骤(5)所述透明质酸钠-胶原蛋白肽混合溶液与所述α-生育酚溶液的混合体积比为7:3。

9.根据权利要求1所述的一种α-生育酚微乳凝胶的制备方法，其特征在于，步骤(5)所述紫外光波长为365nm，交联时间10-15min。

10.根据权利要求1-9之一所述制备方法制备得到的α-生育酚微乳凝胶。

技术总结
本发明公开一种α‑生育酚微乳凝胶及其制备方法，属于生物医药领域，本发明以甲基丙烯酸缩水甘油酯改性修饰透明质酸后制得改性透明质酸钠，以所述改性透明质酸钠和酶解胶原蛋白多肽作为凝胶基质，通过光引发交联制得所述α‑生育酚微乳凝胶，本发明制备的微乳凝胶以透明质酸钠‑胶原蛋白肽为凝胶基质，不仅具有较好的保湿性，提高了透皮率，也增加了细胞亲和性。

技术研发人员：曾庆祝,王艳
受保护的技术使用者：广州大学
技术研发日：
技术公布日：2024/5/10